第十一章經(jīng)典液相色譜法與檢測技術演示文稿

第十一章經(jīng)典液相色譜法與檢測技術演示文稿1目前一頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點優(yōu)選第十一章經(jīng)典液相色譜法與檢測技術目前二頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點◆知識要求31.掌握色譜法的基本概念，吸附色譜法和分配色譜法的分離機制，薄層色譜法的基本原理及其應用。2.熟悉色譜法的分類，離子交換色譜法和凝膠色譜法的分離機制，各種經(jīng)典的柱色譜法基本原理及其應用。3.了解色譜法的由來和發(fā)展?！涯壳叭揬總數(shù)七十四頁\編于十八點◆能力要求熟練掌握薄層色譜法、柱色譜法的操作技術，學會應用薄層色譜法等對物質(zhì)進行分離和鑒定。

4⊙目前四頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點案例導入為什么采用這種方法可以使得這些性質(zhì)相似的物質(zhì)得以分離？固定相（布或紙片）和不斷加入的溶液對組分的分離起到什么作用，兩者如何選擇？分離后的各組分怎樣定性和準確檢出……？5古羅馬時代人們將一滴含有混合色素的溶液滴到一塊布(或紙片)上，隨著溶液的擴展，在布（或紙片）上會呈現(xiàn)一個一個的同心圓環(huán)，人們通過觀察這些同心圓環(huán)的差異來分析染料和色素。目前五頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第一節(jié)概述

色譜法（chromatography）是一種根據(jù)物質(zhì)的物理或物理化學性質(zhì)不同而進行分離分析的方法。6色譜法和其他方法相比較具有下列特點：1.分離效能高2.靈敏度高3.應用范圍目前六頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點色譜法——起源真正意義的色譜實驗色譜法的創(chuàng)始人是俄國植物學家Tsweet。一、色譜法產(chǎn)生與發(fā)展流動相固定相被分離后，代表了不同組分的色帶色譜柱第一節(jié)概述

目前七頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點色譜法——發(fā)展柱色譜—20世紀初；趨勢：新型固定相和檢測器及各種檢測技術的聯(lián)用薄層、紙色譜—20世紀30～40年代；氣相色譜—20世紀50～60年代；高效液相色譜—20世紀70年代；超臨界流體色譜法

毛細管電泳法……20世紀80年代初第一節(jié)概述

目前八頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第一節(jié)概述（一）按兩相的分子聚集狀態(tài)分類9色譜總稱流動相固定相色譜名稱液相色譜法（LC）液體固體液—固色譜法（LSC）液體液—液色譜法（LLC）化學鍵合相化學鍵合相色譜法（BPC）氣相色譜法（GC）氣體固體氣—固色譜法（GSC）液體氣—液色譜法（GLC）超臨界流體色譜法（SFC）超臨界流體固體或化學鍵合相二、色譜法的分類目前九頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第一節(jié)概述10（二）按操作形式分類

色譜名稱柱色譜（CC）平面色譜填充柱色譜法毛細管柱色譜法薄層色譜法（TLC）紙色譜法（PC）固定相形式填充柱毛細管柱薄層板紙在玻璃或金屬管內(nèi)填充或涂覆滿固定相在彈性石英或玻璃毛細管內(nèi)壁覆有吸附劑薄層或固定液在玻璃或金屬板上涂布吸附劑等固定相具有多孔和強滲透能力的濾紙或纖維素薄膜色譜過程流動相由柱頭向柱尾不間斷沖洗流動相從板或紙的一端向另一端擴展二、色譜法的分類第一節(jié)概述目前十頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第一節(jié)概述11（三）按色譜過程的分離機制分類吸附色譜法（AC）分配色譜法（DC）離子交換色譜法（IEC）凝膠色譜法（SEC）……二、色譜法的分類目前十一頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點色譜法分類小結(jié)12目前十二頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點13課堂互動請您闡述色譜法的分類方法，及各種色譜法的特點？第一節(jié)概述第一節(jié)概述目前十三頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第一節(jié)概述（一）分配系數(shù)和容量因子1.分配系數(shù)（K）142.容量因子（k）三、色譜法的基本原理第一節(jié)概述目前十四頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第一節(jié)概述153.分配系數(shù)與容量因子的關系

