第章免疫球蛋白

馮永堂第二章Immunoglobulin

--AntibodyPolyclonalantibody(pAb)

Monoclonalantibody(McAb)GeneticengineeringantibodyImmunoglobulin(Ig)

Ig是指具有抗體(Ab)活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與Ab相似的球蛋白。Ig與Ab:Ab是Ig,Ig不一定都是Ab。泌型Ig(SIg):如Ab等膜型Ig(mIg):如BCR等Ig類型第一節(jié)免疫球蛋白分子的結(jié)構(gòu)一.免疫球蛋白的基本Porter和Edelman-的研究證明了Ab的結(jié)構(gòu).“Y”型-S-S-連接的四肽鏈結(jié)構(gòu)(兩長兩短)(輕鏈)(重鏈)抗原抗原LLHHGeraldEdelmanRodneyPorter1917-1985(一)重鏈(H)與輕鏈(L)

長鏈為Heavychain(H)短鏈為Lightchain(L)μ鏈—IgMα鏈—IgAγ鏈–IgGδ鏈—IgDε鏈—IgEH分L分κ型λ型(二)V區(qū)（veriableregion）和C區(qū)(constantregion)V區(qū)--H的1/4和L的1/2近N端C區(qū)--H的3/4和L的1/2近C端鉸鏈區(qū)V區(qū)C區(qū)N端C端CDR1CDR2CDR3鉸鏈區(qū)V區(qū)與互補(bǔ)決定區(qū)

（complementaritydeterminingregion，CDR）VH和VL中各有3個(gè)區(qū)域氨基酸組成和排列順序高度可變稱高變區(qū)（hyperveriableregion,HVR）或CDR.HVR1=(CDR1),HVR2=(CDR2),HVR3=(CDR3).CDR之外的區(qū)域稱骨架區(qū)（frameworkregion,FR）（三）Ig的結(jié)構(gòu)域或功能區(qū)

結(jié)構(gòu)域指每條Ig肽鏈折疊形成的多個(gè)球型結(jié)構(gòu),每個(gè)約有110AA組成,一般具有相應(yīng)的功能(功能區(qū)).IgG,IgA,IgD:L有2個(gè),

H有4個(gè)

Lchain:VL,CLHchain:VH,CH1,CH2,CH3IgM,IgE:L有2個(gè),

H有5個(gè)

Lchain:VL,CLHchain:VH,CH1,CH2,CH3,CH4VL,VH（CDR)---抗原特異性結(jié)合部位,獨(dú)特型抗原決定簇部位CH1----------同種異型的遺傳標(biāo)記CH2,CH3(IgM)---補(bǔ)體C1q結(jié)合點(diǎn)，激活補(bǔ)體IgGCH2-------------通過胎盤IgGCH3-------------結(jié)合FcR發(fā)揮調(diào)理吞噬,介導(dǎo)ADCC。IgECH2和CH3----與肥大細(xì)胞和嗜堿性性粒細(xì)胞IgE的FcR結(jié)合,介導(dǎo)超I型敏反應(yīng)(四)鉸鏈區(qū)(hingeregion)：

適于V區(qū)同抗原的結(jié)合,含大量脯氨酸，富有彈性和伸展性，利于暴露補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn),鉸鏈區(qū)

是Ig亞類劃分的依據(jù).各功能區(qū)的作用:IgG

分子的四種亞類IgG1IgG4IgG3IgG2

二.Ig的立體結(jié)構(gòu)與Ig超家族Ig肽鏈有獨(dú)特折疊(fold)結(jié)構(gòu),屬β片層(β-sheet)結(jié)構(gòu),其走向與分子長軸平行.每個(gè)Ig折疊有兩個(gè)β片層,每個(gè)片層包括3-5個(gè)反平行的折疊股,兩個(gè)β片層中心的兩個(gè)半胱氨酸殘基之間有一對二硫鍵垂直連接,形成一”β-桶狀結(jié)構(gòu)”.凡凡有Ig獨(dú)特折疊結(jié)構(gòu)的分子,統(tǒng)稱為Ig超家族(immunoglobulinsuperfamily,IgSF)三.Ig的J鏈和分泌片四.Ig的水解片段

第二節(jié)抗體的異質(zhì)性抗體的的異質(zhì)性(heterogeneity)即Ig分子的不均一性。

異質(zhì)性可表現(xiàn)在Ig肽鏈的V區(qū)，也可表現(xiàn)在Ig肽鏈的C區(qū)。一.抗體V區(qū)和C區(qū)的異質(zhì)性（一）抗體V區(qū)異質(zhì)性不同的抗原表位可誘導(dǎo)產(chǎn)生同一類Ig,但同一類Ig識別抗原的特異性不同,這種不同關(guān)鍵是Ig的V區(qū)中HVR（CDR）的差異。

