臨床微生物標(biāo)本的采集方法與運送

臨床微生物標(biāo)本的采集與運送微生物檢驗的重要性在醫(yī)學(xué)高度發(fā)展，新的抗菌藥物不斷涌現(xiàn)的今天，感染性疾病的發(fā)病率和病死率仍然居高不下。主要原因之一是當(dāng)代的感染性疾病，在病原上發(fā)生了較大的變化，形成了現(xiàn)代感染性疾病在病原學(xué)上的新特點現(xiàn)代感染性疾病的新特點以條件致病菌為主：很多低致病、弱毒的細(xì)菌，在外環(huán)境、人體體表以及與外界相通的腔道中廣泛存在的細(xì)菌，引起感染甚至造成嚴(yán)重后果的現(xiàn)象日益增多。病原菌的種類更為廣泛：包括需氧菌、厭氧菌、苛氧菌、分枝桿菌和真菌等。細(xì)菌的耐藥性不斷增強：同一種細(xì)菌對抗生素的耐藥性可以完全不同，甚至出現(xiàn)同時耐多種抗生素的“多重耐藥”細(xì)菌，往往使臨床醫(yī)師的“經(jīng)驗性”治療或所謂的常規(guī)治療根本無效?，F(xiàn)代感染性疾病的新特點出現(xiàn)一些新的感染性病原：有人統(tǒng)計，20世紀(jì)后期，全世界一共出現(xiàn)種31種新的傳染病，其中病毒14種，細(xì)菌11種，寄生物6種，由于人們的認(rèn)識不足，缺乏有效的預(yù)防、治療辦法，人群又無免疫力，這些新出現(xiàn)的病菌在不同的地區(qū)和范圍內(nèi)流行，來勢猛，傳播快，造成巨大的損失和社會恐慌。例如：瘋牛病、埃博拉出血熱、新型肝炎病毒、大腸桿菌O157、出血性腸炎、O139霍亂、艾滋病、萊姆病等?，F(xiàn)代感染性疾病的新特點

我們應(yīng)該追求：

“準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷”

“針對性病原學(xué)治療”

正確的微生物標(biāo)本采集和運送，是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！

微生物讓人類步步為營，檢驗誤差發(fā)生率哪個階段最高？60%以上實驗誤差發(fā)生在分析前

1997年，一位意大利著名檢驗專家就對急診檢驗誤差發(fā)生的種類和發(fā)生率進行了統(tǒng)計。結(jié)果顯示，約有68.2%的檢驗誤差發(fā)生在檢驗前期，而來自于檢驗中期和檢驗后期的誤差率分別為13.3%和18.5%。

2007年，這位檢驗專家又進行了類似統(tǒng)計，結(jié)果顯示，檢驗前期的誤差發(fā)生率仍高達(dá)61.9%。摘自：分析前質(zhì)量控制獲得準(zhǔn)確結(jié)果的重要環(huán)節(jié)基本原則1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑6.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康娜绾翁岣呒?xì)菌陽性檢出率？標(biāo)本采集時機標(biāo)本采集方法標(biāo)本的質(zhì)與量標(biāo)本的運送與保存鏡檢篩選合格標(biāo)本（退檢制度）高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境常見不合格標(biāo)本主要有以下問題：

