微生物的生長(zhǎng)繁殖與

第五章微生物的生長(zhǎng)繁殖與

生存因子第一頁(yè)，共九十三頁(yè)。一、微生物生長(zhǎng)繁殖的概念細(xì)菌兩次細(xì)胞分裂之間的時(shí)間稱為世代時(shí)間。在一定培養(yǎng)條件下，世代時(shí)間是一定的。如果營(yíng)養(yǎng)成分不同，世代時(shí)間不同。不同種的微生物，世代時(shí)間不同。原核微生物的繁殖速度比真核快，專性厭氧菌的世代時(shí)間多數(shù)比好氧菌的長(zhǎng)。生長(zhǎng)生物個(gè)體由小到大的增長(zhǎng)，即表現(xiàn)為細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加繁殖指生物個(gè)體數(shù)目的增加第一節(jié)微生物的生長(zhǎng)繁殖第二頁(yè)，共九十三頁(yè)。一、研究微生物生長(zhǎng)的方法微生物生長(zhǎng)分個(gè)體生長(zhǎng)和群體生長(zhǎng)。培養(yǎng)方法有分批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)。（一）分批培養(yǎng)

分批培養(yǎng)是在一個(gè)封閉的、有一定體積的液體培養(yǎng)基的容器中接種少量細(xì)菌在特定條件下進(jìn)行培養(yǎng)。在分批培養(yǎng)中微生物只完成一次生長(zhǎng)循環(huán)。細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線：將少量細(xì)菌接種到一定體積的新鮮液體培養(yǎng)基中進(jìn)行分批培養(yǎng)，定時(shí)取樣，以細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，可繪制出細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線。第三頁(yè)，共九十三頁(yè)。停滯期生長(zhǎng)曲線可分：對(duì)數(shù)期靜止期衰亡期第四頁(yè)，共九十三頁(yè)。1、停滯期（遲滯期或適應(yīng)期）（lagphase）:將細(xì)菌接種到某一培養(yǎng)基后，細(xì)菌并不立即繁殖而是經(jīng)過(guò)一段適應(yīng)期才能生長(zhǎng)繁殖。調(diào)整適應(yīng)表現(xiàn)在合成多種酶、完善體內(nèi)的酶系統(tǒng)及其他細(xì)胞成分。

特點(diǎn)：（1）細(xì)胞質(zhì)均勻（2）代謝活力強(qiáng)（3）蛋白質(zhì)和RNA含量增加（4）體積顯著增加，許多桿菌可長(zhǎng)成長(zhǎng)絲狀（5）形成誘導(dǎo)酶的能力強(qiáng)（6）對(duì)環(huán)境變化敏感第五頁(yè)，共九十三頁(yè)。影響因素：（1）接種量。接種量大，停滯期可縮短（2）菌齡。菌種年輕，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期接種，停滯期可能很短甚至不明顯（3）營(yíng)養(yǎng)。如果種子培養(yǎng)基與新接種的培養(yǎng)基成分相同，則對(duì)菌生長(zhǎng)有利。從豐富培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入貧營(yíng)養(yǎng)基，停滯時(shí)間拉長(zhǎng)，反之減少；（4）菌種特性。大腸桿菌停滯期長(zhǎng)，分枝桿菌長(zhǎng)第六頁(yè)，共九十三頁(yè)。2、對(duì)數(shù)期（指數(shù)期）logphase

細(xì)菌生長(zhǎng)速度達(dá)到最大，數(shù)量以幾何級(jí)數(shù)增加。特點(diǎn)：（1）細(xì)菌迅速分裂，菌數(shù)按幾何級(jí)數(shù)增加；（2）世代時(shí)間最短，而且恒定；（3）生長(zhǎng)速度最高而且恒定；（4）代謝活力強(qiáng)無(wú)死亡；（5）菌體整齊，體積恢復(fù)到原來(lái)大小；（6）對(duì)環(huán)境敏感，生理性狀及菌體成分較一致第七頁(yè)，共九十三頁(yè)。世代時(shí)間的計(jì)算：

x2=x1·2n以對(duì)數(shù)表示：lgx2=lgx1+nlg2生長(zhǎng)速率常數(shù)平均世代時(shí)間第八頁(yè)，共九十三頁(yè)。影響因素：（1）溫度。在適溫范圍內(nèi)，每增加10℃，生長(zhǎng)速度提高1倍；第九頁(yè)，共九十三頁(yè)。（2）營(yíng)養(yǎng)；（3）氧氣。好氧菌若能供給充足的氧，可能使對(duì)數(shù)期延長(zhǎng)。第十頁(yè)，共九十三頁(yè)。3、靜止期

stationaryphase由于營(yíng)養(yǎng)消耗，供應(yīng)不足及代謝產(chǎn)物的積累，這時(shí)一部分菌死亡，細(xì)菌進(jìn)入靜止期。靜止期到來(lái)的原因主要是：①營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的耗盡；②營(yíng)養(yǎng)物的比例失調(diào)，例如C／N比值不合適等；③酸、醇、毒素或H2O2等有害代謝產(chǎn)物的累積；④pH、氧化還原勢(shì)等物化條件越來(lái)越不適宜。第十一頁(yè)，共九十三頁(yè)。特點(diǎn)：（1）菌數(shù)達(dá)到最高峰；（2）活菌數(shù)達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡；（3）生長(zhǎng)速率為零；（4）開始積累貯存物質(zhì)影響因素：（1）前期主要是營(yíng)養(yǎng)，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)可延長(zhǎng)靜止期；（2）后期主要是代謝產(chǎn)物的積累；（3）離子、pH等物化條件失去平衡第十二頁(yè)，共九十三頁(yè)。4、衰亡期

declinephase由于營(yíng)養(yǎng)缺乏和代謝產(chǎn)物積累造成自身中毒，細(xì)胞生長(zhǎng)受阻，時(shí)間和菌數(shù)對(duì)數(shù)呈反比，生長(zhǎng)曲線直線下降。

特點(diǎn)：（1）生長(zhǎng)速率為負(fù)值，活菌數(shù)減少；（2）細(xì)菌發(fā)生自溶現(xiàn)象autolysis（3）代謝產(chǎn)物大量積累；（4）形態(tài)多變，出現(xiàn)畸形或衰退形。第十三頁(yè)，共九十三頁(yè)。（一）連續(xù)培養(yǎng)原理：如果在培養(yǎng)器中不斷補(bǔ)充新鮮營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并及時(shí)不斷地以同樣速度排出培養(yǎng)物，理論上講，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期可以無(wú)限延長(zhǎng)。1、恒濁連續(xù)培養(yǎng)

