微膠囊在生物醫(yī)學(xué)的作用

微膠囊在生物醫(yī)學(xué)的作用

1微膠囊的制備

材料

材料是決定微膠囊性能的關(guān)鍵因素之一.一般要求其成膜性能好，與包封物不發(fā)生反應(yīng)，而且應(yīng)具有一定的機(jī)械強(qiáng)度、穩(wěn)定性;對于生物環(huán)境中應(yīng)用的微膠囊，材料還要具備很好的生物相容性;有些情況下則需要具有生物可降解性.目前研究報(bào)道中使用的微膠囊材料主要有天然、半合成和合成高分子3大類數(shù)十種。天然材料一般無毒、免疫原性低、生物相容性好、可降解且產(chǎn)物無毒副作用，是最常用的微膠囊制備材料，其中海藻酸鹽、殼聚糖等天然多糖資源豐富、制備簡單、價格便宜，極具開發(fā)潛力.合成材料一般化學(xué)穩(wěn)定性和成膜性好，應(yīng)用研究較多的主要是乳酸/乙醇酸共聚物，它是目前惟一獲準(zhǔn)可用于人體的一類合成控釋制劑材料122].將天然材料與合成高分子混合作為微膠囊材料，既利用合成材料彌補(bǔ)天然材料強(qiáng)度上的不足，又利用天然材料彌補(bǔ)合成材料生物相容性較差的缺點(diǎn)，典型代表是海藻酸鈉/聚賴氨酸微膠囊l4]，在動物實(shí)驗(yàn)中使用這種微膠囊包埋不同細(xì)胞形成的“人工細(xì)胞”取得了良好的治療效果.

方法

chang[2l于1957年首次報(bào)道了乳化、噴霧干燥和靜電法3種微膠囊制備方法以來，微膠囊制備的新方法、新技術(shù)一直是眾多研究者的方向之一目前已形成化學(xué)法、物理化學(xué)法和物理法3大類多種制備方法.圖2是對80年代以來研究報(bào)道中所使用的微膠囊制備方法的統(tǒng)計(jì)結(jié)果.研究者多以溶劑蒸發(fā)法、相分離法、界面沉積法和噴霧干燥法等物理化學(xué)法以及聚合法和乳化法等化學(xué)法制備微膠囊.這些方法通常需要高溫條件，或者使用破壞性有機(jī)溶劑，而且反應(yīng)劇烈，對于那些日用化工行業(yè)中內(nèi)含物性質(zhì)較穩(wěn)定的體系而言基本上沒有不良影響.然而這些條件很難滿足醫(yī)藥工業(yè)和生物技術(shù)領(lǐng)域中保持生物物質(zhì)活性的要求.

另外，一般應(yīng)用中要求微膠囊尺寸均勻，即具有較窄的粒徑分布，而上述方法制備的微膠囊通常粒徑分布寬，需要篩分過濾，增加了工藝步驟和設(shè)備投資.靜電法通過電場中離子型物質(zhì)間反應(yīng)制備微膠囊，過程比較溫和.然而應(yīng)用并不普遍，主要原因是該方法規(guī)模小，產(chǎn)量通常為每小時數(shù)十毫升，而且微膠囊粒徑在200林m以上，不能滿足對小粒徑微膠囊的需要.Lencki等人123]以離子型多糖物質(zhì)為材料，提出了乳化/內(nèi)部凝膠化方法，即以海藻酸鹽和難溶鈣鹽混合懸浮液為分散相，以含有酸的油相為分散介質(zhì)，形成乳化液，利用酸溶解難溶鈣鹽釋放出Ca2+，ca2+再與海藻酸鹽生成海藻酸鈣凝膠珠，實(shí)現(xiàn)了較溫和條件下小粒徑微膠囊的規(guī)模生產(chǎn).Benedetti等人〔24]利用超臨界流體技術(shù)制得粒徑小于20林m，甚至平均直徑只有林m的微粒，并指出了該方法在制備藥物釋放體系中的應(yīng)用前景.他們發(fā)現(xiàn):超臨界反溶劑CO:為連續(xù)流體時，導(dǎo)致微粒聚結(jié)和纖維結(jié)構(gòu)的形成，而為間歇流體時則形成球形微米粒子;溫度實(shí)際上對粒子的形狀和尺寸影響并不顯著;而溶質(zhì)濃度越高，生成的粒子聚結(jié)程度越低.Nakashima等人[25]制備出一種微孔玻璃膜，采用膜乳化方法制備出單分散性乳化液滴.