標(biāo)本采集時間錯誤容器錯誤標(biāo)本量不足標(biāo)本采集延誤標(biāo)本未及時正確運送以及暫存條件錯誤。。。。。。。

最有價值的細(xì)菌學(xué)檢測項目血液培養(yǎng)腦脊液培養(yǎng)膽汁培養(yǎng)胸腹水培養(yǎng)關(guān)節(jié)液其他無菌體液或分泌液血培養(yǎng)標(biāo)本采集與運送血培養(yǎng)是進行血流感診斷的最佳手段血培養(yǎng)概念:采集患者的血液或無菌體液標(biāo)本,送至微生物實驗室培養(yǎng)檢測.檢測原本無菌的血液及體液中是否有細(xì)菌存在.如有細(xì)菌,則極有可能為致病的細(xì)菌.進一步進行鑒定/藥敏試驗.完整的血培養(yǎng)過程醫(yī)師開出醫(yī)囑護理人員收集送檢樣本實驗室檢測、分離并鑒定導(dǎo)致血流感染的微生物三級報告：為臨床醫(yī)生提供抗菌藥物敏感性試驗結(jié)果目前血培養(yǎng)的問題：采血時機不合適采血套數(shù)不夠采血量不足只做需氧培養(yǎng)，不同時做厭氧培養(yǎng)采血前或采血時正在使用抗生素治療血流感染與血培養(yǎng)的規(guī)范實踐“只有在發(fā)熱時，才需要進行血培養(yǎng)?！薄P(guān)于血培養(yǎng)指征想采就采？答案草：血培擋養(yǎng)的指年征當(dāng)懷疑專血流感拘染或膿六毒癥時擋，應(yīng)常訓(xùn)規(guī)行血襯培養(yǎng)懷疑患壩者有血里流感染畝的癥狀圍有：不明原堂因的發(fā)碧燒(＞38℃)或體溫厭過低(＜36℃)白細(xì)胞增寨多（＞10,0需00/u形l），粒降細(xì)胞減甜少（贈＜1,00幟0ul）休克，寒訓(xùn)顫，僵直嚴(yán)重的衡局部感扁染(腦膜炎，暖心內(nèi)膜炎軍，肺炎，抗腎盂腎炎趕，腹部術(shù)尺后感染，…)心率異俘常加快低血壓或謙高血壓呼吸頻跑率加快“何時采洋血進行血哥培養(yǎng)，無買特殊時間和要求?！薄P(guān)于采血確時機？03060時間(分鐘)體溫血培養(yǎng)支采血時蜜機細(xì)菌濃工度答案福：采集第血培養(yǎng)配樣本的旨最佳時危間盡可能鄭在患者信寒戰(zhàn)或環(huán)開始發(fā)菜熱時采用血在患者舟接受抗敢生素治絮療前采長血如患者名已經(jīng)應(yīng)削用抗菌準(zhǔn)藥物進剩行治療威，應(yīng)在負(fù)下一次德用藥之蝴前采血妖培養(yǎng)“為減輕長患者痛苦確，只從一曠個穿刺部滴位采一份憲血液標(biāo)本界即可?！薄P(guān)于采棄血套數(shù)漆及部位？基本概念成人“吸一套”姜血培忌養(yǎng)應(yīng)該垮包括需樹氧瓶和節(jié)厭氧瓶濁各一個掩，也叫物“一份校”注意：槍一次穿倚刺采血仿，算“熄一套”暢，采集馳第二套熱應(yīng)從另漁一個穿殊刺點獲慰得。兒童一委般只做仙需氧培巧養(yǎng)，但花仍需從叉多個部般位采集遍多次。滑特殊患軌者才考奔慮厭氧額培養(yǎng)。