菠菜色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)報(bào)告

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菠菜色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)報(bào)告菠菜色素提取實(shí)驗(yàn)報(bào)告菠菜中色素的提取和色素分離綠色植物如菠菜葉中含有葉綠素(綠)、胡蘿卜素(橙)和葉黃素(黃)等多種天然色素。葉綠素存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素a(C55H72O5N4Mg)和葉綠素b(C55H70O6N4Mg))，差別僅是a中一個(gè)甲基被b中的甲?；〈?。它們都是吡咯衍生物與金屬鎂的絡(luò)合物，是植物進(jìn)行光合作用所必需的催化劑，也是食用的綠色色素，可用于糕點(diǎn)、飲料水等中，添加于膠姆糖中還可消除口臭。植物中a的含量通常是b的3倍。盡管葉綠素分子中含有一些極性基團(tuán)，但大的烴基結(jié)構(gòu)使它易溶于石油醚等一些非極性溶劑。胡蘿卜素(C40H56)是具有長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯。它有三種異構(gòu)體α—，β—,和γ—胡蘿卜素，其中β—異構(gòu)體含量最多，也最重要。生長(zhǎng)期較長(zhǎng)的綠色植物中，異構(gòu)體中β—的含量多達(dá)90,。β—具有維生素A的生理活性，其結(jié)構(gòu)是兩分子維生素A在鏈端失去兩分子水結(jié)合而成。生物體內(nèi)，β—體受酶催化氧化即形成維生素A。目前，β—體可作為維生素A使用，也可作為食品工業(yè)的色素，β一胡蘿卜素還有防癌功能。葉黃素(C40H56O2)是胡蘿卜素的羥基衍生物，在光合作用中能起收集光能的作用。在綠葉中通常是胡蘿卜素的兩倍。較易溶于醇而在石油醚中溶解度較小。由此可見(jiàn)，葉綠素等天然色素有廣泛的用途，對(duì)于色素的提取與分離就顯得很重要了(本實(shí)驗(yàn)就提取和分離做了相關(guān)的研究。1實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器與試劑儀器:研缽、分液漏斗、顯微載玻片、毛細(xì)管、層析柱(20×10cm)、UV-240紫外分光光度計(jì)試劑:石油醚、乙醇(95%)、菠菜葉、丙酮(化學(xué)純)、乙酸乙酯(化學(xué)純)、無(wú)水硫酸鈉、硅膠G、中性氧化鋁(150目,160目)1.2提取與分離1.2.1浸泡法提取色素在研缽中放入20g新鮮的菠菜葉，加入20mL3:2(體積比)石油醚—乙醇混合液，適當(dāng)研磨(不要研成糊狀，否則會(huì)給分離造成困難)，用傾析法將提取液轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，每次用10ml水洗滌兩次,以除去萃取液中的乙醇。洗滌時(shí)要輕輕旋蕩，以防乳化。棄去水乙醇層，石油醚層用無(wú)水硫酸鈉干燥，干燥后濾入小圓底燒瓶，在水浴上蒸發(fā)濃縮至大約lmL。1.2.2薄層層析取四塊顯微載玻片，硅膠G經(jīng)0.5,羧甲基纖維素鈉調(diào)制后制板，在室溫下晾干后在110?C活化1h。選取效果最好的一塊進(jìn)行點(diǎn)樣。展開(kāi)劑:(1)石油醚—丙酮=8:2(體積比)(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(體積比)取活化后的層析板，點(diǎn)樣，放入預(yù)先選定展開(kāi)劑的廣口瓶。