尿液理學(xué)蛋白本周蛋白尿糖檢測(cè)試驗(yàn)

尿液理學(xué)蛋白本周蛋白尿糖檢測(cè)試驗(yàn)第一頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六尿液形成過程示意圖第二頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六■容器1、

一般檢查：清潔干燥2、

細(xì)菌培養(yǎng)：有蓋無菌大試管3、24小時(shí)尿：清潔干燥的大口瓶常規(guī)檢查可隨時(shí)留取，但晨尿較濃縮、偏酸性，病理成分多且完整，可提高檢查的陽性率?！瞿蛞罕４?、

冷藏2、

立即送檢，夏季<1h，冬季<2h3、不能及時(shí)送檢，以4℃6～8小時(shí)冷藏為宜尿液的容器要求保存條件第三頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六第一節(jié)尿液理學(xué)檢查尿量

(有刻度的容器)顏色及透明度(肉眼觀察)比重(尿比重計(jì))第四頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六一、尿量測(cè)定第五頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六一、尿量取決于腎小球的濾過率和腎小管的重吸收正常成人：1000-2000ml/24h

兒童：大約為成人3~4倍二、幾個(gè)重要概念

多尿：>

2500ml/24h少尿：<400

ml/24h無尿：<100

ml/24h第六頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

【注意事項(xiàng)】

1．每次留取標(biāo)本必須排空膀胱。

2．氣溫過高時(shí)注意防腐。

3．測(cè)定尿量需準(zhǔn)確，精確至毫升，誤差不得超過20ml。第七頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

二、尿顏色和透明度

第八頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六第九頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六■異?！鰸獠枭蜥u油色（血紅蛋白尿）

疾?。阂娪谘筒缓陷斞磻?yīng)、急性溶血性貧血、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿（PNH）等、■黃色

膽紅素定性（+）時(shí)，稱膽紅素尿

疾?。?/p>

阻塞性或肝細(xì)胞性黃疸■乳白色混濁

1、菌尿或膿尿：泌尿系統(tǒng)感染，如腎盂腎炎、膀胱炎2、脂肪尿：腎病、擠壓傷、骨折、腎病綜合征等

3、乳糜尿：絲蟲病、腫瘤、腹部創(chuàng)傷等所致淋巴循環(huán)受阻第十頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

【注意事項(xiàng)】1．盛尿液的容器：必須干燥、清潔、透明。2．標(biāo)本：新鮮尿液。3．鑒別渾濁尿：新鮮尿液含鹽類濃度過高，尤其是尿酸鹽排出時(shí)遇冷易析出結(jié)晶，使尿液渾濁。4．尿液顏色：易受某些食物或藥物的影響。第十一頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

三、尿液比重測(cè)定

（一）比重計(jì)法

【原理】尿比重計(jì)是一種液體比重計(jì)，可測(cè)定出規(guī)定溫度下的尿液比密。尿液比重與所含溶質(zhì)成正比，溶質(zhì)越多，尿比重越高，對(duì)浮標(biāo)的浮力就越大，浸入尿液中的比重計(jì)部分則越小，讀數(shù)越大；反之，浸入部分越大，讀數(shù)越小。第十二頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六【操作】

1．加尿

2．放浮標(biāo)

3．讀數(shù)

第十三頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六■參考值①晨尿>1.020，隨機(jī)尿1.003～1.030②新生兒：1.002～1.004

■臨床意義：反映腎小管的濃縮稀釋功能比重慢性腎衰竭、尿崩癥急性腎小球腎炎、心力衰竭、高熱、脫水、出汗過多尿少尿多糖尿病第十四頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

【注意事項(xiàng)】

1．尿比重計(jì)通過校正后才能使用。

2．尿液要求新鮮；尿液過少不足以浮起比重計(jì)時(shí)。

3．因低溫所致的尿酸或其他鹽類沉淀可水浴(37℃)使其溶解，待尿液溫度降至比重計(jì)所標(biāo)定的溫度時(shí)即可測(cè)定。

4．尿液面應(yīng)消除泡沫；比重計(jì)浮標(biāo)要垂直懸浮于尿液中；讀取比密值要準(zhǔn)確。

5．校正結(jié)果要進(jìn)行蛋白尿、糖尿和溫度的校正。

6．每次測(cè)定完畢都需用純凈水沖洗比重計(jì)，若有蛋白質(zhì)及鹽類物質(zhì)沉積時(shí)，需用清潔液洗凈后使用。第十五頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

【原理】pH廣泛試紙是多種指示劑混合的試帶,靈敏度約為pH1.0,顯色范圍為棕紅至深黑色,試帶蘸取尿液后即可顯色,然后與標(biāo)準(zhǔn)色板比較即可測(cè)得尿液pH近似值

四、尿酸堿度pH試紙法測(cè)定第十六頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六【操作】

1.取試紙2.浸尿

3.讀取結(jié)果

4.報(bào)告方式第十七頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六■參考值①

新鮮晨尿pH值在5.5～6.5,平均值6.0②新鮮隨機(jī)尿pH值在4.5～8.0③久置可變堿性■臨床意義PH值酸中毒、發(fā)熱、糖尿病、痛風(fēng)或服用氯化銨等藥物后堿中毒、尿潴留、腎小管酸中毒、服用堿性藥物后第十八頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

【注意事項(xiàng)】1.試帶應(yīng)避光,密封與干燥保存,遠(yuǎn)離酸性和堿性物質(zhì),以防失效2.標(biāo)本應(yīng)新鮮,放置過久會(huì)因揮發(fā)性酸喪失或細(xì)菌繁殖而使pH增高,標(biāo)本不能使用防腐劑,否則可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果3.比色時(shí)間應(yīng)在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)比色第十九頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六第二節(jié)尿蛋白定性檢查