采血套數(shù)Wei瓜nst驕ein瞎et仁al桌.D節(jié)ete俯cti察on尸of披Blo盒ods拴tre艱am托Inf獅ect低ion瘡si車nA晶dul始ts:東Ho旋wM鬼anyBlo筆odC嗓ult倆ure湊sA香re壺Nee饑ded新J即Cli宮nM卵icr喝obi育ol.按20嚴(yán)07;唯45精:35客46-泳354制8表皮葡萄胞球菌的臨植床意義2－3套血培養(yǎng)步，有助于緒污染的判惑斷。Tok崇ars止,J匯I.眨Cli逮nI盯nfe油ct動Dis睜20消04;槽39要:33葬3污染菌致病菌？采集1套無法鏟判斷是定病原菌織還是污先染菌。答案虧：關(guān)威于血培煙養(yǎng)套數(shù)線與采血骨部位每位患者昏每次采血猶最少2套，3套更好初發(fā)患占者，絕擊不能只澡采1套標(biāo)本多個穿刺席部位采血扒。因多部我位同時發(fā)生污染的搬幾率較小緊，便于對渴結(jié)果進判氧斷“兩套舅血培養(yǎng)壤采集間昨隔無特幫殊要求叮?！薄P(guān)于采血校間隔？答案：國關(guān)于標(biāo)刪本采集澇間隔時泛間對于非熄持續(xù)性湖菌血癥公，同時汪或短時料間內(nèi)采英集2－3套血培并養(yǎng)，因欣為體內(nèi)剩巨噬細(xì)債胞吞噬富系統(tǒng)會映在15～30m這in內(nèi)清除掉惰進入人體悠內(nèi)的細(xì)菌辰。可疑急泰性心內(nèi)沙膜炎患享者要立僅即取血療作血培朝養(yǎng)，30分鐘內(nèi)歐完成3套血培養(yǎng)馬的采集，鍵采集后立岸即進行抗曠菌藥的經(jīng)寬驗治療。糊如果24小時內(nèi)玩報告陰墊性，則猴繼續(xù)采希集2套血培養(yǎng)欄。可疑的特亞急性林心內(nèi)膜慣炎患者庸每間隔30分鐘至1h采集1套，連續(xù)破采集3套標(biāo)本。抵如果24小時內(nèi)報測告陰性，浴則繼續(xù)采銜集2套血培哭養(yǎng)。“每瓶浮采集多檢少血液饒無特殊嚴(yán)要求。敏”———關(guān)于采血果量？采血量(ml岸)與檢出率饒的關(guān)系Over粗all血培養(yǎng)蘭物每增累加一毫輛升，真饒性菌血腸癥成年人微醒生物的檢寫出率增加3％但并非越化多越好，戚超過一定尋數(shù)量的采世血量會稀愉釋培養(yǎng)瓶累內(nèi)的肉湯底，使肉湯謙無法有效碼中和血中辛的抑制物扔質(zhì)（補體擦、抗體、街抗生素）所。所以血誘液與肉湯邊的最佳比來例為1：4－1：10答案：槽關(guān)于采集烈血液量采血量是偵影響靈敏劃度最關(guān)鍵衫因素成人一份抹標(biāo)本2個培養(yǎng)山瓶（需忠氧＋厭港氧），百每瓶8－10ml，共20m妨l；要求至越少采兩份漫標(biāo)本，即40m委l。兒童一賄般只需懲采集需曾氧瓶，孔在保證較采集血術(shù)量＜1％總血曠量下，芹一般為1－3ml采血量炊不足時減應(yīng)優(yōu)先暴保證需蜘氧瓶，及因臨床90％以上穩(wěn)的感染虹為需氧錯菌或兼怖性需氧刑菌感染先采生化助、凝血標(biāo)命本，再采掩血培養(yǎng)標(biāo)呀本?！薄P(guān)于各種血果液標(biāo)本漲的采集暢順序？血培養(yǎng)籌對無菌客操作的角要求比淺注射、詞采集生爬化、凝睜血等其貢它標(biāo)本怨要高。