大規(guī)模核酸檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)分享(郝崇華)

大規(guī)模核酸檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)分享郝崇華目錄?

1.檢測(cè)前?

2.檢測(cè)中?

3.檢測(cè)后?

4.意外事件/事故處理流程?

5.持續(xù)改進(jìn)?質(zhì)量保證及其關(guān)鍵環(huán)節(jié):?

檢測(cè)前：標(biāo)本的采集、運(yùn)送和保存，試劑和耗材的準(zhǔn)備、防護(hù)用品的準(zhǔn)備、大規(guī)模核酸檢測(cè)方案?

檢測(cè)中：試劑的配置、核酸提取、擴(kuò)增檢測(cè)?

檢測(cè)后：結(jié)果分析與報(bào)告、醫(yī)療廢物的處理1.檢測(cè)前大規(guī)模核酸檢測(cè)方案的編制?

1.科室管理和流程協(xié)調(diào)組:

負(fù)責(zé)人員的安排調(diào)動(dòng)，協(xié)調(diào)各組聯(lián)動(dòng)，解決過(guò)程出現(xiàn)的問(wèn)題并記錄。?

2.技術(shù)組：負(fù)責(zé)樣本接收、樣本檢測(cè)、結(jié)果報(bào)告過(guò)程的質(zhì)量監(jiān)督和質(zhì)量控制，隨時(shí)向管理組報(bào)告過(guò)程發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題，并記錄過(guò)程。?

3.樣本接收組：負(fù)責(zé)樣本接收工作場(chǎng)所的安排、原始樣本接收流程安排、樣本移交流程安排、記錄安排、場(chǎng)地消殺安排。1.檢測(cè)前大規(guī)模核酸檢測(cè)方案的編制?

4.檢測(cè)組：按照要求完成核酸檢測(cè)和結(jié)果報(bào)告，依照醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例負(fù)責(zé)臨床樣本的儲(chǔ)存、保留和處置。?

5.保障組：負(fù)責(zé)現(xiàn)場(chǎng)設(shè)備、試劑、耗材、防護(hù)用品、支持文件的配給、維持秩序、生活安排、信息系統(tǒng)協(xié)調(diào)等。?

6.感控組：監(jiān)督跟蹤生物安全防護(hù)、設(shè)施和環(huán)境安全控制、職業(yè)暴露應(yīng)急處置等。標(biāo)本的接收：?

1.標(biāo)本送到檢驗(yàn)科，與送檢人員核對(duì)標(biāo)本數(shù)量及信息，并簽字確認(rèn)。?

2.標(biāo)本的編號(hào)：穿隔離衣，戴防護(hù)鏡、戴N95口罩在生物安全柜內(nèi)編號(hào)，編號(hào)規(guī)則：按每批90個(gè)標(biāo)本編號(hào)，1-1-90，2-1-90，3-1-90（1-90，101-190，201-290）等。同時(shí)每排8個(gè)放置在專(zhuān)用試管架上。?

3.標(biāo)本的交接：編號(hào)完成后與檢測(cè)人員交接并做好記錄。?

4.標(biāo)本的保存：核酸檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行檢測(cè)，能在

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小時(shí)內(nèi)檢測(cè)的標(biāo)本可置于

4℃保存；24

小時(shí)內(nèi)無(wú)法檢測(cè)的標(biāo)本則應(yīng)置于?

-70℃或以下保存（如無(wú)-70℃保存條件，則于-20℃冰箱暫存）。?由于大規(guī)模篩查標(biāo)本并且量非常大，并且一旦發(fā)現(xiàn)異常標(biāo)本，需要迅速準(zhǔn)確無(wú)誤地在幾千標(biāo)本中找出該樣本，進(jìn)入復(fù)檢和上報(bào)程序，這就需要標(biāo)本的唯一編號(hào)清晰且適合抓取，同時(shí)也方便檢測(cè)人員流程記錄表的書(shū)寫(xiě)。檢測(cè)前的準(zhǔn)備?

1.大批量核酸檢測(cè)需要大量試劑和加樣槍吸頭，可以在PCR外圍把試劑和加樣槍吸頭包裝盒拆除；?

2.2名工作人員穿戴好二級(jí)防護(hù)后，進(jìn)入I區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)配置試劑；?

3.2--8名工作人員穿戴好三級(jí)防護(hù)后，進(jìn)入II區(qū)樣本制備區(qū)進(jìn)行核酸的提??；?

4.I區(qū)工作人員完成試劑配置后，進(jìn)入III區(qū)進(jìn)行核酸擴(kuò)增。?