不斷調(diào)節(jié)流速而使細(xì)菌培養(yǎng)液濁度保持恒定的培養(yǎng)方法。根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長(zhǎng)密度，并借光電控制系統(tǒng)來(lái)控制培養(yǎng)液流速，以取得菌體密度高、生長(zhǎng)速度恒定的微生物細(xì)胞。第十四頁(yè)，共九十三頁(yè)。恒濁連續(xù)培養(yǎng)可以不斷提供具有一定生理狀態(tài)的細(xì)胞，可以得到以最高生長(zhǎng)速率進(jìn)行生長(zhǎng)的培養(yǎng)物，在微生物工業(yè)上運(yùn)用此法可得到大量菌體及相應(yīng)的代謝產(chǎn)物如乳酸、乙醇。第十五頁(yè)，共九十三頁(yè)。2、恒化連續(xù)培養(yǎng)

維持進(jìn)水中的營(yíng)養(yǎng)成分恒定，從而保持細(xì)菌的恒定生長(zhǎng)速率稱恒化連續(xù)培養(yǎng)，也稱恒組成連續(xù)培養(yǎng)。恒化連續(xù)培養(yǎng)基中，某種必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)必須在低濃度作為限制性因子，其他成分過(guò)量。這樣，細(xì)菌的生長(zhǎng)速率取決于限制性因子的濃度。

常用的限制性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有作為N源的氨、氨基酸；作為C源的葡萄糖、麥芽糖、乳酸；生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽等。第十六頁(yè)，共九十三頁(yè)。第十七頁(yè)，共九十三頁(yè)。第十八頁(yè)，共九十三頁(yè)。稀釋度（率）：新鮮培養(yǎng)基流入的速度為f，培養(yǎng)器中培養(yǎng)液體積為V，稀釋度為D=f/V，表示單位時(shí)間內(nèi)，新加入的培養(yǎng)基體積與培養(yǎng)器內(nèi)培養(yǎng)基總體積之比。隨著D增大，細(xì)菌濃度先升后降，但在相當(dāng)大范圍內(nèi)這種變化不明顯。當(dāng)稀釋度增大到最大比生長(zhǎng)速率時(shí)，微生物的增長(zhǎng)速率趕不上流出速率，結(jié)果必然是到某一時(shí)刻，微生物濃度降到維持生長(zhǎng)所必需的最低濃度（臨界濃度）之下，這時(shí)培養(yǎng)器內(nèi)微生物濃度趨于零。這時(shí)的D為臨界稀釋度。第十九頁(yè)，共九十三頁(yè)。三、細(xì)菌生長(zhǎng)曲線在廢水處理中的應(yīng)用在廢水生物處理時(shí)，可利用不同生長(zhǎng)階段的微生物處理廢水：常規(guī)活性污泥法：減速期，靜止期生物吸附法：生長(zhǎng)下降階段（靜止期）高負(fù)荷活性污泥法：對(duì)數(shù)期、減速期延時(shí)曝氣法：衰亡期第二十頁(yè)，共九十三頁(yè)。四、微生物生長(zhǎng)量的測(cè)定方法可根據(jù)菌體細(xì)胞量、菌體體積、重量直接測(cè)定，也可以根據(jù)某種細(xì)胞物質(zhì)的含量或某個(gè)代謝活動(dòng)速度間接測(cè)定。微生物生長(zhǎng)測(cè)量方法個(gè)體計(jì)數(shù)法重量法生理指標(biāo)法第二十一頁(yè)，共九十三頁(yè)。1、測(cè)微生物總數(shù)（1）計(jì)數(shù)器直接計(jì)數(shù)缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)；需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度；個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察；利用血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。第二十二頁(yè)，共九十三頁(yè)。（2）染色涂片計(jì)數(shù)

將已知體積的待測(cè)材料均勻涂布在載玻片的已知面積內(nèi)，染色后顯微鏡下計(jì)數(shù)。一般1cm2均勻涂片0.01ml樣品。選擇幾個(gè)至十幾個(gè)視野計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量。借助鏡臺(tái)測(cè)微尺測(cè)直徑可計(jì)算出視野的直徑：每ml總數(shù)=視野平均菌數(shù)×1cm2/視野面積×100×稀釋倍數(shù)第二十三頁(yè)，共九十三頁(yè)。（3）比例計(jì)數(shù)法

將菌液與等體積血液混合后涂片，計(jì)算細(xì)菌數(shù)與紅細(xì)胞比例。根據(jù)比例來(lái)計(jì)數(shù)（4）比濁法

測(cè)定菌數(shù)的快速方法。菌液中細(xì)胞濃度與渾濁度成正比，因此測(cè)定懸液的光密度就可以反映細(xì)胞濃度。將未知細(xì)胞數(shù)的懸液與已知細(xì)胞數(shù)懸液相比來(lái)計(jì)數(shù)。第二十四頁(yè)，共九十三頁(yè)。2、

測(cè)定活菌數(shù)（1）

載玻片薄瓊脂層計(jì)數(shù)法（2）平板菌落計(jì)數(shù)法（CFU）：取定量稀釋液，用涂布或傾注平板的方法在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，計(jì)算菌落第二十五頁(yè)，共九十三頁(yè)。（3）液體稀釋培養(yǎng)基計(jì)數(shù)：將待測(cè)樣品作連續(xù)10倍稀釋，一直稀釋到稀釋液的少量接種到新鮮培養(yǎng)基中沒有或極少生長(zhǎng)。記錄每個(gè)稀釋度出現(xiàn)生長(zhǎng)的試管數(shù)，再用或然率理論，查MPN（mostprobablenumber，最大可能數(shù)量）表，根據(jù)樣品的稀釋倍數(shù)就可計(jì)算出其中的活菌含量。（4）薄膜計(jì)數(shù)法：如果測(cè)定量大而含菌濃度很低的樣品（如空氣、水）中的活菌數(shù)，可將樣品用微孔薄膜（硝化纖維素薄膜）過(guò)濾，再與膜一起放到培養(yǎng)基或浸透培養(yǎng)液支持物表面培養(yǎng)。第二十六頁(yè)，共九十三頁(yè)。3、