受此啟發(fā)，Muramatsu等人1261以白蛋白溶液為分散相，含有表面活性劑的煤油為分散介質(zhì)制備出尺寸均一的乳化液滴，再經(jīng)過加熱使之變性固化得到白蛋白微球.研究發(fā)現(xiàn)，加熱變性過程并不影響微球單分散性;白蛋白濃度越高，微球尺寸分布越寬，而濃度較低易形成非球形粒子;另外較高的變性溫度利于形成較小的粒子.眾多研究均表明就單分散性來說，膜乳化法優(yōu)于任何傳統(tǒng)的方法，而且通過選擇膜孔徑可以控制微膠囊的尺寸.

2微膠囊結(jié)構(gòu)與性能的表征

微膠囊膜結(jié)構(gòu)及表面性質(zhì)微膠囊膜結(jié)構(gòu)及表面性質(zhì)的表征對了解微膠囊膜滲透性具有重要作用.利用傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡和掃描電子顯微鏡lz7]可以觀測微膠囊形態(tài)、大小、膜厚、表面及斷面顯微結(jié)構(gòu).近年來，出現(xiàn)借助現(xiàn)代儀器分析方法開展微膠囊膜結(jié)構(gòu)及表面性質(zhì)的研究報(bào)道.Levy等人[28，29〕利用Fourie:變換紅外光譜分別考察了人血清白蛋白與對苯二酞氯表面交聯(lián)制備微膠囊過程中pH、交聯(lián)反應(yīng)時間對表面配基、醋基、梭基等功能團(tuán)吸收峰的影響.pH升高導(dǎo)致配基和醋基峰增強(qiáng)而梭基峰減弱，且在pH=9時得到表面粗糙直徑<巧林m的微膠囊;微膠囊進(jìn)一步在pH=緩沖液中浸泡導(dǎo)致配基消失而梭基增強(qiáng)醋基減弱，相應(yīng)的微膠囊膜表面變得光滑，直徑明顯增大.延長反應(yīng)時間導(dǎo)致酷基、醉基峰增強(qiáng)而梭基峰減弱，反應(yīng)2min得到形狀很好的球形顆粒，凍干后為表面光滑完整的卵形顆粒;反應(yīng)5min后為表面粗糙的球形顆粒，且時間越長，膜表面粒狀物越多.

xu等人l30]利用原子力顯微鏡對處于液體環(huán)境中的微膠囊表面三維形態(tài)進(jìn)行了觀測，考察了表面不同摩爾比的反凝膠和凝膠離子對其表面形態(tài)和粗糙度的影響.Na+/eaZ+比值越高，微膠囊表面垂直方向最大高度越低;且比值為/1，的樣品表面有皺縮，/的樣品則是光滑的，而光學(xué)顯微鏡僅觀測到/1的樣品有皺縮，無法區(qū)分后兩個樣品.我們使用兩個參數(shù)，平面在垂直方向的偏離度及其平方根，對微膠囊表面粗糙度進(jìn)行了定量評價，結(jié)果對應(yīng)于Na+/ca2+比值升高，R。和RMs均降低，即微膠囊表面粗糙度降低.Asaki等人[3’]制備了含有海藻酸作為水溶性大分子配基的聚酞胺微膠囊，萃取銅、鉆、鎳、銀等金屬離子，實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)不僅微膠囊內(nèi)部的配基，而且微膠囊膜本身都能夠吸附累積金屬離子.他們利用X射線光電子譜分析了微膠囊表面組成，發(fā)現(xiàn)海藻酸配基的一些功能團(tuán)穿過微膠囊膜分布于表面，所以膜表面也能富集金屬離子.

微膠囊的物理化學(xué)性能

微膠囊膜具有保護(hù)膜內(nèi)物質(zhì)和控制膜內(nèi)、外物質(zhì)跨膜傳遞的雙重作用，是微膠囊物理化學(xué)性能的決定因素.膜強(qiáng)度和膜滲透性是通常用于表征微膠囊膜物理化學(xué)性能的主要參數(shù).