所以要為最先采罩集血培墳養(yǎng)標(biāo)本宵。污染率撒的指標(biāo)繁是<3%（100份標(biāo)本里總只能有不撈到3個標(biāo)本出闊現(xiàn)污染。歉）答案：采網(wǎng)各種血液由標(biāo)本的先稱后順序“消毒的敏重點是足剛夠量的消聞毒劑?！薄P(guān)于皮判膚及培勒養(yǎng)瓶消蠶毒？皮膚消高毒程序勾：推薦使用輸?shù)忸?、洗軌必泰或碘顆伏作為皮版膚消毒劑壟。碘町作皆用1mi倡n碘伏作耕用1.5-占2min洗必泰作染用時間與荷碘町一樣唐（但不能霉用于少于2個月嬰兒鍛皮膚消毒享）培養(yǎng)瓶的氏消毒程序擔(dān)：去掉培養(yǎng)莊瓶口的塑損料瓶蓋。75%酒精消毒鉗血培養(yǎng)瓶貧橡皮塞子60秒。自然待干。將標(biāo)本注水入培養(yǎng)瓶饞內(nèi)。5.顛倒混勻誦標(biāo)本與肉而湯，以避祥免血液糧凝集。“培養(yǎng)衡瓶未使恢用時，賤需要冷豪藏或冷酒凍?！薄P(guān)于培養(yǎng)瓶陰的儲存寒溫度？不需冷液藏，更喪不能冷朽凍。保謊存在15－25℃的室溫慣即可，游溫度過色低會導(dǎo)聽致對溫賢度敏感年的耐瑟雪氏菌等皆死亡。答案：關(guān)越于未用培未養(yǎng)瓶的儲鄭存溫度“加入標(biāo)侮本后的培毅養(yǎng)瓶夜班叨未能及時另送到檢驗沈科，可以梅冷藏或放斬入35℃的溫箱。楚”———關(guān)于夜班血蘇培養(yǎng)的歡送檢？培養(yǎng)瓶概夜班未伶能及時搬送到檢懂驗科，存在室帝溫即可富，不能民冷藏也選不能放律入35℃的溫箱唐。過夜不霉會對檢恥測造成螞影響，層但仍需給盡快送塘檢。冷銅藏可能望導(dǎo)致對揪溫度敏賠感的耐店瑟氏菌柏等死亡氣。溫箱棍會導(dǎo)致俊細(xì)菌進臟入生長闊對數(shù)期俘，從而府錯過檢棋測的最本佳時期妨。答案：或關(guān)于夜躍班血培蠢養(yǎng)的送符檢“患者靜巨脈中插有煮導(dǎo)管，可禾直接從導(dǎo)編管采血。冊”———關(guān)于采血部礦位？不可以，常規(guī)開血培養(yǎng)縱不宜從課靜脈導(dǎo)甘管或靜浩脈留置寇裝置中相采集，擦檢出污稅染或定刃植菌的肥可能性錫較大。闊除非懷惠疑導(dǎo)管腳相關(guān)性泰血流感哨染，請溫參照導(dǎo)尼管相關(guān)浴性血流運感染的麻采血方縫法。答案：帳關(guān)于從闊靜脈留淚置裝置帝直接采曠血血培養(yǎng)鳴標(biāo)本的桃拒收瓶子上烤帖的標(biāo)扁簽錯誤鼻或未帖鏡標(biāo)簽。血培養(yǎng)瓶丑打破的、很損壞的或幸滲漏。血液凝固拼。培養(yǎng)基的希選擇推薦使用猶商品化的廟培養(yǎng)基使用添加礎(chǔ)抗菌藥物研吸附劑的拼血培養(yǎng)瓶歇有助于提謠高已接受循抗菌藥物斗治療患者稈血培養(yǎng)的具檢出率，狀增加細(xì)菌那的分離率回和分離速步度，但同尾時也會增榨加污染菌挪的檢出率姓。上呼吸道夠標(biāo)本上呼吸雞道感染泰：絕大部分步呼吸道感詠染局限于口咽、鼻柄咽和鼻腔部位；導(dǎo)致咽痛、拐鼻涕、魔常常會蹈發(fā)熱。階感染喉示部、中芝耳、鼻唉竇炎、腔結(jié)膜炎刷或角膜她炎。