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實(shí)驗(yàn)橙汁飲料中維生素C的測(cè)定一、 目的與要求1、 掌握2.6-二氯酚靛酚測(cè)定維生毒C的原理和方法。2、 進(jìn)一步熟練掌握滴定操作。二、 原理還原型抗壞血酸能還原染料2.6-二氯酚靛酚,該染料在酸性中呈紅色(在中性或堿性溶液中呈藍(lán)色),被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原(染料)2.6-二氯酚靛酚后,本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒(méi)有雜質(zhì)干擾時(shí),一定量的樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)2.6-二氯酚靛酚的量與樣品中所含抗壞血酸的量成正比。反應(yīng)式如下:連啾照抗壞血酷染料(螃紅色)脫M愜抗壞血BE堡料《無(wú)色)三、 儀器滴定管,錐形瓶。四、 試劑2%草酸溶液:溶解20克草酸結(jié)晶于200毫升水中,然后稀釋至1000mL。1%草酸溶液:取上述2%草酸溶液500mL,用水稀釋至1000mL。抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取20mg抗壞血酸,溶于1%草酸溶液中,移入10mL量瓶中,并用1%草酸溶液稀釋至100毫升,混勻,置冰箱中保存。使用時(shí)吸取上述抗壞血酸5mL,置于50毫升容量瓶中,用1%草酸溶液定容之。此標(biāo)準(zhǔn)使用液每毫升含0.02mg維生素C。(0.02mg/mL)標(biāo)定:吸取標(biāo)準(zhǔn)使用液5mL于三角燒瓶中,加入6%碘化鉀溶液0.5mL,1%淀粉溶液3滴,再以0.001mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,終點(diǎn)為淡藍(lán)色。計(jì)算如下:c=匕x0.088V2
c:抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mg/mL;V1:滴定時(shí)所耗0.001mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的量,mL;V2:滴定時(shí)所取抗壞血酸的量,mL。0.088:lmlO,0001N碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于抗壞血酸的量(mg/ml)(4)2,6-二氯靛酚溶液:稱取碳酸氫鈉52mg,溶于200mL沸水中,然后稱取2,6-二氯靛酚50mg,溶解在上述碳酸氫鈉的溶液中,待冷,置于冰箱中過(guò)夜,次日過(guò)濾置于250mL容量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。此液應(yīng)貯于棕色瓶中并冷藏,每星期至少標(biāo)定1次。標(biāo)定:取5mL已知濃度的抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,加入1%草酸溶液5mL,搖勻,用上述配制的染料溶液2,6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉紅色于15秒不褪色為止。計(jì)算:CxV 1V2式中:T:每毫升染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù),mg/mL;C:抗壞血酸的濃度,mg/mL;Vl:抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量,mL;V2:消耗染料2,6-二氯靛酚溶液溶液量,mL。0.000167mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液:精確取干燥的碘酸鉀0.3567克,用水稀釋至100mL,取出1mL,用水稀釋至100mL,此溶液1mL相當(dāng)于抗壞血酸0.088mg。1%淀粉溶液。6%碘化鉀溶液。五、操作步驟1、 稱取適量(50.0?100.0克)樣品,加等量的2%草酸溶液,倒入組織搗碎機(jī)中搗成勻漿。稱取10.00?30.00克漿狀樣品(使其含有抗壞血酸1-5mg),置于小燒杯中,用1%草酸溶液將樣品移入100毫升容量瓶中,并稀釋至刻度,搖勻。2、 將樣液過(guò)濾,棄去最初毫升濾液。若樣液具有顏色,用白陶土(應(yīng)選擇脫色力強(qiáng)但對(duì)抗壞血酸無(wú)損失的白陶土)去色,然后迅速吸取5?10mL濾液,置于50mL三角燒瓶中,用標(biāo)定的2,6-二氯靛酚染料溶液滴定,直至溶液呈粉紅色于15秒內(nèi)不褪色為止。六、結(jié)果計(jì)算(V(V-V0)xTx100式中:x:樣品中抗壞血酸含量,mg/100g;T:lmL染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量,mg/mL;V:滴定時(shí)所耗去染料溶液的量,mL;V0:滴定空白時(shí)消耗染料的量,mL;m:滴定時(shí)所取濾液中含有樣品的質(zhì)量,g。七、注意事項(xiàng)樣品取樣后,應(yīng)浸泡在已知量2%草酸溶液中使抗壞血酸受損失。以免發(fā)生氧化,使抗壞血酸受損失。對(duì)動(dòng)性的樣品可用10%三氯醋酸代替2%草酸溶液提?。粚?duì)含有大量Fe的樣品,如儲(chǔ)藏過(guò)久的罐頭食品可用8%醋酸溶液代替草酸溶液提取。整個(gè)操作過(guò)程要迅速,防止還原型抗壞血酸被氧化。若樣品濾液無(wú)色,可不加色陶土。須加白陶土的,要對(duì)每批新的白陶土測(cè)定回收率。加白陶土脫色過(guò)濾后,樣品要迅速滴定。滴定開(kāi)始時(shí),染料溶液要迅速加入,直至紅色不立即消失而后盡可能一滴一滴地加入,并要
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