瓶的內(nèi)壁貼一張高5cm，繞周長(zhǎng)4,5的濾紙，下部浸入展開(kāi)劑中，蓋上瓶蓋。待展開(kāi)劑上升至規(guī)定高度時(shí)，取出層析板，晾干，做出標(biāo)記。分別用兩種展開(kāi)劑展開(kāi)，比較不同展開(kāi)劑的展開(kāi)效果。觀察斑點(diǎn)在板上的位置并排列出胡蘿卜素、葉綠素和葉黃素的Rf值的大小。注意更換展開(kāi)劑時(shí)，需干燥層析瓶，不允許前一種展開(kāi)劑帶入后一系統(tǒng)。1.2.3柱層析取少量脫脂棉在小燒杯中用石油醚浸潤(rùn)后，擠壓除去氣泡，放在層析柱底部。在層析柱中加15cm石油醚。加入中性氧化鋁8克，打開(kāi)柱下活塞，保持石油醚高度不變，氧化鋁在柱子中堆積。裝完后，打開(kāi)下端活塞，放出溶劑，直到氧化鋁表面剩下1—2mm高為止(不能使氧化鋁表面露出液面)。將濃縮液用滴管加到柱頂部，打開(kāi)下端活塞，讓液面下降到柱面以下1mm,關(guān)閉活塞，加數(shù)滴石油醚，打開(kāi)活塞，使液面下降，幾次反復(fù)，使色素全部進(jìn)入柱體。在柱頂加1.5cm洗脫劑——9:1(體積比)石油醚—丙酮。打開(kāi)活塞，用錐形瓶收集。當(dāng)?shù)谝粋€(gè)有色成分即將滴出時(shí)，取另一錐形瓶收集，得橙黃色溶液，即胡蘿卜素。2.結(jié)果與討論2.1提取由于甲醇與乙醇的極性相近，但是乙醇易得、無(wú)毒，所以用3:2的石油醚一乙醇通過(guò)浸泡的方法提取菠菜色素，而不是用石油醚—甲醇。2.2分離薄層層析薄層層析又叫薄層色譜，是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，屬固—液吸附色譜，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)，可以用于少量樣品(幾到幾微克，甚至0.01微克)的分離。實(shí)驗(yàn)中涉及的菠菜色素的比移值(Rf)(薄層色譜法中原點(diǎn)到斑點(diǎn)中心的距離與原點(diǎn)到溶劑前沿的距離的比值)列表如下在一定的色譜條件下，特定化合物的Rf值是一個(gè)常數(shù)，因此有可能根據(jù)化合物的Rf值鑒定化合物。菠菜色素中各種色素的比移值Rf大小為:胡蘿b素葉黃素葉綠素，按此順序它們的非極性依次減弱。物質(zhì)極性的判斷為柱層析中洗脫劑的選擇提供了參考價(jià)值。柱層析胡蘿卜素極性最小，因此胡蘿卜素的洗脫劑用極性較小的9:l的石油醚-丙酮溶劑效果較好。但要收集其他幾種色素得換用其他的洗脫劑，因?yàn)樯氐臉O性各不相同，且有一定差別。如用7:3石油醚-丙酮分離葉黃素(分離出胡蘿卜素和葉黃素后，可加大溶劑極性以較快速度洗脫葉綠素(用3:1:1的丁醇-乙醇-水洗脫劑洗脫葉綠素。3.結(jié)論采用浸泡法提取色素比抽濾法更好。在薄層層析時(shí)，用石油醚-丙酮=8:2時(shí)，能更明顯的看到分層。在柱色譜洗脫劑的選擇上，基于薄層分析的極性判斷選擇了石油醚-丙酮=9:1的溶劑作為洗脫劑，取得了非常好的效果。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)到洗脫劑在柱層析中的重要性。篇二:實(shí)驗(yàn)十二菠菜色素的提取和分析菠菜色素的提取和分離一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、通過(guò)綠色植物色素的提取，學(xué)習(xí)天然物質(zhì)的提取方法;2、通過(guò)薄層色譜分析，掌握有機(jī)物色譜分析的原理和方法。二、實(shí)驗(yàn)原理1菠菜色素的提取綠色植物如菠菜葉中含有葉綠素(綠)、胡蘿卜素(橙)和葉黃素(黃)等多種天然色素。