植物病原的分離培養(yǎng)與接種

噴霧、布、、缸火、接餌針長(zhǎng)鑷、棒、木、解刀刀）記號(hào)、、、保罩彌機(jī)。乙、％升、菌培皿吸管、菌PA和A作45℃左右的馬鈴薯瓊膠培養(yǎng)基一管倒入培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使成平面（分離細(xì)菌時(shí)則不緣切取小塊（3—5毫米）病組織數(shù)塊。表面：將病組織小塊放入70％中浸數(shù)秒鐘后，按無(wú)菌操作法將病組織移入0.1％升液中1—3分鐘，然后放入滅菌水中連續(xù)漂洗三次。也可用漂白粉精片（1－2片），研磨后加滅菌水10ml，5—10分鐘。果實(shí)、塊莖和枝稈等組織內(nèi)部的病原菌可用脫脂棉蘸70％涂拭病部表面，通過(guò)火焰燒去表面，重復(fù)進(jìn)行2－3次，達(dá)到表面。－天后觀菌落長(zhǎng)況，無(wú)菌長(zhǎng)，得米病菌菌，可于箱中存雜取滅菌培養(yǎng)皿三個(gè)，平放在濕紗布上，分別編號(hào)（1、2、3），并注明日期、分離材料及分在火焰燒?！⑴囵B(yǎng)皿翻轉(zhuǎn)后放入恒溫箱（26－28℃）中培養(yǎng)，3－43次稀釋分離（3次），當(dāng)培養(yǎng)物高度一致時(shí)才能作為純培養(yǎng)的菌5℃左右的低溫下才能萌發(fā)。30－60分鐘（在滅菌培養(yǎng)皿中研碎并浸泡），讓細(xì)預(yù)先把NA304－6小時(shí)，使表面沒(méi)726－28℃恒溫箱中培養(yǎng)，2－3天后觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，在哪些地方有單菌植物分離和純需無(wú)菌操作，但仍必須實(shí)行嚴(yán)格的以防止污染和混雜?！洳烧肫∪~放在消過(guò)毒的研缽中，加磷酸緩沖液（0.01MPBS，pH7．2）1ml（5－6滴），研碎。（4）3的種類(lèi)，并作為定量的一種簡(jiǎn)易方法10－15cm5－10crn帶有彈簧夾的乳膠管，漏斗放在木架或鐵環(huán)上，漏斗內(nèi)盛滿清24小時(shí)后樣品中線蟲(chóng)因喜水而從材料中游到水中，并因自身重量逐漸沉落到漏斗底部的橡皮管中，慢慢放出5ml管中于離心管15003分鐘，傾去上層水液，將底部沉淀物連同線蟲(chóng)一起倒在表面（10目／英2），下面一只淺盤(pán)略大些是盛水盤(pán)（底盤(pán)）。上，在兩盤(pán)之間隙縫中加水浸沒(méi)材料，在室溫（20℃以上）8天，材料中的線蟲(chóng)大都能穿過(guò)濾紙而進(jìn)入托盤(pán)水中，收集淺盤(pán)中的水樣通過(guò)二個(gè)小篩子（25400目細(xì)Fenwick10.0g物沉入筒底，胞囊和草渣等則逐漸漂浮起來(lái)沿倚口傾斜的環(huán)槽流到承接篩中（100目）,先把篩中胞拌種法和浸種法傳染的病害可采用這兩種接種方法。拌種法是將病菌的懸浮液或孢子粉拌或24小時(shí)，誘發(fā)病害。傷口接種除了植物接種時(shí)常用的摩擦接種屬傷口接種之外，植物病原細(xì)菌、病原真菌也水稻白葉枯病的傷口接種常用剪葉接種和針刺接種法。先通過(guò)火焰或用75％解剖剪，將剪108cfu／ml。菟絲子接種在溫