婦幼保健院PCR實驗室可行性報告及運(yùn)行預(yù)測分析

市婦幼保健院PCR實驗室可行性報告及運(yùn)行預(yù)測分析

市婦幼保健院位于市區(qū)**號，是一所集醫(yī)療、預(yù)防、保健、康復(fù)教學(xué)為一體婦幼保健?？漆t(yī)院，占地3300平方米，建有門診樓、病房樓。我院開放床位**張，現(xiàn)有職工**人。設(shè)有內(nèi)科、外科、婦科、產(chǎn)科、兒科、乳腺科、眼科、耳鼻喉科、口腔科、皮膚科、肛腸科、不孕癥科、近20個臨床科室，其中婦科、產(chǎn)科、兒科是重點科室。我院多次榮獲省地衛(wèi)生先進(jìn)單位，市級文明單位、市級優(yōu)質(zhì)服務(wù)單位、市級“三八”紅旗集體、獲聯(lián)合國兒童基金會、世界衛(wèi)生組織、衛(wèi)生部“愛嬰醫(yī)院”光榮稱號，全國三八紅旗集體稱號。市婦幼保健院奉行團(tuán)結(jié)、友愛、勤奮、高昂之精神。一流管理、一流技術(shù)、一流服務(wù)為廣大婦女兒童的身心健康作出貢獻(xiàn)。PCR臨床基因擴(kuò)增實驗室簡介聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction，PCR)技術(shù)自1983年問世以來，因為其對基因或特定核酸序列在短時間內(nèi)的極大的擴(kuò)增效率，已在感染性疾病、腫瘤、遺傳病、寄生蟲病、法醫(yī)學(xué)、動植物和考古等的診斷和研究中得到了廣泛的應(yīng)用，并在某些方面成為無可替代的檢測技術(shù)。PCR用于疾病的臨床診斷，使人們擁有了從對蛋白分子的表型的認(rèn)識進(jìn)一步深入到了遺傳物質(zhì)——核酸分子的探索的有力工具，也使臨床檢驗診斷學(xué)科中的臨床分子診斷這一分支得到了飛速發(fā)展。PCR技術(shù)獲得了諾貝爾獎，在臨床檢驗中，該技術(shù)有嚴(yán)格的質(zhì)量保證程序并在臨床分子診斷中已展現(xiàn)了巨大的應(yīng)用價值。PCR技術(shù)有著無可比擬的優(yōu)點，它對環(huán)境因素有較高的要求，要求建立規(guī)范化的PCR實驗室，并且嚴(yán)格地遵循里面的規(guī)章制度。關(guān)于建立PCR實驗室PCR實驗室又叫基因擴(kuò)增實驗室，是采用PCR技術(shù)應(yīng)用于臨床基因診斷的工作地方。建立規(guī)范化的PCR實驗室的必要性主要有以下幾個方面：1、PCR實驗室技術(shù)驗收和規(guī)范化的實驗室管理是PCR技術(shù)本身需要，也是在臨床上順利應(yīng)用該技術(shù)前提。由于PCR技術(shù)對所檢驗的核酸模板進(jìn)行大量擴(kuò)增，容易出現(xiàn)實驗室污染導(dǎo)致臨床檢測樣本假陽性結(jié)果，如果這些結(jié)果當(dāng)成臨床結(jié)果或者一個重大發(fā)現(xiàn)去報告或者發(fā)表，這必然會造成重大的醫(yī)療事故和難以挽回的后果，最嚴(yán)重的甚至?xí)绊懮鐣€(wěn)定。2、PCR實驗室的建立與技術(shù)驗收，一方面可以體現(xiàn)出醫(yī)院在同行業(yè)中的高端形象，利用分子核酸檢測項目的開展為兒科、婦產(chǎn)科等其他科室的快速發(fā)展提供強(qiáng)大的技術(shù)支撐，并在區(qū)域內(nèi)起到了一個很好的領(lǐng)頭羊及示范作用；另外一方面在醫(yī)院評審與級別評定中能起到加分的作用。