鹽酸曲馬多控釋片HPLC檢測方法,分析化學論文

鹽酸曲馬多控釋片HPLC檢測方法,分析化學論文鹽酸曲馬多〔TR〕為非嗎啡類強效鎮(zhèn)痛藥，對各種原因造成的劇烈疼痛均具有顯著作用[1,2].在適宜的劑量下，不會產(chǎn)生呼吸抑制作用，對血流動力學亦無顯著影響[3].控釋制劑〔controlled-releasepreparation1近零級〕從制劑中釋放到作用部位而發(fā)揮療效的一類制劑鹽酸曲馬多制成控釋制劑，可有效延長作用時間，保持較平穩(wěn)的血藥濃度降低其不良反響[4-6].本文以高效液相色譜法測定了自制的鹽酸曲馬多控釋片，并經(jīng)過方式方法學考察，能夠實現(xiàn)定性鑒別及含量測定[7].1材料與方式方法1.1儀器與試藥[8,9]高效液相色譜儀〔美國Waters〕，檢測器為UV-2487,工作站為Empower色譜工作站，柱溫控制箱〔Waters〕；紫外可見分光光度計〔U-1901北京普析通用〕；0.8m微孔濾膜和0.45m微孔濾膜〔上海醫(yī)工院〕；鹽酸曲馬多〔311004石家莊制藥集團華盛制藥有限公司〕；鹽酸曲馬多對照品〔編號153806744〕；甲醇為色譜純級，其他試劑均為分析純，鹽酸曲馬多口服控釋片實驗室自制.1.2色譜條件[10,11]高效液相色譜儀：Waters泵：1500系列HPLC泵；檢測器：UV-2487;工作站：Empower色譜工作站；流動相：取醋酸鈉18g,加冰醋酸9.8mL,再加水稀釋至1000mL即得水相，再以水相∶有機相=65∶35參加甲醇，即得[醋酸-醋酸鈉緩沖液〔pH4.5〕]-甲醇〔65∶35〕；流速：1.0mL/min;色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠填充柱〔C18柱〕Phenomenex?1504.60mm5micro;柱溫30℃。1.3檢測波長的測定方式方法取對照品鹽酸曲馬多，以流動相為溶劑，制成每1mL中含80g的溶液，在200~300nm處以紫外可見分光光度計進行掃描，確定檢測波長.1.4定性鑒別采用高效液相色譜法〔HPLC〕對所制得樣品進行定性鑒別.1.5專屬性測定按處方量稱取空白輔料45mg入25mL量瓶，參加流動相，在超聲波清洗器中超聲處理30min,定容后過濾，濾液即為空白輔料樣品溶液.取鹽酸曲馬多對照品50mg,精致細密稱定，置于25mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，得對照品儲備液.用移液管汲取對照品儲備液2.5mL入10mL量瓶，用流動相定容即得對照品溶液.分別對空白輔料樣品溶液和對照品溶液進樣20l,得圖譜，判定空白輔料對含量測定能否有干擾.1.6精致細密度測定取1.3中鹽酸曲馬多對照品溶液，連續(xù)進樣5次，每次20l,得圖譜及峰面積，求RSD值，判定儀器精致細密度能否良好.1.7線性測定分別汲取1.3中對照品儲備液1.5、2.0、2.5、3.0和3.5mL入10mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，即得對照品系列溶液.分別取對照品系列溶液20l進樣，每個樣重復一次，得圖譜及峰面積，以每個樣品的平均峰面積對濃度進行線性回歸，得回歸方程、標準曲線及相關系數(shù)r.1.8穩(wěn)定性測定取1.3中鹽酸曲馬多對照品溶液，分別在0、2、4、6及8h進樣20l,每次重復進樣一次，得圖譜及峰面積.求RSD值，判定鹽酸曲馬多在8h內(nèi)能否穩(wěn)定.1.9回收率測定精致細密稱取10mg、12.5mg及15mg的鹽酸曲馬多對照品各三份，分別倒入25mL的量瓶中，參加處方量的輔料、適量的流動相分散均勻后，超聲振蕩30min后加流動相定容至刻度，搖勻后過濾，取續(xù)濾液20l進樣，測定峰面積并計算回收率.1.10重復性測定取制得的鹽酸曲馬多控釋片20片，研碎后取適量〔相當于鹽酸曲馬多12.5mg〕，用流動相分散均勻后入25mL容量瓶，超聲處理30min后用流動相定容至刻度，搖勻后過濾，取續(xù)濾液20l進樣.連續(xù)測定五次樣品的含量.1.11含量測定取制得的鹽酸曲馬多控釋片20片，研碎后取適量〔相當于鹽酸曲馬多12.5mg〕，用流動相分散均勻后入25mL容量瓶中，超聲處理30min后用流動相定容至刻度，搖勻后過濾，取續(xù)濾液20l進樣.測定三批樣品的含量，計算，得到每片含量.2結果與討論2.1檢測波長確實定[12]采用紫外分光光度計掃描鹽酸曲馬多的流動相溶液，結果如此圖1所示.