血液一般檢驗丨紅細胞檢驗

臨床檢驗基礎(chǔ)技術(shù)紅細胞檢驗職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫目錄CONTENTⅠ計數(shù)板的結(jié)構(gòu)Ⅱ微量吸管的使用紅細胞計數(shù)Ⅲ血細胞比容測定Ⅵ血紅蛋白測定Ⅳ紅細胞形態(tài)檢查Ⅴ紅細胞沉降率測定Ⅷ網(wǎng)織紅細胞計數(shù)Ⅶ改良牛鮑計數(shù)板結(jié)構(gòu)職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫01計數(shù)板外觀正面觀：居中呈“H”型凹槽“H”型凹槽外側(cè)兩個支持柱側(cè)面觀：支持柱支撐蓋玻片“H”型凹槽中間平面與蓋玻片形成計數(shù)池，高度0.1mm02計數(shù)板劃線共九個大方格每個邊長1mm大方格四角中方格中間中方格小方格02計數(shù)板劃線四角每個大方格單線等分成16個中方格中間大方格雙線等分成25個中方格，每個中方格單線等分成16個小方格四角的中方格和中間的中方格是不一樣的注：L代表白細胞，E代表紅細胞，P代表血小板。E/PE/PE/PE/PE/P03計數(shù)板應用共九個大方格，每個邊長1mm四角四個大方格用于白細胞計數(shù)中間中央大方格內(nèi)的五個中方格用于紅細胞和血小板計數(shù)11紅細胞/血小板03計數(shù)板應用以白細胞計數(shù)為例，細胞計數(shù)原則為：①按照“弓”字形移動；②壓線細胞數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下。左圖實心圓表示計數(shù)的細胞，空心圓表示不計數(shù)的細胞；右圖表示細胞計數(shù)的結(jié)果。03計數(shù)板應用細胞種類計數(shù)原理稀釋液稀釋倍數(shù)計數(shù)范圍計算公式白細胞將血液稀釋一定的倍數(shù)，計數(shù)一定范圍內(nèi)的血細胞數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液中的血細胞數(shù)量。2%冰醋酸20四角四個大方格N/20×109/L紅細胞Hayem液200中央大方格內(nèi)五個中方格N/100×1012/L血小板10g/L草酸銨溶液20同紅細胞N×109/L

注：N為計數(shù)的細胞數(shù)。細胞計數(shù)因稀釋液、稀釋倍數(shù)、計數(shù)范圍不同，最后計數(shù)方法不同。04改良牛鮑計數(shù)板專用蓋玻片長×寬×厚為24mm×20mm×0.6mm具有一定的重量，平整、光滑、無裂痕，厚薄均勻一致將潔凈的蓋片緊貼于干燥的平面玻璃上，若能吸附一定時間不脫落，落下時呈弧線形旋轉(zhuǎn)，表示蓋片平整、厚薄均勻合格的蓋片放置在計數(shù)池表面后，與支持柱緊密接觸的部位可見到彩虹用綢布拭凈蓋玻片，采用“推式”法從計數(shù)板下緣向前平推蓋玻片，將其蓋在計數(shù)池上紅細胞計數(shù)職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫01概述紅細胞的發(fā)育過程在睪酮和促紅細胞生成素的簡介和直接調(diào)節(jié)，生成發(fā)育分化，網(wǎng)織紅細胞成熟48小時，紅細胞存活約120天01概述紅細胞計數(shù)（RBC）即測定單位體積外周血液中紅細胞的數(shù)量，是診斷貧血等疾病最常用的檢查項目之一。臨床可通過各項紅細胞參數(shù)檢驗和紅細胞的形態(tài)觀察對貧血和某些疾病進行診斷和鑒別診斷。02計數(shù)原理用紅細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)后，充入改良牛鮑計數(shù)板中，在顯微鏡下計數(shù)一定容積內(nèi)的紅細胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中的紅細胞數(shù)量。02計數(shù)方法Hayem稀釋液：由NaCl、Na2SO4、HgCl2和蒸餾水組成。其中NaCl和Na2SO4調(diào)節(jié)滲透壓，后者還可提高比重防止細胞粘連，HgCl2為防腐劑。該稀釋液的主要缺點是遇高球蛋白血癥患者，由于蛋白質(zhì)沉淀而使紅細胞易凝集。03計數(shù)方法取稀釋液2.0ml加入全血10μl，混勻充池，靜置2-3min高倍鏡計數(shù)中央大方格內(nèi)4角和正中間1個共5個中方格內(nèi)的紅細胞數(shù)計算：N/5×25×10×200×106=N/100×1012/L⑦報告方式：X.XX×1012/L。04參考區(qū)間成年男性（4.3～5.8）×1012/L成年女性（3.8～5.1）×1012/L新生兒：（6.0～7.0）×1012/L05醫(yī)學決定水平高于6.8×1012/L，應采取相應的治療措施；低于3.5×1012/L，可診斷為貧血；低于1.5×1012/L，可考慮輸血。血紅蛋白測定職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫01概述卟啉環(huán)包著一個亞鐵離子組成一個亞鐵血紅素，每條多肽鏈含一個亞鐵血紅素，每個血紅蛋白分子有四個珠蛋白肽鏈血紅蛋白（Hb或HGB）分子量為64458。01概述種類多肽鏈組成比例HbAα2β2大于95%HbA2α2δ2約2-3%HbFα2γ2小于1%α4：β地貧β4

