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文檔簡介
HPV的檢測及其臨床應用演示文稿目前一頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPV的檢測及其臨床應用目前二頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPV感染屬于常見的性傳播感染直接的皮膚-皮膚接觸是傳播的最有效途徑病毒不通過血液或體液傳播(例如精液)目前三頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPV感染生殖器HPV感染的潛伏期變化極大。一般來說,生殖器疣在HPV感染3-6月后顯現(xiàn),然而也有研究表明潛伏期有數(shù)個月甚至幾十年;絕大多數(shù)的HPV感染是一過性的,新發(fā)感染大多1-2年內會發(fā)生自愈;僅有少數(shù)的HPV感染會保持潛伏性,幾年或幾十年后會再激活。目前四頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點多數(shù)生殖道HPV感染無臨床癥狀與HPV相關的宮頸疾病包括:宮頸濕疣、宮頸病變和宮頸癌等從HPV感染到釋放病毒約有3周。但是,HPV感染至出現(xiàn)損傷之間可能數(shù)周到數(shù)月。病毒感染的早期可能存在免疫逃逸,故沒有炎癥反應目前五頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點完整的HPV感染循環(huán)HPV感染顆粒突破下肛殖道表皮HPV感染顆粒進入表皮細胞的基底層隨著基底層干細胞的子細胞分裂以及在垂直方向上的成熟化,病毒在基底層以上鱗狀細胞中復制成熟的病毒在表面細胞分離時釋放到環(huán)境中目前六頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPV分型最重要的分類學單元是型(type)與宮頸癌相關程度較為清楚的HPV型歸為高危型HPV(16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,73)和疑似高危型HPV(26,53,66)與尖銳濕疣等良性疾病相關的HPV被歸入低危型HPV(6,11,40,42,43,44,54,61,70,72,81,89),一般認為這類HPV的感染不會誘導宮頸癌的發(fā)生
目前七頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPV與宮頸癌的相關性年輕性活躍的女性HPV感染率最高,感染高峰年齡為18~28歲多屬于一過性感染,通過自身免疫將HPV消滅只有持續(xù)感染HPV的婦女,才成為子宮頸癌高發(fā)人群HPV感染到發(fā)展成為子宮頸癌需要9-25年時間
30%發(fā)展成為CIN1,10%發(fā)展成為CIN2,10%進一步發(fā)展成為CIN3,1%發(fā)展成為子宮頸癌目前八頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點宮頸癌前病變
宮頸上皮細胞內瘤變(CIN);包括宮頸非典型增生和宮頸原位癌,反映宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的過程。從細胞學分為CINI、Ⅱ、III級,包含宮頸鱗狀上皮細胞內病變和腺細胞內病變。目前九頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點宮頸癌現(xiàn)狀女性第二大常見惡性腫瘤全世界每年新病例數(shù)為56.5萬在發(fā)展中國家宮頸癌的發(fā)生率為發(fā)達國家6倍,有50%的病例發(fā)生在中國和印度中國每年新病例為18.15萬中國每年有3萬多的婦女死于宮頸癌目前十頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點發(fā)展中國家的新發(fā)病例多是晚期患者未能早期診斷細胞學檢查未能普及陰道鏡應用條件受到限制民眾對宮頸癌的防范意識欠缺目前十一頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點發(fā)病年齡原位癌的發(fā)病年齡為35-39歲浸潤癌為40-49歲目前十二頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點宮頸癌的新動向近年來由于生活方式的改變發(fā)病率:有上升趨勢發(fā)病年齡:趨向年輕化目前十三頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPV
感染和宮頸癌在不同年齡組的發(fā)生率年齡(Years)HPV感染率(%)40-4415-1920-2425-2930-3435-3945-4950-54051015202530051015202530每10萬人中宮頸癌發(fā)生率目前十四頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點哪些些婦女更容易患宮頸癌性生活過早早孕多產或多次人工流產自己或性伴侶有多個性伴侶曾經或正患有生殖道HPV感染有或曾經患有其它性病吸煙、吸毒和營養(yǎng)不良內分泌紊亂或免疫力低下的婦女目前十五頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點現(xiàn)在基本明確宮頸癌的病因就是高危型HPV的持續(xù)性感染。感染HPV病毒到發(fā)展成浸潤癌需要大約十年的歷程,這是重要不可忽視的時間,只要定期進行婦科健康檢查,就可以及早發(fā)現(xiàn)子宮頸癌癌前病變并加以治療,就可有效地扼制其癌變;預防子宮頸癌的發(fā)生。宮頸癌可以預防和治愈目前十六頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點引起宮頸癌幾個方面因素環(huán)境因素
自身免疫因素HPV病毒持續(xù)感染宮頸癌變目前十七頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPV致宮頸癌機理5--10yearsHPV感染持續(xù)HPV感染細胞分化異常CIN高度CIN>30<30宮頸癌輔助—
致癌劑免疫因素目前十八頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPVE6癌蛋白與宮頸惡性病變的關系目前十九頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPVE7癌蛋白的分子生物學特性
