《生物化學(xué)》第七版

程稱

生物化學(xué)Biochemistry生物化學(xué)是一門基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)必修課程，是研究生物體內(nèi)化學(xué)分子與化學(xué)反應(yīng)的科個領(lǐng)域。隨著近代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，越來越多地將生物化學(xué)的理論和技術(shù)應(yīng)用于疾病課的預(yù)防、診斷和治療，從分子水平探討各種疾病的發(fā)生發(fā)展機制，已成為當代醫(yī)程學(xué)研究的共同目標。近年來，對人們十分關(guān)注的惡性腫瘤、心腦血管疾病、免疫簡性疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等重大疾病發(fā)病機制進行了分子水平的研究取得了豐碩成介果?？梢韵嘈?，隨著生物化學(xué)與分子生物學(xué)（是生物化學(xué)的重要組成部分，是其發(fā)展和延續(xù)）進一步發(fā)展，將給臨床醫(yī)學(xué)的診斷和治療帶來全新的理念。因此，學(xué)習和掌握生物化學(xué)知識，除理解生命現(xiàn)象的本質(zhì)與人體正常生理過程的分子機制外，更重要的是為進一步學(xué)習基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)其它課程和臨床醫(yī)學(xué)打下扎實的生物化學(xué)基礎(chǔ)。1、教師必需嚴肅認真地備課，精通本學(xué)科的內(nèi)容，同時必需熟悉相關(guān)課程，教對學(xué)中做到能宏觀與微觀相結(jié)合，形態(tài)與功能相結(jié)合，基礎(chǔ)與臨床相結(jié)合。教2、教師必需深入研究教學(xué)法，根據(jù)各專業(yè)培養(yǎng)目標和課程設(shè)置目標認真研究教師學(xué)內(nèi)容，分層次分專業(yè)教學(xué)，充分發(fā)揮學(xué)生的主體作用，激發(fā)其求知欲望，培養(yǎng)的學(xué)生的自學(xué)能力。要3、在教學(xué)過程中，教師應(yīng)注重學(xué)生綜合分析、解決問題能力和實踐技能的培求養(yǎng)，注重學(xué)生創(chuàng)新意識和思想品德的培養(yǎng)。教材查錫良主編.生物化學(xué).第7版.人民衛(wèi)生出版社選用參考參考書籍：書FengZuohua,QuShen.BiochemistryandMolecularBiology.PEOPLE,S籍MEDICALPUBLISHINGHOUSE與GERALDKARP.CELLANDMOLECULARBIOLOGY(CONCEPTSAND常EXPERIMENTS).4thedition.HigherEducationPress用宋今丹.醫(yī)學(xué)細胞細胞生物學(xué).人民衛(wèi)生出版社網(wǎng)網(wǎng)絡(luò)課件與常用網(wǎng)址：地址授課章節(jié)緒論第一章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能2009級授課對象口腔、臨本3學(xué)時班

