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關于免疫學檢測免疫學預防第1頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月主要內(nèi)容第一節(jié)免疫細胞及其亞群的檢測(自學)第二節(jié)免疫分子的檢測(重點)一、抗原、抗體的檢測(一)抗原-抗體反應的特點(自學)(二)抗原-抗體反應的影響因素(自學)(三)抗原-抗體反應的類型和檢測方法(重點)1.沉淀反應(自學)2.凝集反應(自學)3.補體參與的抗原抗體反應(自學)4.免疫標記技術(重點)5.蛋白芯片技術(自學)二、細胞因子的檢測(自學)第三節(jié)免疫學檢測的臨床應用第2頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)免疫分子的檢測(三)抗原抗體反應的類型和檢測方法4.免疫標記技術(1)免疫熒光技術(3)放射免疫測定法(2)酶免疫測定法……….第3頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月

Ag-Ab+標記技術。用以檢測Ag或Ab的一種試驗方法。標記:熒光素、酶、放射性同位素等。標記后的Ag或Ab仍有原有的生物學活性。特點:敏感性高、特異性強、應用范圍廣,可定性、定量、定位。4、免疫標記技術免疫熒光技術免疫酶測定法放射免疫測定法發(fā)光免疫分析免疫膠體金技術免疫印跡技術第4頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月Ag熒光素Ag放射性同位素酶熒光顯微鏡酶標檢測儀射線測量儀化學發(fā)光物、金屬顆粒等用熒光素、放射性同位素、酶、金屬顆粒及化學(或生物)發(fā)光劑等作為追蹤物,標記抗體或抗原進行的抗原抗體反應免疫標記技術第5頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月Ag硝酸纖維素膜和醋酸纖維素膜利用吸附載體作為固相進行抗原抗體反應吸附載體聚苯乙烯微量反應板(酶標板)第6頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月Ag聚苯乙烯微量反應板(酶標板)封阻/封閉(block)包被(coat)AgAg第7頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月熒光素:異硫氰酸熒光素(FITC)---------黃綠色熒光四乙基羅丹明(RB200)-----------橙色熒光四甲基異硫氰酸羅丹明(TMRITC)--橙紅色第8頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月待檢標本(固定在玻片上)+已知熒光抗體→洗去游離的熒光Ab→干燥后,熒光顯微鏡下觀察。用途:病毒感染的細胞、攜帶某種特異性Ag的細胞的檢測。a、直接熒光法問題思考:直接法會給我們的檢測工作帶來什么不方面?檢測多種Ag需制備多種相應的熒光抗體標記。第9頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月用來檢測標本中未知的Ag。檢測Ag。未標記Ab+待檢Ag(未知)→(沖洗)+熒光標記抗Ab→沖洗、干燥、熒光顯微鏡下觀察。b、間接熒光法優(yōu)點:敏感性高,制備一種熒光標記抗Ab即可對多種Ab-Ab系統(tǒng)進行檢測。缺點:易出現(xiàn)非特異性熒光。第10頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月直接酶標法間接酶標法辣根過氧化物酶(HRP)堿性磷酸酶抗抗體、二抗酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)第11頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月雙抗體夾心法——用已知抗體檢測未知抗原第12頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月間接法——用已知抗原檢測未知抗體第13頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月“免疫標記技術”小結熒光標記法酶聯(lián)免疫吸附試驗直接熒光法間接熒光法夾心法間接法已知抗體包被于固相載體,加待測抗原,再加酶標抗體,顯色;反之亦然(先加已知抗原)標記抗原或者一抗抗原包被于固相載體,加酶標一抗,再加酶標二抗,顯色標記二抗第14頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月課堂測試1、下列哪項不是免疫標記技術的特點_______A、提高了反應的靈敏度B、反應的特異性更強C、能進行定量檢測D、能進行定性檢測E、具有快速的優(yōu)點2、下列免疫學測定方法靈敏度最高的是______A、沉淀反應B、凝集反應C、ELISAD、放射免疫測定E、補體結合試驗3、免疫熒光抗體技術間接法是將熒光素標記在______A、被檢抗原上

B、已知抗體上C、抗Ig抗體上

D、Ag—Ab復合物上E、已知抗原上第15頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月4、ELISA的雙抗體夾心法,固相載體的標記物是_______A、待檢抗原B、已知抗原C、已知抗體D、酶標抗體E、酶標抗原5、檢測可溶性抗原可以用______A、直接凝集反應B、酶聯(lián)免疫吸附實驗C、放射性免疫分析法D、直接熒光標記6、間接標記技術一般主要用于檢測______A、未知抗原B、未知抗體C、兩者都可以第16頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月第二十四章免疫學防治第一節(jié)免疫預防(重點)一、疫苗(重點)二、疫苗的基本要求(自學)三、計劃免疫和預防接種注意事項(了解)第二節(jié)免疫治療(自學)第17頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月老問題思考第一次患嚴重疾病而病愈,第二次遭受同一嚴重疾病,患病結果會怎樣?怎么解釋?第18頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月人工主動免疫第19頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月初次抗原刺激再次抗原刺激時間(天)人工被動免疫第20頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月人工主動免疫和人工被動免疫的特點人工主動免疫人工被動免疫輸入物質(zhì)抗原抗體等免疫力出現(xiàn)時間慢(2-3周)快(輸注即生效)免疫力維持時間數(shù)月至數(shù)年2-3周主要用途預防治療或緊急預防接種次數(shù)1到3次1次第21頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月是給機體輸入抗原性物質(zhì),剌激機體產(chǎn)生特異性免疫力一、疫苗1.滅活疫苗/死疫苗2.減毒活疫苗3.類毒素4.新型疫苗第22頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月三、計

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