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柱色譜法的分離機(jī)制與分類職業(yè)教育醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)宜春職業(yè)技術(shù)學(xué)院王宜萍0102柱色譜法的定義與分類柱色譜法的分離機(jī)制柱色譜法的分離機(jī)制與分類一、柱色譜法的定義與分類定義:把固定相裝在色譜柱中進(jìn)行分離的方法。柱色譜法的分離機(jī)制與分類根據(jù)管柱的粗細(xì)及固定相填充方式分:填充柱色譜法;毛細(xì)管柱色譜法。按分離機(jī)理分類:吸附柱色譜法分配柱色譜法離子交換色譜法空間排阻色譜法柱色譜法的分離機(jī)制與分類柱色譜法的分離機(jī)制吸附柱色譜法定義:以吸附劑為固定相,液體為流動(dòng)相,利用吸附劑對(duì)不同組分的吸附能力不同,而進(jìn)行分離的色譜法。柱色譜法的分離機(jī)制與分類吸附劑:多孔性物質(zhì),表面有許多吸附中心。吸附:組分的分子與流動(dòng)相的分子競(jìng)爭(zhēng)占據(jù)吸附劑表面活性中心的過(guò)程。吸附色譜體系是由吸附劑、流動(dòng)相和試樣三者構(gòu)成的,試樣在吸附劑和流動(dòng)相作用下,反復(fù)地在柱中進(jìn)行吸附-解吸附-吸附-解吸附的過(guò)程,由于在兩相吸附能力的差異,不同組分依次從柱中流出而得到分離。柱色譜法的分離機(jī)制與分類流動(dòng)相分子

吸附劑流動(dòng)相柱色譜法的分離機(jī)制與分類當(dāng)吸附達(dá)到平衡時(shí),可用吸附平衡常數(shù)K來(lái)表示:Cs

:組分在吸附劑表面的濃度;Cm

:組分在流動(dòng)相中的濃度柱色譜法的分離機(jī)制與分類組分的吸附平衡常數(shù)K越大,組分越容易被吸附,保留時(shí)間越長(zhǎng),遷移速度就越慢,即后流出色譜柱柱色譜法的分離機(jī)制與分類分配柱色譜法的流動(dòng)相是液體,固定相也是液體(稱為固定液)。是利用被分離組分在固定相或(和)流動(dòng)相中的溶解度差別,即分配系數(shù)的差別而實(shí)現(xiàn)分離。分類:正相色譜法:固定相的極性比流動(dòng)相極性強(qiáng)反相色譜法:固定相的極性比流動(dòng)相極性弱柱色譜法的分離機(jī)制與分類基本原理與液—液萃取原理相似,當(dāng)流動(dòng)相攜帶樣品流經(jīng)固定相(固定液)時(shí),各組分在兩相間不斷地進(jìn)行溶解、萃取,再溶解、再萃取……,由于不同組分的分配系數(shù)不同,產(chǎn)生差速遷移,最終組分得以分離。分配系數(shù):柱色譜法的分離機(jī)制與分類定義:離子交換柱色譜法是利用被分離混合物中不同組分離子交換能力的差別而實(shí)現(xiàn)分離的。適用于離子型化合物的分離分析。固定相:離子交換樹(shù)脂流動(dòng)相:水為溶劑的緩沖溶液柱色譜法的分離機(jī)制與分類不同離子的交換能力不同,導(dǎo)致在柱內(nèi)的遷移速度不同而得到分離。如圖示:Na+和Ca2+柱色譜法的分離機(jī)制與分類空間排阻色譜法又稱為分子排阻色譜法,是利用被分離組分分子的大?。ɑ驖B透系數(shù)的大?。┎町悂?lái)進(jìn)行分離。其固定相為多孔性凝膠,故又稱為凝膠色譜法。柱色譜法的分離機(jī)制與分類小分子:能完全滲透進(jìn)入凝膠內(nèi)部孔穴而滯留

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