可能與確嚴(yán)重疾走病百日族咳、流正行性感緒冒、麻待疹和傳小染性單慶核細(xì)胞孟增多癥斑并存。不同的采鹽樣拭子豪對標(biāo)本的校檢測結(jié)果酬有影響嗎??棉+木棍抑菌區(qū)域娛的產(chǎn)生由嶺于棉中所背含的脂肪說酸以及從雄木棒中滲晉出的樹脂平和甲醛。咽拭子縮慧運送培寒養(yǎng)基可以運送轉(zhuǎn)需氧、厭掌氧、苛養(yǎng)席菌4℃或RT24或48小時建議用于要病原菌培養(yǎng)而不是涂僻片的標(biāo)本乞送檢。痰培養(yǎng)拉標(biāo)本采集與眼運送病原體就種類繁隨多而復(fù)澇雜使下呼琴吸道感武染病原紋診斷成齒為難題細(xì)菌（包市括放線菌熟與奴卡菌赴，厭氧菌憤與分枝桿吸菌）真菌（包形括肺孢子數(shù)菌）病毒支原體、素衣原體與壇立克次體原蟲寄生蟲咳痰途經(jīng)刊口咽部唾液中口料咽部定植柔菌的濃度三可達(dá)108-109/ml。研究顯獄示，國雕內(nèi)常規(guī)翅痰標(biāo)本暫中約半屯數(shù)存在占唾液嚴(yán)掀重污染社現(xiàn)象。不可避矩免地受用到污染我國痰細(xì)起菌培養(yǎng)現(xiàn)汁狀標(biāo)本送躺檢率低苛養(yǎng)菌檢竊出率極低結(jié)果重床復(fù)性差報告速撞度慢感染菌與幅污染菌不鑰易區(qū)分藥敏結(jié)伶果與治抖療反應(yīng)掙存在差進距下呼吸道點感染病原蔥學(xué)診斷注娃意事項痰標(biāo)本亦的正確軋采集（界包括導(dǎo)哲痰）痰標(biāo)本負(fù)及時運訴送和處側(cè)理的重嗓要性痰標(biāo)本的滿洗滌與勻渾化痰涂片旨：質(zhì)量管評估和姨細(xì)菌、浮真菌初凳步報告接種平板澆：質(zhì)量與哲質(zhì)控，血有、巧克力參、麥康凱倒、沙保弱培養(yǎng)環(huán)貸境：CO2培養(yǎng)時間金：24h，48h菌落觀燈察要點結(jié)果報告當(dāng)：所有菌食種（群）榮，包括半戲定量臨床意懇義判定其他病原長體的檢測煮：結(jié)核、聯(lián)真菌、厭幸氧菌、非像典型病原茄體下呼吸道甜感染病原傷學(xué)診斷注酬意事項咳痰標(biāo)本類的采集標(biāo)本采集多方法醫(yī)師或矮護士直維視下采博集標(biāo)本病人先漱充口，去除趙表面的菌共群教育病率人深咳王，收集纏從下呼份吸道咳購出的痰宣液臨床上約擴半數(shù)咳痰參標(biāo)本不合杏格！關(guān)于咳痰泡標(biāo)本在抗生必素應(yīng)用限前采集品痰標(biāo)本;標(biāo)本采集別后1～2h內(nèi)必須宋立即進改行實驗伯室處理咳痰標(biāo)本予應(yīng)用最早袖且廣泛，繡但也是最含受爭議的薪標(biāo)本取標(biāo)本前辛應(yīng)摘去牙駐托，清潔質(zhì)口腔如刷制牙和漱口深咳，耍采集標(biāo)鼻本過程施中要有窩專業(yè)的籌醫(yī)務(wù)人鍵員指導(dǎo)無痰可膊用3％～5％NaC濤l5跪ml霧吸約5mi故n導(dǎo)痰也可用耀物理療舟法、體隆位引流踢、鼻導(dǎo)向管抽吸鏟等法取磁痰5種篩選加標(biāo)準(zhǔn)判嫁斷140訴01份痰標(biāo)濾本合格嶄率比較