抗體V區(qū)的異質(zhì)性是抗體多樣性的主要原因。自然界抗原多樣性是導(dǎo)致抗體V區(qū)異質(zhì)性的主要原因。（二殃）抗體C區(qū)的刑異質(zhì)床性(1箱)不同孟抗原廁表位鐮可刺艇激機(jī)撕體產(chǎn)葉生不您同類狀型的等抗體(2辭)同一繼抗原揉表位汪刺激覺機(jī)體擺產(chǎn)生沉的抗僑體,其識索別抗徐原的謎特異滑性相寸同,但其柜重鏈崇與輕率鏈的C區(qū)可洞有差惱異。根據(jù)疾抗體C區(qū)的探不同卸可分菊：1.類(c森la斤ss新):且C轟H的不所同2.亞類(s湖ub辱cl急as葛s)亦:鉸鏈吊區(qū)的躍差異拆及H陶-S愛-S館-差異桂）如Ig感G分為Ig載G1用,2市,3蟻,43.型(t總yp銜e)桌:焦CL的不格同分孩：κ型λ型4.亞型(s返ub原ty大pe鞋):λCL的AA排列碑差異:內(nèi)λ1伸~4亞型Ig類、扣亞類辮、型劫、亞捉型都是抗體C區(qū)免祥疫原框性的扣差異腔所決籠定的匯，即IgC區(qū)抗間原表追位所勢決定的。應(yīng)用削抗不鞏同H和L鏈C區(qū)的寇抗體播可將Ig分為惑不同拋的血旅清型津。（1）同搜種型脹（is仿ot太yp意e)：同一拒物種焰所有塞個(gè)體啄同一賭類Ig共同顧具有箭的抗刑原特遣異性緒標(biāo)志擇。（2）同早種異見型（Al池lo傳ty副pe)：同一庫物種朗不同冠個(gè)體磚間IgC區(qū)具豎有的薦不同凡抗原豈特異菊性標(biāo)撥志。同種消型同種蘭異型二、Ig的獨(dú)午特型（id犧io不ty摧pe，Id）是指庭不同B細(xì)胞猜克隆葉產(chǎn)生呈的抗體V區(qū)上混所獨(dú)垮有的姥抗原匹特異漂性標(biāo)皂志，在TC續(xù)R/商BC仆R的V區(qū)上轉(zhuǎn)也有Id。決定Id的表杯位稱痕為獨(dú)特沈位（id督io何to暮pe）。Id表位辮可刺慰激異基種、堵同種暢異體稅及自撕體產(chǎn)領(lǐng)生抗Id抗體（an溫ti羊-id雨io襪ty俗pean扒ti仍bo肉dy，AI守d）。每一比種Ag表位他可誘棗導(dǎo)產(chǎn)袖生一辰種特督異性Ab，每仔一種谷特異枕性Ab都有杜各自希的Id。Id分布仙于Ig的VH和VL。Id主要參覆蓋湊抗體璃的抗皮原結(jié)標(biāo)合部外位，渣即CD曉R及接姐近這挑一部賺位的棄骨架江區(qū)(F悼DR征)部分（一）Id和AI漠d的分?jǐn)r類1、獨(dú)寨特型的分扮類按Id特異野性：分個(gè)尋體（現(xiàn)私有古）Id和公靠有（故交叉捕反應(yīng)印性）Id1）in鞏di裁vi恭vd脫alId（Id墓I）：某一攤特異Ab或TC話R/償BC偏R上V區(qū)所獨(dú)石有的Id。與DJ基因創(chuàng)編碼拴的CD錦R3關(guān)系民密切遺。2）cr谷os砌s－re迅ac暢ti搬ve請I堪d（CR延I或Id蛛X）：是功鑄能上假有關(guān)愚聯(lián)的Ig或TC睜R/飽BC疏R上V區(qū)所餡共有蔽的Id。2、抗娛獨(dú)特鉤型（AI果d）的分累類Bo攝na分類競法-根據(jù)AI填d與Id反應(yīng)瓜的特州點(diǎn)及AI趕d抗體遺（Ab汪2）的功錘能分：Ab登2、Ab添2β、Ab滅2、Ab灰2（1）Ab駝2：識別Ab恢1骨架鑄區(qū)相體關(guān)的滑獨(dú)特旬型。Ab辣2與Ab俱1結(jié)合魚不影雕響Ag與Ab煙1的結(jié)午合（用屬半?yún)部乖兎且肿咧菩訟b蕩2）?？删咿r(nóng)有促碼進(jìn)或蘆抑制Ab臣1克隆腸的增倒殖作及用。Ab2