3、經(jīng)過技術(shù)驗收后的PCR實驗室可以開展許多項目，如HPV-DNA、耳聾基因檢測、性病三項的檢測、HBV-DNA、單純皰疹病毒、B族鏈球菌、結(jié)核桿菌的DNA檢測等等項目。從方法學(xué)上，PCR技術(shù)操作簡便，出報告時間短，給醫(yī)院節(jié)省人力與時間成本；從經(jīng)濟(jì)效益上，會給醫(yī)院與科室?guī)矸浅？捎^經(jīng)濟(jì)收益。PCR實驗室的具體分區(qū)規(guī)劃及其設(shè)備配置對于臨床PCR實驗室的分區(qū)及其配置，按照衛(wèi)生部頒發(fā)的《臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室管理暫行辦法》（衛(wèi)醫(yī)發(fā)【2002】10號）中作了明確規(guī)定，并且衛(wèi)生臨床檢驗中心發(fā)出的配套文件《臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室工作規(guī)范》（衛(wèi)檢字【2002】8號）又對各區(qū)的功能及注意事項作了闡述。PCR實驗室可根據(jù)醫(yī)院開展的項目來把PCR實驗室規(guī)劃成三區(qū)還是四區(qū)（如用實時熒光PCR，則只需3個區(qū)；如需要雜交的要分4個區(qū)）。一般較為理想的PCR實驗室應(yīng)該符合各自獨立，不產(chǎn)生空氣流通，各區(qū)設(shè)計有緩沖間，儀器設(shè)備專區(qū)專用等要求。PCR實驗室可開展的項目很多，可以分為病原微生物檢測、生殖遺傳、分子病理、個體化用藥/代謝基因檢測四個類別，我院檢驗科已建成PCR實驗室，根據(jù)醫(yī)院現(xiàn)狀及病人分布情況，下面對醫(yī)院熱點項目進(jìn)行效益分析及項目申請。二、項目詳細(xì)情況乙肝病毒核酸檢測項目背景及意義：乙肝病毒（HBV）是乙型肝炎的病原體，它是一種DNA病毒，在生物學(xué)上它是嗜肝DNA病毒科家族種的一員。這種病毒除了對具體的器官具有特異性，對寄主也同樣有特殊要求，它通常只對人和猩猩有易感性。乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）感染所致。全世界約有3億人是HBV攜帶者而HBV攜帶者發(fā)生肝癌的危險性比非攜帶者高100倍，約有80%的肝癌患者與乙肝有關(guān)。我國是乙肝高發(fā)區(qū)，約有1.2億人攜帶乙肝病毒，其中慢性乙肝患者約3000萬例，每年約有35萬人死于慢性乙肝相關(guān)疾病。圍產(chǎn)期的傳播是HBV感染的主要方式，約20萬的新生兒會遭受HBV陽性母親的感染而成為HBV慢性攜帶者?？梢奌BV已對人類的健康構(gòu)成了巨大的威脅。HBV感染是全球性公共衛(wèi)生問題，據(jù)估計全世界HBV攜帶者達(dá)3.5億人之多。中國作為乙型肝炎的高流行區(qū)，其中大約有1.2億人長期帶有乙型肝炎病毒（乙肝病毒攜帶者），人群中大約有2000萬人是慢性乙型肝炎者，占全球HBV表面抗原（hepatitisBvirussurfaceantigen，HBsAg）總攜帶率的近50%，其中60%的人受過HBV的感染，在某些人群中甚至高達(dá)79%，8%-10%的人為HBsAg攜帶者。目前，患慢性乙型肝炎的病人約為1000萬人，近年發(fā)病率約為0.158%。此外，患慢性肝炎的病人中約有80%以上為慢性乙型肝炎患者，而受HBV慢性感染的人群罹患原發(fā)性肝細(xì)胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）的相對危險性至少增加300倍。