稱為相比，在一定色譜條件下為定值；Vm為柱中流動相體積（近似等于第十二章中提及的死體積）；Vs

是柱中固定相（或固定液）的體積；κ值隨β

和K

的變化而變化。（一）分配系數(shù)和容量因子目前十五頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第一節(jié)概述分配系數(shù)（或容量因子）越小，組分的遷移速度越快，保留時間越短，即先流出色譜柱；反之亦然。

分配系數(shù)（或容量因子）不等是組分分離的前提。

164.分配系數(shù)、容量因子與保留值的關系

課堂互動請您分析：組分的分配系數(shù)

，與組分在固定相中的停留時間之間存在什么關系？第一節(jié)概述（一）分配系數(shù)和容量因子目前十六頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點（二）色譜過程的分離機制

組分不斷被吸附、解吸附，如此反復多次的過程。組分的吸附平衡常數(shù)越大，越容易被吸附，遷移速度就越慢。吸附平衡常數(shù)17圖11-2吸附色譜分離機制示意圖吸附劑組分分子流動相分子被解吸的組分分子被解吸的流動相分子1.吸附色譜法分離機制第一節(jié)概述目前十七頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點（二）色譜過程的分離機制18流動相攜帶樣品流經(jīng)固定相時，各組分在兩相間不斷地進行溶解、萃取，再溶解、再萃取的過程分配系數(shù)大的組分移動速度慢，分配系數(shù)小的組分移動速度快。進入固定相的組分分子進入流動相的組分分子固定相2.分配色譜法分離機制圖11-3分配色譜分離機制示意圖第一節(jié)概述目前十八頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點（二）色譜過程的分離機制3.離子交換色譜法分離機制19被分離的離子隨流動相流經(jīng)離子交換樹脂時，與離子交換樹脂上可被交換的離子連續(xù)進行競爭交換，交換能力弱的離子，遷移速度快，保留時間短，先流出色譜柱。離子交換劑Θ固定離子組分離子⊕可交換陽離子圖11-4陽離子交換色譜分離機制示意圖第一節(jié)概述目前十九頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第一節(jié)概述以陽離子為例，離子交換反應的通式用下式表示：20選擇性系數(shù)KA/B用于衡量離子對樹脂的親和能力。KA/B越大（KA/B>1），說明A＋的交換能力大，保留時間長，則A＋比B＋后流出色譜柱；反之亦然。離子交換達到平衡時以濃度表示的平衡常數(shù)為：3.離子交換色譜法分離機制目前二十頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點（二）色譜過程的分離機制4.凝膠色譜法分離機制21凝膠色譜分離機制示意圖O：凝膠顆粒o：大分子組分·：小分子組分組分的分離取決于凝膠顆粒的孔徑大小和被分離物質(zhì)分子的大小。出柱順序：首先是大分子，其次是中等大小的分子，最后是小分子。第一節(jié)概述目前二十一頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點角度不同，對色譜法的分類不同。色譜法中分配系數(shù)（或容量因子）不等是組分分離的前提。中分配系數(shù)（或容量因子）越大，組分在固定相中的保留時間越長；反之亦然。凝膠色譜法中分子的尺寸（分子量）越小在固定相中的保留時間越長；反之亦然。點滴積累

22第一節(jié)概述目前二十二頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點23第二節(jié)柱色譜法柱色譜法是指將固定相填覆在玻璃管或不銹鋼管柱中的色譜法。經(jīng)典柱色譜法的流動相是液體，固定相可以是吸附劑、液體，也可以是離子交換樹脂、凝膠等。目前二十三頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點一、液—固吸附柱色譜法24第二節(jié)柱色譜法固定相：吸附劑，是一些多孔性微粒物質(zhì)，具有較大的比表面積和多個吸附中心，其吸附性能取決于吸附中心的多少及其吸附能力的大小。常用的吸附劑有硅膠、氧化鋁、聚酰胺、大孔吸附樹脂、活性炭等。目前二十四頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點一、液—固吸附柱色譜法1.固定相（1）硅膠（SiO2·XH2O）25硅膠的吸附活性與含水量有關。第二節(jié)柱色譜法硅膠含水量（%）活性級數(shù)活性氧化鋁含水量（%）0Ⅰ高低05Ⅱ315Ⅲ625Ⅳ1038Ⅴ15表11-3硅膠和氧化鋁的活性與含水量的關系硅膠呈微酸性，主要用于分離酸性和中性化合物。