計(jì)算生長(zhǎng)量：測(cè)細(xì)菌重量（1）

測(cè)細(xì)胞干重：一般干重為濕重的20-25%。收集單位體積培養(yǎng)液中菌體，干燥器內(nèi)加熱或減壓干燥，直接用儀器測(cè)定。（2）

測(cè)細(xì)胞含N量確定細(xì)胞濃度：凱氏定氮法測(cè)N，總蛋白含量=含N量%×6.25（3）

通過(guò)DNA測(cè)定計(jì)算濃度：熒光法，每個(gè)菌平均含DNA8.4×10-5ng（4）

生理指標(biāo)：測(cè)定微生物對(duì)氧的吸收、發(fā)酵糖產(chǎn)酸量或二氧化碳產(chǎn)量。第二十七頁(yè)，共九十三頁(yè)。第二節(jié)

微生物的生存因子

第二十八頁(yè)，共九十三頁(yè)。一、溫度溫度對(duì)生活機(jī)體的影響表現(xiàn)在兩方面：一方面是隨著溫度上升，細(xì)胞中生物反應(yīng)和生長(zhǎng)速率加快，另一方面蛋白質(zhì)、核酸等可能在高溫下被破壞。每種微生物都有最低生長(zhǎng)溫度、最高生長(zhǎng)溫度、最適生長(zhǎng)溫度、致死溫度。各種微生物最適溫度不一致，可將微生物分為嗜冷菌、嗜中溫菌、嗜熱菌、嗜超熱菌。大多數(shù)細(xì)菌是嗜中溫菌。嗜熱菌和嗜超熱菌是特殊微生物，細(xì)分為：專性嗜熱菌、兼性嗜熱菌、超嗜熱菌。第二十九頁(yè)，共九十三頁(yè)。

微生物類型

生長(zhǎng)溫度／℃最低最適最高

嗜冷微生物0以下1520兼性嗜冷微生物020-3035；嗜溫微生物15-2020-4545以上嗜熱微生物4555-6580超嗜熱或嗜高溫微生物6580-90100以上第三十頁(yè)，共九十三頁(yè)。1、嗜冷菌專性嗜冷菌：最適5-15℃，最低-12℃，兩極地區(qū)。

兼性嗜冷菌：最適10-20℃，最低，-5-0℃，海水及冷藏食品李斯特菌嗜冷微生物能在低溫下生長(zhǎng)的機(jī)制在于：（1）酶在低溫下仍能有效地發(fā)揮作用（2）細(xì)胞膜中不飽和脂肪酸含量較高，低溫下仍能保持流動(dòng)狀態(tài)。低溫致死的原因是細(xì)胞內(nèi)水分變成冰晶，造成細(xì)胞脫水，還造成細(xì)胞尤其是細(xì)胞膜的損傷。第三十一頁(yè)，共九十三頁(yè)。2、嗜熱菌：

適于在45-50℃中生長(zhǎng)，主要分布在溫泉、堆肥和土壤中。機(jī)制：（1）酶和蛋白質(zhì)比中溫型更能抗熱（2）產(chǎn)生多胺、熱亞胺和高溫精胺，可穩(wěn)定細(xì)胞中與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的結(jié)構(gòu)和保護(hù)大分子免受高溫的損害（3）核酸也有保證熱穩(wěn)定性的結(jié)構(gòu)（4）細(xì)胞膜中含有較多的飽和脂肪酸和直鏈脂肪酸，使膜具有熱穩(wěn)定性（5）生長(zhǎng)速率快，合成大分子迅速，可及時(shí)彌補(bǔ)由于熱所造成的大分子的破壞第三十二頁(yè)，共九十三頁(yè)。二、pH環(huán)境中的pH對(duì)微生物生命活動(dòng)影響很大：1、引起細(xì)胞膜電荷的變化，影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收2、影響代謝過(guò)程中酶的活性3、改變生長(zhǎng)環(huán)境中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的可給性及有害物質(zhì)的毒性第三十三頁(yè)，共九十三頁(yè)。不同微生物生長(zhǎng)所需的pH不同。大多數(shù)微生物最適pH6.5-7.5，適應(yīng)范圍在pH4-10之間。能在pH1-5范圍內(nèi)生長(zhǎng)的微生物稱為專性嗜酸微生物，如氧化硫硫桿菌、酸熱硫化葉菌；

能在酸性條件下也能在中性條件下生長(zhǎng)的為兼性嗜酸微生物；能在高pH下生長(zhǎng)的為嗜堿性微生物，如巴氏芽孢桿菌能在pH11.2-11.6條件下生長(zhǎng)（最適pH9.6）。

微生物最低pH最適pH最高pH細(xì)菌3-56.5-7.58-10酵母菌2-34.5-5.57-8霉菌1-34.5-5.57-8第三十四頁(yè)，共九十三頁(yè)。在培養(yǎng)微生物的過(guò)程中，隨著微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝進(jìn)行，pH會(huì)變化：

碳源：葡萄糖、乳糖→有機(jī)酸——pH下降

氮源：蛋白質(zhì)、蛋白胨、氨基酸→氨、胺類——pH上升（NH4）2SO4→SO42-——pH下降Na2NO3→NO32-被吸收——pH上升尿素→氨——pH上升第三十五頁(yè)，共九十三頁(yè)。三、氧化還原電位（Eh）