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2010年830—91授課地點5222、5226教室 教材 見首頁掌握：生物化學(xué)、生物大分子和分子生物學(xué)的概念。蛋白質(zhì)元素組成及教學(xué)及其應(yīng)用；蛋白質(zhì)分離純化的方法及其基本原理。目的熟悉：當代生物化學(xué)研究的主要內(nèi)容。各種氨基酸的結(jié)構(gòu)；蛋白質(zhì)的分要求類。了解：生物化學(xué)的發(fā)展簡史、生物化學(xué)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系。多肽鏈氨基酸序列分析；蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)測定。重點：教學(xué)蛋白質(zhì)元素組成及其特點。氨基酸的種類、基本結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)。蛋白重點質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)與高級結(jié)構(gòu)，肽鍵、肽單元、肽平面的概念。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)難點與功能的關(guān)系；蛋白質(zhì)組學(xué)概念，蛋白質(zhì)的主要理化性質(zhì)及其應(yīng)用。蛋白質(zhì)分離純化的方法及其基本原理難點：蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系；氨基酸序列分析及空間結(jié)構(gòu)測定。教學(xué)大課系統(tǒng)講授方法教具 多媒體課件輔以板緒論第一節(jié)生物化學(xué)發(fā)展簡史一、敘述生物化學(xué)階段二、動態(tài)生物化學(xué)階段三、分子生物學(xué)時期四、我國科學(xué)家對生物化學(xué)發(fā)展的貢獻第二節(jié)當代生物化學(xué)研究的主要內(nèi)容第三節(jié)生物化學(xué)與醫(yī)學(xué)一、生物化學(xué)已成為生物學(xué)各學(xué)科之間、醫(yī)學(xué)各學(xué)科之間相互聯(lián)系的共同語言二、生物化學(xué)為推動醫(yī)學(xué)各學(xué)科發(fā)展作出了重要貢獻授課第一章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能提綱第一節(jié)蛋白質(zhì)的分子組成20L-α-二、氨基酸可根據(jù)側(cè)鏈接構(gòu)和理化性質(zhì)進行分類三、20第二節(jié)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)一、氨基酸的排列順序決定蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)二、多肽鏈的局部主鏈構(gòu)象為蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)三、在二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上多肽鏈進一步折迭形成蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)四、含有兩條以上多肽鏈的蛋白質(zhì)具有四級結(jié)構(gòu)五、蛋白質(zhì)的分類六、蛋白質(zhì)組學(xué)第三節(jié)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系一、蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)是高級結(jié)構(gòu)與功能的基礎(chǔ)二、蛋白質(zhì)的功能依賴特定空間結(jié)構(gòu)第四節(jié)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)二、蛋白質(zhì)具有膠體性質(zhì)三、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)破壞而變性四、蛋白質(zhì)在紫外光譜區(qū)有特征性吸收峰五、應(yīng)用蛋白質(zhì)呈色反應(yīng)可測定蛋白質(zhì)溶液含量第五節(jié)蛋白質(zhì)的分離、純化與結(jié)構(gòu)分析一、透析及超濾法可去除蛋白質(zhì)溶液中的小分子化合物二、丙酮沉淀、鹽析及免疫沉淀是常用的蛋白質(zhì)沉淀方法三、利用荷電性質(zhì)可用電泳法將蛋白質(zhì)分離四、利用相分配或親和原理可將蛋白質(zhì)進行層析分離五、利用蛋白質(zhì)顆粒沉降行為不同可進行超速離心分離教學(xué)主要內(nèi)容備注教學(xué)主要內(nèi)容備注緒論20mins生物化學(xué)就是生命的化學(xué)。它是研究活細胞和有機體中存在的各種化學(xué)分子及其所參與的化學(xué)反應(yīng)的科學(xué)。5mins分子生物學(xué)：是研究生物大分子結(jié)構(gòu)、功能及其基因結(jié)構(gòu)、表達與調(diào)控機制的科學(xué)。5mins一、生物化學(xué)發(fā)展簡史25二、生物化學(xué)研究內(nèi)容mins1．生物分子的結(jié)構(gòu)與功能202．物質(zhì)代謝及其調(diào)節(jié)mins3．遺傳信息的傳遞及其調(diào)控 5三、生物化學(xué)與醫(yī)學(xué) 20生物化學(xué)與分子生物學(xué)在生命科學(xué)中占有重要的地位 mins生物化學(xué)的理論與技術(shù)已滲透到醫(yī)學(xué)科學(xué)的各個領(lǐng)域 10生物化學(xué)的發(fā)展促進了疾病病因、診斷和治療的研究 mins第一章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能 10一、蛋白質(zhì)(protein)是由許多氨基酸(aminoacids)通過肽鍵(peptidebond)mins蛋白質(zhì)是細胞的重要組成部分，是功能最多的生物大分子物質(zhì)，幾乎在所有的生命過程中起著重要作用：1）5作為生物催化劑，2）代謝調(diào)節(jié)作用，3）免疫保護作用，4）物質(zhì)的轉(zhuǎn)運和存儲，5）運動與支持作用，6）參10與細胞間信息傳遞。 mins二、蛋白質(zhì)的分子組成 5蛋白質(zhì)的元素組成主要有C、H、O、N和S，各種蛋白質(zhì)的含N量很接近，平均16%。 20通過樣品含氮量計算蛋白質(zhì)含量的公式：蛋白質(zhì)含量(g%)=含氮量(g%)×6.25 mins組成蛋白質(zhì)的基本單位——L-a-氨基酸：種類、三字英文縮寫符號、基本結(jié)構(gòu)。 10分類（非極性脂肪族氨基酸、極性中性氨基酸、芳香族氨基酸、酸性氨基酸、堿性氨基酸）。 mins理化性質(zhì)（兩性解離及等電點、紫外吸收、茚三酮反應(yīng)）。 肽鍵是由一個氨基酸的-羧基與另一個氨基酸的-氨基脫水縮合而形成的化學(xué)鍵。肽、多肽鏈；肽鏈的主鏈及側(cè)鏈；肽鏈的方向（N-末端與C-末端），氨基酸殘基； 5生物活性肽：谷胱甘肽及其重要生理功能，多肽類激素及神經(jīng)肽。 20三、蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)