目前二十五頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點硅膠活性級數(shù)和活性及吸附能力間的關系：硅膠的活性級數(shù)是根據(jù)其含水量高低確定。硅膠的活性是根據(jù)其吸附能力強弱確定。硅膠的含水量越高，活性級數(shù)越高，越多的硅醇基因為形成水合硅醇基，而使得硅膠吸附其他物質(zhì)的能力下降，即硅膠的吸附性能下降，活性低。26難點釋疑第二節(jié)柱色譜法目前二十六頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點27（2）氧化鋁：吸附能力略高于硅膠，分離能力強，活性可以控制。氧化鋁的吸附活性與其含水量密切相關。一、液—固吸附柱色譜法1.固定相氧化鋁可分為酸性、中性、和堿性三種，其中中性氧化鋁應用廣泛。第二節(jié)柱色譜法目前二十七頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點酸性氧化鋁（pH4～5）用于分離酸性化合物以及對酸穩(wěn)定的中性化合物。堿性氧化鋁（pH9～10）用于分離堿性和中性化合物。中性氧化鋁（pH≈7.5）凡是酸性、堿性氧化鋁上能分離的化合物，中性氧化鋁都能分離。28一、液—固吸附柱色譜法（2）氧化鋁第二節(jié)柱色譜法目前二十八頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點（3）聚酰胺：是一類由酰胺聚合而成的高分子化合物，常用的是聚己內(nèi)酰胺。

聚酰胺主要通過分子中的酰氨基或羰基與化合物質(zhì)子給予體形成氫鍵而對被分離組分產(chǎn)生吸附。聚酰胺在天然藥物有效成分的分離方面應用廣泛。29一、液—固吸附柱色譜法1.固定相第二節(jié)柱色譜法目前二十九頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點（4）大孔吸附樹脂：是一種不含交換基團，但具有大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子化合物。通過范德華引力或產(chǎn)生氫鍵對被分離物質(zhì)產(chǎn)生吸附。

大孔吸附樹脂的選擇性由多孔性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)所決定。大孔吸附樹脂主要用于水溶性化合物的分離及純化。30一、液—固吸附柱色譜法1.固定相第二節(jié)柱色譜法目前三十頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法2.被測物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)31不同類型的化合物極性由小到大的順序為：烷烴＜烯烴＜醚類＜硝基化合物＜酯類＜酮類＜醛類＜硫醇＜胺類＜醇類＜酚類＜羧酸類一、液—固吸附柱色譜法目前三十一頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法判斷物質(zhì)極性強弱時，可以參考以下規(guī)律：①基本母核相同，分子中極性基團的極性越大、極性基團越多，則分子的極性就越大；②分子中雙鍵越多、共軛雙鍵鏈越長，極性越大；③分子式相同，能形成分子內(nèi)氫鍵的分子極性要弱；④在同系物中，分子量越大，分子的極性越小。322.被測物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、液—固吸附柱色譜法目前三十二頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法3.流動相性質(zhì)常用溶劑的極性由小到大的順序為：石油醚＜環(huán)己烷＜四氯化碳＜苯＜甲苯＜乙醚＜三氯甲烷＜乙酸乙酯＜正丁醇＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水33一、液—固吸附柱色譜法目前三十三頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法（1）吸附劑的選擇：分離極性大的物質(zhì)，一般選用吸附活性小的吸附劑；反之亦然。即使得吸附劑與被分離物質(zhì)間存在適宜強度的吸附作用力。344.吸附劑和流動相的選擇一、液—固吸附柱色譜法（2）流動相的選擇：“相似相溶”原則進行選擇。目前三十四頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法35被測物質(zhì)的極性、吸附劑活性和流動相極性之間的關系示意圖

一、液—固吸附柱色譜法目前三十五頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點一般用親水性吸附劑（如：硅膠）作色譜分離時，若分離物極性較小，應選擇何吸附劑和洗脫劑？分離物極性小，形成氫鍵的能力弱，所以宜選用吸附活性大（含水量低即活性級數(shù)低）的吸附劑，這樣分離物和吸附劑間才能形成一定強度的氫鍵，使固定相對其產(chǎn)生適宜的吸附作用；被分離物極性小，根據(jù)“相似相溶”原則宜選用極性小的洗脫劑。36案例分析第二節(jié)柱色譜法目前三十六頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法二、液—液分配柱色譜法1.固定相由載體及涂漬或鍵合在載體表面的固定液組成。37載體是一種惰性物質(zhì)，主要起負載或支撐固定液的作用。固定液正相色譜：強極性溶劑，如水、甲醇等。反相色譜：非極性或弱極性溶劑，如液體石蠟等。目前三十七頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法2.流動相