表位Ab2

表位Ab1、TCR/BCR上的v區(qū)2）Ab帳2β：類似扔原始穩(wěn)的抗棉原表游位，可模棚擬抗倍原誘雄導(dǎo)的習(xí)特異環(huán)性抗軍體產(chǎn)喝生或期細(xì)胞傲免疫雄應(yīng)答(“內(nèi)應(yīng)歌像”呼作用企），校可抑得制Ab濤1與相關(guān)應(yīng)抗擴(kuò)原的蜜結(jié)合略反應(yīng)妨。Ab串2β與模從擬的競抗原之之間印在特坡定部名位有昌較高蚊的同谷源性孫。Ab謠2β可誘截導(dǎo)出化特異塑性與Ab柏1相同策的Ab槽3。表位Ab2β原始的抗原Ab2β模擬相似原始的抗原表位Ab1、TCR/BCR上的v區(qū)（3）Ab繞2可識葬別Ab欣1上與響補(bǔ)位蔽相關(guān)反的獨(dú)此特位且?？杉逡种艫b罷1與相脈應(yīng)抗孟原的職結(jié)合拉，屬坦半抗踩原抑漿制性Ab芳2。也具構(gòu)有調(diào)痕節(jié)作伍用，促進(jìn)屆或抑土制帶冠有相張應(yīng)Id細(xì)胞躲克隆野的增甜殖。Ab2表位Ab2Ab1、TCR/BCR上的v區(qū)Ab2

Ab1、TCR/BCR上的v區(qū)表位（4）Ab2Ab2又稱epibody，是一種雙特異性抗體。既可識別骨架區(qū)上的獨(dú)特位，同時(shí)又識別自身或外來抗原上的表位。該獨(dú)特型可能與某些自身免疫性疾病相關(guān)。Ab2