mins蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu) 概念：蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)指多肽鏈中氨基酸的排列順序。 15主要化學(xué)鍵——肽鍵。二硫鍵的位置屬于一級結(jié)構(gòu)研究范疇。

mins蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)殘基側(cè)鏈的構(gòu)象。主要化學(xué)鍵：氫鍵肽單元是指參與組成肽鍵的6個原子位于同一平面，又叫酰胺平面或肽鍵平面。它是蛋白質(zhì)構(gòu)象的基本結(jié)構(gòu)單位。元、、芳香族氨基酸、酸性氨基酸、堿性氨基酸）、四種主要結(jié)構(gòu)形式（α螺旋、β折疊、β轉(zhuǎn)角、無規(guī)卷曲）及影響因素。m蛋白質(zhì)分子中，二個或三個具有二級結(jié)構(gòu)的肽段，在空間上相互接近，形成一個具有特殊功能的空間構(gòu)象，被稱為模體(motif)。蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)概念：整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對空間位置。即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置。主要次級鍵——疏水作用、離子鍵（鹽鍵）、氫鍵、范德華力等。結(jié)構(gòu)域（domain）：大分子蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)?？煞指畛梢粋€或數(shù)個球狀或纖維狀的區(qū)域，折迭得較為緊密，各行其功能，稱為結(jié)構(gòu)域。分子伴侶：通過提供一個保護環(huán)境從而加速蛋白質(zhì)折迭成天然構(gòu)象或形成四級結(jié)構(gòu)的一類蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)每條具有完整三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈，稱為亞基(subunit)。蛋白質(zhì)分子中各亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用，稱為蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。各亞基之間的結(jié)合力——疏水作用、氫鍵、離子鍵。蛋白質(zhì)的分類：根據(jù)組成分為單純蛋白質(zhì)和結(jié)合蛋白質(zhì)，根據(jù)形狀分為球狀蛋白質(zhì)和纖維狀蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)基本概念：一種細胞或一種生物所表達的全部蛋白質(zhì)，即“一種基因組所表達的全套蛋白質(zhì)”。研究技術(shù)平臺研究的科學(xué)意義。四、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系一級結(jié)構(gòu)是高級結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)；氨基酸序列提供重要的生物進化信息；氨基酸序列改變可能引起疾病。蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系肌紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能。血紅蛋白結(jié)構(gòu)、運輸O2功能，氧飽和曲線。協(xié)同效應(yīng)：一個寡聚體蛋白質(zhì)的一個亞基與其配體結(jié)合后，能影響此寡聚體中另一個亞基與配體結(jié)合能力的現(xiàn)象，稱為協(xié)同效應(yīng)。