體液中酶的生物化學(xué)檢驗(yàn)

體液中酶的生物化學(xué)檢驗(yàn)1第一頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五1、掌握臨床診斷中常用酶與同工酶的檢測方法、參考區(qū)間及臨床意義2、熟悉酶及同工酶的基本概念、分類與特征本章教學(xué)要求：2第二頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五第一節(jié)概述一、基本概念酶（E）：具有催化作用的生物大分子，在生命進(jìn)程中發(fā)揮著重要作用。除少數(shù)酶是核酸外，絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)酶的底物（S）：酶所催化的反應(yīng)物酶的產(chǎn)物（P）：酶促反應(yīng)的生成物酶的活性：酶的催化能力的大小3第三頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五二、酶的分類單純酶結(jié)合酶

酶蛋白（蛋白質(zhì)部分）

輔助因子輔酶（非共價(jià)鍵結(jié)合）

輔基（共價(jià)鍵結(jié)合）1、酶分子的組成4第四頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五2、催化的反應(yīng)性質(zhì)1.氧化還原酶2.轉(zhuǎn)移酶3.水解酶4.裂合酶或裂解酶5.異構(gòu)酶6.合成酶或連接酶酶的命名采用系統(tǒng)命名法5第五頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五臨床常用酶的名稱與編號EC編號習(xí)慣用名英語縮寫EC編號習(xí)慣用名英語縮寫1.1.1.27乳酸脫氫酶LD、LDH2.7.3.2肌酸激酶CK、CPK1.1.1.37蘋果酸脫氫酶MD、MDH3.1.1.3脂肪酶LPS1.1.1.41異檸檬酸脫氫酶ICD、ICDH3.1.1.8膽堿酯酶CHE1.1.1.496-磷酸葡萄糖脫氫酶G6PDH3.1.3.1堿性磷酸酶ALP、AKP1.4.1.3谷氨酸脫氫酶GLD、GLDH3.1.3.2酸性磷酸酶ACP1.4.3.4單氨氧化酶MOD3.1.3.55'-核苷酸酶5'-NT2.1.3.3鳥氨酸氨甲?；D(zhuǎn)移酶OCT3.2.1.1α-淀粉酶AMY、AMS2.3.2.2γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶γ-GT、GGT3.2.1.30β-N-乙酰(基)-D氨基葡萄糖苷酶NAG2.4.1.1糖原磷酸化酶GP3.2.1.51α-L-巖藻糖苷酶α-FU、AFU2.5.1.18谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶GST3.4.23.1亮氨酸氨基肽酶LAP2.6.1.1門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶AST、GOT4.1.2.13果糖二磷酸醛縮酶ALD2.6.1.2丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALT、GPT6第六頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五三、同工酶同工酶：催化的化學(xué)反應(yīng)相同，但酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。根據(jù)同工酶的來源和結(jié)構(gòu)不同，從基因角度可將其分為單基因決定的同工酶、復(fù)等位基因同工酶、多基因決定的同工酶和修飾同工酶四類。

7第七頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五8第八頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五四、血清酶血漿特異酶（血漿固有酶）：凝血酶、纖溶酶、膽堿酯酶、銅氧化酶（銅藍(lán)蛋白）、脂蛋白酯酶等非血漿特異酶：外分泌酶和細(xì)胞酶（一）分類9第九頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（二）影響血清酶的因素1、生理變化性別年齡飲食運(yùn)動妊娠10第十頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五2、病理變化（1）酶合成異常：大多數(shù)酶在肝臟合成（2）酶釋放增加：酶從病變（或損傷）細(xì)胞中釋放增加是疾病時大多數(shù)酶增高的原因（3）酶清除異常：同酶的半壽期以及其他一些因素有關(guān)血清酶的半壽期（T1/2）：指酶失活至原來活性一半時所需要的時間。半壽期長的酶，在血清中持續(xù)時間長。11第十一頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五12第十二頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五第二節(jié)臨床診斷中常用的酶與同工酶一、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）也稱谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）一種參與人體蛋白質(zhì)新陳代謝的酶，起加快體內(nèi)蛋白質(zhì)氨基酸在體內(nèi)轉(zhuǎn)化的作用，它廣泛存在于人體各種組織、器官、肌肉、骨骼中，以肝細(xì)胞的細(xì)胞漿中最多。13第十三頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（一）檢測方法連續(xù)監(jiān)測法可在340nm處連續(xù)監(jiān)測NADH的消耗量，從而計(jì)算出ALT活性濃度。L-丙氨酸+α-酮戊二酸