合格不合格不能歸類

標(biāo)本數(shù)率％標(biāo)本數(shù)率％標(biāo)本數(shù)率％標(biāo)準(zhǔn)1474033.9925366.1*80.1標(biāo)準(zhǔn)2358325.611097.9*930966.5標(biāo)準(zhǔn)3483234.5916965.5－－標(biāo)準(zhǔn)4911565.1488634.9－－標(biāo)準(zhǔn)5637845.6762354.4－－注：標(biāo)黨準(zhǔn)2：衛(wèi)生部擁醫(yī)政局《全國臨叔床檢驗姥操作規(guī)餅程》咳痰標(biāo)飄本不合魔格，退販檢嗎？如果低倍箱視野下鱗雖狀上皮細(xì)技胞大于25個，白細(xì)籃胞小于10個，應(yīng)版不做或置僅在特捆殊要求勁時做培殼養(yǎng)。如做培養(yǎng)賊，報告中貓注明“鏡侄檢結(jié)果表之明標(biāo)本口乎咽分泌物們污染明顯矮”。幾種下呼城吸道直接服采集的標(biāo)惜本經(jīng)氣管穿驢刺吸引（tra出nst性rac康hea烤la猴spi伶rat誼ion鴿,TT產(chǎn)A）經(jīng)胸壁釋針刺吸節(jié)引（tra男nst詞hor隸aci逗cn姓eed團le姥asp低ira座tio番n,車TNA）經(jīng)支氣管梳鏡采樣支氣管遍肺泡灌監(jiān)洗（bron替choa伴lveo鉆lar屋lava陳ge,劫BAL）經(jīng)支氣攜管鏡直卡接吸引防污染樣激本毛刷（pro恒tec掏tiv晨es傘pec倘ime劇nb嗚rus喝h,須PSB）開胸肺馬活檢（ope壇n-l蠻ung蘭bi練ops詢y，OLB）經(jīng)人工氣鵲道吸引分懇泌物（endo鋒trac柿heal史asp勾irat默es，ETA）痰培養(yǎng)嚴(yán)的送檢棕次數(shù)對于普等通細(xì)菌券性肺炎荒，痰標(biāo)本悅送檢每賊天1次，連續(xù)2～3天。不建議24h內(nèi)多次冠采集，禍除非痰勁液外觀須性狀出態(tài)現(xiàn)改變亭；懷疑分犬枝桿菌只感染者雷，應(yīng)連遵續(xù)收集3天清晨槳痰液送窗檢；懷疑軍綱團菌或槍深部真授菌感染冒，痰標(biāo)層本理想唐的送檢喊次數(shù)尚漲無定論森。痰培養(yǎng)睜的運送伙和保存盡快（<2h）送至實壤驗室。如不能慨及時送油達(dá)，應(yīng)秩將標(biāo)本區(qū)暫存于4℃，但放秧置時間違不可超丸過24h。厭氧培養(yǎng)樓標(biāo)本的最埋佳運送時劇間取決于釣標(biāo)本量。被口咽叮部菌群逆污染的世標(biāo)本如低咳痰等贈不可用裕于厭氧觀菌培養(yǎng)揀。痰培養(yǎng)的臭拒收光學(xué)顯微妥鏡細(xì)胞學(xué)浸檢查發(fā)現(xiàn)鏈口咽分泌桂物污染明贏顯。沒有標(biāo)簽糟或貼錯標(biāo)掉簽。運送容貴器選擇奸不當(dāng)或醉有滲漏白。標(biāo)本采待集不符窩合要求烘。同一天同議一試驗重才復(fù)送檢2次。延時送魚至實驗液室的標(biāo)贈本。尿培養(yǎng)珠標(biāo)本采集與運執(zhí)送你知道嗎鳳？尿液通常擱是無菌的姥或一過性褲有少量微隔生物，但堵是尿道內(nèi)槽或尿道周狹圍皮膚的強菌群會污特染尿液標(biāo)描本，從而想可能導(dǎo)致著錯誤的培畫養(yǎng)結(jié)果。診斷癥狀程明顯的病席人（如尿言急、尿頻礎(chǔ)、尿痛）型，一份標(biāo)父本就已足澆夠，治療48-虜72小時后再奴采集第二浮份標(biāo)本。萌對于癥狀騾不明顯的慶病人，需復(fù)采集2-3份標(biāo)本鋸。懷疑熄腎結(jié)核轎時，應(yīng)僻連續(xù)3天采集菊晨尿。多次收族集或24小時尿不垮能用作培夕養(yǎng)。申請單上填必須注明博病人癥狀棗是否明顯漫，這對于械定量培養(yǎng)沙分析非常餡重要，尤扁其只有少協(xié)量尿液標(biāo)攔本。室溫都村有利于蛛病原菌離和污染政菌會生聯(lián)長繁殖賴，因此容若30mi脈n內(nèi)不能奴及時培貝養(yǎng)尿液含則必須序冷藏，亭但也不傭能超過24小時。尿培養(yǎng)標(biāo)回本清潔中段無尿?qū)驅(qū)Ч艽蚪?jīng)恥骨上眾皮膚穿刺爹采集膀胱傭內(nèi)尿液送檢標(biāo)本段以晨起第他一次尿液徒為佳不能立即獵送檢者，鳥可暫存4℃冰箱，坦但保存厚不超過8h清潔中刃段尿液盡量取早椅晨第一次毛尿液棄去開始趴流出的尿喬液，以沖襯刷尿道口吧的細(xì)菌，蔽取能代表村膀胱部位松病原菌的樸中段尿詳細(xì)告量知病人削以下操牙作步驟女性病睬