火腿腸中亞硝酸鹽含量

《食品分析實(shí)驗(yàn)報(bào)告》火腿腸中亞硝酸鹽的含量測(cè)定學(xué)院醫(yī)學(xué)部專 業(yè)食品質(zhì)量與安全班 級(jí) 2014級(jí)學(xué) 號(hào) 1430415026姓 名 王焱指導(dǎo)老師 蔡春芳、王永玲蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部2016年5月13日一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康募盎疽竺鞔_亞硝酸鹽的測(cè)定與控制成品質(zhì)量的關(guān)系。明確與掌握鹽酸萘乙二胺法的基本原理與操作方法。了解比色測(cè)定的一般注意事項(xiàng)二、 實(shí)驗(yàn)原理理論原理樣品經(jīng)沉淀蛋白、除去脂肪后，在弱酸條件下硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)成紫紅色的染料，產(chǎn)生的顏色深淺與亞硝酸根含量成正比，顯色后的樣品可與標(biāo)準(zhǔn)液比色，即可算出樣品中亞硝酸鹽含量。反應(yīng)式如下：2.比色原理定義：比色法（colorimetry）以生成有色化合物的顯色反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過(guò)比較或測(cè)量有色物質(zhì)溶液顏色深度來(lái)確定待測(cè)組分含量的方法。分類：目視比色法光電比色法（分光光度法）----朗伯-比爾定律為基礎(chǔ)朗伯-比爾定律:一束單色光照射于一吸收介質(zhì)表面，在通過(guò)一定厚度的介質(zhì)后，由于介質(zhì)吸收了一部分光能，透射光的強(qiáng)度就要減弱。吸收介質(zhì)的濃度愈大，介質(zhì)的厚度愈大，則光強(qiáng)度的減弱愈顯著，其關(guān)系為：其中：A：吸光度；I0：入射光的強(qiáng)度；It：透射光的強(qiáng)度；T：透射比，或稱透光度；K：系數(shù)，可以是吸收系數(shù)或摩爾吸收系數(shù)；l：吸收介質(zhì)的厚度，一般以cm為單位；c：吸光物質(zhì)的濃度，單位可以是g/L或mol/Lo比色分析對(duì)顯色反應(yīng)的基本要求反應(yīng)應(yīng)具有較高的靈敏度和選擇性反應(yīng)生成的有色化合物的組成恒定且較穩(wěn)定和顯色劑的顏色差別較大選擇適當(dāng)?shù)娘@色反應(yīng)和控制好適宜的反應(yīng)條件，是比色分析的關(guān)鍵.三、實(shí)驗(yàn)材料除非另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)用水為雙蒸水（國(guó)標(biāo)蒸餾水），是GB/T6682規(guī)定的二級(jí)水或去離子水。(一)試劑1、 氯化銨緩沖液：1L容量瓶中加入500mL水，準(zhǔn)確加入20.0mL鹽酸，振蕩混勻，準(zhǔn)確加入50mL氫氧化銨，用水稀釋至刻度。必要時(shí)用稀鹽酸和稀氫氧化銨調(diào)試至pH9.6?9.7。2、 硫酸鋅溶液(0.42mol/L)：稱取120g硫酸鋅(ZnSO4?7H2O)，用水溶解，并稀釋至1000mL。(**作用:生成沉淀。前提條件:此實(shí)驗(yàn)要先加硫酸鋅后加氫氧化鈉。因?yàn)橄燃託溲趸c會(huì)先全部生成無(wú)色易溶的偏鋅酸鈉，無(wú)明顯現(xiàn)象。雖然加入過(guò)量硫酸鋅會(huì)有氫氧化鋅沉淀生成，但比較浪費(fèi)試劑。而實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)遵守從簡(jiǎn)、節(jié)約的原則，故此實(shí)驗(yàn)要先加硫酸鋅后加氫氧化鈉。)3、 氫氧化鈉溶液(20g/L):稱取20g氫氧化鈉用水溶解，稀釋至1L。(摩爾濃度：以單位體積里所含溶質(zhì)的物質(zhì)的量(摩爾數(shù))來(lái)表示溶液組成的物理量，叫作該溶質(zhì)的摩爾濃度，又稱該溶質(zhì)的物質(zhì)的量濃度。符號(hào)為C，單位為mol/L。計(jì)算式為：C=n/V)4、 對(duì)氨基苯磺酸溶液：稱取10g對(duì)氨基苯磺酸，溶于700mL水和300mL冰乙酸中，置棕色瓶中混勻，室溫保存。5、 N—1—萘基乙二胺溶液(1g/L)：稱取0.1gN—1—萘基乙二胺，加60%乙酸溶解并稀釋至100mL，混勻后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周內(nèi)穩(wěn)定。6、 顯色劑：臨用前將N—1—萘基乙二胺溶液(1g/L)和對(duì)氨基苯磺酸溶液等體積混合。7、 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取250.0mg于硅膠干燥器中干燥24h的亞硝酸鈉，加水溶解移入500mL容量瓶中，加100mL氯化銨緩沖液，加水稀釋至刻度，混勻，在4°C避光保存。此溶液每毫升相當(dāng)于500pg的亞硝酸鈉。8、 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液：臨用前，吸取亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00mL，置于100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于5.0pg亞硝酸鈉。器材1、 小型粉碎機(jī)。2、 分光光度計(jì)待分析食品火腿腸四、操作方法1.樣品處理2.測(cè)定A.按下表配置標(biāo)準(zhǔn)樣液及樣品溶液123456789試樣濾液00000002.62.6亞硝酸鈉5mg/ml0.00.10.20.40.60.81.000氯化銨緩沖液mL0.90.90.90.90.90.90.90.90.960%乙酸mL0.50.50.50.50.50.50.50.50.5立即加顯色劑mL111111111加水mL2.62.52.42.22.01.81.600加水定容成5ml，暗處?kù)o置25min，1cm比色杯，測(cè)OD550計(jì)算結(jié)果，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。五、計(jì)算結(jié)果收罄酸鈉深度標(biāo)麻曲線123456189試祥濾瓶00000002.fl2.6亞植酸鈉5Pg/ml0.00.10.20.40.60.81.00.00.0亞硝酸鈉含量ug0.00.51.02.0304.05.09I-7■'亞陰酸鈉灘度Pg/ml0.00.10.20.40.60.81.077氯化鉉緩沖液血0,90,90.90.90.90.90.90.90.960%乙酸mL0.50.50.50.50.50.50.50.50.5立即加顯色劑mL1.01.01.01.01.01.01.01.01.0加水eL2.62.52.42.22.01.81.60000吸光度值《頌_0.040I皿.?域210奶0.2750.3850.4850.1070.1071—吸光度值—線性（吸光度值）=0.4862工-0.006R2=0.9991—吸光度值—線性（吸光度值）=0.4862工-0.006R2=0.99910.6000.5000.4000.3000.2000.1000.000-0.1000.亞硝酸鈉濃度ug/inL由表格可得樣品濾液吸光度值為0.107、0.107，平均值為0.107，代入公式得樣品濾液中亞硝酸鈉濃度為0.23pg/ml。已知樣品濾液中亞硝酸鈉濃度為0.23pg/ml，則測(cè)定用樣液中亞硝酸鈉質(zhì)量約為1.15Mg。m2X1000

m~~XV2x1000X1:樣品中亞硝酸鹽的含量，mg/kgmi：樣品質(zhì)量，gm2：測(cè)定用樣液中亞硝酸鹽的質(zhì)量，以gVi:樣品處理