（二交）Id及AI旨d網(wǎng)絡(luò)B1B2B4B3EAb1Ab2Ab3Ab4Bn抗原Je盟rn菊e簡化匠的免矛疫網(wǎng)貨絡(luò)學(xué)鋒說示廈意圖3214激發(fā)ARC細(xì)胞（內(nèi)影像組）抗原反應(yīng)細(xì)胞（ARC組）Id反應(yīng)細(xì)胞組（IRC組）Id與ARC相同細(xì)胞（非特異平行組）外來抗原Id（三饑）Id和AI猴d網(wǎng)絡(luò)隙與免眠疫調(diào)裂節(jié)AgAb1Ab2(Ab2β)Ab2’(Ab2)AgAbAb3Ab3’內(nèi)影像作用抗Id抗體瞇在醫(yī)粗學(xué)中譯的應(yīng)門用1、抗泊獨(dú)特起型抗凍體與嶺疫苗制備Ab庸2β作為林抗原腳的模章擬物壓，代仁替病畜原體絡(luò)抗原屢誘導(dǎo)勻特異阻性免顯疫應(yīng)殲答，管即所溪謂抗獨(dú)昂特型茫疫苗(aI徑dva當(dāng)cc具ci問ne)aI薄dva潑cc沸ci灶ne的優(yōu)讓點(diǎn)：（1）不駕帶有竭傳染氣性物困質(zhì)（2）可寄大量可制備誘抗Id的單圣抗（3）某性些抗Id可模紡擬碳凈水化循合物榨性的見保護(hù)賢性抗餐源決場定族恭（而DN卷A重組麥技術(shù)謙無法屑實(shí)現(xiàn)既）(4設(shè))能誘蝴導(dǎo)比腔滅活睡病毒翅更為城有效餃的T細(xì)胞銅應(yīng)答（5）能肢誘導(dǎo)抗原決定規(guī)族特異濃性的抗獨(dú)需特型臂疫苗2、抗Id抗體售與某春些自垮身免陽疫病述發(fā)泊生有王關(guān)的撿實(shí)驗(yàn)軟研究重癥晨肌無逐力（MG）患者你體內(nèi)她除發(fā)駐現(xiàn)有煌抗Ac武hR的自萬身抗闖體外卵，還腹可能薄含有融針對Ac菠h抗體尾的抗Id抗體算（Ab蠢2）。Ab河2可作娃為Ac推h的模右擬物朝封閉倡神經(jīng)至肌肉火接頭噴的Ac滿hR，從而武導(dǎo)致施神經(jīng)淚肌肉扎接頭江功能林障礙倍，發(fā)珠生MG。3、抗Id抗體萌與腫筍瘤免騎疫治幕療－Le浪ry等應(yīng)生用雜院交瘤巷技術(shù)太制備紋了針世對病埋人結(jié)鋤節(jié)性薪淋巴踐瘤B細(xì)胞Ig的AI蓋d（4D判6)，獲得挪一定堵療效.鼠骨髓瘤細(xì)胞結(jié)節(jié)性淋巴瘤（B細(xì)胞瘤）融合淋巴細(xì)胞雜交瘤分泌mAb（Id）B免疫小鼠脾細(xì)胞（分泌AId）鼠骨髓瘤細(xì)胞融合淋巴細(xì)胞雜交瘤分泌mAb（AId,4D6)體內(nèi)注射治療B細(xì)胞瘤C溶解ADCC調(diào)理吞噬抗AId（4D6)治療病人結(jié)節(jié)性淋巴瘤B細(xì)胞B死亡B第三左節(jié)Ig的生拋物合頃成與灰表達(dá)(自修)第四這節(jié)Ig的生綁物學(xué)分特性一、Ig的主拋要生俯物學(xué)割功能（一盤）V區(qū)的比功能1、識球別結(jié)輛合抗花原：發(fā)噸揮體合液免學(xué)疫效域應(yīng)如:抗毒州素(Ab)具+毒素--牲--坐--句-中和抹毒素醋的毒翼性抗病鎮(zhèn)毒抗差體+病毒--我--盟--求-阻止托病毒甲感染2、免疫勵調(diào)節(jié)：Id和AI陳d網(wǎng)絡(luò)3、超池抗體錄活性指抗郵體可照在抗旅原結(jié)牽合部謝位以鋸?fù)獾臉?gòu)部位宅（V區(qū)的仙骨架張區(qū)）彼與多止種配外體結(jié)電合，游從而貫發(fā)揮辱多種柿功能罷。（二飯）C區(qū)的蹤蝶功能1、激旁活補(bǔ)需體—Ig巧M/團(tuán)Ig塔G1膏,2奴,3抗體+細(xì)胞(菌)+補(bǔ)體--溶解箏細(xì)胞(菌)2、結(jié)顆合細(xì)算胞表枝面的FC受體--酸-介導(dǎo)延其它彈效應(yīng)（1）調(diào)魯理作謠用（op恢so不ni谷za滴ti右on）:（2）AD因CC作用(A淡nt遭ib趟od互y-戒de傳pe煮nd丈en梳t(yī)冠ce偉ll碑-m棗ed此ia杜te丘dcy景to顆to翼xi陣ci北ty):有FC受體廢的殺黨傷細(xì)室胞(M芳Ф、中寸性粒爐、NK騎)，借助傻識別FC段殺緩傷被Ig策G包被畢的靶抱細(xì)胞跪。（3）Fc?R介導(dǎo)Ⅰ型超若敏反舅應(yīng)（4）過換胎盤掩及粘稠膜二、各類Ig的特?fù)湫耘c旨作用Ig聽G：1.含量真最高戒、白分布扣最廣2.再次茂應(yīng)答欄的主膠要Ab3.活化霜補(bǔ)體撓、4.結(jié)合哈吞噬窯細(xì)胞欣上的Fc每R介導(dǎo)調(diào)理勿吞噬5.抗感捏染、贏中和頂毒素番的主賀要Ab6.過胎統(tǒng)盤7.結(jié)合SP寧A8.介導(dǎo)AD圖CCIg掃M(jìn)1.分子呆量最悔大（巨舍球蛋浴白）2.五聚怪體形爽式存(血清旁）3.產(chǎn)生挽最早4.活化懷補(bǔ)體豬能力災(zāi)最強(qiáng)5.天然右的血維型抗偶體6.血管姜內(nèi)抗下感然Ab（早崖期防過御感淺染）7.膜Ig-B卻CR成分Ig享A兩種陽形式拜存在單體-Ig脆A（血推清型作）二聚吧體-SIg瓜A（分義泌型思）,2．SIg辜A可過粘肅膜、洲嬰兒搖可經(jīng)佩初乳亦獲得3．SIg貌A是粘膜朵、腺術(shù)體分聯(lián)泌液本中主糞要Ab--帶--發(fā)揮重粘膜賣局部敗免疫芒作用Ig礦D1咸.鉸鏈晨區(qū)最推長、朵半壽嘗期較鉤短（3天）2.mI罵gD是成國熟B細(xì)胞咱的BC帶RIg戚E1．血值清含壯量最璃低2．親捆細(xì)胞宣性強(qiáng)3．介魂導(dǎo)Ⅰ型超肆敏反項(xiàng)應(yīng)4．抗洲寄生質(zhì)蟲感帥染第五像節(jié)Ig基因側(cè)超家覺族凡有卷與Ig結(jié)構(gòu)工（獨(dú)拴特折寨疊結(jié)序構(gòu)）憂相似千，遺盒傳基拜因同聲源的副蛋白檔質(zhì)分弊子,統(tǒng)稱混為Ig超家篩族(i逆mm開un姨og格lo脫bu供li妄nsu正pe挺rf強(qiáng)am膠il記y,Ig撕SF)。編碼Ig鼠SF的基沙因稱壺為Ig基因喪超家敢族。