微膠囊膜強(qiáng)度膜強(qiáng)度大小決定了微膠囊在生物環(huán)境停留期間能否保持基本完整，從而保證囊內(nèi)細(xì)胞或物質(zhì)活性，是微膠囊的重要性能之一，但至今仍未建立微膠囊膜強(qiáng)度的直接測試方法.Jay等人[32l采用泡形彈性計(jì)對含有血紅蛋白的聚己撐癸二酞胺微膠囊的膜強(qiáng)度進(jìn)行了定量研究，他將與可調(diào)水銀柱相連通的微量滴管伸到懸浮在水中的微膠囊表面上，通過改變汞柱高度的方法將膜的小舌吸人微量滴管內(nèi)，測定膜表面張力，從而表征膜強(qiáng)度.zhang等人[33}把測定細(xì)胞強(qiáng)度的微控制方法引人微膠囊膜強(qiáng)度的測定研究，即將微膠囊置于兩水平探頭間，采用擠壓方法測定破碎微膠囊所需的破碎力.

測得典型微膠囊的破碎力一般在5一20林N，而且還給出了單個微膠囊的直徑.一般認(rèn)為，微膠囊膜強(qiáng)度是膜厚和膜彈性的綜合結(jié)果，而相同條件下制備的微膠囊，其膜強(qiáng)度與膜厚之間成正比關(guān)系，所以通過對微膠囊膜厚的評價即可定性地表征微膠囊膜的強(qiáng)度.馬小軍等人134}在假設(shè)微膠囊尺寸均勻和膜內(nèi)液體密度D;與微膠囊密度Dw相等的情況下，建立了微膠囊濕態(tài)膜厚的定量計(jì)算方法:L=R{l一[/Ww]113}，通過實(shí)驗(yàn)手段測定微膠囊總重Ww，微膠囊濕態(tài)膜重硯n和微膠囊平均半徑R，即可確定微膠囊濕態(tài)膜厚L，從而定性表征膜強(qiáng)度.而且，他們還發(fā)現(xiàn):微膠囊制備過程中體積膨脹率與膜厚之間成反比關(guān)系，進(jìn)而可以推出體積膨脹率與膜強(qiáng)度成反比關(guān)系，定義體積膨脹率為S=100[一V/V]，通過實(shí)驗(yàn)手段測定微膠囊體積V和膠珠體積V，即可計(jì)算出體積膨脹率，同樣可定性表征膜強(qiáng)度.

微膠囊膜滲透性膜的滲透性是微膠囊的另一重要性能，尤其對于生物環(huán)境中應(yīng)用的微膠囊來說，了解膜滲透性更為重要.生物環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)能否擴(kuò)散進(jìn)入微膠囊，細(xì)胞代謝產(chǎn)物能否擴(kuò)散出微膠囊，微膠囊能否隔離具有殺傷性的抗體等性能都將影響微膠囊內(nèi)生物物質(zhì)的活性.因而膜的滲透性是決定微囊化技術(shù)能否用于臨床移植治療或細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵.目前，國際上普遍使用截留分子量[35]，即不能透過微膠囊膜的蛋白質(zhì)的最低分子量，來衡量微膠囊的滲透特性.但是，截留分子量只反映了微膠囊膜對不同分子量溶質(zhì)的阻隔能力，不能反映低于截留分子量的各種溶質(zhì)的滲透速率等特性，因而它作為表征微膠囊膜滲透特性的手段顯得不夠準(zhǔn)確也不夠全面.Jalsenjak和Un。等人[36，’7]建立了平板膜模型，使用滲透率來衡量微膠囊膜的滲透性，分別利用NaCI擴(kuò)散進(jìn)人水相分離法制備的明膠一一阿拉伯樹膠微膠囊以及苯巴比妥擴(kuò)散進(jìn)人乙基纖維素微膠囊的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對模型進(jìn)行了驗(yàn)證，認(rèn)為物質(zhì)擴(kuò)散通過微膠囊膜的機(jī)理主要是溶解一擴(kuò)散作用.Kwok等人138}建立了海藻酸鈉/聚賴氨酸微膠囊的物質(zhì)擴(kuò)散模型，對物質(zhì)跨膜傳遞現(xiàn)象作了理論預(yù)測.他們利用牛血清白蛋白擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與模型計(jì)算所得擴(kuò)散系數(shù)進(jìn)行了對比，結(jié)果比較吻合.解玉冰等人139〕綜合膜分離技術(shù)中表示超濾、微濾和透析過程分離透過特性的物化參數(shù)，使用膜相擴(kuò)散系數(shù)、截留率、截留分子量等參數(shù)較為全面地表征了微膠囊膜的滲透性，并建立了非穩(wěn)態(tài)球形滲透擴(kuò)散模型，從理論上對微膠囊膜的物質(zhì)傳遞特性進(jìn)行了分析，認(rèn)為APA微膠囊內(nèi)外物質(zhì)擴(kuò)散阻力主要集中在膜上.