目前二十頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點宮頸上皮細胞發(fā)生異常和瘤變的進化過程基底細胞膜正常輕度中度原位鱗狀細胞癌變 上皮 變型HSIL細胞異型CIN1CIN2CIN3LSIL巴氏涂片活檢目前二十一頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPV致宮頸癌進展示意圖LSILLSILCISCA8—10年(100%治愈)2—5年(死亡)正常低度病變高度病變原位癌浸潤癌目前二十二頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點關于HPV感染HPV感染多數(shù)不發(fā)展成為宮頸癌,可以在9-16(8-10)個月消失;間隔半年2次HPV(+);HPV持續(xù)感染;28%的持續(xù)感染者,在2年內發(fā)展為CINI;70%的持續(xù)感染者4年內發(fā)展為CINII;目前二十三頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點HPV實驗室檢測目前二十四頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點
臨床常用的HPV檢測方法病理學檢查細胞學檢查免疫組化檢測原位雜交技術檢測聚合酶鏈反應(PCR)技術DNA芯片分型檢測雜交捕獲DNA分析目前二十五頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點病理學檢查鱗狀上皮疣狀乳頭狀增生表皮角化不全棘層不規(guī)則增厚基底層增生上皮腳延長中表層出現(xiàn)灶狀分布的挖空細胞等。目前二十六頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點細胞學檢查凹空細胞、角化不良及濕疣外底層細胞細胞學診斷HPV感染敏感性較差目前二十七頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點免疫組化檢測檢測HPV的衣殼抗原來進一步明確HPV感染所得陽性反應定位明確,判斷可靠必須在HPV-DNA復制成熟后才有衣殼裝備敏感性較低目前二十八頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點原位分子雜交
用來測定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位,檢測重組體DNA)通過非放射性探針對石蠟組織進行檢測,能作定位檢測,假陽性率低,但靈敏度不高,大大降低了臨床使用價值。目前二十九頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點
聚合酶鏈反應(PCR)技術設計與HPV-DNA互補的一對特異性核苷酸引物,以HPV-DNA為模板以指數(shù)增長的速率進行體外擴增敏感性最高,可對HPV進行分型,測定病毒載量,發(fā)現(xiàn)新基因型,對基因進行序列分析缺點為樣品間易交叉污染導致假陽性目前三十頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點雜交捕獲DNA分析標本中的HPV-DNA與液相中的RNA探針結合,形成特異性的RNA-DNA雜交體,被微孔板內的特異抗體所捕獲,然后被所加的發(fā)光底物檢測,其發(fā)光的強度與標本中的DNA量成比例,因而可對HPV進行半定量檢測效率高,適于大量人群檢測,臨床上操作簡便目前三十一頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點DNA裂解→RNA-DNA雜交→抗體捕獲→化學發(fā)光→計算機判讀裂解加入探針雜交加入二抗和發(fā)光劑目前三十二頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點
hC2方法,特異性強,準確率高,并能做到定量,但不能分出亞型。芯片技術,可在相同的條件下,分出亞型,但不能定量。因此,HPV亞型分類和定量檢測研究將成為今后的重要課題。亞型和量化,可能對疾病的演變和轉歸提供更有利的證據。目前三十三頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點宮頸癌的篩查目前三十四頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點篩查對象21歲以上有性生活史或具有性生活三年以上的任何婦女。高危人群:有多個性伴侶、性生活過早、HIV/HPV感染、機體免疫功能低下、衛(wèi)生條件差/性保健知識缺乏。某些情況無需進行篩查,如因良性疾病摘除子宮的婦女。
目前三十五頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點起始年齡:
在我國經濟發(fā)達地區(qū)為25-30歲;經濟欠發(fā)達地區(qū)為35-40歲。對于高危婦女人群,篩查起始年齡應適當提前。終止年齡:
65歲后患子宮頸癌的危險性極低,故一般不主張對65歲以上的婦女進行子宮頸癌篩查。
目前三十六頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點篩查間隔1、每年一次細胞學檢查,連續(xù)2次(-),可3年一次2、連續(xù)2次HPV(-),細胞學檢查(-)可5~8年一次3、高危人群:最好每年一次(CIN及以上、特殊職業(yè)、30歲以上高危HPV感染者)目前三十七頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點篩查方案
根據《中國癌癥預防與控制規(guī)劃綱要(2004-2010)》推薦,一般可以選擇下面兩種篩查方案。
目前三十八頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點醋酸或碘染色后肉眼觀察(VIA/VILI)
陽性陰性陰道鏡+病理定期篩查(1次/年)相應治療初級篩查方案流程圖目前三十九頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點醫(yī)生取材HPV檢測+傳統(tǒng)巴氏涂片(TBS分級)HPV(-)HPV(+)HPV(-)HPV(+)細胞學≤ASCUS細胞學≤ASCUS細胞學≥
ASC-H細胞學≥
ASC-H
陰道鏡檢查/
多點活檢+ECC篩查(1次/3~5年)隨訪(1次/年)相應治療
一般篩查方案流程圖目前四十頁\總數(shù)四十一頁\編于十三點取材HPV檢測+液基細胞學檢查(TBS分級)HPV(-)HPV(+)HPV(-)HPV(+)細胞學≤ASCUS細胞學≤ASCUS細胞學≥ASC-H細胞學≥ASC-H
陰道鏡檢查/
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