指的是氧化體系供給電子（作為還原劑）或接受電子（作為氧化劑）的趨勢(shì)的度量，單位為mv。氧化環(huán)境有正電位，還原環(huán)境有負(fù)電位各種微生物需要的氧化還原電位不同：好氧微生物—+300~+400mv，大于100mv才能生長(zhǎng)；兼性厭氧微生物—+100mv以上好氧呼吸，小于+100mv無(wú)氧呼吸；專性厭氧微生物—–200~-250mv，產(chǎn)甲烷菌-300~-400mv。第三十六頁(yè)，共九十三頁(yè)。影響因素：1、氧分壓：分壓高，氧化還原電位高2、pH：pH低，氧化還原電位低3、微生物的生長(zhǎng)：對(duì)有機(jī)物的氧化可使氧化還原電位下降，在代謝過(guò)程所產(chǎn)生的H2、H2S也使氧化還原電位下降。加入還原劑可使氧化還原電位下降。要提高氧化還原電位，提高氧的通氣。氧化還原電位影響微生物許多酶的活性，也影響細(xì)胞的呼吸作用。在某些條件下，如果保持低的氧化還原電位，則專性厭氧菌可不被氧殺死。所以有人認(rèn)為氧不是專性厭氧菌的致死原因，而是由于氧所形成的高氧化還原電位。第三十七頁(yè)，共九十三頁(yè)。四、溶解氧根據(jù)微生物與分子氧的關(guān)系，分為：好氧微生物：專性好氧微生物——PO20.2×101KPa微量好氧微生物——PO20.03-0.2×101KPa兼性厭氧（兼性好氧）厭氧微生物：專性厭氧微生物——PO2小于0.005×101KPa耐氧厭氧微生物——第三十八頁(yè)，共九十三頁(yè)。（一）好氧微生物與氧的關(guān)系大多數(shù)細(xì)菌、大多數(shù)放線菌、霉菌、原生動(dòng)物、微型后生動(dòng)物都屬于好氧性微生物。氧對(duì)好氧微生物的作用：1、作為微生物好氧呼吸中電子傳遞鏈的最終受體2、參與甾醇類和不飽和脂肪酸的生物合成在利用氧的過(guò)程中，氧可產(chǎn)生各種有毒的代謝產(chǎn)物如過(guò)氧化氫、羥自由基、超氧陰離子等，好氧微生物體內(nèi)具有SOD、CAT、過(guò)氧化物酶可清除之。第三十九頁(yè)，共九十三頁(yè)。好氧微生物需要的是溶解氧。氧的溶解度與水溫、大氣壓有關(guān)。溫度低，溶解度大；壓力大，溶解度大。在純水中0℃時(shí)氧溶解度14mg/L；10℃——11.3mg/L；20℃——9.2mg/L；30℃——7.7mg/L。含有機(jī)物的污水溶解度很低好氧微生物需要供給充足的氧氣。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)振蕩培養(yǎng)，工業(yè)生產(chǎn)上采用通入無(wú)菌空氣和攪拌等方法供氧。污水處理中利用各種充氧設(shè)備充氧，供給量根據(jù)微生物的數(shù)量、理化性質(zhì)、基質(zhì)性質(zhì)及濃度綜合考慮。一般來(lái)說(shuō)，溶解氧質(zhì)量濃度維持在3-4mg/L，若供氧不足，廢水處理效果不好。第四十頁(yè)，共九十三頁(yè)。（二）兼性厭氧菌與氧的關(guān)系兼性厭氧菌既有脫氧酶又有氧化酶，因此既能在無(wú)氧條件下又能在有氧條件下生存。在有氧條件下，氧化酶活性強(qiáng)，可進(jìn)行氧化磷酸化；無(wú)氧時(shí)，細(xì)胞色素和電子傳遞體系的其他組分減少或喪失，但充氧后又可全部恢復(fù)。兼性微生物包括酵母菌、腸道細(xì)菌、硝酸鹽還原菌、人和動(dòng)物致病菌、某些原生動(dòng)物、微型后生動(dòng)物、個(gè)別真菌。

第四十一頁(yè)，共九十三頁(yè)。酵母在有氧條件下進(jìn)行好氧呼吸，將有機(jī)物氧化成二氧化碳和水；無(wú)氧條件下，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)生乙醇和二氧化碳。在發(fā)酵過(guò)程中通入氧，發(fā)酵速度下降，葡萄糖利用速度下降，氧對(duì)葡萄糖的利用有抑制作用——巴斯德效應(yīng)。原因在于有氧的情況下，氧化磷酸化使NADH的H+不再轉(zhuǎn)給丙酮酸生成乳酸而是傳給氧產(chǎn)生ATP，丙酮酸進(jìn)入TCA循環(huán)使檸檬酸濃度增加，高含量的ATP及檸檬酸抑制磷酸果糖激酶的活性，從而減慢糖酵解的速度。兼性厭氧菌在污水處理中有積極作用。在供氧不足的條件下，它們可對(duì)有機(jī)物進(jìn)行不徹底的氧化，將大分子的蛋白質(zhì)、脂肪、糖類分解成小分子的有機(jī)酸和醇。第四十二頁(yè)，共九十三頁(yè)。（三）厭氧微生物：專性厭氧微生物——梭菌屬、擬桿菌、產(chǎn)甲烷菌等耐氧的厭氧微生物——氧的存在對(duì)它們無(wú)影響，不利用氧也不中毒。如乳酸菌。專性厭氧微生物的生存環(huán)境中絕對(duì)不能有氧，有氧存在時(shí)代謝產(chǎn)生的NADH2和O2反應(yīng)產(chǎn)生H2O2、NAD，還可產(chǎn)生超氧陰離子，而且專性厭氧微生物不具備SOD、H2O2酶。耐氧的厭氧微生物具有SOD，但缺乏H2O2酶，H2O2積累過(guò)多仍會(huì)被氧化。

第四十三頁(yè)，共九十三頁(yè)。厭氧微生物的培養(yǎng)：

可用N2、H2、He驅(qū)趕氧；加入氧化還原顏料——甲基蘭或刃天青指示培養(yǎng)基的氧化還原電位；要預(yù)先還原，將氧化還原電位降到一定值，可加入還原劑、維生素C、巰基乙醇、半胱氨酸鹽酸鹽等。厭氧罐第四十四頁(yè)，共九十三頁(yè)。AnaerobicGloveBox第四十五頁(yè)，共九十三頁(yè)。五、太陽(yáng)輻射

波長(zhǎng)小于1000nm的紅外輻射，可被光合細(xì)菌利用作為能源；波長(zhǎng)380-760nm的可見光是藍(lán)細(xì)菌、藻類進(jìn)行光合作用的能源。

光氧化作用：強(qiáng)烈的可見光可引起微生物的死亡。當(dāng)光線被細(xì)胞內(nèi)色素吸收后，在有氧的條件下，可產(chǎn)生許多氧自由基，引起一些酶或其他敏感部分失去活性。