α-丙酮酸+L-谷氨酸

ALTα-丙酮酸+NADH+H+

乳酸+NAD+LD14第十四頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（二）參考區(qū)間男性：9--50U/L女性：7--40U/L

（三）臨床意義1、活性增高（1）肝膽疾?。簜魅拘愿窝?、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝、膽管炎等（2）心血管疾?。盒墓?、心肌炎、腦出血等（3）藥物和毒物2、活性降低：磷酸吡哆醛缺乏癥15第十五頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五二、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）也稱谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT），AST和ALT是人體內(nèi)糖和蛋白質(zhì)相互轉(zhuǎn)變所需的酶。AST廣泛分布于全身各組織，尤其以心臟、骨骼肌、肝臟、腎臟中最為豐富，在細(xì)胞內(nèi)定位于線粒體（ASTm）和胞質(zhì)（ASTs）中，70%為ASTm16第十六頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（一）檢測方法連續(xù)監(jiān)測法可在340nm處連續(xù)監(jiān)測NADH的消耗量，從而計(jì)算出AST活性濃度。L-天冬氨酸+α-酮戊二酸

草酰乙酸+L-谷氨酸

AST草酰乙酸+NADH+H+L-蘋果酸+NAD+MD17第十七頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（二）參考區(qū)間8--40U/L

（三）臨床意義活性增高（1）AST在心肌細(xì)胞中含量最高，心肌梗死時活性增高（2）各種肝?。?）肌炎、胸膜炎、腎炎、肺炎18第十八頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五三、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）

是一種含巰基的線粒體酶，參與體內(nèi)谷胱甘肽的代謝。腎臟、肝臟和胰腺中含量豐富，但血清中GGT主要來自肝膽系統(tǒng)。GGT在肝臟中廣泛分布于肝細(xì)胞的毛細(xì)膽管一側(cè)和整個膽管系統(tǒng)，因此肝內(nèi)合成亢進(jìn)或膽汁排出受阻時，血清中GGT升高。19第十九頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（一）檢測方法堿性條件下GCNA與甘氨酰甘氨酸反應(yīng)的方法（二）參考區(qū)間男性：11--50U/L女性：7--32U/L

20第二十頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（三）臨床意義1、腎臟疾?。貉逯蠫GT活性升高不明顯2、肝臟疾?。海?）診斷惡性腫瘤肝轉(zhuǎn)移和肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)情況，陽性率可達(dá)90%（2）GGT同工酶II與AFP聯(lián)合檢測可原發(fā)性肝癌的檢測陽性率明顯升高3、嗜酒或長期服用某種藥物21第二十一頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五四、肌酸激酶（CK）CK能催化高能磷酸鍵在肌酸和ATP之間轉(zhuǎn)換。為二聚體結(jié)構(gòu)，由M和B兩個亞基構(gòu)成，可組成三種同工酶，CK-MM（主要存在于骨骼肌中）、CK-BB（腦、平滑?。?、CK-MB（心?。?。22第二十二頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（一）檢測方法酶偶聯(lián)法（二）參考區(qū)間男性：38--174U/L女性：26--140U/L

23第二十三頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（三）臨床意義1、心肌梗死：AMI發(fā)生后4-8h，CK開始升高，12-48h達(dá)高峰，可達(dá)正常上限的10-12倍，2-4天后降至正常。CK-MB是目前公認(rèn)的診斷AMI較有價(jià)值的生化指標(biāo)。2、病毒性心肌炎3、皮肌炎、肌營養(yǎng)不良、骨骼肌損傷等4、腦膜炎、腦血管意外、甲狀腺功能低下5、非疾病因素：劇烈運(yùn)動，各種插管及手術(shù)等升高甲亢、長期臥床者，CK-MM下降24第二十四頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五五、乳酸脫氫酶（LD）LD是參與糖無氧酵解和糖異生的重要酶。LD是由M和H兩個亞基組成的四聚體，形成五種結(jié)構(gòu)不同的同工酶LD1（H4）和LD2（H3M）：主要存在于腎、心肌和紅細(xì)胞LD3（H2M2）：脾臟、肺臟LD4（HM3）和LD5（M4）：橫紋肌和肝臟25第二十五頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（一）檢測方法連續(xù)監(jiān)測法在340nm處連續(xù)監(jiān)測NADH吸光度上升或下降速率，與LD活性呈正比關(guān)系。正向反應(yīng)：L-乳酸+NAD