HBV感染后臨床表現(xiàn)呈多樣性，可表現(xiàn)為重癥肝炎、急性肝炎、慢性肝炎或無癥狀攜帶者，其中部分慢性肝炎演變成肝硬化或肝癌。所以，乙型肝炎是我國嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題，在一定程度上制約著我國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和國民健康素質(zhì)的提高。據(jù)世界衛(wèi)生組織1983年報告，全世界的原發(fā)性HCC中大約80%都與HBV慢性感染相關(guān)。中國也是肝癌高發(fā)區(qū)，因而對HBV的檢測與防治已成為中國健康與傳染病控制中的首要問題。乙肝定量檢測有如下意義：①可以了解患者體內(nèi)HBV的復(fù)制情況和傳染性的強(qiáng)弱，這是因為單憑大、小三陽并不能準(zhǔn)確測定HBV在體內(nèi)的含量、復(fù)制情況和傳染性強(qiáng)弱，HBVDNA是HBV感染最直接、特異性強(qiáng)和靈敏性高的指標(biāo)。HBVDNA定量檢測結(jié)果濃度越高，說明體內(nèi)病毒含量越高，病毒復(fù)制越活躍，傳染性也越強(qiáng)。HBVDNA定量檢測結(jié)果濃度很低或者為零，說明病毒復(fù)制緩慢甚至停止，傳染性很低。②對慢性乙型肝炎的輔助診斷。對于隱匿性HBV感染：血清HBsAg檢測陰性，但外周血或肝組織中可檢測到HBVDNA。這是因為乙肝病毒S區(qū)變異，不能編碼產(chǎn)生HBsAg。HBeAg陰性的慢性乙型肝炎患者（HBeAg（-）/抗-Hbe（+）），這是因為乙肝病毒前C區(qū)變異，HBeAg表達(dá)下調(diào)或不表達(dá)。③用于確定是否開展抗病毒治療及適宜抗病毒治療方案的選擇。④用于抗病毒治療的療效評估，考察某種藥物治療乙肝是否有效，首先要觀察該藥對HBV-DNA的抑制作用。HBVDNA載量的動態(tài)變化在臨床上可以為用藥的劑量、用藥時間、是否需要聯(lián)合用藥以及用藥的效果等提供重要的參考依據(jù)，是評價抗病毒或免疫增強(qiáng)藥物療效的最客觀的指標(biāo)。治療前、治療中和治療后均應(yīng)定期進(jìn)行檢查（防治指南推薦：每3-6個月檢測1次）。2015年3月世界衛(wèi)生組織推薦的慢性乙肝患者管理流程中明確表示HBVDNA檢測應(yīng)貫穿整個管理流程。丙肝病毒核酸檢測項目背景及意義：據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）公布《2017年全球肝炎報告》，2015年全球約有7100萬人染有丙肝病毒，中國約有1000萬丙肝感染者。目前，WHO已將病毒性肝炎列為全球公共衛(wèi)生面臨的重要威脅之一。中國衛(wèi)健委法定傳染病報告顯示：2018年中國丙肝發(fā)病人數(shù)22萬，發(fā)病率為15.79/10萬。據(jù)中國疾控中心（CDC）數(shù)據(jù)，我國丙肝患者呈地區(qū)分布，大部分分布在偏遠(yuǎn)農(nóng)村，患者主動就診不足20%。全球肝炎防治一號課題，加強(qiáng)檢測是防治關(guān)鍵2016年，WHO提出到2030年消除肝炎危害的目標(biāo)：即在2015年數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上將新發(fā)病毒性肝炎感染減少90%，丙肝治療覆蓋80%的患者，并將病毒性肝炎引起的死亡數(shù)減少65%。