進(jìn)而利用葡萄糖擴(kuò)散進(jìn)人海藻酸鈉/聚賴氨酸微膠囊的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)擬合，求算出其膜相有效擴(kuò)散系數(shù)，從而對葡萄糖的膜內(nèi)濃度分布有所了解.何洋等人140」在非穩(wěn)態(tài)球形滲透擴(kuò)散模型基礎(chǔ)上，提出膜擴(kuò)散阻力特性參數(shù)和膜內(nèi)基質(zhì)分配系數(shù)，重新建立了蛋白質(zhì)在APA微膠囊中的擴(kuò)散數(shù)學(xué)模型.該模型一方面消除了原模型在編程差分?jǐn)M合中需調(diào)整初值以防結(jié)果發(fā)散的問題，利于大批數(shù)據(jù)處理;另一方面清晰地反映出制備條件對物質(zhì)擴(kuò)散性質(zhì)的影響，為APA微膠囊制備條件的優(yōu)化提供了重要的理論依據(jù).但是上述基礎(chǔ)研究大都是對微膠囊膜性能初步的、靜態(tài)的表征，相關(guān)的應(yīng)用環(huán)境中微膠囊膜行為動態(tài)過程規(guī)律的研究是相對薄弱的一環(huán)，這一方面的研究工作有待加強(qiáng).

微膠囊生物相容性

對于生物環(huán)境中應(yīng)用的微膠囊來說，其主要目的是保護(hù)并運(yùn)載生物活性物質(zhì)或細(xì)胞進(jìn)入生物體內(nèi)發(fā)揮一定的功能，因而其材料除應(yīng)具備一定的物理化學(xué)性能外，還必須具備生物相容性，即材料在特定應(yīng)用環(huán)境中，引起適當(dāng)宿主反應(yīng)和產(chǎn)生有效作用的能力.它決定于材料和活體系統(tǒng)間的相互作用，要求材料盡可能不引起生物體異常反應(yīng)，生物體對材料性能也不產(chǎn)生較大影響.Mille:等人14’l通過體外細(xì)胞培養(yǎng)和動物體內(nèi)模型考察了組織/材料界面的細(xì)胞相互作用，發(fā)現(xiàn)一些材料能不同程度地激活單細(xì)胞/巨噬細(xì)胞分泌具有不同生物活性的蛋白質(zhì)，如白細(xì)胞介素一1和一種促纖維細(xì)胞增殖及膠原質(zhì)合成的調(diào)節(jié)因子，而正是這些物質(zhì)在宿主反應(yīng)中起了決定性作用.

Gin等人[’2〕分別考察了植人大鼠腹腔和脾臟的聚丙烯酞胺微膠囊的生物相容性.微膠囊在整個20周植人期內(nèi)每4周回收檢測一次，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腹腔中微膠囊保持很好的獨(dú)立性，而脾臟中的微膠囊引起了輕微的炎癥反應(yīng)，進(jìn)而發(fā)現(xiàn)這是微膠囊吸附了纖維細(xì)胞并促進(jìn)其生長的結(jié)果.研究表明，在微囊化Langerhans胰島細(xì)胞移植實(shí)驗(yàn)中囊周宿主反應(yīng)常最終導(dǎo)致移植失敗.Robitaille等人143〕將海藻酸鈉/聚賴氨酸微膠囊移植人大鼠附翠脂肪墊，考察了細(xì)胞因子在宿主反應(yīng)機(jī)理中的作用.在移植14d后檢測了轉(zhuǎn)生長因子p，基因的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)在囊周浸潤物包含的細(xì)胞中細(xì)胞因子TGF一plmRNA水平明顯高于非移植組織細(xì)胞和鹽水注射組織細(xì)胞中的水平.這表明TGF一p，在宿主反應(yīng)中起了一定的作用.