葉綠素存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素a(C55H72O5N4Mg)和葉綠素b(C55H70O6N4Mg)，其差別僅是葉綠素a中一個(gè)甲基被甲?；〈鷱亩纬闪巳~綠素b。它們都是吡咯衍生物與金屬鎂的絡(luò)合物，是植物進(jìn)行光合作用所必需的催化劑。植物中葉綠素a的含量通常是b的3倍。盡管葉綠素分子中含有一些極性基團(tuán)，但大的烴基結(jié)構(gòu)使它易溶于醚、石油醚等一些非極性的溶劑。胡蘿卜素(C40H56)是具有長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯。它有三種異構(gòu)體，即?-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和γ-胡蘿卜素，其中β-胡蘿卜素含量最多，也最重要。在生物體內(nèi)，β-胡蘿卜素受酶催化氧化形成維生素A。目前β-胡蘿卜素已可進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)，可作為維生素A使用，也可作為食品工業(yè)中的色素。葉黃素(C40H56O2)是胡蘿卜素的羥基衍生物，它在綠葉中的含量通常是胡蘿卜素的兩倍。與胡蘿卜素相比，葉黃素較易溶于醇而在石油醚中溶解度較小。CH2H3CCH2CH3MgH3CCH3CO2CH3CH3CH3CH3葉綠素a(R=CH3)葉綠素b(R=CHO)CH22CH33H3CCH3CH3CH3CH3H3CRR3CH3H3C3β-胡蘿卜素(R=H)葉黃素(R=OH)H3C333CH2OHCH3維生素A2薄層色譜原理常用TLC表示，又稱(chēng)薄層層析，屬于固液吸附色譜。樣品在薄層板上的吸附劑(固定相)和溶劑(移動(dòng)相)之間進(jìn)行分離。由于各種化合物的吸附能力各不相同，在展開(kāi)劑上移時(shí)，它們進(jìn)行不同程度的解吸，從而達(dá)到分離的目的。3薄層色譜的用途:1)化合物的定性檢驗(yàn)。(通過(guò)與已知標(biāo)準(zhǔn)物對(duì)比的方法進(jìn)行未知物的鑒定)在條件完全一致的情況，純碎的化合物在薄層色譜中呈現(xiàn)一定的移動(dòng)距離，稱(chēng)比移值(Rf值)，所以利用薄層色譜法可以鑒定化合物的純度或確定兩種性質(zhì)相似的化合物是否為同一物質(zhì)。但影響比移值的因素很多，如薄層的厚度，吸附劑顆粒的大小，酸堿性，活性等級(jí)，外界溫度和展開(kāi)劑純度、組成、揮發(fā)性等。所以，要獲得重現(xiàn)的比移值就比較困難。為此，在測(cè)定某一試樣時(shí)，最好用已知樣品進(jìn)行對(duì)照。Rf?溶質(zhì)最高濃度中心至原點(diǎn)中心的距離溶劑前沿至原點(diǎn)中心的距離2、快速分離少量物質(zhì)。(幾到幾十微克，甚至0.01μg)3、跟蹤反應(yīng)進(jìn)程。在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時(shí)，常利用薄層色譜觀察原料斑點(diǎn)的逐步消失，來(lái)判斷反應(yīng)是否完成。4、化合物純度的檢驗(yàn)(只出現(xiàn)一個(gè)斑點(diǎn)，且無(wú)拖尾現(xiàn)象，為純物質(zhì)。)此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。4薄層色譜的操作步驟1、吸附劑的選擇薄層色譜的吸附劑最常用的是氧化鋁和硅膠。1)、硅膠:“硅膠H”—不含粘合劑;“硅膠G”—含煅石膏粘合劑;其顆粒大小一般為260目以上。顆粒太大，展開(kāi)劑移動(dòng)速度快，分離效果不好;反之，顆粒太小，溶劑移動(dòng)太慢，斑點(diǎn)不集中，效果也不理想?