而全球只有20%的丙肝感染者得到了檢測和診斷，7%開始治療，中國丙肝患者僅有17.7%得到檢測，1.3%得到有效治療，遠(yuǎn)低于世界平均水平。2030目標(biāo)已成為全球肝病防治領(lǐng)域的“一號課題”。圖，WHO2030目標(biāo)以及世界平均和中國現(xiàn)有水平WHOMarcBulterys博士表示：“加強(qiáng)肝炎檢測是加強(qiáng)挽救生命的肝炎治療的關(guān)鍵?！?017年2月，WHO首次發(fā)布了全球慢性病毒性乙型肝炎和丙型肝炎檢測指南，為2030目標(biāo)的實現(xiàn)提供重要工具。丙肝可以治愈，但對實驗室檢測提出更高要求HCV在患者體內(nèi)長期地高水平復(fù)制，激發(fā)免疫清除應(yīng)答從而損傷肝臟，是其致病機(jī)理。臨床研究已證明，抑制病毒復(fù)制對控制疾病進(jìn)展非常重要。目前臨床治療慢性丙肝的核心措施，就是抗病毒優(yōu)化治療。2017年以來，國家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）批準(zhǔn)多個國內(nèi)外丙肝小分子抗病毒藥物（DAA），DAA藥物僅需12-24周治愈90%以上的丙肝感染者。而且，泛基因型DAA藥物進(jìn)入2018版國家基藥目錄，極大的提升丙肝的治療可及性。臨床治療的進(jìn)步，對實驗室檢測也提出了更高的要求。丙肝抗病毒治療的目的是清除丙肝病毒，獲得療效，消除或減輕丙肝病毒相關(guān)肝損害，阻止進(jìn)展為肝硬化、失代償期肝硬化、肝功能衰竭或肝癌，改善患者的長期生存率，提高患者的生活質(zhì)量?！扒宄《尽钡暮x，是最靈敏PCR方法“檢測不出”病毒核酸，以此作為適宜治療患者選擇、確定治療方案和療效評價、治療終點判斷關(guān)鍵標(biāo)志。因此，在臨床治療過程中，準(zhǔn)確而敏感地監(jiān)測患者體內(nèi)病毒核酸載量的動態(tài)變化至關(guān)重要。另外，超敏HCVRNA檢測在丙肝患者接受透析治療期間的監(jiān)測、術(shù)前檢查等方面有明確的臨床意義。國內(nèi)外指南對HCVRNA檢測要求增加目前臨床上常采用熒光定量PCR技術(shù)可直接檢測血清中HCVRNA的載量。熒光定量PCR技術(shù)檢測HCV-RNA載量具有快速、特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點，超靈敏試劑檢測結(jié)果對HCV感染進(jìn)行早期診斷、病毒學(xué)應(yīng)答、療效觀察及預(yù)后評估、流行病學(xué)調(diào)查等提供科學(xué)依據(jù)。北美肝病學(xué)會（AASLD）和歐洲肝病研究學(xué)會（EASL）在其最新頒布的HCV臨床指南中，均推薦使用“超敏感、特異和寬線性范圍”的實時PCR技術(shù)測定病毒核酸載量。我國《丙型肝炎病毒核糖核酸測定試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則》也將HCV的靈敏度要求提升到了50IU/ml，同時要求內(nèi)標(biāo)全程參與核酸提取和擴(kuò)增。丙型肝炎病毒檢測結(jié)果轉(zhuǎn)陰患者血液透析管理方案要求HCVRNA檢測靈敏度＜15IU/mL。B族鏈球菌基因檢測開展的項目背景及意義：在20世紀(jì)70年代，GBS已被證實是圍產(chǎn)期母嬰感染的常見致病菌之一，在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中有不可忽視的地位，同時它也是嬰幼兒腦膜炎和敗血癥最常見的原因。母嬰傳播是主要新生兒感染的主要途徑。