GBT22286-2008動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

GB/T22286-2008動物源性食品中多種

β-受體激動劑殘留量的測定（液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法LC/MS/MS-ESI)2021/5/91主要內(nèi)容2021/5/92一、背景介紹

Β-受體激動劑是一類化學合成的苯乙醇胺類物質(zhì)，早期主要用于防治人、動物支氣管哮喘和支氣管痙攣，后來發(fā)現(xiàn)在飼料中添加該類藥物后具有營養(yǎng)再分配作用，可明顯提高動物的瘦肉率（提高10%），因此曾被作為促生長添加劑被廣泛關(guān)注，但是人們食用了該類藥物殘留的畜禽產(chǎn)品后會出現(xiàn)面色潮紅、頭痛、頭暈、胸悶、心悸、四肢麻木等不良反應(yīng)，嚴重的可危及生命。因此歐盟、美國等都先后立法禁止在養(yǎng)殖業(yè)中使用該類藥物，我國政府也明令禁止其使用。1.“瘦肉精”的危害2021/5/93鹽酸克倫特羅在動物體內(nèi)主要發(fā)生氧化作用，也發(fā)生硫酸化反應(yīng)和葡萄糖醛酸絡(luò)合反應(yīng)(存在形式為結(jié)合態(tài)和游離態(tài))。其主要代謝場所是肝臟，最終大部分隨尿液排出，實驗證明，鹽酸克倫特羅在動物體內(nèi)代謝周期長，易富集和殘留，耐熱性較高，在100℃的沸水中很穩(wěn)定。2.“瘦肉精”體內(nèi)代謝2021/5/94目前，針對β-興奮劑有效檢測方法主要集中在膠體金快速檢測卡法、酶聯(lián)免疫法（ELISA）、高效液相色譜法（HPLC）、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)、氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)3.檢測方法及相應(yīng)標準2021/5/95二、GB/T22286-2008適用范圍及原理范圍：本標準規(guī)定了動物源性食品中（適用于豬肝和豬肉）克倫特羅、沙丁胺醇、特布他林、萊克多巴胺、塞曼特羅、塞布特羅、溴布特羅、苯氧丙酚胺、馬布特羅、溴代克倫特羅殘留量的檢測方法，檢出限均為0.5μg/kg。實驗室還針對鰻魚及烤鰻等動物源性食品進行了方法驗證2021/5/96檢測原理原理：試樣中的殘留物經(jīng)酶解，用高氯酸調(diào)節(jié)pH值，沉淀蛋白后離心，上清液用異丙醇-乙酸乙酯提取，再用陽離子交換柱凈化，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定，內(nèi)標法定量（沙丁胺醇-D3作為沙丁胺醇、特布他林和萊克多巴胺的內(nèi)標物，克倫特羅-D9作為其余β-受體激動劑的內(nèi)標物質(zhì)）克倫特羅沙丁胺醇特布他林萊克多巴胺賽曼特羅-NH-+H20-NH2-+OH+-水解作用2021/5/97三、檢測流程檢測流程：-NH-+H20-NH2-+OH+-水解作用

酶解

提取

凈化1.酶的最適pH2.在酸性條件下溶于水，易提取2021/5/98四、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件2021/5/99五、注意事項1、每批檢測樣做樣順序為試劑空白、樣品空白、空白樣品加標曲線、樣品。2、加標回收：取0.25mL10.0ng/mL的四種興奮劑混標到5g樣品中，相當于0.5μg/kg添加水平

3、初測加標選用同等基質(zhì)的任一樣品，復測時做平行樣，初測濃度較高的樣品復測時應(yīng)先將樣品稀釋一定倍數(shù)后過固相萃取柱，保證最終濃度在曲線范圍之內(nèi)，且最終對應(yīng)內(nèi)標濃度應(yīng)與曲線保持一致4、檢測結(jié)果