5-核苷酸酶的檢測(cè)和臨床意義

5‘-核苷酸酶(5-NT)的檢測(cè)和臨床意義

2021/10/101一.定義

5‘-核苷酸酶全稱5’-核糖核苷酸磷酸水解酶（5‘-Nucleoticlase,5’-NU或5‘-NT）。5’-核苷酸酶(5‘-NT)是一種對(duì)底物特異性不高的水解酶，可作用于多種核苷酸。主要參與核酸的分解代謝。能特異性的催化核苷5’-核苷酸酶和次黃嘌呤核苷酸。2021/10/102

5‘-NT在人體的運(yùn)動(dòng)，細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育，纖維蛋白合成，提高表皮或內(nèi)皮屏障功能，神經(jīng)傳遞及淋巴細(xì)胞的再循環(huán)及黏附，免疫應(yīng)答等方面均發(fā)揮重要的作用。2021/10/103廣泛分布在肝、膽、胰、腸、心、腦、肺、腎、垂體、甲狀腺、前列腺、睪丸等臟器和組織中，定位在細(xì)胞膜上，肝膽系統(tǒng)是血清中5’-核苷酸酶的主要來(lái)源。在肝內(nèi)主要存在于膽小管和竇狀間隙內(nèi)。二.來(lái)源和去路2021/10/1045‘-NT要釋放入血必須要經(jīng)肝膽系統(tǒng)內(nèi)的高濃度膽汁酸去垢處理2021/10/105三.檢測(cè)方法鉬藍(lán)比色法化學(xué)發(fā)光法

酶法偶聯(lián)速率法2021/10/106四.實(shí)驗(yàn)原理5′-核苷酸酶（5′-NT）催化5′-次黃嘌呤核苷酸水解生成次黃苷和氨，次黃苷在嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）作用下生成次黃嘌呤，次黃嘌呤在黃嘌呤氧化酶（XOD）作用下生成尿酸和過氧化氫（H2O2），H2O2與4-氨基安替比林（4-AA）和TOOS在過氧化物酶（POD）作用下生成醌亞氨化合物，通過測(cè)定相應(yīng)波長(zhǎng)處吸光度變化值得出樣本中5′-NT活性。2021/10/107五.標(biāo)本的采集及保存

1．細(xì)胞培養(yǎng)物：離心后收集上清液，并將標(biāo)本保存于-20℃。

2．血清：室溫放置2小時(shí)內(nèi)或2-8℃

24H，1000xg離心20分鐘。

3．血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于1000xg離心15分鐘。4.2-8℃可放置24小時(shí)，-20℃可放置一星期，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。2021/10/108六.參考范圍速率法：正常成人血清5’-NT酶活性為：0-11

U/L

鉬藍(lán)雙色法：健康成年人5’-NT活性為2-17

U/L，兒童稍低。60歲以上老人的均值約為青壯年的2倍。

2021/10/109七.臨床意義⒈5-NT活性增高常見于原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性肝癌、膽道癌、胰腺癌、膽道阻塞、膽管炎、急、慢性肝炎、肝硬化、藥物性肝損傷。其活性增高可達(dá)2～6倍，且與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。

⒉5-NT是診斷肝腫瘤非常靈敏的酶學(xué)指標(biāo)。在病變?cè)缙冢?dāng)肝功能、肝掃描和有關(guān)肝病檢查陰性時(shí)本酶活性已明顯增高。對(duì)于AFP陰性病例，其與AFP互補(bǔ)診斷肝癌的陽(yáng)性率可達(dá)94％。

2021/10/1010⒊特異性高，能協(xié)助判斷堿性磷酸酶（ALP）增設(shè)是肝膽系統(tǒng)疾病，還是骨髓系統(tǒng)疾?。ㄈ绻前⒐侨饬?、骨轉(zhuǎn)移癌、佝僂病等）。ALP在肝膽系統(tǒng)疾病和骨骼系統(tǒng)疾病時(shí)均可增高。除5-NT除肝膽系統(tǒng)疾病增高外，骨骼系統(tǒng)疾病一般均不升高。

2021/10/1011⒋有助于鑒別診斷肝細(xì)胞性黃疸和阻塞性黃疸。后者5-NT明顯高于前者。

⒌5-NT已