：α地貧地中海貧血（珠蛋白生成障礙性貧血）01概述Hb有多種形式及衍生物HbO2HbredHbMHb（Hi）HbCOSHb02測定方法RBCHbHiHiCN

OD值Hb（g/L）=KAλ=540nm溶血氧化結(jié)合計算02測定方法此處K值為理論值，在實際應用中更多采用標準品參照，測定未知樣品血紅蛋白濃度。02測定方法HiCN法測定血紅蛋白標準曲線？A:0.332，Hb=？02測定方法十二烷基硫酸鈉法（sodiumdodecylsulfatehemoglobin，SDS-Hb）堿羥血紅蛋白法（alkalinehaematindetergent，AHD575）疊氮高鐵血紅蛋白法（HiN3）溴代十六烷基三甲胺法（cetyltrimethylammonynmbromide，CTAB）目前，自動血液分析儀已多使用不含氰化鉀的血紅蛋白測定方法03參考區(qū)間成年男性：130～175g/L成年女性：115～150g/L新生兒：170～200g/L04臨床意義極重度重度中度輕度正常<30g/L(31-60)g/L(61-90)g/L(91-120)g/L>120g/L

306090110

120Hb（g/L）女性

男性貧血的程度與臨床表現(xiàn)并不一定一致04臨床意義增生理性增多年齡性別及缺氧代償引起的增多多病理性增多①相對性增多；②絕對性增多減生理學減少①6個月～2歲的嬰幼兒；②中、晚期妊娠的孕婦；③造血功能減退老年人。以上幾種情況所致的貧血統(tǒng)稱為生理性貧血少病理性減少①骨髓造血功能低下：如再生障礙性貧血、白血病、惡性腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移等；②造血原料缺乏：如缺鐵引起的缺鐵性貧血、缺乏維生素B12或葉酸所致的巨幼細胞性貧血；③紅細胞破壞增加：各種溶血性貧血；④紅細胞丟失過多：急、慢性失血RBC+Hb的變化紅細胞形態(tài)檢查職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫01正常紅細胞形態(tài)正常的紅細胞呈雙凹圓盤形，細胞大小均一，平均直徑約7.2μm，瑞氏染色后為淡粉紅色，血紅蛋白充盈良好，呈正常色素性、向心性淺染，中央有生理性淡染區(qū)胞質(zhì)內(nèi)無異常結(jié)構(gòu)。除健康人外，部分再生障礙性貧血、急性失血性貧血和白血病等患者的紅細胞亦呈正常形態(tài)。02異常紅細胞形態(tài)（1）大小異常大紅細胞大小不等小紅細胞巨紅細胞直徑小于6μm直徑大于10μm直徑大于15μm指同一血涂片中紅細胞大小懸殊，直徑相差在1倍以上小紅細胞大紅細胞和巨紅細胞紅細胞大小不等02異常紅細胞形態(tài)（2）形態(tài)異常橢圓形紅細胞靶形紅細胞球形紅細胞口形紅細胞棘形紅細胞緡錢狀排列裂片紅細胞紅細胞形態(tài)不整鐮刀形紅細胞淚滴形紅細胞球形紅細胞口形紅細胞橢圓形紅細胞靶形紅細胞鐮刀形紅細胞裂片紅細胞棘形紅細胞淚滴形紅細胞紅細胞形態(tài)不整緡錢狀紅細胞02異常紅細胞形態(tài)（3）染色異常低色素性紅細胞高色素性紅細胞嗜多色性紅細胞裂片紅細胞高色素性紅細胞低色素性紅細胞嗜多色性紅細胞02異常紅細胞形態(tài)（4）結(jié)構(gòu)異?？úㄊ檄h(huán)染色質(zhì)小體嗜堿性點彩紅細胞有核紅細胞染色質(zhì)小體（Howell-Jollybody）：又稱豪-焦小體，位于成熟或幼稚紅細胞胞質(zhì)內(nèi)的紫紅色小體，直徑1～2μm，1至數(shù)個不等，為核碎裂或溶解后的殘余物。最常見于巨幼細胞性貧血，也見于溶血性貧血及脾切除術(shù)后。染色質(zhì)小體卡-波環(huán)（Cabotring）：存在于成熟或幼稚紅細胞胞質(zhì)內(nèi)，呈紫紅色線圈狀或“8”字形結(jié)構(gòu)，可能是紡錘體的殘余物或脂蛋白變性所致。常與染色質(zhì)小體并存，見于溶貧、巨幼貧、白血病及鉛中毒等?？úㄊ檄h(huán)嗜堿性點彩紅細胞（basophilicstipplingcell）：指在瑞氏染色涂片中，紅細胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形態(tài)大小不一、數(shù)量不等的灰藍色點狀物。在鉛、鉍、鋅、汞等重金屬中毒時增多，為鉛中毒診斷的篩查指標。重癥巨幼細胞性貧血和骨髓纖維化等亦可見增多。