正相色譜：極性小于固定相的醇類、酮類、酯類、鹵代烷、苯或其混合物。

反相色譜：水、稀醇等極性溶劑。應用各類化合物的分離，特別是親水性物質(zhì)。38二、液—液分配柱色譜法目前三十八頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點

分配色譜分離時，已知某混合物中A、B二組分在兩相中的分配系數(shù)分別為315、450，請您分析，進行柱色譜分離時二組分的出柱順序。39課堂互動二、液—液分配柱色譜法第二節(jié)柱色譜法目前三十九頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法1.固定相

離子交換樹脂40交聯(lián)度：離子交換樹脂中所含交聯(lián)劑的量。用于衡量離子交換樹脂的選擇性，交聯(lián)度大，樹脂的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)緊密，網(wǎng)眼小，選擇性好。交換容量：實驗條件下，每克干樹脂真正參加交換的活性基團數(shù)。用于衡量離子交換樹脂的交換能力，交換容量大，樹脂的交換能力強。三、離子交換柱色譜法目前四十頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法2.流動相水為溶劑的緩沖溶液。應用去離子水的制備，天然藥物化學成分的分離。41三、離子交換柱色譜法目前四十一頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法四、凝膠柱色譜法1.固定相選擇時應使試樣的相對分子量落入凝膠的相對分子質(zhì)量范圍內(nèi)。42（1）排斥極限：化合物的相對分子質(zhì)量達到某一數(shù)值后就不能滲透進入凝膠的任何孔穴，這一數(shù)值稱~。（2）全滲透點：化合物的相對分子質(zhì)量小于某一數(shù)值后就能進入凝膠的所有孔穴，則這一數(shù)值稱~。（3）相對分子質(zhì)量范圍：排斥極限與全滲透點之間的相對分子質(zhì)量范圍稱為~。第二節(jié)柱色譜法目前四十二頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法應用天然藥物化學和生物化學的研究，水溶性高分子化合物如蛋白制劑等的分析。432.流動相一般水溶性試樣選擇水溶液為流動相，而非水溶性試樣則選擇四氫呋喃、氯仿、甲苯等有機溶劑為流動相。四、凝膠柱色譜法目前四十三頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第二節(jié)柱色譜法五、柱色譜法的應用例如采用柱色譜法中的凝膠色譜法，以葡聚糖凝膠為固定相，1mol/L的NaCl為流動相，可以將分子量存在差異的葡萄糖和淀粉進行分離。例如采用分配色譜法以硅膠為固定相，水飽和的乙酸乙酯為流動相，可以將洋地黃毒苷、羥基洋地黃毒苷、異羥基洋地黃毒苷三種單體進行分離等。44目前四十四頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點點滴積累1.硅膠（或氧化鋁）活性級數(shù)高，活性低，吸附能力弱。2.吸附柱色譜法：被分離組分與固定相間的吸附作用力適中；組分與流動相“相似相溶”。3.分配柱色譜法：固定相與流動相極性不同，且不互溶；適于各類化合物分離，特別是親水性化合物分離4.離子交換柱色譜法：分子量較小的樣品宜選擇交聯(lián)度大的樹脂，分子量較大的樣品宜選擇交聯(lián)度小的樹脂；常選用水為溶劑的緩沖溶液做流動相。5.凝膠色譜法：樣品的分子量范圍落入凝膠的相對分子質(zhì)量范圍內(nèi)；常選用水溶劑或非水溶劑做流動相。45第二節(jié)柱色譜法目前四十五頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法一、基本原理（一）分離原理薄層色譜法：將固定相（如：吸附劑）均勻地涂鋪在光潔的玻璃板、塑料板或金屬板上形成薄層，在薄層板上進行分離分析的方法。分離機制與吸附柱色譜的分離機制相似。46目前四十六頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法（二）比移值與相對比移值

47比移值（Rf）：

L0原點溶劑前沿ABL1L2Rf的測量示意圖

Rf可用范圍是0.2～0.8，最佳范圍是0.3～0.5。

目前四十七頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法48相對比移值（Rr）

Rr可以大于1，也可以小于1。，

L0原點溶劑前沿ABL1L2Rf的測量示意圖目前四十八頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法491.已知A與參考物質(zhì)B的相對比移值為1.2，當B物質(zhì)在一定色譜條件下，在某薄層板上展開后，斑點距原點6cm，此時溶劑前沿到原點的距離為18cm，若A也在此薄層板上同時展開。請分析A在薄層板的何位置，A物質(zhì)的比移值是多少？2.分別說明什么？課堂互動第三節(jié)平面色譜法目前四十九頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法