IgSF種類繁多、分布廣泛、功能各異。如：Ig、MHC分子、Ag受體、某些CD分子、黏附分子、

IgFcR、CKR等一代Ab(pA極b)：人工扒免疫抹技術(shù)槽制備二代Ab濫(m受Ab)：雜交俗瘤技刷術(shù)制悔備三代Ab(基因驗(yàn)工程Ab)：分子拖生物磚學(xué)技慮術(shù)制認(rèn)備第六充節(jié)人工制備Ab技術(shù)人工糟抗體尋（Ab）技術(shù)(1功)(2)(1)+調(diào)取mAb基因基因改造改造基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞表達(dá)Geneticengineeringantibody(3)一.多克召隆抗失體(P哪ol丙yc鏈lo針na鳴l奏an嘩ti辮bo芬dy維)1.概念給動?jì)鹞锝右卜N抗紅原所剖獲得伯的免控疫血尤清或取抗血港清是撞多種油抗體冤的混河合物,它是乘由多詠種抗游原決洪定簇遭刺激君多株B細(xì)胞丸增殖鵲分化團(tuán)所產(chǎn)心生的,稱為揀多克男隆抗險(xiǎn)體.免疫血清抗原獲得接種1243B1B2B3B4(含Ab典1,啟2,場3,叮4等)2.多克云隆抗做體的倍應(yīng)用免疫粉學(xué)診監(jiān)斷被動尋免疫殲治療鬧和緊桿急預(yù)效防3.存在混問題特異會性差,用于慎免疫悄學(xué)檢般測容鹿易出拋現(xiàn)交膝叉反靠應(yīng)異質(zhì)性問盛題,容易撓出現(xiàn)捏過敏二.單克寄隆抗價(jià)體(M菌on賠oc拒lo泊na奏l(xiāng)an課ti沉bo長dy繡,M吧cA消b)1.概念:由識普別一嚼種Ag表位喘的B細(xì)胞依克隆悼產(chǎn)生忍的同份源性Ab，稱mA蕉b?？捎蓡屉s交留瘤技抗術(shù)生位產(chǎn)。19宮75年，Ko往hl估er和Mi籍ls信te叨in雜交埋瘤技蛙術(shù)的某建立,使抗蠅體技促術(shù)得廊到了臭廣泛遙的應(yīng)浴用和股發(fā)展--逼--細(xì)胞鞠工程盲產(chǎn)生祝的鼠睡源單野克隆沖抗體GeoregesKohlerCesarMilste基本黨原理致敏括的B淋巴側(cè)細(xì)胞禽能分壩泌特處異性垂抗體終，但隆這些她細(xì)胞蠟不能族在體測外存必活。骨髓借瘤細(xì)漢胞可殊在體悠外大面量繁趕殖，餓但不京能分豎泌特巧異性晨的抗慌體.將骨喇髓瘤例細(xì)胞瞞與B淋巴脊細(xì)胞毯融合喬，則棕融合縫的雜智交瘤兩細(xì)胞翼既具慘有腫鐵瘤細(xì)命胞易億繁殖門的特聚性，千又具題有B淋巴俱細(xì)胞創(chuàng)能分雕泌特陳異性娃抗體吳的能過力?？寺〗┗臏y雜交魂瘤細(xì)決胞能膜夠分顛泌針位對單列一抗宅原決現(xiàn)定簇場的單必克隆蒜抗體乘。2.書B細(xì)胞繭雜交喉瘤的蜻類型骨髓槳瘤細(xì)姻胞B細(xì)胞小鼠---常--脅--還--圍--孟--小鼠大鼠--院--鑰--妨--殼--陶--深-大鼠小鼠--抽--畢--纖--奏--的--悲-人人--槐--裁--芹--礦--顏--督--訪--人3.雜交作瘤技女術(shù)流蛇程陽性克隆篩選陽性克隆陽性克隆Ab檢測鑒定Ag免疫小鼠脾細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞PEG融合雜交瘤細(xì)胞存活死亡死亡未融合的脾細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞未融合的瘤細(xì)胞融合結(jié)果接種小鼠腹腔制備單抗擴(kuò)增培養(yǎng)制備單抗HAT選擇培養(yǎng)凍存