光動(dòng)力作用：在細(xì)菌懸液中加入熒光染料,細(xì)菌對(duì)可見光具有高度敏感性，照射幾分鐘后即可引起死亡，其原因是染色劑誘使細(xì)胞吸收可見光內(nèi)某些波長(zhǎng)的光線而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。第四十六頁(yè)，共九十三頁(yè)。六、水的活度與滲透壓（一）水活度水活度是在一定的物質(zhì)中含有可利用水分的一種表達(dá)方式。水的可利用性既取決于水的含量也取決于水被吸附的緊密程度和有機(jī)體把水移進(jìn)體內(nèi)的效力大小。水對(duì)微生物的影響可以用水的活度值aw這個(gè)參數(shù)來(lái)表示，aw表示水的吸附和溶液因子對(duì)水可利用性的影響的一個(gè)指標(biāo)，定義為：一定溫度下（25度），某溶液或物質(zhì)在與一定空間空氣相平衡時(shí)的含水量與空氣飽和水量的比值。第四十七頁(yè)，共九十三頁(yè)。水的活度分基質(zhì)的水活度（吸附影響）和滲透壓的水活度（受溶質(zhì)相互作用的影響）。大多數(shù)微生物在aw為0.95-0.99時(shí)生長(zhǎng)最好，低至0.60-0.70時(shí)除少數(shù)真菌和酵母菌外，大多數(shù)微生物不能生長(zhǎng)。第四十八頁(yè)，共九十三頁(yè)。（二）

滲透壓

滲透壓的大小決定于濃度。在一定容量的溶液中所含溶質(zhì)的分子或離子的數(shù)量與滲透壓成正比。在同一濃度的溶液中，含小分子溶質(zhì)的溶液滲透壓大。離子溶液的滲透壓比分子溶液大。G+滲透壓大于G-（G+中凝聚著某些氨基酸）。微生物在不同滲透壓溶液中有不同反應(yīng)：等滲——0.5-0.85%NaCl溶液，生長(zhǎng)良好：低滲——破裂：高滲——質(zhì)壁分離。第四十九頁(yè)，共九十三頁(yè)。嗜高滲微生物：花蜜酵母屬和某些霉菌可在蜜餞上生長(zhǎng)。鹽桿菌可使鹽漬食品腐敗，如咸魚上長(zhǎng)的紅色細(xì)菌。醬油變質(zhì)時(shí)表面生產(chǎn)菌蹼——產(chǎn)膜性酵母菌。極端嗜鹽菌（古細(xì)菌）可在15-30%的鹽溶液中生長(zhǎng)，可應(yīng)用于含鹽量高的廢水生物處理上。細(xì)菌能調(diào)節(jié)體內(nèi)的離子濃度，以適應(yīng)不同的滲透壓力，主要是K+。當(dāng)細(xì)菌處于高滲溶液中能大量積累K+（可高于外環(huán)境64-140倍），反之排K+。第五十頁(yè)，共九十三頁(yè)。七、表面張力

液體表面的分子被它周圍和內(nèi)部的分子所吸引，而使液面趨向收縮，這種力量稱為表面張力，表示為作用在單位長(zhǎng)度上的收縮力。培養(yǎng)基表面張力為4.5-6.5×10-4N/m，適合微生物生長(zhǎng)。再降低時(shí)將影響菌體形態(tài)、生長(zhǎng)和繁殖。不同細(xì)菌對(duì)表面張力的忍受力不同，G-大于G+。20℃，4.0×10-4N/m適合G-的生長(zhǎng)。在培養(yǎng)液中加入甘氨膽酸鈉和牛磺酸鈉（膽酸鹽），使表面張力降至3.72-3.75×10-4N/m，此時(shí)肺炎球菌和鏈球菌等G+將發(fā)生細(xì)胞溶解現(xiàn)象?？捎媚懼芙鈱?shí)驗(yàn)鑒別。腸道內(nèi)的細(xì)菌因長(zhǎng)期生存在富含膽汁的腸道中，可適應(yīng)降低的表面張力，故膽酸鹽廣泛應(yīng)用于大腸菌群的分離。第五十一頁(yè)，共九十三頁(yè)。第三節(jié)其他不利環(huán)境因子對(duì)微生物的影響第五十二頁(yè)，共九十三頁(yè)。一、紫外輻射和電離輻射（一）紫外輻射紫外線的波長(zhǎng)一般是200-390nm，240-300nm的范圍內(nèi)對(duì)微生物有致死效應(yīng)。250-280nm殺傷力最強(qiáng)。紫外輻射殺菌燈的波長(zhǎng)是253.7nm，殺菌力強(qiáng)而且穩(wěn)定。作用原理：1、引起DNA分子產(chǎn)生胸腺嘧啶二聚體，使DNA不能復(fù)制。2、紫外線可使空氣中的分子氧變成臭氧，臭氧易分解產(chǎn)生單線態(tài)氧。Ｏ２

紫外線０３０２＋｛O｝第五十三頁(yè)，共九十三頁(yè)。光復(fù)活：經(jīng)紫外線照射的微生物，在可見光下，可以激活DNA修復(fù)酶，修復(fù)輻射造成的損傷。這種酶主要作用于由紫外線引起的T-T二聚體，可以與之結(jié)合形成復(fù)合物，被可見光活化，將受損區(qū)域兩端的磷酸二酯鍵水解，切除受損DNA，再由另一些酶催化插入新的核苷酸，補(bǔ)上切去的片段。暗修復(fù)：切除修復(fù)和復(fù)制后重組修復(fù)。第五十四頁(yè)，共九十三頁(yè)。不同微生物或不同生長(zhǎng)階段對(duì)紫外線的抵抗力不同。G-無(wú)芽孢桿菌（大腸桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌）最敏感，G+照射量要增加5-10倍，病毒的抵抗力更大，芽孢比營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞抵抗力高5-10倍。干燥細(xì)胞抵抗力大于濕細(xì)胞，有色素細(xì)菌大于無(wú)色細(xì)菌。芽孢在出芽階段抵抗力最弱，酵母菌在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期抵抗力最強(qiáng)。應(yīng)用：紫外線的穿透力很弱，只能用作表面消毒或空氣消毒?？諝庀尽米贤廨椛錃⒕鸁簦槐砻嫦尽獙?duì)某些不能用加熱和化學(xué)藥品消毒的器具；誘變育種——低于致死劑量下照射。第五十五頁(yè)，共九十三頁(yè)。（二）電離輻射

