血型鑒定抗體篩選交叉合血

血型鑒定抗體篩選交叉合血血型鑒定抗體篩選交叉合血第1頁試驗內(nèi)容血型判定抗體篩選交叉配血血型鑒定抗體篩選交叉合血第2頁血型判定血型鑒定抗體篩選交叉合血第3頁目標掌握紅細胞ABO血型及Rh血型判定血型鑒定抗體篩選交叉合血第4頁原理ABO血型判定：依據(jù)紅細胞上有沒有A抗原或（和）B抗原，以及血清中有沒有抗A及抗B，能夠?qū)⒀头譃锳型、B型、AB型、O型四種，利用紅細胞凝集試驗經(jīng)過正定型、反定型準確判定ABO血型。

Rh血型判定：IgM型鹽水抗D試劑能夠與D陽性紅細胞在鹽水介質(zhì)中形成肉眼可見凝集。

血型鑒定抗體篩選交叉合血第5頁原理血型鑒定抗體篩選交叉合血第6頁試劑

抗A及抗B血清（商品試劑）5%A型和B型紅細胞（試管法）10%A型和B型紅細胞（玻片法）IgM型鹽水抗D試劑標本

抗凝靜脈血EDTA-K2

血型鑒定抗體篩選交叉合血第7頁紅細胞ABO血型判定（試管法正定型）標識兩支潔凈試管-A和-B在標識為-A試管中加1滴抗A試劑。在標識為-B試管中加1滴抗B試劑。在每個試管中各加入5%受檢者紅細胞懸液

(1份壓積紅細胞+19份0.9%鹽水)輕輕混勻，1000g離心1分鐘。檢驗上清液是否有溶血。輕輕重懸細胞扣，檢驗凝集。血型鑒定抗體篩選交叉合血第8頁紅細胞ABO血型判定（試管法反定型）標識兩支潔凈試管Ac和Bc每管加入2滴受檢者血清。在標識Ac試管中加入1滴5%A型試劑紅細胞。在標識Bc試管中加入1滴5%B型試劑紅細胞。輕輕混勻，1000g離心1分鐘。檢驗上清有沒有溶血。輕輕重懸細胞扣，檢驗凝集。判斷并統(tǒng)計結(jié)果。血型鑒定抗體篩選交叉合血第9頁紅細胞ABO血型判定（玻片法）在標識玻板上分別加一滴抗A、抗B。各加一滴10%受檢者紅細胞懸液

(1滴壓積紅細胞+9滴0.9%鹽水)輕輕混勻，室溫放置2-15分鐘。觀察并統(tǒng)計結(jié)果：凝集為陽性結(jié)果，不凝集為陰性結(jié)果，對結(jié)果有懷疑，應用試管法重新試驗。血型鑒定抗體篩選交叉合血第10頁紅細胞Rh血型判定試管法標識一支75×12mm試管加入抗D血清1滴，加1滴5%待檢細胞。輕輕混勻，1000g離心1分鐘，或3000r/min，15秒。檢驗是否溶血，然后輕輕重懸細胞扣，檢驗凝集玻片法在玻板上標識待檢紅細胞編號。加入抗D血清1滴于標識玻片中。將35－45%待檢細胞1滴滴入玻片并混勻。室溫放置2分鐘左右觀察結(jié)果。血型鑒定抗體篩選交叉合血第11頁結(jié)果判讀（ABO血型判定）正定型反定型血型抗A抗BA細胞B細胞O細胞--++-O+--+-A-++--B++---AB血型鑒定抗體篩選交叉合血第12頁結(jié)果判讀（Rh血型判定）陽性對照陰性對照待檢細胞結(jié)果+-+++---血型鑒定抗體篩選交叉合血第13頁匯報方式

XXX型，Rh+/-血型鑒定抗體篩選交叉合血第14頁注意事項玻片、試管都要標識?。?！A及B標準血清絕對不能相混,不要依靠用染料顏色標識血清。所用玻片、試管試驗前必須清洗潔凈，以免出現(xiàn)假凝集現(xiàn)象。紅細胞懸液滴管頭不能接觸標準血清液面，普通先加血清，再加紅細胞懸液，便于核實是否漏加血清。離心時間、速度嚴格要求。要在光亮背景下觀察凝集,可使用光鏡檢驗小凝集,同時應注意觀察凝集強度，有利于A、B亞型發(fā)覺，觀察后馬上統(tǒng)計。血型鑒定抗體篩選交叉合血第15頁抗體篩選血型鑒定抗體篩選交叉合血第16頁目標掌握抗體篩選試驗方法血型鑒定抗體篩選交叉合血第17頁鹽水試驗法白蛋白介質(zhì)法低離子強度介質(zhì)法（LISS）酶技術抗球蛋白試驗聚凝胺促凝技術PEG促凝技術血型鑒定抗體篩選交叉合血第18頁原理抗人球蛋白法：IgG類抗體，因為其分子量小，與紅細胞結(jié)合以后在鹽水介質(zhì)中不發(fā)生肉眼可見凝集，稱為不完全抗體。但在加入抗-IgG抗體后，以其搭橋則可出現(xiàn)凝集。血型鑒定抗體篩選交叉合血第19頁試劑