同樣的方法可用于研究其他成纖維細(xì)胞因子的作用機(jī)理，從而可通過控制其水平而控制囊周宿主反應(yīng)，以獲得理想的移植效果.由于生物相容性的研究涉及多學(xué)科交叉的綜合性因素，是十分復(fù)雜的，所以人們對生物相容性的認(rèn)識基本上還是經(jīng)驗(yàn)性的.如何從本質(zhì)上認(rèn)識生物相容性問題，進(jìn)而指導(dǎo)成膜材料的選擇仍將是微膠囊研究中的主要課題之一。

3微膠囊在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用研究

在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用研究

人體器官和組織缺損或衰竭正日益成為威脅人類健康乃至生命的突出問題.同種或異種器官移植是世界醫(yī)學(xué)界對付器官衰竭的主要手段，當(dāng)前心臟和腎臟等器官整體移植手術(shù)的成功率已經(jīng)相當(dāng)高，挽救了許多患者的生命.但是供體來源有限和機(jī)體免疫排斥反應(yīng)限制了其應(yīng)用和發(fā)展.在器官供體來源嚴(yán)重匾乏的情況下，人們研制了人工器官，即人造的裝置或機(jī)器，它們可以替代人體有缺陷的部位，完成復(fù)雜的任務(wù)以維持生命.

另一方面，糖尿病、帕金森氏癥、早老性癡呆、肝功能障礙、甲狀腺功能減退和侏儒癥等神經(jīng)/內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病則是部分組織細(xì)胞功能喪失引起的，如糖尿病是因?yàn)榛颊咦陨砻庖呦到y(tǒng)選擇性地破壞了分泌胰島素的胰腺細(xì)胞，導(dǎo)致胰島素分泌不足，血糖水平升高130].對此類疾病目前尚無法實(shí)現(xiàn)相關(guān)的整體器官移植，只能期望通過組織細(xì)胞水平移植得以治療.這時裸露的組織細(xì)胞移植人體內(nèi)又將遇到強(qiáng)烈的機(jī)體免疫排斥反應(yīng).微膠囊則依靠膜的隔離保護(hù)性能和選擇透過作用，可以保證生物活性物質(zhì)擴(kuò)散通過，抗體或免疫細(xì)胞被截留隔離，從而在生理上避免了個體的免疫排斥，成為解決組織細(xì)胞移植過程免疫排斥問題的理想手段，因而引起眾多研究者的興趣.繼糖尿病大鼠模型取得進(jìn)展之后，sun等人147}實(shí)驗(yàn)室又進(jìn)行了靈長類糖尿病動物模型的研究.他們將APA微囊化豬胰島細(xì)胞移植人9只自發(fā)性糖尿病猴的腹腔中，7只病猴在不注射胰島素的情況下維持正常血糖水平4個月以上，最長達(dá)804d.進(jìn)一步檢測發(fā)現(xiàn)受試猴體內(nèi)葡萄糖清除率和胰島素分泌量明顯高于移植前.血糖正常3個月后從兩只病猴體內(nèi)回收得到完整的微膠囊且沒有細(xì)胞過度生長的跡象，囊內(nèi)胰島清晰可見.

而且移植人體內(nèi)長達(dá)兩年的微膠囊對兩只病猴器官無不良影響.薛毅瓏等人149]以右側(cè)帕金森氏癥病樣大鼠和猴為模型，分別將APA微囊化和非微囊化牛腎上腺嗜鉻細(xì)胞及空微囊定向植人右側(cè)腦紋狀體內(nèi)，結(jié)果表明植人的微囊化BCC能在動物腦內(nèi)存活、分泌多巴胺等單胺類物質(zhì)并糾正帕金森病樣大鼠和猴的異常行為，作用超過10個月.非囊化BCC僅能改變部分動物的偏側(cè)旋轉(zhuǎn)，且作用時間基本只能持續(xù)1個月;空微囊組則與對照組模型一樣，癥狀沒有改善.甲狀腺功能減退癥是由多種原因引起的甲狀腺激素合成、分泌或生物效應(yīng)不足所致的一種內(nèi)分泌疾病.其中占90%以上的是由免疫反應(yīng)或病毒感染、放療和缺碘等引起的甲狀腺組織破壞.吳美慧等人150〕以甲狀腺功能減退大鼠為模型，進(jìn)行APA微囊化和非微膠囊化豬甲狀腺組織移植治療.微囊化甲狀腺組織顯著提高了受體T3，T4水平，降低了促甲狀腺激素水平且作用持續(xù)超過40周，且微膠囊回收率100%，回收的微囊化甲狀腺組織存活率達(dá)80%.