X-射線、γ-射線等高能電磁波，可以將被照射物質(zhì)原子核周圍的電子打出，射出的電子可以依附于其他質(zhì)子上，使之變?yōu)殛庪x子，也可以再?zèng)_擊其他原子，打出外圍所含的電子引起繼發(fā)性電離，這種輻射作用稱電離輻射。X-射線波長(zhǎng)范圍0.1-0.01nm，γ-射線0.01-0.001nm。低劑量照射有促進(jìn)生長(zhǎng)作用或引起變異，高劑量可致死。X-射線在10-20cm照射2-30min可以殺死平板上大腸桿菌、炭疽桿菌、芽孢桿菌、白喉棒狀桿菌和葡萄球菌等，但對(duì)液體培養(yǎng)基殺傷離不大。第五十六頁(yè)，共九十三頁(yè)。微生物對(duì)電離輻射的敏感程度不同。假單胞菌較敏感，小球菌和鏈球菌抗性較強(qiáng)。芽孢有較強(qiáng)抗性。不同生長(zhǎng)階段敏感性不同。在培養(yǎng)基中加入某些化合物如含-SH的化合物，可增加抵抗力。蛋白質(zhì)、醇、葡萄糖、羧酸、乙醇等也有保護(hù)作用。X-射線穿透力強(qiáng)，但因經(jīng)濟(jì)原因一般不用于滅菌，常被用于誘變劑。作用機(jī)制：1、直接作用。輻射的能量直接作用于細(xì)胞內(nèi)部的某個(gè)特殊敏感區(qū)域，導(dǎo)致細(xì)胞突變或死亡。2、間接作用：輻射可引起培養(yǎng)基中的水或者氧電離，產(chǎn)生自由基第五十七頁(yè)，共九十三頁(yè)。機(jī)制：1、細(xì)胞內(nèi)含物受到強(qiáng)烈震蕩，膠體發(fā)生絮狀沉淀，凝膠液化或乳化，喪失生物活性2、空穴作用：超聲波的高頻振動(dòng)與細(xì)胞振動(dòng)不協(xié)調(diào)而造成細(xì)胞周圍環(huán)境的局部真空，引起細(xì)胞周圍壓力的極大變化，使細(xì)胞破裂3、溶解的氣體變成小氣泡，氣泡沖擊引起細(xì)胞破裂4、熱作用應(yīng)用：細(xì)菌裂解，研究其構(gòu)造及其化學(xué)組成；提取病毒；治療疾病。超聲波的殺菌效果與其頻率、處理時(shí)間、細(xì)菌大小、形狀及數(shù)量有關(guān)。二、超聲波第五十八頁(yè)，共九十三頁(yè)。三、重金屬

重金屬是酶的組成成分，適當(dāng)濃度對(duì)微生物生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，高濃度下則可致死。重金屬帶正電荷，易與帶負(fù)電荷的菌體蛋白結(jié)合，有較強(qiáng)的殺菌能力。機(jī)制：1、與酶或蛋白質(zhì)上的-SH發(fā)生反應(yīng)使酶失活，蛋白質(zhì)變性2、進(jìn)入細(xì)胞后以金屬原子的形式沉積在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生抗代謝作用3、重金屬離子在細(xì)胞內(nèi)與主要代謝物發(fā)生螯和作用4、取代細(xì)胞結(jié)構(gòu)上的主要元素第五十九頁(yè)，共九十三頁(yè)。銅：硫酸銅是主要的銅化合物殺菌劑，對(duì)真菌及藻類效果較好，也可以殺死金黃色葡萄球菌和抑制破傷風(fēng)桿菌芽孢。鉛：1-5g/L幾分鐘內(nèi)可使細(xì)菌死亡銀：長(zhǎng)期作為一種溫和防腐劑使用。0.1-1%硝酸銀用于皮膚消毒。汞：HgCl2、Hg2Cl、HgCl和有機(jī)汞。HgCl21：500-1：2000對(duì)大多數(shù)細(xì)菌有致死作用，實(shí)驗(yàn)室也曾用0.1%HgCl2消毒非金屬器皿。紅汞也是最常用的消毒劑之一。但汞鹽有劇毒，應(yīng)用較受限制。第六十頁(yè)，共九十三頁(yè)。四、極端溫度

超高溫（大于細(xì)菌最高生長(zhǎng)溫度）殺菌的機(jī)制：1、引起蛋白質(zhì)和核酸不可逆的變性2、細(xì)胞膜中脂肪被溶解使膜上形成小孔，細(xì)胞內(nèi)含物泄漏引起死亡超高溫滅菌效果的影響因素：1、菌種：無(wú)芽孢菌比芽孢菌易死亡。2、所需時(shí)間與溫度高低有關(guān)3、與菌齡有關(guān)。幼齡比老齡敏感4、pH。pH低易被殺死5、菌體含水量。干細(xì)胞比濕細(xì)胞耐熱。致死溫度與菌體蛋白質(zhì)含水量有關(guān)。第六十一頁(yè)，共九十三頁(yè)。滅菌與消毒：消毒(disinfection)是用物理、化學(xué)因素殺死致病菌（有芽孢和無(wú)芽孢的細(xì)菌），或者是殺死所有微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞或一部分芽孢。滅菌(sterilization)是通過(guò)超高溫或其他物理、化學(xué)因素將所有微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和所有的芽孢或孢子全部殺死。防腐(antisepsis)：在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生長(zhǎng)的一種措施第六十二頁(yè)，共九十三頁(yè)。高溫滅菌方法：干熱滅菌

焚燒；干熱滅菌，160℃1-2h，適用于玻璃、金屬器皿濕熱滅菌

高壓蒸汽滅菌；間歇滅菌法，100℃15-30min，37℃保溫一天，再以同樣方法加熱，反復(fù)三次。缺點(diǎn)：費(fèi)時(shí)，適用于不耐熱藥品、營(yíng)養(yǎng)物、特殊培養(yǎng)基或缺乏高溫設(shè)備時(shí)，也可用于一般物品滅菌。第六十三頁(yè)，共九十三頁(yè)。消毒方法：煮沸消毒法：100℃15min，加入1%Na2CO3、2-5%石炭酸效果更好，適用于注射器、解剖器具消毒巴斯德消毒法：采用60-70℃處理15-30min，可以去除食品（酒、牛奶等）的病原微生物。低溫維持法：只要在63℃下維持30min高溫瞬時(shí)法：只要在72℃下維持15s超高溫法：只要在135-150℃下維持2-6s第六十四頁(yè)，共九十三頁(yè)。五、極端pH