(2件)細(xì)胞錯融合融合托后細(xì)擋胞的執(zhí)類型:未融賽合的半脾細(xì)烘胞雜交秧瘤細(xì)昨胞未融榨合的弄瘤細(xì)盯胞雜交瘤細(xì)胞PEG脾細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合Ag免疫小鼠4.單克子隆抗禽體的茶特性結(jié)構(gòu)魂均一校、型歇別相純度耀高、用特異密性強(qiáng)效價(jià)率高、滅可體肚外連蔑續(xù)生春產(chǎn)、診斷橡上--堤-避免岡交叉閣反應(yīng)治療繁上--采-制備鵝生物姐導(dǎo)彈5姨.單克朱隆抗蘿體在撲醫(yī)學(xué)踐上的扁應(yīng)用用作要診斷垮試劑1)檢測靈細(xì)胞哄表面圍分子彎，區(qū)紗分不巾同分甚化歪階段課的細(xì)腰胞，供如歲鑒別蠅淋巴報(bào)細(xì)胞肆亞群蠻。2)鑒定漆病原止體，戀準(zhǔn)確峰診斷育傳染蓄病。3)用于翅各種套腫瘤游的診捷斷和過分型4)各種有細(xì)胞漂因子仇的含巖量測哥定5)用于揭測定捉體內(nèi)眠激素罰含量炸，判杏斷勾內(nèi)殘分泌還的功邁能狀恢態(tài)用作肺研究襖工具純化止抗原分析壘和探棋查抗鋤原結(jié)隨構(gòu)分析繩抗原變決定電簇分峰子的貪功能用于朗疾病暑的治跌療抗T細(xì)胞楚單抗袍，用贏于移桑植排傳斥反夕應(yīng)的量防治抗細(xì)濾胞因昌子單廳抗用狗于自澇身免美疫性朗疾病賢的治罩療抗腫妹瘤單遺抗用揀于腫助瘤的生物堅(jiān)導(dǎo)向治療異種蒼抗體崗反應(yīng)鼠源磨性單戚抗用債于人顧體，餐抗-單抗活的產(chǎn)甩生.導(dǎo)致語異源肉性蛋披白超件敏反半應(yīng).單抗姐體用泛于免脂疫治灰療存扯在的楊問題三.基因切工程癥抗體(G譽(yù)en淘et鹽ic陡e枝ng令in織ee訴ri榴ng低a省nt辜ib通od俗y)概念靈：根據(jù)坡研究珠者的唱意圖湯，采縫用基切因工作程方筋法，大在基員因水樹平，謊對免匹疫球面蛋白摔基因演進(jìn)行狐切割悶、拼幣接或邁修飾境后構(gòu)灘建成跟抗體謝基因教載體,導(dǎo)入余受體棉細(xì)胞浴進(jìn)行文表達(dá)崗，產(chǎn)河生新薪型抗皂體?；蛞肮こ萄蹩贵w告類型主要劃包括嵌合伐抗體甩（ch勇im屢er傍ican蜘ti寫bo鹿dy）改型災(zāi)抗體菠（re襪sh嗽ap方edan禍ti鎖bd脈y）小分傳子抗鍬體(mi伴no貼mo汗le匆cu忠la舉yAb)包括:Fa姨b片段AbFv抗體桌及單鏈葉抗體勻（Si伐ng舉le然c雁ha驚in鎮(zhèn)F傍van復(fù)ti暈bo露dy鑰,s株cF烈v）雙鏈掛抗體值（Di陣ab訊od囑y）雙價(jià)皮抗體么或雙商特異位性抗翼體（bi剃sp矩ec控if仁ican況ti巴bo澇dy）重組Ab--慶--免疫禮毒素犧等(一)改造瘡鼠源浸性抗插體1、嵌呀合抗料體(ch覆im睡er床ican墻ti尋bo兵dy麗)從雜跑交瘤低細(xì)胞帶分離鋸出功柱能性Ig可變摧區(qū)(V埋)基因遼，與饅人Ig恒定黨區(qū)(C但)基因顏連接紀(jì)，插盾入適測當(dāng)表袋達(dá)載獄體，衰轉(zhuǎn)染劉宿主灰細(xì)胞首，表嚴(yán)達(dá)人-鼠嵌地合抗少體。嵌合疏抗體免疫球蛋白基因載體的構(gòu)建H鏈嵌合載體L鏈嵌合載體共轉(zhuǎn)染細(xì)胞抗體分泌細(xì)胞

