課題2-月季的花藥培養(yǎng)(精華)

課題2-月季的花藥培養(yǎng)(精華)第一頁(yè)，共14頁(yè)。一、基礎(chǔ)知識(shí)（一）被子植物的花粉發(fā)育1.花的結(jié)構(gòu)第二頁(yè)，共14頁(yè)。思考：1.被子植物花粉發(fā)育過(guò)程中的四分體時(shí)期與減數(shù)分裂過(guò)程中的四分體時(shí)期是同一階段嗎？2.花粉粒中幾個(gè)細(xì)胞核的基因型相同嗎？2.花粉的發(fā)育過(guò)程減數(shù)分裂有絲分裂四分體時(shí)期單核期雙核期第三頁(yè)，共14頁(yè)。3.花粉粒類(lèi)型一個(gè)成熟的花粉粒即為雄配子體，有兩種情況：成熟的花粉粒中，只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。（精子在花粉管中形成）有些植物的花粉，在成熟前，生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，這樣的花粉在成熟時(shí)，含有一個(gè)營(yíng)養(yǎng)核和兩個(gè)精子。二核花粉粒:三核花粉粒:被子植物的雌蕊第四頁(yè)，共14頁(yè)。（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑快速閱讀P38頁(yè)有哪兩種途徑？原因是什么？花藥胚狀體愈傷組織叢芽生根植株abcde1．形成原因：主要取決于培養(yǎng)基中

種類(lèi)及其濃度配比。2．植株的特點(diǎn)：

植株，植株弱小，

。激素單倍體高度不育思考：1.為什么愈傷組織和胚狀體到叢芽分別稱(chēng)為分化和再分化？2.花粉植株弱小，高度不育，是否就沒(méi)有利用價(jià)值？第五頁(yè)，共14頁(yè)。1.為什么胚狀體和愈傷組織到叢芽分別稱(chēng)為分化和再分化？思考2.花粉植株弱小，高度不育，是否就沒(méi)有利用價(jià)值？用于單倍體育種技術(shù)，可明顯縮短育種周期，培育純合新品種。

胚狀體就像種子，有胚芽、胚軸、胚根等結(jié)構(gòu)。胚狀體到叢芽就是由原始的分化狀態(tài)繼續(xù)生長(zhǎng)和分化完成的。而愈傷組織形成叢芽的過(guò)程是從脫分化狀態(tài)進(jìn)入再分化形成叢芽的過(guò)程。第六頁(yè)，共14頁(yè)。（三）影響花藥培養(yǎng)的因素a.材料選擇什么時(shí)期最好，為什么？b.如何選擇單核期細(xì)胞？c.為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給消毒帶來(lái)困難？d.還有哪些影響花藥培養(yǎng)的因素？閱讀P38-39思考：誘導(dǎo)花粉植株能否成功及成功率的高低，主要影響因素是

和

。培養(yǎng)基的組成材料的選擇花期為初花期，花粉發(fā)育在單核靠邊期，成功率最高。選擇完全未開(kāi)放的花蕾親本植株的生長(zhǎng)條件、材料的預(yù)處理及接種密度等。第七頁(yè)，共14頁(yè)。（一）材料的選取:染色鏡檢2.針對(duì)不易著色的花粉細(xì)胞核，采用的方法是：

?；ǚ奂?xì)胞核被染成

色。1.確定花粉發(fā)育時(shí)期的最常用的方法有

。機(jī)理：醋酸洋紅為

性染色劑，

易被堿性染料著色染成紅色。二、實(shí)驗(yàn)操作醋酸洋紅法焙花青-鉻礬法藍(lán)黑堿染色體堿性染料不是通常所說(shuō)的酸堿性，而指染料中著色基團(tuán)是陰離子/陽(yáng)離子，若為陽(yáng)離子則為堿性染料。第八頁(yè)，共14頁(yè)。（二）材料的消毒（無(wú)菌吸水紙）吸干水分（0.1％氯化汞溶液）2～4min（無(wú)菌水）沖洗花蕾（70％酒精）大約30s（無(wú)菌水）清洗1.與菊花外植體的消毒相比較，有何不同？為什么？

在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗。因?yàn)樵录净ɡ偻饷嬗谢ㄝ唷⒒ò昊蚍f片保護(hù)，通常處于無(wú)菌狀態(tài)，所以只要將整個(gè)花蕾或幼穗消毒即可。

2.為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給消毒帶來(lái)困難？花瓣松動(dòng)后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來(lái)困難。第九頁(yè)，共14頁(yè)。（三）接種和培養(yǎng)思考：1、為何不能損傷花藥且要徹底去除花絲？2、培養(yǎng)時(shí)需要注意哪些事項(xiàng)？②與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體形成①損傷花藥，容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織，即得不到單倍體。②花藥開(kāi)裂長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體。長(zhǎng)出的愈傷組織要及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上；釋放的胚狀體，必須在花藥開(kāi)裂后盡快將幼小植株分開(kāi)，否則這些植株將很難分開(kāi)。①溫度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。③在花藥培養(yǎng)中，特別是通過(guò)愈傷組織形成的花粉植株，常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化。（主要原因是營(yíng)養(yǎng)核和生殖核融合造成的）所以還需要對(duì)培養(yǎng)出來(lái)的植株作進(jìn)一步的鑒定和篩選第十頁(yè)，共14頁(yè)。1.在月季花藥培養(yǎng)成單倍體植株的過(guò)程中，哪個(gè)時(shí)期最易成活?（）A、單核期前的花藥

B、單核期后的花藥

C、單核期花藥

D、雙核期2.關(guān)于月季的花藥培養(yǎng)技術(shù)與菊花的組織培養(yǎng)技術(shù)的不同，下列說(shuō)法不正確的是()A．花藥培養(yǎng)需發(fā)育時(shí)期適宜的花蕾B．花藥培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格C．培養(yǎng)基配制方法完全不同D．花藥裂開(kāi)后長(zhǎng)出的愈傷組織或釋放的胚狀體要及時(shí)換培養(yǎng)基課堂練習(xí)CC第十一頁(yè)，共14頁(yè)。3.某高等植物體細(xì)胞內(nèi)假設(shè)有6條染色體，它們是AaBbDd，那么，一個(gè)花粉管中的兩個(gè)精子中的染色體是？（）

A、ABD和abd

B、AbD和abd

C、AaB和Bbd

D、Abd和Abd

D4.關(guān)于花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的途徑，下列敘述錯(cuò)誤的是()A．花粉可通過(guò)愈傷組織發(fā)育成植株B．花粉可通過(guò)胚狀體進(jìn)一步分化成植株C．主要由培養(yǎng)基中激素的種類(lèi)及用量決定途徑D．產(chǎn)生胚狀體是花藥離體培養(yǎng)中特有的途徑D第十二頁(yè)，共14頁(yè)。1.答：F2代紫色甜玉米的基因型組成可能為Aasusu或AAsusu。如果運(yùn)用常規(guī)育種方法，將F2代中的紫色甜玉米與白色甜玉米（aasusu）進(jìn)行測(cè)交，可以選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比較繁瑣，耗時(shí)也較長(zhǎng)，需要至少三年的選種和育種時(shí)間。