變構(gòu)效應(yīng)：凡蛋白質(zhì)（或亞基）因與某小分子物質(zhì)相互作用而發(fā)生構(gòu)象變化，導(dǎo)致蛋白質(zhì)（或亞基）功能的變化，稱為蛋白質(zhì)的變構(gòu)效應(yīng)。蛋白質(zhì)構(gòu)象改變可引起疾病如瘋牛病等。五、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)兩性解離pHpH膠體性質(zhì)變性、復(fù)性、沉淀及凝固蛋白質(zhì)的變性(denaturation)：在某些物理和化學(xué)因素作用下，蛋白質(zhì)分子的特定空間構(gòu)象被破壞，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。]變性的本質(zhì)：破壞非共價鍵和二硫鍵，不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。造成變性的因素：如加熱、乙醇等有機溶劑、強酸、強堿、重金屬離子及生物堿試劑等。蛋白質(zhì)變性后的性質(zhì)改變：溶解度降低、粘度增加、結(jié)晶能力消失、生物活性喪失及易受蛋白酶水解。變性的蛋白質(zhì)易于沉淀，有時蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀，但并不變性。蛋白質(zhì)的凝固作用(proteincoagulation)：蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變成比較堅固的凝塊，此凝塊不易再溶于強酸和強堿中。紫外吸收（280nm）、呈色反應(yīng)（茚三酮反應(yīng)、雙縮脲反應(yīng)）六、蛋白質(zhì)的分離純化與結(jié)構(gòu)分析蛋白質(zhì)的分離純化透析(dialysis)：利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開的方法。超濾法：應(yīng)用正壓或離心力使蛋白質(zhì)溶液透過有一定截留分子量的超濾膜，達到濃縮蛋白質(zhì)溶液的目的。0～4℃10沉淀后，應(yīng)立即分離。除了丙酮以外，也可用乙醇沉淀。鹽析：(saltprecipitation)是將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液，使蛋白質(zhì)表面電荷被中和以及水化膜被破壞，導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。免疫沉淀：將某一純化蛋白質(zhì)免疫動物可獲得抗該蛋白的特異抗體。利用特異抗體識別相應(yīng)的抗原蛋白，并形成抗原抗體復(fù)合物的性質(zhì)，可從蛋白質(zhì)混合溶液中分離獲得抗原蛋白。pI電場中泳動而達到分離各種蛋白質(zhì)的技術(shù),稱為電泳(elctrophoresis)。層析原理：待分離蛋白質(zhì)溶液（流動相）經(jīng)過一個固態(tài)物質(zhì)（固定相）時，根據(jù)溶液中待分離的蛋白質(zhì)顆粒大小、電荷多少及親和力等，使待分離的蛋白質(zhì)組分在兩相中反復(fù)分配，并以不同速度流經(jīng)固定相而達到分離蛋白質(zhì)的目的。超速離心。多肽鏈中氨基酸序列分析Sanger法：（1）分析已純化蛋白質(zhì)的氨基酸殘基組成NC把肽鏈水解成片段，分別進行分析（4.）測定各肽段的氨基酸排列順序，一般采用Edman降解法（5）經(jīng)過組合排列對比，最終得出完整肽鏈中氨基酸順序的結(jié)果。反向遺傳學(xué)方法蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)測定：圓二色光譜、X復(fù)習思考題域、分子伴侶、協(xié)同效應(yīng)、變構(gòu)效應(yīng)、蛋白質(zhì)等電點、電泳、層析蛋白質(zhì)變性的概念及本質(zhì)是什么？有何實際應(yīng)用？蛋白質(zhì)分離純化常用的方法有哪些？其原理是什么？舉例說明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系？授課第二章核酸的結(jié)構(gòu)與功能章節(jié)授課2009對口腔、臨本3象