；衔锏奈侥芰εc它們的極性成正比，具有較大極性的化合物吸附較強(qiáng)，因而Rf值較小。酸和堿醇、胺、硫醇酯、醛、酮芳香族化合物鹵代物、醚烯飽和烴本實(shí)驗(yàn)選擇的吸附劑為薄層色譜用硅膠G。2、薄層板的制備(濕板的制備)薄層板制備的好壞直接影響色譜的結(jié)果。薄層應(yīng)盡量均勻且厚度要固定。否則，在展開(kāi)時(shí)前沿不齊，色譜結(jié)果也不易重復(fù)。在燒杯中放入2g硅膠G，加入5—6ml0.5%的羧甲基纖維素鈉水溶液，調(diào)成糊狀。將配制好的漿料傾注到清潔干燥的載玻片上，拿在手中輕輕的左右搖晃，使其表面均勻平滑，在室溫下晾干后進(jìn)行活化。本實(shí)驗(yàn)用此法制備薄層板4片。3、薄層板的活化將涂布好的薄層板置于室溫涼干后，放在烘箱內(nèi)加熱活化，活化條件根據(jù)需要而定。硅膠板一般在烘箱中漸漸升溫，維持105—110?活化30min。氧化鋁板在200?烘4h可得到活性為?級(jí)的薄板，在150—160?烘4h可得活性為?—?級(jí)的薄板。活化后的薄層板放在干燥器內(nèi)保存待用。4、點(diǎn)樣先用鉛筆在距薄層板一端1cm處輕輕劃一橫線(xiàn)作為起始線(xiàn)，然后用毛細(xì)管吸取樣品，在起始線(xiàn)上小心點(diǎn)樣，斑點(diǎn)直徑一般不超過(guò)2mm。若因樣品溶液太稀，可重復(fù)點(diǎn)樣，但應(yīng)待前次點(diǎn)樣的溶劑揮發(fā)后方可重新點(diǎn)樣，以防樣點(diǎn)過(guò)大，造成拖尾、擴(kuò)散等現(xiàn)象，而影響分離效果。若在同一板上點(diǎn)幾個(gè)樣，樣點(diǎn)間距離應(yīng)為1。點(diǎn)樣要輕，不可刺破薄層。5、展開(kāi)薄層色譜的展開(kāi)，需要在密閉容器中進(jìn)行。為使溶劑蒸氣迅速達(dá)到平衡，可在展開(kāi)槽內(nèi)襯一濾紙。在層析缸中加入配好的展開(kāi)溶劑，使其高度不超過(guò)1cm。將點(diǎn)好的薄層板小心放入層析缸中，點(diǎn)樣一端朝下，浸入展開(kāi)劑中。蓋好瓶蓋，觀察展開(kāi)劑前沿上升到一定高度時(shí)取出，盡快在板上標(biāo)上展開(kāi)劑前沿位置。晾干，觀察斑點(diǎn)位置，計(jì)算Rf值。6、顯色被分離物質(zhì)如果是有色組分，展開(kāi)后薄層色譜板上即呈現(xiàn)出有色斑點(diǎn)。如果化合物本身無(wú)色，則可用碘蒸氣熏的方法顯色。還可使用腐蝕性的顯色劑如濃硫酸、濃鹽酸和濃磷酸等。對(duì)于含有熒光劑的薄層板在紫外光下觀察，展開(kāi)后的有機(jī)化合物在亮的熒光背景上呈暗色斑點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)樣品本身具有顏色，不必在熒光燈下觀察。三、1試劑:硅膠G,95%乙醇,石油醚(60—90?),丙酮,無(wú)水MgSO4,菠菜2儀器:層析板(25mm×75mm),125ml廣口瓶,研缽,分液漏斗四、實(shí)驗(yàn)步驟主要試劑和儀器1菠菜色素的提取稱(chēng)取5g無(wú)水的新鮮菠菜葉，用研缽研碎，加入15ml石油醚-乙醇溶劑(3:2)研磨至槳，抽濾，濾液放至分液漏斗中，加入5ml飽和NaCl水溶液，分層，上層再用飽和NaCl水溶液洗滌，有機(jī)層用無(wú)水MgSO4干燥，濾去MgSO4后，濾液放入小燒杯中，水浴蒸去溶劑(控制溫度(60?-70?)，濃縮至2.5ml左右為止。2薄層層析取活化后的層析板，點(diǎn)樣，小心放入盛有展開(kāi)劑(7:3石油醚-丙酮)的廣口瓶?jī)?nèi)，樣點(diǎn)不能浸到展開(kāi)劑中，蓋好瓶蓋，待展開(kāi)劑上升至規(guī)定高度時(shí)，取出層析板，在空氣中晾干，計(jì)算三種色素(葉綠素、葉黃素和胡蘿卜素)的Rf值。