中藥藥理實驗操作

（一）藥理實驗操作技能向曉雪前言中藥藥理學(xué)實驗是中藥藥理學(xué)學(xué)習(xí)的重要組成部分，它的目的在于通過實驗，不僅僅是驗證藥理學(xué)中的重要基本理論，牢固地掌握藥理學(xué)的基本概念，更重要的是培養(yǎng)智能，即了解獲得藥理學(xué)知識的科學(xué)途徑。使學(xué)生掌握進(jìn)行中藥藥理學(xué)實驗的基本方法和技能，初步具備客觀地對事物進(jìn)行觀察、比較、分析、綜合和解決實際問題的能力。同時，通過實驗培養(yǎng)學(xué)生對科學(xué)工作的嚴(yán)肅態(tài)度、嚴(yán)格的要求、嚴(yán)密的工作方法和實事求是的作風(fēng)。第一節(jié)實驗設(shè)計中藥藥理學(xué)實驗的基本程序大體分為選題、設(shè)計、實驗、資料整理與總結(jié)五步。實驗設(shè)計是中心環(huán)節(jié)，是制定實踐選題目標(biāo)，它關(guān)系到能否按選題愿望取得預(yù)期的結(jié)果。三大原則隨機對照原則：“齊同對比”重復(fù)重復(fù)是實驗設(shè)計的首要原則，可靠的實驗結(jié)果，應(yīng)能在相同的實驗條件下重復(fù)出來，即重現(xiàn)性?？瞻讓φ战M陰性對照組陽性對照組組間對照組絕對隨機均衡隨機第一節(jié)實驗設(shè)計實驗設(shè)計程序中應(yīng)考慮的四個問題實驗設(shè)計程序中應(yīng)考慮的四個問題選擇適當(dāng)?shù)膶嶒瀯游锎_定實驗方法與觀察指標(biāo)重視預(yù)備實驗明確實驗?zāi)康牡谝还?jié)實驗設(shè)計問題：請選擇一味能治療消渴癥的中藥，并討論其對消渴癥模型的影響。以此設(shè)計一項實驗。實驗預(yù)前準(zhǔn)備中藥葛根雄性wistar大鼠實驗動物的確定藥效篩選預(yù)實驗方法和指標(biāo)的確定給藥劑量的確定實驗?zāi)康母鸶鶎ο拾Y模型的影響大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素造模動物分組血糖一般指標(biāo)統(tǒng)計方法的確定陽性藥第二節(jié)實驗動物一、實驗動物的分類（一）按遺傳學(xué)控制分類近交系突變系F1雜種采用兄妹交配或親子交配連續(xù)繁殖20代以上培育出的純品系動物。封閉群動物一般是具有遺傳缺陷的突變系動物。通過自然突變和人工定向突變培育而成。如腫瘤鼠，白血病鼠，貧血鼠，應(yīng)用于免疫試驗的裸鼠（無胸腺）。兩種純品系動物交配而生出的第一代子代動物。特點就是遺傳素質(zhì)明確，生命力強，體質(zhì)強壯。用同一血緣品系群內(nèi)的動物五年以上不引入新血緣品種混雜，隨意繁殖稱為封閉群主要特點就是抗病能力強。第二節(jié)實驗動物（二）按微生物學(xué)控制方法分類無菌動物機體內(nèi)均無任何寄生蟲的動物悉生動物無菌動物，人為將指定的微生物投入其體內(nèi)，因此體內(nèi)帶有已知微生物，在隔離器類飼養(yǎng)。SPF動物無特殊病原體動物。無傳染病的健康實驗動物。清潔級普通動物最低限度疾病動物。來自SPF動物，飼養(yǎng)在普通設(shè)施中。第二節(jié)實驗動物（三）我國實際情況分類清潔動物SPF動物無菌（GF)動物和悉生動物(GN)普通動物一級動物二級動物四級動物三級動物第二節(jié)實驗動物二、常用實驗動物的捉持給藥標(biāo)記（1）大鼠無膽囊，不嘔吐。不能用于嘔吐藥物的實驗捉拿方法：以右手抓住尾部，左手戴手套防護(hù)（有經(jīng)驗者也可不戴），抓緊兩耳和頭頸部的皮膚，并將鼠固定在左中，右手即可進(jìn)行操作。常用的品種為Wistar大鼠和SD大鼠第二節(jié)實驗動物（2）小鼠常用品種為Swiss小鼠和昆明系小鼠捉拿方法：用右手輕輕抓住尾，放在粗糙面上，輕向后拉，以左手拇指和食指夾住其兩耳及頭部皮膚，用無名指和小指壓住鼠尾將小白鼠完全固定于手中。第二節(jié)實驗動物（3）豚鼠對組織胺敏感，常作為平喘藥和抗組織胺藥品研究。易過敏，常用于藥物過敏試驗。對結(jié)核桿菌極為敏感，用于結(jié)核病的研究。體內(nèi)不能合成維生素C，是目前唯一用于試驗性壞血病的動物。一般實驗是選用非純種短毛豚鼠。第二節(jié)實驗動物（4）家兔我國科研教學(xué)常用中國本兔，青紫藍(lán)兔，大耳白兔三種。家兔耳大，血管清晰，便于注射和取血。兔耳動脈在耳中間行走，耳緣為靜脈。見家兔的眼球甚大，便于手術(shù)操作和觀察。因此是眼科研究中最常用的動物。家兔體溫變化十分靈敏，發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定。對許多病毒和致病菌非常敏感，可用于感染模型、過敏和免疫細(xì)菌學(xué)的研究。第二節(jié)實驗動物（5）犬屬哺乳綱，食肉目，犬科。壽命10-20年。狗胰腺小，且易分離。具有發(fā)達(dá)的血液系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)以及基本上和人相似的消化過程，因而在進(jìn)行血液循環(huán)、消化和神經(jīng)活動等研究工作更為常用。在長期毒性試驗用狗。狗有五種血型，即A、B、C、D、E型。對A型血進(jìn)行交叉輸血。比格犬第二節(jié)實驗動物常用實驗動物的捉拿，標(biāo)記，給藥方法第二節(jié)實驗動物大鼠小鼠的常用給藥劑量動物灌胃給藥腹腔注射皮下注射靜脈注射小鼠0.2-0.3ml/10g體重0.1-0.2ml/10g體重0.1-0.2ml/10g體重0.1-0.2ml/10g體重大鼠1-2ml/100體重0.5-1ml/100g體重0.3-0.5ml/100g體重0.3-0.5ml/100g體重第三節(jié)實驗劑量的換算已知某種動物的使用劑量第三節(jié)實驗劑量的換算第三節(jié)實驗劑量的換算例：已知家兔2kg，用藥50mg/kg，求算家犬5kg體重用藥量。第三節(jié)實驗劑量的換算15.7mg/kg為人的估算