學(xué)時 4 時

2010年96—910授5222、5226教室 教材 見首頁課地點掌握：核酸的分類、細胞分布，各類核酸的功能及生物學(xué)意義；核酸的化學(xué)組教成；兩類核酸（DNARNA）分子組成異同；核酸的一級結(jié)構(gòu)及其主要化學(xué)鍵；學(xué)DNA右手雙螺旋結(jié)構(gòu)要點及堿基配對規(guī)律；mRNA一級結(jié)構(gòu)特點；tRNA二級結(jié)構(gòu)目特點；核酸的主要理化性質(zhì)（紫外吸收、變性、復(fù)性），核酸分子雜交概念。的熟悉：核酸的高級結(jié)構(gòu)；核酸酶。要了解：堿基和戊糖的結(jié)構(gòu)；DNARNARNA求學(xué)；人類基因組計劃研究的主要內(nèi)容；snmRNA參與基因表達調(diào)控。重點：教兩類核酸（DNARNA）的細胞分布，功能及生物學(xué)意義；化學(xué)組成；兩類核酸學(xué)分子組成異同；核酸的一級結(jié)構(gòu)及其主要化學(xué)鍵；DNA右手雙螺旋結(jié)構(gòu)要點及堿重基配對規(guī)律；mRNA、tRNA的結(jié)構(gòu)特點；核酸的主要理化性質(zhì)（紫外吸收、變點性、復(fù)性），核酸分子雜交概念。難難點：點DNA的空間結(jié)構(gòu)。教學(xué)大課系統(tǒng)講授方法教多媒體課件輔以板書具第一節(jié)核酸的化學(xué)組成及一級結(jié)構(gòu)授一、核苷酸是構(gòu)成核酸的基本組成單位課二、DNA是脫氧核苷酸通過3′，5′-磷酸二酯鍵連接形成的大分子提三、RNA也是具有3′，5′-磷酸二酯鍵的線性大分子綱四、核酸的一級結(jié)構(gòu)是核苷酸的排列順序第二節(jié)DNA的空間結(jié)構(gòu)與功能第二節(jié)DNA的空間結(jié)構(gòu)與功能一、DNA二、DNA三、DNA一、mRNA是蛋白質(zhì)合成的模板二、tRNArRNA四、snmRNA五、核酸在真核細胞和原核細胞中表現(xiàn)了不同的時空特性第四節(jié)核酸的理化性質(zhì)一、核酸分子具有強烈的紫外吸收二、DNA變性是雙鏈解離為單鏈的過程三、變性的核酸可以復(fù)性或形成雜交雙鏈第五節(jié)核酸酶教學(xué)主要內(nèi)容教學(xué)主要內(nèi)容備注核酸是以核苷酸為基本組成單位的生物大分子，攜帶和傳遞遺傳信息。分為5mins脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)90%以上分布于細胞核，其10mins余分布于核外如線粒體，葉綠體，質(zhì)粒等。攜帶遺傳信息，決定細胞和個體5的基因型(genotype)RNADNARNA10一.核酸的化學(xué)組成及一級結(jié)構(gòu)mins核酸的化學(xué)組成20元素組成：C、H、O、N、P（9~10%）mins分子組成：堿基（嘌呤堿，嘧啶堿）、戊糖（核糖，脫氧核糖）和磷酸101．核苷酸中的堿基成分：腺嘌呤（A）、鳥嘌呤（G）、胞嘧啶（C）、尿嘧mins啶（U）、胸腺嘧啶（T）。DNA（A、G、C、T），RNA（A、G、C、U）。戊糖：D-核糖（RNA）、D-2-脫氧核糖（DNA）。磷酸

10mins10mins核酸及核苷酸：堿基及戊糖通過糖苷鍵連接形成核苷，核苷與磷酸連接形成5mins核苷酸。重要游離核苷酸及環(huán)化核苷酸：NMP、NDP、NTP、cAMP、cGMP核酸的一級結(jié)構(gòu)