美國新生兒早發(fā)型GBS感染率90年代初約為1.5‰～2‰，由于其制定分娩GBS預(yù)防性篩查，2008年其發(fā)生率下降至0.34‰--0.37‰。2010年版美國疾控中心《圍產(chǎn)期GBS疾病預(yù)防指南》：在妊娠第35-37周取孕婦直腸陰道分泌物進(jìn)行GBS檢測，并對陽性和高危孕婦采用分娩期預(yù)防性抗生素（靜脈注射）進(jìn)行干預(yù)（臨床有效率約為90%）。目前，GBS感染的預(yù)防也引起了我國圍產(chǎn)界的高度重視，中華醫(yī)學(xué)會起草的2012版《孕前和孕期保健指南》中，GBS正式被收納為備查項目。指南表明：外觀良好的新生兒、而且母親需要GBS預(yù)防但未進(jìn)行或進(jìn)行不充分分娩期預(yù)防的；孕周<37周或胎膜破裂≥18小時，應(yīng)進(jìn)行有限的診斷評估，并觀察≥48小時。核酸檢測法與傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)方法相比，PCR可顯示出其明顯的優(yōu)勢，敏感性為97％，特異性為100％，陽性預(yù)測值為100％，陰性預(yù)測值為98．8％。通過PCR技術(shù)，可以在40-100分鐘內(nèi)得到實驗室結(jié)果。其中實時定量熒光聚合酶鏈反應(yīng)(real-timequantityPCR，rtq-PCR)的敏感性(94％～97％)及特異性(90％-100％)較高，平均耗時40分鐘，最具實用價值。鑒于rtq-PCR準(zhǔn)確、快速、價格適中的特點，國外近年來對此法的應(yīng)用較為關(guān)注。除產(chǎn)時GBS檢測外，該檢測方法目前已運(yùn)用到產(chǎn)后新生兒即時GBS檢測。在Natarajan等的報道中，對94例孕母胎膜早破、產(chǎn)時GBS帶菌狀況不詳?shù)男律鷥哼M(jìn)行體表4點采樣(鼻孔、咽喉、外耳道、肛門)檢測，rtq-PCR陽性檢出率為51％，該方法敏感度與特異性分別為90％和80.3％，顯著優(yōu)于瓊脂平板法(陽性檢出率僅17%)。國內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院首選的檢測方法是無乳鏈球菌普通細(xì)菌培養(yǎng)法，但假陰性率高造成漏診率高。2002年美國疾病預(yù)防與控制率中心(CDC)推薦使用特殊GBS培養(yǎng)基，假陰性率低，但價格貴且不易獲得。核酸檢測法作為GBS檢測的新方法，克服了以上方法的各項缺限，其優(yōu)勢如下：（1）核酸檢測，不受樣本純度、樣本是否存活等方面的影響，從而解決不易培養(yǎng)微生物的鑒定問題；（2）操作簡便，出結(jié)果快，特異性強(qiáng)、靈敏度高；（3）可監(jiān)控，保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。綜上所述，核酸檢測方法可改變傳統(tǒng)檢測方法敏感性低，特異性差，檢測結(jié)果無法監(jiān)控，且耗時過長等問題，是首選的GBS檢測方法。開展B族鏈球菌基因檢測開展的意義簡述如下：（1）通過孕晚期GBS感染的篩查，陽性者通過有針對性的治療，阻斷母嬰傳播；（2）預(yù)防嬰幼兒腦膜炎和敗血癥的發(fā)生；4.遺傳性耳聾基因檢測開展的項目背景及臨床意義：耳聾是一種嚴(yán)重影響人類生活質(zhì)量的常見先天性疾病，它可以由單一基因突變或不同基因的復(fù)合突變引起，也可由環(huán)境因素（如醫(yī)療因素，環(huán)境暴露，創(chuàng)傷，藥物等）或基因和環(huán)境兩者共同作用而致。