嗜堿性點彩紅細胞有核紅細胞（nucleatederythrocyte，NRBC）：即幼稚紅細胞。存在于骨髓中，1周內(nèi)新生兒外周血涂片可見少量，成人外周血中出現(xiàn)有核紅細胞屬病理現(xiàn)象，常見于各種溶血性貧血、白血病、紅白血病等。有核紅細胞都來認一認，異常屬于哪一種？血細胞比容職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫01血細胞比容的概念血細胞比容（hemotocrit，HCT；packedcellvolume，PCV），是指一定體積（1L）的全血中（抗凝血）紅細胞所占容積的相對比例（小數(shù)或百分數(shù)）HCT的高低主要與細胞紅數(shù)量、大小有關(guān)，主要用于貧血和紅細胞增多的診斷，反應血液稀釋和血液濃縮變化02血細胞比容測定方法HCT測定可采用直接離心法（包括溫氏法和微量法）或間接血液分析儀法溫氏法微量法素折射儀法黏度法比重測定法放射性核法其中微量法為推薦方法，放射性核素法為參考方法02血細胞比容測定方法溫氏法將定量的抗凝血灌注于特制的細玻璃管中，定時、定速離心后,有形成分和血漿分離，上層呈淡黃色的液體是血漿，中間很薄一層為灰白色，即白細胞和血小板（或栓細胞），下層為暗紅色的紅細胞，彼此壓緊而不改變細胞的正常形態(tài)。根據(jù)紅細胞柱及全血高度，可計算出紅細胞在全血中的容積比值，即為紅細胞比容（壓積）02血細胞比容測定方法抗凝血注入Wintrobe管以2264g離心力離心30分鐘讀數(shù)再離心10分鐘判讀結(jié)果03血細胞比容參考區(qū)間04血細胞比容臨床意義增高：①各種原因引起的血液濃縮；②原發(fā)性或繼發(fā)性紅細胞增多癥；③新生兒。降低：①各種原因引起的血液稀釋；②各種原因引起的貧血。臨床補液量的參考：各種原因?qū)е旅撍畷r，HCT都會增高真性紅細胞增多癥診斷指標：當HCT大于0.7，RBC為（7～10）×109/L，Hb大于180g/L，即可診斷。血液流變學指標：自發(fā)性凝血時，HCT可＞0.6。04血細胞比容臨床意義RBC、HGB、HCT

MCV、MCH、MCHC紅細胞平均值職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫01紅細胞平均值的概念平均紅細胞體積（MCV）就是平均每個紅細胞的體積，單位pg/L（1g=1012pg）平均紅細胞血紅蛋白（MCH）就是平均每個紅細胞內(nèi)的血紅蛋白量，單位fL（1L=1012fL）平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）就是平均每升紅細胞內(nèi)含有的血紅蛋白量,單位（g/L）02紅細胞平均值的計算如果RBC=4.0×1012/L，Hb=120g/L，Hct=0.40，那么MCV=?MCH=？MCHC=?03紅細胞平均值參考值人群MCV（fl）MCH（pg）MCHC（g/L）成人80～10026～34320～3601～3歲79～10425～32280～350新生兒86～12027～36250～37004紅細胞平均值的應用貧血形態(tài)學分類MCVMCHMCHC臨床意義正常細胞性貧血正常正常正常急性失血、急性溶血、再生障礙性貧血、白血病等大細胞性貧血增高增高正常巨幼細胞性貧血單純小細胞性貧血降低降低正常慢性炎癥、尿毒癥等小細胞低色素性貧血降低降低降低缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、慢性失血等網(wǎng)織紅細胞計數(shù)職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫01網(wǎng)織紅細胞定義網(wǎng)織紅細胞（Ret）是介于晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間的過渡階段細胞，其胞質(zhì)中尚殘留部分嗜堿性物質(zhì)（RNA），可被某些染料活體染色后呈藍色或紫色的網(wǎng)狀或顆粒狀結(jié)構(gòu)，故名為網(wǎng)織紅細胞。Ret體積略大于成熟紅細胞（直徑8.0～9.5μm），仍具有合成血紅蛋白的能力，約1～2天后，過渡為成熟紅細胞。ICSH將網(wǎng)織紅細胞分成I～IV型。I型（絲球型）