5.人員安排考慮不同實(shí)驗(yàn)室人員儲(chǔ)備、提取儀和擴(kuò)增儀的數(shù)量等。試劑的配置可以提前(當(dāng)日)2.檢測(cè)中?

標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)：?

在提取核酸時(shí)，標(biāo)本號(hào)與提取板的編號(hào)要一一對(duì)應(yīng)，同時(shí)填寫(xiě)對(duì)應(yīng)的流程表。提取板、標(biāo)本按順序整齊擺放，以便異常結(jié)果標(biāo)本第一時(shí)間復(fù)查。結(jié)果出來(lái)后才能處理標(biāo)本和提取板。同時(shí)與下一班做好交接記錄。每次提取結(jié)束后，用75%酒精擦拭提取儀內(nèi)部，并至少10分的紫外燈照射。工作結(jié)束后用75%酒精擦拭生物安全柜、臺(tái)面。用0.2%有效氯溶液擦拭地面。開(kāi)紫外燈照射120分鐘，打包帶走所有的醫(yī)療廢物。2.檢測(cè)中?

擴(kuò)增檢測(cè)區(qū)：按標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)傳送過(guò)來(lái)的流程圖布板擴(kuò)增，同時(shí)記錄結(jié)果及陰性、陽(yáng)性、質(zhì)控記錄。用自封袋裝擴(kuò)增產(chǎn)物，工作結(jié)束后用75%酒精擦拭擴(kuò)增儀、臺(tái)面。用0.2%有效氯溶液擦拭地面。開(kāi)紫外燈照射60分鐘，打包帶走所有的醫(yī)療廢物。3.檢測(cè)后?

每組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果由組長(zhǎng)檢查原始擴(kuò)增結(jié)果，組員負(fù)責(zé)提交檢驗(yàn)結(jié)果，組長(zhǎng)審核報(bào)告。3.檢測(cè)后?

結(jié)果上報(bào)及復(fù)檢原則

每板結(jié)果出來(lái)后，首先參考擴(kuò)增試劑說(shuō)明書(shū)判斷陰性對(duì)照、環(huán)境評(píng)價(jià)和陽(yáng)性對(duì)照是否在控，若失控需立即查找原因，并整改。

在陰性對(duì)照、環(huán)境評(píng)價(jià)和陽(yáng)性對(duì)照均在控的情況下進(jìn)行結(jié)果分析，若有內(nèi)參未檢出的標(biāo)本，立即原管復(fù)檢；若出現(xiàn)

ＯＲＦ１ａｂ

或

Ｎ

基因單靶位點(diǎn)陽(yáng)性則不上報(bào)，立即使用雙試劑復(fù)檢；若

ＯＲＦ１ａｂ

及

Ｎ基因雙靶位點(diǎn)陽(yáng)性第一時(shí)間上報(bào)，同時(shí)立即雙試劑復(fù)檢。

在記錄流程表時(shí)，填寫(xiě)復(fù)檢標(biāo)本的孔位，初始

Ｃｔ

值及復(fù)檢

Ｃｔ值，并做好交接班記錄。3.檢測(cè)后醫(yī)療廢物的處理：1.試劑準(zhǔn)備區(qū)和核酸擴(kuò)增區(qū)的醫(yī)療廢物，樣本制備區(qū)的核酸提取板，雙層扎袋，鵝口扎好，外面用75%酒精或0.2%有效氯溶液噴拭后運(yùn)輸至醫(yī)療廢物存放點(diǎn)。2.標(biāo)本制備區(qū)的醫(yī)用防護(hù)服、標(biāo)本放入雙層醫(yī)療廢物袋中，外面用75%酒精或0.2%有效氯溶液噴拭后運(yùn)轉(zhuǎn)到高壓滅菌間，高壓滅菌后雙層扎袋，鵝口扎好，運(yùn)輸至醫(yī)療廢物存放點(diǎn)。利器盒直接封口后外面用75%酒精或0.2%有效氯溶液噴拭后運(yùn)輸至醫(yī)療廢物存放點(diǎn)。4.意外事件/事故處理流程?

標(biāo)本溢灑的處理流程?

當(dāng)出現(xiàn)標(biāo)本溢灑時(shí)，首先在溢灑區(qū)域鋪上紗布（完全覆蓋），而后用0.5%的含氯消毒液噴灑在紗布上，作用

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ｍｉｎ

以上，再將紗布小心移除。清理過(guò)程中避免接觸污染物，清理的污染物按感染性廢物處置。

清除污染物后，用