Pr鼠VH人CHPr鼠VL人CL啟動子19吵84（Morr寫is候on）鼠VL人CL人CH鼠VH鼠VL

鼠源McAb人Ig

V區(qū)基因----C區(qū)基因嵌合體嵌合酬抗體特點(diǎn)印：1）保由留鼠鉆單抗密特異屈性2）降方低對僚人體稍免疫岔原性3）體針內(nèi)半暑衰期皆延期4）有縮慧更強(qiáng)耳活性5）可偶更換Ig類、娛型、萌亞型6）體則外傳較代穩(wěn)判定7）產(chǎn)弱量高說、商寇業(yè)價(jià)哲值高抗乳Ca抗肺Ca抗肺Ca抗結(jié)腸Ca抗ECA抗HBsAg抗TCR-

α、β抗乙惱V等等產(chǎn)品2、尚改型寇抗體（re竄sh蛇ap媽edAb）或人源露化抗鴿體(h軋um螺an狀iz哪edAb)用CD欲R移植德技術(shù)槐，將沸人-鼠V區(qū)Ig局CD極R置換羽，保蒸留人FR刃,產(chǎn)生致的抗狡體，亦稱業(yè)為CD洞R移植爐抗體念。即改型亡抗體幣或人買源化熔抗體暢。改型茶抗體洲對人艘體免翼疫原霧性比齡嵌合鄙抗體娃顯著舌減弱買。鼠單克隆抗體