Ⅱ型（網(wǎng)型）

III型（破網(wǎng)型）

Ⅳ型（點粒型）02網(wǎng)織紅細胞形態(tài)分型形態(tài)特征正常存在部位I型（絲球型）RBC幾乎被網(wǎng)織物充滿僅存在于正常骨髓II型（網(wǎng)型）位于RBC中央線團樣結(jié)構(gòu)松散大量存在于骨髓，極少見于外周血中III型（破網(wǎng)型）網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)稀少，呈不規(guī)則枝點狀排列少量存在于外周血中IV型（點粒型）嗜堿性物質(zhì)少，呈分散的細顆粒、短絲狀主要存在于外周血中02網(wǎng)織紅細胞形態(tài)7、抗凝劑原理網(wǎng)織紅細胞內(nèi)帶負電荷的RNA磷酸基團，與新亞甲藍、燦爛甲酚蘭等堿性染料帶正電荷的有色反應基團結(jié)合，使RNA膠體間的負電荷減少而發(fā)生凝縮，形成藍色的點狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，顯微鏡下計數(shù)可得網(wǎng)織紅細胞的相對值（%）和絕對值（×109/L）（Ret#=RBC×Ret%）。試劑10g/L煌焦油藍或新亞甲藍染液。簡要操作染液與待檢血液1︰1混合→室溫放置或37℃水浴10～15分鐘→制備血涂片→低倍鏡下觀察→油鏡計數(shù)→計算。03網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法血液染液7、抗凝劑ICSH及我國衛(wèi)計委臨床檢驗中心推薦使用Miller窺盤法Miller窺盤為圓形玻片，玻片上刻有兩個正方形格子，計數(shù)時用小方格A計數(shù)紅細胞，用大方格B（包含A）計數(shù)網(wǎng)織紅細胞，大方格B面積為小方格A的9倍。03網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法BA03網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法B格Ret2個，A格RBC5個03網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法小方格A格內(nèi)紅細胞數(shù)（RBC）大方格B格內(nèi)網(wǎng)織紅細胞數(shù)（Ret）121102140130120121130140111合計11155111×9Ret%==0.5%

Ret#=RBC×Ret%04網(wǎng)織紅細胞計數(shù)參考區(qū)間05網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的臨床意義（1）網(wǎng)織紅細胞增多：表示骨髓造血功能旺盛，見于各種增生性貧血，溶血性貧血尤為顯著。溶血性貧血時由于大量網(wǎng)織紅細胞進入血循環(huán)，網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)可增至6%～8%或更多。急性溶血時可高達20%，嚴重者甚至可達40%～50%以上；急性失血性貧血時網(wǎng)織紅細胞可明顯增高；缺鐵性貧血和巨幼紅細胞性貧血時，網(wǎng)織紅細胞正?；蜉p度增高。（2）網(wǎng)織紅細胞減少：表示骨髓造血功能低下，多見于再生障礙性貧血。網(wǎng)織紅細胞低于15×109/L為診斷急性再生障礙性貧血的標準之一。急性白血病時，由于骨髓中異常細胞大量浸潤，使紅細胞生成受到抑制，可造成網(wǎng)織紅細胞減少。06網(wǎng)織紅細胞生成指數(shù)（RPI）反映骨髓造血功能指標，代表網(wǎng)織紅細胞的生成相當于健康人多少倍。其計算公式為：網(wǎng)織紅細胞成熟時間：①健康人RPI為1；②RPI＞3：提示為溶血性貧血或急性失血性貧血；③RPI＜1：提示為骨髓增生低下或紅系成熟障礙所致貧血。紅細胞沉降率測定職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫7、抗凝劑紅細胞沉降率（ESR）簡稱血沉，是指紅細胞在一定條件下自然下沉的速率通常是枸櫞酸鹽抗凝劑，1:4比例，時間是1小時ESR測定的常用方法有魏氏（Westergren）法和自動血沉儀法01紅細胞沉降率定義7