非囊化甲狀腺組織在初期也明顯改善了上述指標(biāo)，但9周后均回復(fù)到了移植前的水平.上述臨床前動物研究均表明:采用一定材料、方法制成的微膠囊本身并不具備治療疾病的作用，但能保證囊內(nèi)包埋的細(xì)胞存活且正常代謝、應(yīng)答式分泌有效物質(zhì)，如胰島素、多巴胺和甲狀腺激素等，從而達(dá)到治療疾病的目的;微膠囊膜的選擇透過作用可以保證細(xì)胞分泌的有效物質(zhì)擴(kuò)散進(jìn)人生物體內(nèi)發(fā)揮生理功能，而將免疫球蛋白等抗體阻隔在囊外，避免了異種移植中最棘手的免疫排斥問題.臨床應(yīng)用的主要技術(shù)問題一是獲取高產(chǎn)量、高活性、高純度的供體組織細(xì)胞;二是作為免疫隔離工具的微膠囊材料的生物相容性;三是微囊化細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)和保存.

在生化藥物控制釋放中的應(yīng)用研究

蛋白質(zhì)和多膚類大分子生化物質(zhì)由于在侏儒癥、糖尿病、肝硬化以及許多癌癥等難以治愈疾病的治療過程中表現(xiàn)出藥理作用強(qiáng)、副作用少且很少引起過敏反應(yīng)的特點(diǎn)而備受重視.另一方面，重組DNA技術(shù)的出現(xiàn)使得具有療效的蛋白質(zhì)的規(guī)模生產(chǎn)成為現(xiàn)實(shí)15’〕.然而由于此類生化藥物穩(wěn)定性差，采用傳統(tǒng)口服給藥后在人體胃腸道內(nèi)易被酶降解，所以目前多限于注射給藥，如胰島素在其被發(fā)現(xiàn)75年之后仍只是以注射途徑治療糖尿病[52〕.另外，此類藥物體內(nèi)半衰期短，以至于不得不多次注射以維持療效.此外在非保護(hù)狀態(tài)下這類藥物的生物利用度通常很低，不能獲得滿意的療效.所以，開發(fā)適于蛋白質(zhì)和多膚類生化藥物的釋放體系已成為重要的研究方向.

微膠囊膜能最大程度地保持囊內(nèi)生化物質(zhì)活性，且通過調(diào)節(jié)制備條件可以控制微膠囊膜的厚度和孔尺寸，從而實(shí)現(xiàn)囊內(nèi)生化藥物的控釋或緩釋.Redding等人1531將黃體激素包埋于乳酸一乙醇酸共聚物微膠囊中，采取肌肉注射途徑實(shí)現(xiàn)該膚在大鼠體內(nèi)持續(xù)釋放30d以上，顯著降低了雄激素依賴型前列腺瘤的重量和體積，成功抑制了大鼠血清中肇酮水平，而且效果優(yōu)于每天皮下注射等量或雙倍劑量的未包囊激素.纖維原細(xì)胞生長因子具有刺激細(xì)胞生長和組織修復(fù)的功能，傳統(tǒng)的基于聚合物基質(zhì)的釋放體系雖然能實(shí)現(xiàn)緩釋，但其99%的分裂活性將喪失.Edelman等人154]將其與肝素一瓊脂糖凝膠珠鍵合以便于長期穩(wěn)定保存，再以海藻酸鈉包囊，然后在肝素酶酶解斷鍵作用下實(shí)現(xiàn)了該因子以活性狀態(tài)的控制釋放.Johnson等人155]將重組人生長激素包埋于PLGA微球中，經(jīng)皮下注射人大鼠和恒河猴體內(nèi)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明微囊化激素性質(zhì)穩(wěn)定，動物血清中重組人生長激素維持高水平達(dá)30d以上，是等量該激素以溶液形式經(jīng)皮下注射后維持時間的20倍.Takada等人f56}設(shè)計(jì)了leuprorehn的微膠囊控制釋放體系，以大鼠和狗為動物模型，一次注射即可實(shí)現(xiàn)3od內(nèi)維持血清中穩(wěn)定的leuprorelin水平.

該微囊化leuprorelin對前列腺癌、子宮內(nèi)膜異位及性激素依賴型疾病的臨床療效已在60多個國家得到了證實(shí).Isobe等人157]將重組人骨形成蛋白包埋于乳酸一乙醇酸共聚物微膠囊中并移植人大鼠皮下，經(jīng)組織化學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)隨著骨形成蛋白的釋放，具有堿性磷酸酶活性的骨誘導(dǎo)細(xì)胞出現(xiàn)在膠囊周圍，而且在異位骨誘導(dǎo)形成過程中并不