510mins概念：核酸中核苷酸的排列順序，由于核苷酸間的差異主要是堿基不同，所10以也稱為堿基序列。核苷酸間的連接鍵——3’，5’-磷酸二酯鍵、方向（5’→3’）及鏈書寫方式。二、DNA的空間結(jié)構(gòu)與功能1、DNA的二級結(jié)構(gòu)——雙螺旋結(jié)構(gòu)

mins10mins10mins2．chargaff規(guī)則：Chargaff規(guī)則：①腺嘌呤與胸腺嘧啶的摩爾數(shù)總是相等10（Ａ=T），鳥嘌呤的含量總是與胞嘧啶相等（G=C）；②DNAminsDNA成。B-DNA：①DNA磷酸基骨架位于雙鏈的外側(cè)、而堿基位于內(nèi)側(cè)，兩條鏈的堿基互補配對，A---T，G---C5’→3’，3’→5’。）。②DNADNA2nm。螺旋每旋轉(zhuǎn)一周包含了1036°3.4nm；0.34nm。DNA（majorgroove）和一個小溝（minorgroove），DNA③DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的維系橫向靠兩條鏈間互補堿基的氫鍵維系，縱向

10mins則靠堿基平面間的疏水性堆積力維持，尤以堿基堆積力更為重要。Z-DNA、A-DNA。2、DNA的高級結(jié)構(gòu)—超螺旋超螺旋結(jié)構(gòu)(superhelixsupercoil)：DNA結(jié)構(gòu)。原核生物DNA的高級結(jié)構(gòu)是環(huán)狀超螺旋真核生物染色質(zhì)(chromatin)DNA形成核小體。LysArgH1、H2A、H2B、H3、H4。由許多核小體形成的串珠樣結(jié)構(gòu)又進一步盤曲成直徑為30nm46DNA1.7m,經(jīng)過這樣的折疊壓縮，46200nm左右。4、DNA：DNA礎(chǔ)。5、人類基因組計劃研究的主要內(nèi)容。三、RNA的結(jié)構(gòu)與功能（一）mRNA：特點（含量最少（2-3%），種類多，代謝最快（壽命短））mRNA5′3′非編碼序列。真核細胞mRNA分子分為五部分帽子、5′非編碼序列（前導(dǎo)序列）、編碼序列、3′非編碼序列（拖尾序列）和尾巴（二）tRNA：10-15%，70-90特點：（稀有堿基多，分子量?。┙Y(jié)構(gòu)：二級結(jié)構(gòu)：三葉草形主要組成:四臂三環(huán)三級結(jié)構(gòu)：倒L形rRNA：特點（70-80%，甲基化多種類：原核：23S、16S、5S，真核：28S、18S、5S、5.8S與多種蛋白質(zhì)結(jié)合形成核糖體（大亞基、小亞基），是蛋白質(zhì)合成場所。4．snmRNA參與基因表達調(diào)控snmRNAsRNA，RNA，RNA，RNARNAsnmRNAshnRNArRNA核酶：概念、化學(xué)本質(zhì)（RNA）、作用底物（核酸）及應(yīng)用。5、核酸在真核細胞和原核細胞中表現(xiàn)不同時空特性。四、DNA的理化性質(zhì)及其應(yīng)用（一）變性概念：在物理、化學(xué)因素的影響下，DNA性。DNADNA變性后的特點：特點：1.紫外吸收增加。增色效應(yīng):DNA變性因素：強酸堿、有機溶劑、高溫等等。影響因素：1.G+C含量。DNA（均一性）：均一性好，則熔解溫度范圍窄。Tm（二）復(fù)性：DNA特點：紫外吸收減少。減色效應(yīng)：DNA常用的復(fù)性方法：退火。（溫度緩慢降低，使變性的DNA重新形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程）。（三）核酸分子雜交。概念：不同來源的核酸鏈因存在互補序m列而形成互補雙鏈結(jié)構(gòu)，這一過程就是核酸雜交過程。包括DNA—DNA雜交。DNA—RNA雜交。RNA—RNA雜交。原因：不同核酸的堿基之間可以形成堿基配對。用途：是分子生物學(xué)研究與基因工程操作的常用技術(shù)。五、核酸酶核酸酶是指所有可以水解核酸的酶依據(jù)底物不同分類DNA(deoxyribonuclease,DNase)：DNARNA(ribonuclease,RNase)：RNA。依據(jù)切割部位不同核酸內(nèi)切酶：分為限制性核酸內(nèi)切酶和非特異性限