能夠發(fā)現(xiàn)，樣品分別在229nm和271nm波長處有最大吸收峰，該檢測器是紫外檢測器，故229nm處可能是溶劑峰的影響，鹽酸曲馬多的流動相溶液和水溶液在271nm處均有最大吸收，所以選擇271nm作為高效液相色譜儀的紫外檢測波長2.2專屬性測定[13,14]對所制得鹽酸曲馬多樣品進行HPLC測定，結果如此圖2所示.由圖2〔a〕和圖2〔b〕可知，HPLC圖譜中的樣品出峰時間與對照品出峰時間一致，TR8.0min.同時，與圖2〔c〕比照發(fā)現(xiàn)，鹽酸曲馬多的保存時間約是8min,而輔料在8min附近沒有峰，所以輔料對鹽酸曲馬多的含量測定沒有干擾。2.3精致細密度測定對鹽酸曲馬多的HPLC測定方式方法的精致細密度進行考察，結果如表1所示.能夠發(fā)現(xiàn)，6個平行樣品的峰面積RSD值為0.72%,表示清楚該方式方法的精致細密度好.2.4線性測定對鹽酸曲馬多的HPLC測定方式方法的線性進行考察，測得數(shù)據(jù)作圖，如此圖3所示.經(jīng)過計算可知，鹽酸曲馬多溶液0.3~0.7mg/mL濃度范圍內(nèi)線性關系良好.回歸方程為A=5845502C+83705,相關系數(shù)r=0.9999.2.5穩(wěn)定性測定對鹽酸曲馬多的HPLC測定方式方法的穩(wěn)定性進行研究，實驗結果如表2所示.能夠發(fā)現(xiàn)，檢測結果的波動幅度較小〔RSD=0.70%〕，鹽酸曲馬多溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定，即在測定時間范圍內(nèi)穩(wěn)定性較好.2.6回收率測定[15]對鹽酸曲馬多的HPLC測定方式方法的回收率進行研究，結果如表3所示.能夠發(fā)現(xiàn)，樣品的回收率在98%~102%,RSD值為0.99%,因此，采用HPLC法測定鹽酸曲馬多含量的方式方法是準確可靠的。2.7重復性測定對鹽酸曲馬多的HPLC測定方式方法的重復性進行研究，得到RSD=1.18%,該方式方法的重復性較好，且結果準確.如表4所示.2.8含量測定根據(jù)1.11項方式方法制備供試品及1.2項色譜條件，對鹽酸曲馬多含量測定，測得數(shù)據(jù)經(jīng)計算得到每片含量，且RSD=0.24%.如表5所示.按上述樣品處理方式方法和色譜條件測定，對鹽酸曲馬多標準品進行HPLC測定，保存時間為7.99min,如此圖2〔b〕所示.所制得鹽酸曲馬多樣品進樣得，保存時間為8.02min如此圖2〔a〕所示.色譜行為一致，且對測定無干擾.3結論本文建立了鹽酸曲馬多口服控釋片的HPLC檢測方式方法.通過紫外測定確定了HPLC法的檢測波長，排出溶劑峰影響故在271nm有較強吸收，提高了檢出效果.選擇流動相[醋酸-醋酸鈉緩沖液〔pH4.5〕]-甲醇〔65∶35〕，分離度大于2且時間短.同時增加了空白輔料的色譜圖，防止輔料干擾結果.試驗研究了HPLC測定方式方法的專屬性、精致細密度、線性、穩(wěn)定性、回收率和重復性.試驗結果表示清楚，選用HPLC法對鹽酸曲馬多口服控釋片進行檢測，準確高效，可知足含量測定的需要.【圖略】以下為參考文獻[1]劉艷紅，柯靜，鐘衛(wèi)華，等.鹽酸曲馬多與高烏甲素術后自控鎮(zhèn)痛療效與安全性的meta分析[J].職業(yè)與健康，2021,31〔3〕:366-369.[2]王啟盛，呂亞莉，陳傳軍，等.鹽酸羥考酮緩釋片與鹽酸曲馬多緩釋片治療癌痛療效比擬[J].中國藥師，2020,17〔12〕:2082-2084.[3]王芳，方浩，等.應用微透析技術研究鹽酸曲馬多在小鼠額葉皮質(zhì)細胞外液中的藥動學[J].藥學學報，2020,48〔3〕:406-410.[4]張向萍，李淑卿.鹽酸曲馬多鎮(zhèn)痛作用的研究大概情況[J].當代中西醫(yī)結合雜志，2005,14〔14〕:1920-1922.[5]茹鮮吾斯曼，王霞，阿米娜，等.鹽酸曲馬多緩釋片對中重度癌痛鎮(zhèn)痛的觀察106例分析[J].新疆醫(yī)學，2004,34〔2〕:22-24.[6]蘇玉珠，盧秋桃，羅球珠，等.曲馬多制劑與臨床應用研究[J].基層醫(yī)學論壇，2018,15〔34〕:1167-1168.[7]徐歡，邱穎姮.高效液相色譜法測定鹽酸曲馬多緩釋片中鹽酸曲馬多含量[J].中國藥業(yè)，2007,16〔24〕:35-36.[8]魏紀魯，胡冠時.復方鹽酸曲馬多分散片處方及制劑工藝[J].中國醫(yī)院藥學雜志，2004,24〔10〕:627-629.[9]崔瑞潔.鹽酸曲馬多微球緩釋片的制備及藥動學研究[J].中國當代應用藥學，2020,31〔9〕:1089-1093.[10