我國每年2000萬新生兒中，嚴(yán)重聽力障礙發(fā)病率為1‰-3‰，也就是每年都有2-6萬的聾寶寶出生，其中60﹪都是遺傳因素導(dǎo)致，先天耳聾的發(fā)病率約占中國聾人的50%，而遺傳聾約占先天耳聾的85%，其大多數(shù)為常染色體隱性遺傳。遺傳性耳聾基因檢測，就是通過分析被檢者的DNA，確認(rèn)與耳聾相關(guān)的基因是否存在缺陷，從而為耳聾的臨床診斷提供依據(jù)。對致聾基因的尋找和檢測具有重大臨床價值，通過對基因突變的識別不僅可用于耳聾患者的病因診斷、遺傳咨詢、產(chǎn)前診斷和新生兒聽力篩查，還可以幫助和提醒醫(yī)生慎重使用特定種類的抗生素以避免造成攜帶基因突變的兒童致聾。耳聾基因檢測產(chǎn)品的有效推出將進(jìn)一步推進(jìn)耳聾基因檢測作為聽力篩查技術(shù)的有力補(bǔ)充，使得耳聾患者在基因水平上明確病因，同時避免遲發(fā)性耳聾的發(fā)生等，將在中國新生兒聽力篩查中奠定堅實的基礎(chǔ)。開展耳聾基因檢測的意義簡述如下：（1）在分子水平上明確病因:及早進(jìn)行助聽器或電子耳蝸植入的康復(fù)治療；（2）遺傳咨詢及婚育指導(dǎo)：對聾病基因突變攜帶者，可以有效預(yù)警其在到達(dá)婚育年齡時及時接受遺傳咨詢，降低生育聾兒的風(fēng)險，提高人口素質(zhì)；（3）指導(dǎo)耳聾治療：預(yù)測電子耳蝸的療效，基因突變導(dǎo)致的耳聾，電子耳蝸移植效果好；（4）指導(dǎo)患者及其親屬用藥和生活注意事項。5.新型冠狀病毒核酸檢測開展的項目背景及臨床意義：2019新型冠狀病毒，2020年1月12日，世界衛(wèi)生組織正式將其命名為2019-nCoV。冠狀病毒是一個大型病毒家族，已知可引起感冒以及\t"/item/2019%E6%96%B0%E5%9E%8B%E5%86%A0%E7%8A%B6%E7%97%85%E6%AF%92/_blank"中東呼吸綜合征（MERS）和\t"/item/2019%E6%96%B0%E5%9E%8B%E5%86%A0%E7%8A%B6%E7%97%85%E6%AF%92/_blank"嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARS）等較嚴(yán)重疾病。新型冠狀病毒是以前從未在人體中發(fā)現(xiàn)的冠狀病毒新毒株。2019年12月以來，湖北省武漢市持續(xù)開展流感及相關(guān)疾病監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)多起\t"/item/2019%E6%96%B0%E5%9E%8B%E5%86%A0%E7%8A%B6%E7%97%85%E6%AF%92/_blank"病毒性肺炎病例，均診斷為病毒性肺炎/肺部感染。人感染了冠狀病毒后常見體征有呼吸道癥狀、發(fā)熱、咳嗽、氣促和呼吸困難等。在較嚴(yán)重病例中，感染可導(dǎo)致肺炎、嚴(yán)重急性呼吸綜合征、腎衰竭，甚至死亡。目前對于新型冠狀病毒所致疾病沒有特異治療方法。但許多癥狀是可以處理的，因此需根據(jù)患者臨床情況進(jìn)行治療。此外，對感染者的輔助護(hù)理可能非常有效。做好自我保護(hù)包括：保持基本的手部和呼吸道衛(wèi)生，堅持安全飲食習(xí)慣，并盡可能避免與任何表現(xiàn)出有呼吸道疾病癥狀（如咳嗽和打噴嚏等）的人密切接觸。臨床主要癥狀多表現(xiàn)為感染病毒的人會出現(xiàn)程度不同的癥狀，有的只是發(fā)燒或輕微咳嗽，有的會發(fā)展為肺炎，有的則更為嚴(yán)重甚至死亡。該病毒致死率約為2%到4%，但這是一個非常早期的百分比，隨著更多信息的獲得可能會改變。同時，這并不意味著它不嚴(yán)重，只是說病毒感染者不一定人人都會面臨最嚴(yán)重的后果。新型冠狀病毒主要的傳播途徑還是呼吸道飛沫傳播和接觸傳播，氣溶膠和糞—口等傳播途徑尚待進(jìn)一步明確。通過流行病學(xué)調(diào)查顯示，病例多可以追蹤到與確診的病例有過近距離密切接觸的情況。