過(guò)高過(guò)低pH對(duì)微生物生長(zhǎng)都不利，表現(xiàn)在：1、pH過(guò)低，引起微生物表面由負(fù)電荷變?yōu)閹д姡绊懳⑸飳?duì)營(yíng)養(yǎng)物的吸收2、影響培養(yǎng)基中有機(jī)化合物的離子化作用，間接影響微生物3、pH適宜時(shí)才能使酶發(fā)揮最大活性4、過(guò)高過(guò)低pH都降低微生物對(duì)高溫的抵抗能力強(qiáng)酸強(qiáng)堿具有殺菌力。無(wú)機(jī)酸腐蝕性大，實(shí)際上不作消毒劑，某些有機(jī)酸如苯甲酸可作消毒劑。強(qiáng)堿可用作殺菌劑，但毒性大。對(duì)G-與病毒的作用比G+強(qiáng)。第六十五頁(yè)，共九十三頁(yè)。六、干燥

干燥（指水活度低至0.60-0.70）會(huì)使微生物的代謝活動(dòng)停止，有機(jī)體基本處于休眠狀態(tài)，嚴(yán)重時(shí)會(huì)引起細(xì)胞脫水和蛋白質(zhì)變性進(jìn)而引起死亡。不同微生物抗干燥能力不同。大多數(shù)腐生或寄生細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞可在大氣下干化死亡。一般小型細(xì)胞、細(xì)胞壁厚的細(xì)胞、圓形細(xì)胞和孢子、芽孢、胞囊較耐干燥。第六十六頁(yè)，共九十三頁(yè)。干燥作用與溫度有關(guān)，溫度越高越容易死亡。干燥緩慢進(jìn)行，死亡率高。與菌齡、空氣有無(wú)及基質(zhì)性質(zhì)也有關(guān)。在蒸餾水中微生物干燥后易死亡，含糖、淀粉、蛋白質(zhì)基質(zhì)中的微生物，干燥后存活時(shí)間長(zhǎng)。干燥條件下，細(xì)胞代謝處于停滯狀態(tài)，供給潮氣又可復(fù)活。可用于保存食品、物品和菌種（沙土管、冷凍干燥）。第六十七頁(yè)，共九十三頁(yè)。七、有機(jī)物（一）醇是脫水劑和脂溶劑，可使蛋白質(zhì)脫水、變性，殺死菌體，還能溶解物品表面的油脂，所以有機(jī)械除菌的作用。乙醇是常用的消毒劑，70%（重量）或77%（體積）效果最好，純乙醇不起殺菌作用。乙醇對(duì)芽孢不敏感。甲醇?xì)⒕Σ疃矣卸?，不宜作殺菌劑?/p>

醇的殺菌力隨分子量的增加而增加，丁醇>丙醇>乙醇>甲醇，90%-95%異丙醇比70%乙醇?xì)⒕Υ蟮写瘫菤馕?。第六十八?yè)，共九十三頁(yè)。（二）甲醛通常使用37-40%甲醛溶液（福爾馬林），可殺死細(xì)菌、真菌及其芽孢和病毒。0.1-0.2%的甲醛溶液可殺死細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)體，5%可殺死芽孢。甲醛具有還原作用，能與蛋白質(zhì)的-NH結(jié)合而使蛋白質(zhì)變性?？勺餮粝緞瑢?duì)空氣和物體表面消毒。也常用作動(dòng)物組織的固定劑。第六十九頁(yè)，共九十三頁(yè)。

（三）表面活性劑1、酚酚是表面活性劑，可引起蛋白質(zhì)變性，還可抑制脫氫酶和氧化酶的活性。又名石炭酸，常用濃度5%，短時(shí)間內(nèi)可殺死細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)體，殺死細(xì)菌芽孢需要幾小時(shí)或更長(zhǎng)的時(shí)間。酚的衍生物，如甲酚、間苯二酚和六氯苯酚殺菌力更強(qiáng)。石炭酸系數(shù)：指在一定時(shí)間內(nèi)被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度和達(dá)到同效的石炭酸的最高稀釋度的比率。一般規(guī)定處理時(shí)間為10分鐘，而供試菌定為Salmonellatyphi（傷寒沙門氏菌）。第七十頁(yè)，共九十三頁(yè)。2、新潔爾滅

陽(yáng)離子表面活性劑。能吸附帶負(fù)電荷的細(xì)菌，破壞細(xì)菌的細(xì)胞膜最終導(dǎo)致菌體自溶死亡，也可使菌體蛋白變性沉淀。對(duì)許多非芽孢型致病菌有效，對(duì)芽孢無(wú)作用，對(duì)肥皂、碘、高錳酸鉀等陰離子表面活性劑有拮抗作用。3、合成洗滌劑

合成洗滌劑中主要起去污作用的物質(zhì)是表面活性劑，根據(jù)表面活性劑在水中解離出的有表面活性的離子所帶電荷的不同，可分為陰離子型、陽(yáng)離子型、兩性型及非離子型。目前主要應(yīng)用的是非離子型和陰離子型。陰離子型的LAS（直鏈烷基苯磺酸鈉），可被生物降解，有殺菌作用。第七十一頁(yè)，共九十三頁(yè)。4、染料

帶正電荷的堿性染料如孔雀綠、亮綠、結(jié)晶紫、吖啶黃都有抑菌作用。堿性染料的陽(yáng)離子與菌體的羧基或磷酸基作用，形成弱電離的化合物，妨礙菌體正常代謝，擾亂菌體的氧化還原作用，并阻礙芽孢的形成。G+比G-敏感，結(jié)晶紫抑制G-要比G+濃10倍。由于染色劑的抑菌作用有選擇性，利用此可將菌分離。常在培養(yǎng)基中加入10-6g/L的染料配制成選擇培養(yǎng)基，只有G-可以生長(zhǎng)，可用于大腸桿菌的鑒別實(shí)驗(yàn)。第七十二頁(yè)，共九十三頁(yè)。

八、抗生素antibiotics

大多數(shù)抗生素是由某些微生物合成或半合成的化合物，在低濃度（ug/ml）即可殺死或抑制其他微生物生長(zhǎng)的化合物。分為

廣譜抗生素——氯霉素、金霉素、土霉素、四環(huán)素等；

狹譜抗生素——青霉素、多枯菌素（G-）。

作用方式各不相同，主要是阻止微生物新陳代謝的某些環(huán)節(jié)，鈍化某些酶的活性。第七十三頁(yè)，共九十三頁(yè)。1、抑制細(xì)胞壁的合成。