【原理】生物堿試劑磺基水楊酸，在酸性條件下，其磺酸根陰離子與蛋白質(zhì)氨基酸陽離子結(jié)合，形成不溶性蛋白鹽沉淀?；腔畻钏岱ǖ诙摚踩?，編輯于2023年，星期六

【操作】

1.調(diào)pH:使尿液PH值在5~6

2.加尿液:取2支試管,加入1ml尿液

3.加試劑:第一支試管加試劑2滴,輕混

勻,另一支試管不加做對(duì)照

4.判斷結(jié)果:1min內(nèi)觀察結(jié)果

1第二十一頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六①優(yōu)點(diǎn):簡便快速，靈敏度高0.05-0.1g/L；

缺點(diǎn):與清/球/本周蛋白反應(yīng)；假陽性。②干化學(xué)法的參考方法，NCCLS推薦的確證實(shí)驗(yàn)?！驹u(píng)價(jià)】①尿液中蛋白質(zhì)含量＞150mg/24h尿中蛋白質(zhì)濃度＞100mg/L②蛋白定性為陽性，即蛋白尿。1.蛋白尿

(proteinuria,PRO)

第二十二頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六【干擾因素】

干擾因素假陽性①高濃度尿酸、尿酸鹽、草酸鹽②碘造影劑、大劑量青霉素③混入生殖系統(tǒng)分泌物假陰性pH>9或<3第二十三頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

【注意事項(xiàng)】1.標(biāo)本:①尿液明顯混濁，先離心或過濾。

②患者應(yīng)用大劑量青霉素鉀鹽、慶大霉素、磺胺、含碘造影劑時(shí)，應(yīng)告知結(jié)果可能產(chǎn)生假陽性。

③正確采集中段尿，避免混有生殖系統(tǒng)分泌物。2.調(diào)pH

本法在尿液偏堿或偏酸時(shí)（pH＞9，pH＜3）可呈假陰性，檢測(cè)前先測(cè)試尿pH(5~6).3．掌握好結(jié)果判斷時(shí)間,對(duì)于微弱陽性的判斷，可選用黑色襯紙作背景，以提高分辨力。第二十四頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六第三節(jié)尿本周蛋白定性檢查一、凝溶法【原理】

本周蛋白在pH4.9±0.1條件下，加熱至40℃～60℃時(shí)可發(fā)生凝固，溫度升至90℃～100℃時(shí)沉淀消失，當(dāng)溫度降低恢復(fù)至40℃～60℃時(shí)又可重新凝固。第二十五頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六【操作】（詳見實(shí)驗(yàn)課本P90）

1．標(biāo)本處理

2．加入試劑

3．觀察結(jié)果

4．驗(yàn)證結(jié)果

第二十六頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

【注意事項(xiàng)】

1．收集已診斷輕鏈疾病患者的尿液做此試驗(yàn)。尿液新鮮，減少清蛋白、球蛋白分解變性產(chǎn)生的干擾?；鞚崮蛞喉毾入x心取上清液。

2．嚴(yán)格控制或調(diào)節(jié)pH，凝溶法最適pH為4.5～5.5。

3．煮沸過濾時(shí)，動(dòng)作迅速，保持高溫，不要振蕩，防止BJP夾雜于其他沉淀蛋白中被過濾除掉而造成假陰性。過濾用漏斗、濾紙、試管等用品，需保持高溫狀態(tài)，以避免溫度降低使BJP凝固。

4．凝溶法特異性高，操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，靈敏度低（0.3～2.0）g/L。

5.操作時(shí)一定注意安全!!

第二十七頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六二、對(duì)-甲苯磺酸法

【原理】

對(duì)-甲苯磺酸能沉淀相對(duì)分子質(zhì)量較小的本周蛋白，而對(duì)相對(duì)分子質(zhì)量較大的清蛋白和球蛋白不起反應(yīng)。第二十八頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六【操作】

1.加尿液:取2支試管，分別加尿液1ml

2.加試劑:測(cè)定管加0.5ml試劑,對(duì)照管加0.5ml冰醋酸,輕混勻靜置5min

3.觀察結(jié)果:

①陽性:測(cè)定管渾濁加重或有沉淀,對(duì)照管清晰透明或輕度渾濁

②陰性:測(cè)定管清晰透明或與對(duì)照管相似第二十九頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六

【注意事項(xiàng)】

1．收集已診斷輕鏈疾病患者的尿液做此試驗(yàn)。尿液應(yīng)新鮮，混濁尿液須先行離心取上清液。服用利福平類抗結(jié)核藥物患者可能出現(xiàn)周蛋白假陽性。

2．尿液中其他球蛋白＞5.0g/L可出現(xiàn)假陽性，需進(jìn)行驗(yàn)證。如果尿液中本周蛋白含量低，則需先對(duì)尿液進(jìn)行濃縮。第三十頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六第四節(jié)尿葡萄糖班氏法定性檢查【原理】Cu2+-----------→Cu+藍(lán)色

黃色至磚紅色.△簡易步驟:班氏試劑1ml(煮沸不變色)+尿4滴→煮沸1-2min→冷卻后觀察.堿性條件+葡萄糖第三十一頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期六?操作：１ml班氏試劑，加熱試管底部，煮沸，觀察，再加尿液2滴，繼續(xù)煮沸１～２min，冷卻后觀察結(jié)果。?結(jié)果判斷：1.藍(lán)色不變:

-2.藍(lán)中略帶綠無沉淀:+/-3.綠色有少許黃綠色沉淀:+4.較多黃綠色沉淀:++5.土黃色渾濁,大量沉淀