抗球蛋白試劑陽性對照血清陰性對照血清O型紅細胞生理鹽水標本：抗凝靜脈血（EDTA-K2）血型鑒定抗體篩選交叉合血第20頁操作步驟在標識好試管中各加入兩滴血漿和一滴5%O型紅細胞，混勻。于370C孵育一小時。用生理鹽水洗滌紅細胞4-6次，完全傾盡末次洗滌鹽水。向得到干細胞扣中加入1-2滴抗球蛋白試劑。1000rpm，離心1分鐘。檢驗凝集并統(tǒng)計結(jié)果。血型鑒定抗體篩選交叉合血第21頁結(jié)果判讀加入抗球蛋白試劑后，如紅細胞出現(xiàn)凝集或溶血，則結(jié)果為陽性。加入抗球蛋白試劑后結(jié)果為陰性，而加入直抗陽性對照細胞后呈陽性反應，則結(jié)果為陰性。如加入直抗陽性對照細胞后呈陰性反應，則結(jié)果不可靠，必須重復檢測。

血型鑒定抗體篩選交叉合血第22頁操作步驟陽性對照管待檢管陰性對照管IgG型抗D1待檢血清2陰性對照血清25%O型試劑紅細胞111在標識好試管中按下表加入試劑及血清。血型鑒定抗體篩選交叉合血第23頁ABO血型判定不規(guī)則抗體篩選玻片法（正定型）試管法（正定型,反定型）鹽水法聚凝胺法抗人球法血型鑒定抗體篩選交叉合血第24頁微柱凝集試驗技術達亞美微量定型系統(tǒng)凝膠測試法基于生物化學凝膠過濾技術和離心技術及免疫化學抗原抗體特異反應。當抗原抗體反應，抗人球試驗時血細胞發(fā)生凝集。離心時凝集塊不能經(jīng)過凝膠間隙而在凝膠上層，呈陽性反應，未凝集細胞離心時可經(jīng)過凝膠間隙而在凝膠底部，呈陰性反應。

血型鑒定抗體篩選交叉合血第25頁DiaMed卡法結(jié)果判讀4＋在凝膠柱頂端形成單一層凝集細胞。3＋凝集層主要位于凝膠柱上1/3。2＋凝集位于整個凝膠柱，底部僅有較少細胞。1＋凝集層位于凝膠柱下1/3。凝膠中細胞沒有凝集或溶血視為陰性。

血型鑒定抗體篩選交叉合血第26頁思索題1.紅細胞ABO血型判定正反定型不一致原因2.造成Rh血型判定出現(xiàn)假陽性和假陰性原因3.抗體篩選臨床意義血型鑒定抗體篩選交叉合血第27頁交叉配血

CrossMatch血型鑒定抗體篩選交叉合血第28頁目標掌握交叉配血試驗方法血型鑒定抗體篩選交叉合血第29頁原理鹽水法

檢驗供受者之間有沒有ABO血型不合。用于抗體篩選陰性和不一樣血型骨髓移植患者輸血。

血型鑒定抗體篩選交叉合血第30頁原理凝聚胺法

凝聚胺是一個高價陽離子季胺鹽多聚物，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，能夠中和紅細胞表面負電荷，使紅細胞之間距離降低，能引發(fā)正常紅細胞可逆性非特異性凝集。假如是抗體致敏紅細胞被凝聚胺凝集，則凝集不可逆。離心后，加入重懸液，凝聚胺凝聚作用可經(jīng)過加入枸櫞酸鈉而中和，使正常紅細胞凝聚解散，而抗體引發(fā)凝集依然存在。

血型鑒定抗體篩選交叉合血第31頁試劑

抗A/抗B標準血清A1/B反定型細胞獻血者血清或血漿以及5%紅細胞懸液受檢者血清或血漿以及5%紅細胞懸液BASOpolymatching試劑盒

標本：抗凝靜脈血（EDTA-K2）血型鑒定抗體篩選交叉合血第32頁操作步驟（鹽水法）標識為主側(cè)試管中加入受者血清或血漿2滴和供者紅細胞懸液1滴。標識為次側(cè)試管中加入供者血清或血漿2滴和受者紅細胞懸液1滴。混勻，馬上1000g離心1分鐘。檢驗是否溶血，輕輕搖動試管檢驗凝集。復查獻血員ABO血型，患者ABO/Rh血型。判斷并統(tǒng)計結(jié)果。

血型鑒定抗體篩選交叉合血第33頁操作步驟（凝聚胺法）取試管2支，標識主次側(cè)在主側(cè)管中加入病人血清或血漿2滴，加供血者5%紅細胞懸液1滴。次側(cè)管加供血者血清或血漿2滴，加入病人5%紅細胞懸液1滴。各加LIM液0.7ml，混勻，再各加polybrene(凝聚胺)溶液2滴，并混合均勻。血型鑒定抗體篩選交叉合血第34頁操作步驟（凝聚胺法）3400rpm離心10秒，倒掉上清液，管底殘留約0.1ml液體。輕輕搖動試管，