青霉素抑制G+肽聚糖的形成。肽聚糖中胞壁酸上連接有一條短肽鏈，相鄰短肽鏈之間以五甘氨酸橋連接，五甘氨酸一端與D-丙氨酸連接。青霉素β-內(nèi)酰胺環(huán)結(jié)構(gòu)與D-丙氨酸末端結(jié)構(gòu)很相似，從而能占據(jù)D-丙氨酸的位置與轉(zhuǎn)肽酶結(jié)合，將酶滅活，肽鏈無(wú)法連接，抑制細(xì)胞壁合成，使菌體吸收水分膨脹破裂。多氯霉素——?dú)⒄婢鷦?，阻礙細(xì)胞壁中幾丁質(zhì)的形成，對(duì)細(xì)胞壁主要是纖維素組成的藻類沒什么作用。第七十四頁(yè)，共九十三頁(yè)。抑制細(xì)胞壁肽聚糖合成的抗生素主要作用于G+，對(duì)G-效果不明顯。另外，對(duì)生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞作用明顯，對(duì)靜止細(xì)胞不明顯。第七十五頁(yè)，共九十三頁(yè)。2、破壞細(xì)胞質(zhì)膜

某些抗生素尤其是多肽類抗生素如多粘菌素、短桿菌素等等，主要引起細(xì)胞膜損傷。多粘菌素與G-質(zhì)膜中的磷酸基結(jié)合，損傷細(xì)胞質(zhì)膜，導(dǎo)致細(xì)胞物質(zhì)的泄漏。作用于真菌細(xì)胞膜的大部分是多烯類抗生素，如制菌霉素、兩性霉素等，主要與膜中的麥角固醇結(jié)合從而破壞膜結(jié)構(gòu)，細(xì)菌質(zhì)膜不含固醇，不起作用。第七十六頁(yè)，共九十三頁(yè)。3、干擾蛋白質(zhì)合成

通過(guò)抑制蛋白質(zhì)生物合成來(lái)抑制微生物生長(zhǎng)，并非殺死微生物。不同的抗生素抑制蛋白質(zhì)合成機(jī)制不同：與核糖體亞基結(jié)合

30S亞基——卡那霉素、鏈霉素、春日霉素50S亞基——氯霉素、紅霉素、林可霉素等；在蛋白質(zhì)合成的不同階段起作用能與酶組分中的金屬離子結(jié)合，抑制酶活性。第七十七頁(yè)，共九十三頁(yè)。4、阻礙核酸的合成。

通過(guò)抑制DNA或RNA的合成來(lái)抑制微生物正常的生長(zhǎng)繁殖。作用機(jī)制有所不同：

絲裂霉素——與核酸上的堿基結(jié)合形成交聯(lián)，阻礙DNA解鏈，從而影響DNA復(fù)制；博萊霉素（爭(zhēng)光霉素）——切斷DNA的核苷酸鏈，使DNA分子量下降，干擾DNA復(fù)制；利福霉素——作用于核酸酶，與RNA合成酶結(jié)合，抑制RNA合成酶反應(yīng)的起始階段；放線菌素D（更生霉素）——多肽類，作用是干擾RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄過(guò)程，使RNA鏈停止延長(zhǎng)第七十八頁(yè)，共九十三頁(yè)。此外，有的抗生素可提高DNA酶活性，使DNA部分裂解（絲裂霉素）；有的可嵌入DNA分子中破壞其立體構(gòu)型，影響DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。除了這些機(jī)制外，有的抗生素作用于電子傳遞系統(tǒng)，使呼吸作用停止；有的是能量轉(zhuǎn)移的抑制劑，使ATP不能合成；有的是解偶聯(lián)劑，呼吸可進(jìn)行但不合成能量。第七十九頁(yè)，共九十三頁(yè)。第四節(jié)微生物與微生物之間的關(guān)系第八十頁(yè)，共九十三頁(yè)。一、競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系competition

競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系是指不同微生物種群生活在同一環(huán)境中，對(duì)食物等營(yíng)養(yǎng)、溶解氧、空間和其他共同要求的物質(zhì)相互爭(zhēng)奪，其中最能適應(yīng)特殊生境的將占優(yōu)勢(shì)。但由于在競(jìng)爭(zhēng)中，兩者都要消耗有限的同一養(yǎng)料，結(jié)果使兩種微生物的生長(zhǎng)都受限制。種間共處是兩種微生物相互無(wú)影響地生活在一起，如乳桿菌和鏈球菌分別進(jìn)行純培養(yǎng)和混合培養(yǎng)，最后兩種菌的種群幾乎是相同的。第八十一頁(yè)，共九十三頁(yè)。二、原始合作關(guān)系protocooperation

也稱互生關(guān)系。指兩種可以獨(dú)立生活的微生物共存于同一環(huán)境中，相互提供營(yíng)養(yǎng)及其他生活條件，雙方得益或是一方得利，當(dāng)兩者分開時(shí)可單獨(dú)生存。三、共生關(guān)系symbiosis

指兩種不能單獨(dú)生活的微生物共同生活于同一環(huán)境中，各自執(zhí)行優(yōu)勢(shì)的生理功能，在營(yíng)養(yǎng)上互為有利，組成共生體，兩者之間的關(guān)系就為共生關(guān)系。這種關(guān)系高度發(fā)展時(shí)形成特殊共生體，生理上有一定分工，組織形態(tài)上有新的結(jié)構(gòu)，互惠共生是兩者從結(jié)合中都得利，偏利共生是一方得利另一方也無(wú)害。第八十二頁(yè)，共九十三頁(yè)。典型的例子是地衣。地衣組成：真菌（子囊菌，擔(dān)子菌）、單細(xì)胞藻類（綠藻，藍(lán)藻）地衣的結(jié)構(gòu)：形成有固定形態(tài)的葉狀結(jié)構(gòu)，真菌無(wú)規(guī)則地纏繞藻類細(xì)胞，或二者組成一定的層次排列。地衣的代謝：地衣中的真菌和藻類已形成特殊形態(tài)的整體了，在生理上相互依存，真菌營(yíng)