直接傳播：是指患者噴嚏、咳嗽、說話的飛沫，呼出的氣體近距離直接吸入導(dǎo)致的感染；氣溶膠傳播：是指飛沫混合在空氣中，形成氣溶膠，吸入后導(dǎo)致感染；接觸傳播：是指飛沫沉積在物品表面，接觸污染手后，再接觸口腔、鼻腔、眼睛等黏膜，導(dǎo)致感染。易感人群各個年齡段的人都可能被感染，被感染的主要是成年人，其中老年人和體弱多病的人似乎更容易被感染。

兒童和孕產(chǎn)婦是新型冠狀病毒感染的肺炎的易感人群。診斷標(biāo)準(zhǔn)：第六版診斷標(biāo)準(zhǔn)取消湖北省和湖北省以外其他省份的區(qū)別。統(tǒng)一分為“疑似病例”和“確診病例”兩類。疑似病例判定分兩種情形。一是“有流行病學(xué)史中的任何一條，且符合臨床表現(xiàn)中任意2條（發(fā)熱和/或呼吸道癥狀；具有上述肺炎影像學(xué)特征；發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)正?；蚪档?，淋巴細(xì)胞計數(shù)減少）。二是“無明確流行病學(xué)史的，且符合臨床表現(xiàn)中的3條（發(fā)熱和/或呼吸道癥狀；具有上述肺炎影像學(xué)特征；發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)正?；蚪档停馨图?xì)胞計數(shù)減少）。確診病例需有病原學(xué)證據(jù)陽性結(jié)果（實時熒光RT-PCR檢測新型冠狀病毒核酸陽性；或病毒基因測序，與已知的新型冠狀病毒高度同源）。6.MTHFRC67777T基因檢測開展的項目背景及臨床意義：葉酸是一種水溶性的B族維生素，作為體內(nèi)最重要的一碳單位載體，其主要生理功能為參與機(jī)體許多細(xì)胞代謝過程。一方面為DNA、RNA以及蛋白質(zhì)甲基化提供甲基，并參與嘌呤、嘧啶的合成；另一方面，同型半胱氨酸合成酶催化同型半胱氨酸(Hcy)轉(zhuǎn)化為甲硫氨酸(Met)過程中，需要甲基供體5-甲基四氫葉酸(5-methylTHF，5-MTHF)的參與。葉酸在Met代謝中必不可少，它以5-MTHF形式起作用，如果缺乏葉酸會對人體造成很大的危害，特別是對孕婦和胎兒的發(fā)育,主要的表現(xiàn)如下：（1）葉酸水平不足，導(dǎo)致Met合成障礙，血中Hcy堆積，在孕早期干擾神經(jīng)管閉合，可使胎兒發(fā)育畸形，神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生異常。（2）由于葉酸與DNA的合成密切相關(guān),孕婦若攝入葉酸嚴(yán)重不足,就會使胎兒的DNA合成發(fā)生障礙,細(xì)胞分裂減弱,其脊柱關(guān)鍵部位的發(fā)育受損,導(dǎo)致脊柱裂，婦女在懷孕的前6周內(nèi)若攝入葉酸不足,其生出無腦兒和脊柱裂的畸形兒的可能性增加4倍。（3）缺乏葉酸會引發(fā)嬰兒的核巨紅細(xì)胞性貧血和孕婦的巨紅細(xì)胞性貧血，這是由于葉酸的缺乏使DNA的合成受到了抑制,核蛋白形成不足,骨髓中新形成的紅細(xì)胞不能成熟,細(xì)胞分裂增殖速度下降,細(xì)胞體積增大而出現(xiàn)了巨紅細(xì)胞。