丙酮酸+

NADH+H+

LDLD逆向反應(yīng)：丙酮酸+

NADH+H+

L-乳酸+NAD

PH8.8-9.8PH7.4-7.826第二十六頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（二）參考區(qū)間LD-L法：109--245U/LLD-P法：200--280U/L

27第二十七頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（三）臨床意義疾病LD總酶LD同工酶心肌梗死升高最慢（8-10天），可高于正常上限10倍LD1>LD2，可持續(xù)14天充血性心衰、心肌炎可高于正常上限5倍LD1>LD2病毒性肝炎可高于正常上限5倍LD5>LD4肝硬化輕度升高LD5>LD4原發(fā)性肝癌部分病例升高LD5>LD4梗阻性黃疸不定LD4>LD5肌肉損傷視損傷程度而異以LD5升高為主惡性腫瘤可升高LD3>LD128第二十八頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五六、堿性磷酸酶（ALP）

堿性磷酸酶（ALP或AKP）是廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎和胎盤等組織經(jīng)肝臟向膽外排出的一種酶。這種酶能催化核酸分子脫掉5’磷酸基團(tuán)，從而使DNA或RNA片段的5’-P末端轉(zhuǎn)換成5’-OH末端。但它不是單一的酶，而是一組同功酶。分為生殖細(xì)胞型、胎盤型、腸型和非特異組織型。29第二十九頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（一）檢測方法連續(xù)監(jiān)測法（二）參考區(qū)間女性：1-12歲<500U/L;>15歲40--150U/L男性：1-12歲<500U/L；12-15歲<750U/L；>25歲40--150U/L30第三十頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（三）臨床意義1、骨骼疾?。鹤冃涡怨茄?、佝僂病、軟骨病、骨惡性腫瘤、惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移等2、肝膽疾?。鹤枞渣S疸、肝硬化、肝壞死、原發(fā)性和繼發(fā)性肝癌時明顯升高；肝細(xì)胞性黃疸升高不明顯。3、腫瘤：乳腺癌、肺癌等4、其他疾?。杭谞钕偌凹谞钆韵俟δ芸哼M(jìn)、遺傳性ALP過多癥5、藥物：巴比妥類、抗生素等升高31第三十一頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五七、酸性磷酸酶（ACP）

酸性磷酸酶是一種在酸性條件下催化磷酸單酯水解生成無機(jī)磷酸的水解酶。人血清酸性磷酸酶的最適pH為4.5-7。ACP前列腺含量最多，主要存在于巨噬細(xì)胞，定位于溶酶體內(nèi)。ACP同工酶分為前列腺ACP和非前列腺ACP兩大類。32第三十二頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（一）檢測方法連續(xù)監(jiān)測法（二）參考區(qū)間成人總酶活性：0--9U/L前列腺ACP：0--3U/L（三）臨床意義血清中ACP測定主要作為前列腺癌的輔助診斷、療效觀察及預(yù)后判斷。33第三十三頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五八、淀粉酶（AMY）AMY屬于糖苷鏈水解酶。主要存在于胰腺和唾液腺中。有兩種同工酶，唾液型（S-AMY）和胰腺型（P-AMY）。正常人血清中AMY主要由肝臟產(chǎn)生，AMY分子量小，可通過腎小球?yàn)V過出現(xiàn)在尿液中。AMY是唯一能正常時出現(xiàn)于尿液中的血清酶。34第三十四頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（一）檢測方法對硝基酚麥芽七糖苷法（二）參考區(qū)間血清AMY：<220U/L尿AMY:≤1200U/L

35第三十五頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五（三）臨床意義1、急性胰腺炎和流行性腮腺炎。急性胰腺炎發(fā)病后2h血AMY開始升高，12-24h達(dá)高峰，2-5天降至正常。尿AMY于發(fā)病后12-24h開始升高，下降也比血清慢。因此急性胰腺炎后期測定尿AMY意義更大。2、急性闌尾炎、腸梗阻、胰腺癌、膽石癥、潰瘍病穿孔及嗎啡注射后3、血清與尿中同時減低主要見于肝炎、肝硬化、肝癌及急慢性膽囊炎。36第三十六頁，共四十一頁，編輯于2023年，星期五九、脂肪酶（LPS