二、吸附劑的選擇50與吸附柱色譜法所用的吸附劑相似，其主要區(qū)別在于薄層色譜法所用的吸附劑顆粒更細小。

三、展開劑的選擇遵循“相似相溶”原則。

薄層色譜中常用的溶劑按極性由弱到強的順序是：石油醚＜環(huán)己烷＜二硫化碳＜四氯化碳＜三氯乙烷＜苯＜甲苯＜二氯甲烷三氯甲烷＜苯＜甲苯＜二氯甲烷＜三氯甲烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜正丙醇＜乙醇＜甲醇＜吡啶＜水目前五十頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法51在苯-乙醇（9?1）展開劑中，您知道苯、乙醇的作用嗎？吸附薄層色譜實驗中以硅膠板為薄層板，環(huán)己烷為展開劑，若某極性組分Rf=0

，請分析應如何調(diào)整展開劑的極性？課堂互動目前五十一頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法四、操作方法

薄層色譜法的操作可分為制板、點樣、展開、顯色與檢視、系統(tǒng)適用性試驗和測定六個步驟。

52目前五十二頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法薄層板：

分為硬板軟板，熒光薄層板等。53符號含意符號含意G以石膏作粘合劑C薄層已被分成條帶H無外加粘合劑Silanised,RP-2二甲基硅烷改性的反相R特別純化的RP反相P制備用RP-8，RP-18C-8，C-18烷基改性W水可濕性的NH2氨基改性親水層F254,366熒光指示劑激發(fā)波長CHIR手性固定相F254S抗酸性熒光指示劑CN氰基改性固定相40,60……平均孔徑（?）DIOL二醇基改性固定相市售吸附劑和預制板包裝上的符號及含意引自知識拓展目前五十三頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點1.吸附劑薄層2.涂布器3.玻璃夾板4.玻璃板5.玻璃夾板過程：載板選擇→涂敷→晾干→活化→備用優(yōu)點：一次鋪多塊薄層板，簡單易行。（一）制板第三節(jié)平面色譜法目前五十四頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點（二）點樣點樣方法：劃基線做樣品標記點樣55平頭微量點樣器點樣毛細管注意：①動作要輕，勿損傷薄層板表面；②若需多次點樣，每次點樣后將樣品點晾干或吹干后，再二次點樣，樣點直徑不超過3mm為宜；③展開后斑點集中，各點面積大小基本一致。第三節(jié)平面色譜法目前五十五頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點56（三）展開展開方式：單向展開、雙向展開、多次相展開等。單向展開中的上行展開前沿

??1.5~2.0cm12展開預飽和第三節(jié)平面色譜法邊緣效應目前五十六頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點57（四）顯色與檢視1.物理方法有顏色物質(zhì)紫外光下顯色熒光板分離紫外光下發(fā)熒光

