農(nóng)業(yè)微生物配套實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌革蘭氏染色法

農(nóng)業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)微生物教研室2010秋季學(xué)期植物生產(chǎn)類(lèi)各專(zhuān)業(yè)第一頁(yè)，共十三頁(yè)。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一

細(xì)菌革蘭氏染色法實(shí)驗(yàn)二

培養(yǎng)基的制備及滅菌實(shí)驗(yàn)三

稀釋平板分離計(jì)數(shù)法實(shí)驗(yàn)四微生物菌落特征觀(guān)察及描述第二頁(yè)，共十三頁(yè)。實(shí)驗(yàn)報(bào)告書(shū)寫(xiě)和實(shí)驗(yàn)要求1一個(gè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)內(nèi)容寫(xiě)一份報(bào)告。2實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、操作步驟及實(shí)驗(yàn)結(jié)果，強(qiáng)調(diào)的是不能將書(shū)本上的搬到實(shí)驗(yàn)報(bào)告中，必須是你真實(shí)完成的步驟及對(duì)應(yīng)每步的結(jié)果反映在你的報(bào)告中。3要求繪圖時(shí)必須用鉛筆描繪，用一個(gè)圓表示從顯微鏡看到的視野，標(biāo)明菌名、放大倍數(shù)等。大腸桿菌10×1004實(shí)驗(yàn)結(jié)束后要求每位同學(xué)將自己使用過(guò)的儀器和玻璃器皿打掃干凈，并放回原處，保持實(shí)驗(yàn)室整潔，每次實(shí)驗(yàn)全班留一組同學(xué)打掃實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生。第三頁(yè)，共十三頁(yè)。農(nóng)業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌革蘭氏染色法第四頁(yè)，共十三頁(yè)。1．本實(shí)驗(yàn)的目的和要求了解革蘭氏染色的原理，學(xué)習(xí)并掌握革蘭氏染色的方法。第五頁(yè)，共十三頁(yè)。2．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和原理革蘭氏染色法（Gramstain）不僅能觀(guān)察到細(xì)菌的形態(tài)而且還可將所有細(xì)菌區(qū)分為兩大類(lèi)：染色反應(yīng)呈藍(lán)紫色的稱(chēng)為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，用G+表示；染色反應(yīng)呈紅色（復(fù)染顏色）的稱(chēng)為革蘭氏陰性細(xì)菌，用G-表示。細(xì)菌對(duì)于革蘭氏染色的不同反應(yīng)，是由于它們細(xì)胞壁的成分和結(jié)構(gòu)不同而造成的。革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的細(xì)胞壁主要是由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成的，在染色過(guò)程中，當(dāng)用乙醇處理時(shí)，由于脫水而引起網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的孔徑變小，通透性降低，使結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被保留在細(xì)胞內(nèi)而不易脫色，因此，呈現(xiàn)藍(lán)紫色；革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁中肽聚糖含量低，而脂類(lèi)物質(zhì)含量高，當(dāng)用乙醇處理時(shí)，脂類(lèi)物質(zhì)溶解，細(xì)胞壁的通透性增加，使結(jié)晶紫-碘復(fù)合物易被乙醇抽出而脫色，然后又被染上了復(fù)染液（番紅）的顏色，因此呈現(xiàn)紅色。第六頁(yè)，共十三頁(yè)。3．需用的儀器和試劑等大腸桿菌，枯草芽孢桿菌；革蘭氏染色液，載玻片，接種環(huán)、顯微鏡等。第七頁(yè)，共十三頁(yè)。4．實(shí)驗(yàn)步驟樣品涂片——干燥——固定——草酸銨結(jié)晶紫初染約1min——水洗——碘液媒染約1min——水洗——95％酒精脫色20―30s——立即水洗——番紅液復(fù)染1―2min——水洗——干燥——鏡檢第八頁(yè)，共十三頁(yè)。2023/5/149第九頁(yè)，共十三頁(yè)。2023/5/1410第十頁(yè)，共十三頁(yè)。第十一頁(yè)，共十三頁(yè)。5．實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求在你所作的革蘭氏染色制片中，大腸桿菌和枯草芽孢桿菌各染成什么顏色？它們是革蘭氏陰性菌還是革蘭氏陽(yáng)性菌？繪圖。第十二頁(yè)，共十三頁(yè)。內(nèi)容總結(jié)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)二培養(yǎng)基的制備及滅菌。實(shí)驗(yàn)三稀釋平板分離計(jì)數(shù)法。實(shí)驗(yàn)四微生物菌落特征觀(guān)察及描述。3要求繪圖時(shí)必須用鉛筆描繪，用一個(gè)圓表示從顯微鏡看到的視野，標(biāo)明菌名、放大倍數(shù)等。大腸桿菌10×100。革蘭氏染色法（Gramstain）不僅能觀(guān)察到細(xì)菌的形態(tài)而且還可將所有細(xì)菌區(qū)分為兩大類(lèi)：染色反應(yīng)呈藍(lán)紫色的稱(chēng)為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，用G+表示。細(xì)菌對(duì)于革蘭氏染色的不同反應(yīng)，是由于它們細(xì)胞壁的成分和結(jié)構(gòu)不