生物人教必修二基因工程及其應(yīng)用

生物人教必修二基因工程及其應(yīng)用第1頁(yè)/共12頁(yè)3、基因操作的工具（1）基因的剪刀——

。分布：

。作用特點(diǎn)：

，即識(shí)別特定核苷酸序列，切割特定切點(diǎn)。結(jié)果：

（堿基互補(bǔ)配對(duì)）（2）基因的針線——

。連接的部位：

（梯子的扶手），不是氫鍵（梯子的踏板）。結(jié)果：

?；蚬こ痰脑硐拗菩詢?nèi)切酶主要在微生物中特異性產(chǎn)生黏性末端DNA連接酶磷酸二酯鍵兩個(gè)相同的黏性末端的連接第2頁(yè)/共12頁(yè)3、基因操作的工具（3）基因的運(yùn)載工具——

。作用：

。具備的條件：能在

內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存；具有

；具有某些

基因。種類：

、

和

。質(zhì)粒的特點(diǎn)：質(zhì)粒是基因工程中最常用的

；最常用的質(zhì)粒是

的質(zhì)粒；存在于許多細(xì)菌及酵母菌等生物中；質(zhì)粒的存在對(duì)宿主細(xì)胞

；質(zhì)粒的復(fù)制只能在

內(nèi)完成；細(xì)胞染色體外能自主復(fù)制的小型

?；蚬こ痰脑磉\(yùn)載體將外源基因送入受體細(xì)胞宿主細(xì)胞多個(gè)限制酶切點(diǎn)標(biāo)記質(zhì)粒噬菌體動(dòng)植物病毒運(yùn)載體大腸桿菌無影響宿主細(xì)胞環(huán)狀DNA分子第3頁(yè)/共12頁(yè)例1：實(shí)施基因工程第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來，這要利用限制性內(nèi)切酶。一種限制性內(nèi)切酶能識(shí)別DNA分子中的GAATTC順序，切點(diǎn)在G和A之間，這是應(yīng)用了酶的（）A、高效性 B、專一性 C、多樣性 D、催化活性受外界條件影響基因工程的原理B第4頁(yè)/共12頁(yè)例2：下列黏性末端屬于同一種限制酶切割而成的是（）A、①② B、①③ C、①④ D、②③基因工程的原理B第5頁(yè)/共12頁(yè)4、基因操作的基本步驟（1）

（人們所需要的的基因）。提取途徑有兩條：一條是從

；另一種是

。人工合成方法有①

（利用mRNA）；②根據(jù)

推測(cè)出核苷酸序列，通過化學(xué)方法合成

。（2）

（以質(zhì)粒為運(yùn)載體）。步驟：用一定的

切割質(zhì)粒；用

切割目的基因；加入

；質(zhì)粒和目的基因結(jié)合成

分子。結(jié)果：可能有三種情況：目的基因與目的基因結(jié)合；質(zhì)粒與質(zhì)粒結(jié)合；目的基因與質(zhì)粒結(jié)合?；蚬こ痰脑硖崛∧康幕蚬w細(xì)胞的DNA中直接分離基因人工合成基因反轉(zhuǎn)錄法蛋白質(zhì)中氨基酸的序列DNA目的基因與運(yùn)載體結(jié)合限制酶同一種限制酶DNA連接酶重組DNA第6頁(yè)/共12頁(yè)4、基因操作的基本步驟（3）

。導(dǎo)入方法：

。導(dǎo)入過程：

。（4）目的基因的表達(dá)與檢測(cè)檢測(cè)：根據(jù)受體細(xì)胞中是否具有

，判斷目的基因?qū)肱c否。如大腸桿菌質(zhì)粒中含抗青霉素基因，把某種生物放入帶有青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，若有抗性，說明導(dǎo)入成功；若無抗性，說明導(dǎo)入失敗。表達(dá)：受體細(xì)胞表現(xiàn)出

，如棉花抗蟲性狀的表現(xiàn)?；蚬こ痰脑韺⒛康幕?qū)胧荏w細(xì)胞借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑運(yùn)載體為質(zhì)粒，受體細(xì)胞為細(xì)菌標(biāo)記基因特定的性狀第7頁(yè)/共12頁(yè)例3：下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是（）A、重組DNA技術(shù)所用的工具本科是限制酶、連接酶和運(yùn)載體B、所有限制酶都只能識(shí)別同一種按規(guī)定排列的核苷酸序列C、選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞是因?yàn)榧?xì)胞繁殖快D、只要目的基因進(jìn)入了受體細(xì)胞就能成功地實(shí)現(xiàn)表達(dá)基因工程的原理C第8頁(yè)/共12頁(yè)例4：以下說法正確的是（）A、所有的限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列B、質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體C、運(yùn)載體必須具備的條件之一是具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接D、基因治療主要是對(duì)有缺陷的細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)基因工程的原理C第9頁(yè)/共12頁(yè)例5：上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶白蛋白的轉(zhuǎn)基因牛，他們還研究出一種可大大提高基因表達(dá)水平的新方法，使轉(zhuǎn)基因動(dòng)物乳汁中藥物蛋白含量提高30多倍，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物是指（）A、提供基因的動(dòng)物 B、基因組中增加了外源基因的動(dòng)物C、能產(chǎn)生白蛋白的動(dòng)物 D、能表達(dá)基因信息的動(dòng)物基因工程的原理B第10頁(yè)/共12頁(yè)例6