（4）成人葉酸缺乏易誘發(fā)急性心腦血管病，葉酸缺乏會使血中的高半胱氨酸水平升高,由于血液中過高的高半胱氨酸水平,使得激活血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖基因被啟動,使這些細(xì)胞變成動脈粥樣斑,形成血凝塊,造成管腔狹窄和閉塞,而易誘發(fā)急性心腦血管病。為降低出生缺陷，衛(wèi)生部自1997年就開始推薦孕期婦女統(tǒng)一補(bǔ)充葉酸，劑量為400微克/天，使新生兒神經(jīng)管畸形的發(fā)病率顯著下降。然而，葉酸補(bǔ)充也并不是越多越好。研究發(fā)現(xiàn)，葉酸補(bǔ)充過多易導(dǎo)致：（1）孕婦結(jié)腸腺瘤癌變風(fēng)險和乳腺癌發(fā)病風(fēng)險上升；（2）掩蓋維生素B12缺乏，導(dǎo)致孕婦體虛、神經(jīng)衰弱和惡性貧血等癥狀；（3）影響胎兒鋅的吸收，使胎兒發(fā)育異常，孕婦健康受損；（4）孕婦葉酸過敏癥，如發(fā)熱、皮膚痛癢和呼吸困難等。MTHFR和MTRR基因在機(jī)體葉酸代謝過程中發(fā)揮了極其重要作用，MTHFR和MTRR基因突變可致機(jī)體葉酸代謝出現(xiàn)障礙，血清Hcy顯著升高，最終導(dǎo)致一系列病理變化。因此補(bǔ)充葉酸和維生素B12被認(rèn)為是經(jīng)濟(jì)有效的手段，較高的血漿葉酸水平可以彌補(bǔ)因MTHFR和MTRR基因突變導(dǎo)致酶活性降低引起的血清高Hcy濃度。MTHFR和MTRR基因多態(tài)性決定了個體對于葉酸的代謝能力，決定了葉酸每日的補(bǔ)充量。因此，衛(wèi)生部規(guī)定的每日葉酸服用劑量并不能真實反映不同基因型孕婦所需確切需求量。部分孕婦由于體內(nèi)葉酸代謝存在障礙，需要增補(bǔ)更多的葉酸。而部分孕婦補(bǔ)充過量會帶來較大的危害，如導(dǎo)致孕婦結(jié)腸腺瘤和乳腺癌發(fā)病風(fēng)險上升，掩蓋維生素B12缺乏所致孕婦體虛、神經(jīng)衰弱和惡性貧血等癥狀，影響胎兒鋅的吸收，導(dǎo)致胎兒發(fā)育異常。因此補(bǔ)充合適劑量的葉酸對于孕婦和胎兒至關(guān)重要；另外，由于MTHFR基因多態(tài)性相關(guān)的葉酸利用障礙導(dǎo)致的血清高水平Hcy與心腦血管疾病密切相關(guān)，因此也有必要補(bǔ)充合適劑量的葉酸用于預(yù)防并降低該類疾病的發(fā)病率。通過檢測MTHFR和MTRR基因多態(tài)性，測定人群機(jī)體葉酸代謝水平，從而在出生缺陷、心腦血管疾病疾病的預(yù)防和治療過程中，預(yù)測不同基因型患者葉酸補(bǔ)充劑量，在早期為患者制定個體化的給藥方。開展MTHFR和MTRR基因多態(tài)性檢測的意義簡述如下：（1）通過MTHFR和MTRR基因多態(tài)性檢測，確定孕婦是否存在葉酸代謝障礙，指導(dǎo)其補(bǔ)充合適劑量的葉酸，避免補(bǔ)充不足或者補(bǔ)充過量給孕婦及胎兒造成損傷；（2）通過葉酸代謝能力的檢測，補(bǔ)充適合劑量的葉酸以預(yù)防并降低心腦血管疾病的發(fā)病率。7.HPV21分型核酸檢測開展的項目背景及臨床意義子宮頸癌是女性最常見的癌癥之一，僅次于乳腺癌。在亞洲和中國，宮頸癌已取代乳腺癌成為女性第一位惡性腫瘤。全世界每年約有50萬新發(fā)子宮頸癌病例，亞洲約38萬，中國約15萬例，全世界每年約23萬婦女死于宮頸癌，亞洲約19萬，中國約8萬。使廣大婦女的身心健康和生命安全受到嚴(yán)重威脅。近年來，宮頸癌病因?qū)W研究