人抗體

人源化抗體（改型抗體）CDR序列

CDR序列

特點(diǎn)奮：1）最墊大限番度克逆服鼠卸源單步抗在人體院的免顫疫原2）應(yīng)臥用價(jià)忍值高瘋?cè)纾何渲委熋畎籽m病缺點(diǎn)嬌：技術(shù)沉難度歪大3、小分雕子抗孩體能與剪抗原所結(jié)合草的抗掌體小澤分子拜片段慮稱為這小分斤子抗細(xì)體。包括Fa若b、Fv及單己鏈抗享體（Sc晝F園v）、稼雙特漸異性開抗體雅、單概區(qū)抗粗體（H鏈V區(qū)單迫鏈）啦等。優(yōu)點(diǎn):分子補(bǔ)量小鐮，免查疫原刷性弱,滲透閉力強(qiáng)萬。(1刃)F潑ab片段鵝抗體途：Fa秤b片段邪由H鏈VH根-C預(yù)H1段和娃完整L鏈通過伶二硫計(jì)鍵形踩成的紙異二日聚體腎，僅蜻含一災(zāi)個(gè)抗沾原結(jié)蜘合位即點(diǎn)。(用木誦瓜水破解酶占消化讓抗體Ig蛙G可獲誕得2個(gè)Fa怨b片段)。免疫球蛋白基因載體的構(gòu)建H鏈表達(dá)載體L鏈表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染細(xì)胞抗體分泌細(xì)胞PrVHCH1PrVLCLVHVLCL-S-S-CH1Fa諷b抗體待分子器的制攀備(2)單域抗體(singledomainantibody)僅有VH或VL單一功能結(jié)構(gòu)域組成，為單體Ab分子1/12。VHVL僅有VH挽-C剝H1段組憂成，類為單癥體Ab分子1/江6。(3信)F餅v片段VHCH1用適濱當(dāng)?shù)倪€接頭嶺蛋白側(cè)基因抬將L鏈和H鏈的V區(qū)基插因連絕接起喪來，轉(zhuǎn)染雖表達(dá)使之際形成屈單一最的多貌肽鏈則，稱老為單壓鏈抗渠體（si獲ng立le間c老ha奶in層F柴v,Sc趟Fv）。完整Ab分子1/騰6。（4）單鏈我抗體(s斬in訂gl區(qū)e折ch困ai數(shù)n屬an焦ti穿bo衫dy們)優(yōu)點(diǎn):分子偷量小糾，免攜疫原錄性弱,滲透斤力強(qiáng)慚。缺點(diǎn):是無減抗體C區(qū)，猴不能賽介導(dǎo)毫抗體民的其泰它生落物學(xué)福效應(yīng)圖。用途:可用曉于腫貪瘤的追藥物劑導(dǎo)向聲治療中和筆毒素侮治療腫瘤脹的影陸像分屠布診典斷制備喚診斷木用蛋貫白生濱物芯洪片VHVL5、最惱小識恰別單扎位(mi衣ni耐ma稀l咳re耕co配gn世it謀io園nun惹it陷s,乞MR譽(yù)U)僅有頓單個(gè)CD瘋R構(gòu)成架，分掀子量畏約為扎完整Ab分子讓的1%。6、雙具價(jià)小呼分子由抗體將連曬接Sc睡Fv的接鹽頭蛋叮白縮刪短VHVL7、雙碰特異歐性抗找體(bi燦sp聲ec練if浪ican迎ti鞋bo芽dy碗,Bs耕Ab)Bs暈Ab也稱廳雙功補(bǔ)能抗荷體或弊雜交苦抗體紐奉，為吃非天訪然抗來體。繞其兩崗個(gè)抗?jié)Y(jié)攪合部興位具當(dāng)有不惑同的妖特異紙性，紐奉因此饒，化打?qū)W結(jié)咬構(gòu)上扯雖是算雙價(jià)其的，側(cè)結(jié)合啊抗原題的功丸能卻特是單餅價(jià)的俯。Bs節(jié)Ab用途建：由于針其雙再特異胳性，染它可著以同考時(shí)與類兩種再抗原醬發(fā)生馳發(fā)應(yīng)昂并使刮之交仔聯(lián)，鍵因而線可介料導(dǎo)標(biāo)柄記物揪與靶則抗原壩結(jié)合爪，或崗使某哥種效濟(jì)應(yīng)因浸子定械位于膏靶細(xì)巨胞，滾在介濟(jì)導(dǎo)腫穗瘤的苗細(xì)胞得殺傷展中尤頌為有蕩用。Bs趕Ab制備鄉(xiāng)豐方法1)化學(xué)凳交聯(lián)Bs謊AbBs役Ab制備玻始于辣化學(xué)陳交聯(lián)磚。分諒別分研離純壯化兩閃種親敵本單涼抗,采用貓還原幻玉劑使賓其解孩鏈,獲得餃單價(jià)涼抗體走。之駛后采殊用異墻雙功違能交撫聯(lián)劑,把兩廟種具勉有不友同抗事原特著異性拋的單找價(jià)抗志體或演其片與段交喪聯(lián)起尿來。2)細(xì)胞區(qū)工程Bs乘Ab通過扇細(xì)胞滾融合縣的方遠(yuǎn)法制觀備Bs挖Ab?？娠L(fēng)將分繩泌單攝抗的燭雜交衛(wèi)瘤與奏經(jīng)免錘疫的掘脾細(xì)坊胞融宋合，丈或使紫兩種務(wù)分泌細(xì)不同哭特異捆性單吩抗的墻雜交岡瘤彼柴此融偏合。3)基因賣工程Bs擁Ab多采活用抗腦體分遇子片誘段，釀如Fa錘b、Fv或Sc授Fv，經(jīng)溫基因延操作戴修飾及后，靈或體麗外組懶裝為Bs扇Ab，或博直接芽表達(dá)多分泌葉型的Bs年Ab。Bs臥Ab作用架原理Bs妹Ab介導(dǎo)仰的殺冰傷作凡用機(jī)名制（a)庭,Bs勸Ab橋連淘效應(yīng)爸細(xì)胞它和靶壩細(xì)胞猾；(b裕),連接高的觸撞發(fā)分勁子啟悠動細(xì)則胞毒倆反應(yīng)滑；(c誘)丹,效應(yīng)碼細(xì)胞欠對靶筐細(xì)胞涂產(chǎn)生貍致死鬧性殺淘傷反休應(yīng)?？笻ER2/neu×抗CD16BsAbBsAb

CD16HER2/neuNK細(xì)胞腫瘤學(xué)細(xì)胞（二工）噬親菌體漢抗體(p皺ha穿ge瓦a莫nt拾ib欠od謀y)將體廉外克回隆的命抗體戰(zhàn)基因唱片段控插入宗噬菌筆體載策體，哄轉(zhuǎn)染閉相應(yīng)干細(xì)菌以進(jìn)行增表達(dá)雄，然臨后用怒抗原收篩選循即可志獲得喂特異賣的單睛克隆離噬菌下體抗庫體。刃利用沃這一詞技術(shù)折可以貝得到板完全味人源蘋性的墓抗體懶。(三)胞內(nèi)摔抗體（in尼t(yī)r轉(zhuǎn)ab共od陰y）指借流助基加因工船程手光段，放獲得注僅在殊細(xì)胞吧內(nèi)表綁達(dá)并笑作用洋于胞忌內(nèi)靶征分子扒的抗閉體或勝其某墨一抗書體片唱斷（辣多為Sc