2.化學方法第三節(jié)平面色譜法目前五十七頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點58（五）系統(tǒng)適用性試驗1.檢測靈敏度對照溶液稀釋若干倍的溶液應顯示清晰的斑點2.比移值應在0.2～0.8之間3.分離效能對照品與結(jié)構(gòu)相似物質(zhì)，應顯示兩個清晰分離的斑點。第三節(jié)平面色譜法目前五十八頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點59（六）測定1.定性鑒別利用斑點的顏色（或熒光）和斑點位置（Rf或Rr)2.雜質(zhì)檢查3.定量分析定量分析時注意：①色斑要集中、無拖尾現(xiàn)象；②應選用對被測組分有較大溶解度的溶劑浸泡并多次洗脫；③對吸附性較強、不易洗脫的組分，可采用離心分離或濾過等方法進行定量洗脫。可采用雜質(zhì)對照品法、樣品溶液的自身稀釋對照法或雜質(zhì)對照品法與樣品溶液自身稀釋對照法并用。（1）目視比色法（2）洗脫法（3）薄層掃描法第三節(jié)平面色譜法目前五十九頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點應用適用于有機化合物的分離與鑒定，也可用于小量物質(zhì)的提純與精制。在藥學領域中，可用于測定藥品純度和檢查降解產(chǎn)物；判斷藥品合成反應進行的程度、監(jiān)控反應歷程；分離和測定天然藥物的有效成分。60第三節(jié)平面色譜法目前六十頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法61紙色譜法：以濾紙為載體的平面色譜法，屬于分配色譜的范疇，一般為正相色譜。紙色譜的固定相一般為紙纖維及其吸著的水，展開劑常為一些含水的有機溶劑。目前六十一頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點紙色譜法濾紙的選用：①純凈，無明顯熒光斑點；②均勻無痕，有一定的機械強度；③紙纖維松緊適宜；④對相差很小的化合物，宜選用慢速濾紙；而相差較大的化合物，則選用快速濾紙。進行定性分析時，宜選用較薄的濾紙；而進行制備或定量分析時則應采用厚的濾紙。62第三節(jié)平面色譜法目前六十二頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第三節(jié)平面色譜法1.Rf與Rr均為物質(zhì)定性鑒定的依據(jù)。Rf在0～1之間，0.2～0.8為可用范圍，0.3～0.5為最佳范圍；Rr可大于1，也可小于1。2.吸附薄層色譜吸附劑與展開劑選擇原則與吸附柱色譜相同。3.混合展開劑：一般占比例較大的溶劑起著溶解物質(zhì)和分離的作用，而占比例小的溶劑則起著調(diào)整溶劑極性、改善值的作用。4.薄層色譜操作方法：制板、點樣、展開、顯色與檢視、系統(tǒng)性實驗、測定。5.薄層色譜測定：定性鑒別、雜質(zhì)檢查、定量分析。63點滴積累目前六十三頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第十一章經(jīng)典液色譜法與檢測技術一、選擇題（一）單項選擇題1.分離性質(zhì)極其相似的物質(zhì)的最佳方法是A.萃取B.蒸餾C.滴定D.色譜法2.色譜法中吸附劑含水量越高則吸附力越強B.活性級別小C.活性高D.吸附力越弱64【目標檢測】目前六十四頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第十一章經(jīng)典色譜法與檢測技術3.分配柱色譜中，分配系數(shù)大的組分在柱中遷移速度快B.遷移速度慢

C.保留體積小D.保留時間短4.色譜法最大的特點是A.定性分析B.定量分析C.結(jié)果分析D.既可分離又可分析混合物65目前六十五頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點5.在IEC中，交換容量可用于衡量離子交換樹脂的A.所含交聯(lián)劑的量B.體積C.交換能力D.選擇性6.在離子交換色譜中，交聯(lián)度可用于衡量離子交換樹脂的A.所含活性基團數(shù)目B.體積C.交換能力D.選擇性66第十一章經(jīng)典液色譜法與檢測技術目前六十六頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第十一章經(jīng)典色譜法與檢測技術7.一般用親水性吸附劑（如：硅膠、氧化鋁）作色譜分離時，若分離物極性較小，則應選用A.吸附性較大的吸附劑，極性較大的洗脫劑。B.吸附性較小的吸附劑，極性較大的洗脫劑。C.吸附性較小的吸附劑，極性較小的洗脫劑。D.吸附性較大的吸附劑，極性較小的洗脫劑。8.在色譜過程中，流動相對物質(zhì)起著A.滯留作用B.洗脫作用C.平衡作用D.分解作用67目前六十七頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點

9.某物質(zhì)在流動相中的濃度為Cm、質(zhì)量為mm；而在固定相中的濃度為CM、質(zhì)量為MS，則該物質(zhì)的分配系數(shù)（）為A.Cm/CsB.Cs/Cm

C.mm/msD.ms/mm10.在液—液色譜中，下列敘述正確的是A.分配系數(shù)大的組分先流出柱。B.分配系數(shù)小的組分先流出柱。C.吸附能力大的組分先流出柱。D.吸附能力小的組分先流出柱。68第十一章經(jīng)典液色譜法與檢測技術目前六十八頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點第十一章經(jīng)典色譜法與檢測技術11.色譜法中載體的作用是A.吸附被測離子B.支撐固定相C.增大展開劑極性D.提高分離效率12.凝膠色譜法的分離原理是

分配平衡B.吸附平衡C.離子交換平衡 D.滲透平衡13.在薄層色譜中，一般要求值的范圍在（）A.0.2~0.8B.1.0~1.5C.0.1~3.5D.0.1~0.269目前六十九頁\總數(shù)七十四頁\編于十八點

14.薄層色譜中軟板和硬板的區(qū)別在于A.有無粘合劑B.