注:葉綠素會(huì)出現(xiàn)兩點(diǎn)(葉綠素a，葉綠素b)。葉黃素易溶于醇而在石油醚中溶解度小，從嫩綠葉中得到提取液，葉黃素會(huì)顯很少。五、注意事項(xiàng)注意薄層色譜、柱層析實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)的掌握和應(yīng)用六、思考題1、如何利用Rf值來(lái)鑒定化合物,2、薄層色譜法點(diǎn)樣應(yīng)注意些什么,3、常用的薄層色譜的顯色劑是什么,篇三:菠菜中色素的提取分離和鑒定(有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn))菠菜中的色素提取、分離及鑒定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.進(jìn)一步熟悉和掌握薄層色譜的原理及應(yīng)用2.了解菠菜中主要色素的基本性質(zhì)，通過(guò)菠菜色素的提取和分離，了解天然物質(zhì)分離提純方法及原理3.掌握用紫外光譜和熒光光譜鑒別菠菜中色素的原理及方法二、菠菜中的色素簡(jiǎn)介菠菜葉中富含多種色素成分,如葉綠素(綠色)、胡蘿卜素(橙黃色)和葉黃素(黃色)等多種天然色素。葉綠素存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素a(C55H72O5N4Mg)和葉綠素b(C55H7O6N4Mg)，結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。二者差別僅是a中一個(gè)甲基被b中的甲?；〈Ｋ鼈兌际沁量┭苌锱c金屬鎂的絡(luò)合物，是植物進(jìn)行光合作用所必需的催化劑。植物中葉綠素a的含量通常是b的3倍。盡管葉綠素分子中含有一些極性基團(tuán)，但分子中大的烷基結(jié)構(gòu)使它易溶于丙酮,乙醇,乙醚,石油醚等有機(jī)溶劑。胡蘿卜素(C40H56)是具有長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯。它有三種異構(gòu)體，即α-,β-和γ-胡蘿卜素，其中β-異構(gòu)體含量最多，也最重要。在生物體內(nèi)，β-體受酶催化氧化即形成維生素A。目前β-胡蘿卜素已可進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)，可作為維生素A使用，也可作為食品工業(yè)中的色素。葉黃素(C40H56O2)是胡蘿卜(來(lái)自:www.XIelw.Com寫(xiě)論文網(wǎng):菠菜色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)報(bào)告)素的羥基衍生物，它在綠葉中的含量通常是胡蘿卜素的兩倍。與β-胡蘿卜素相比，葉黃素較易溶于醇而在石油醚中溶解度較小。根據(jù)這些色素在有機(jī)溶劑中的溶解性,可將它們提取出來(lái)。CH2H3CRCH2CH3NH3CCH32CH3CH3CH3CH3CH332CH2O葉綠素a和葉綠素b的結(jié)構(gòu)(葉綠素a:R=CH3，葉綠素b:R=CHO)CH3CH33H3CRH3C3R33H3C3β-胡蘿卜素和葉黃素的結(jié)構(gòu)(β-胡蘿卜素:R=H，葉黃素:R=OH)菠菜中各色素的理化性質(zhì)綠色植物中的葉綠體色素在把光能轉(zhuǎn)變?yōu)榛瘜W(xué)能的光和作用中起著重要作用。葉綠體色素有葉綠素和類(lèi)胡蘿卜素兩類(lèi)，主要包括β-胡蘿卜素，葉黃素，葉綠素a和葉綠素b四種色素，它們?cè)谌~綠體中的含量比約為2:1:3:1。葉綠素是植物進(jìn)行光合作用所必需的催化劑。(1)葉綠素a有四個(gè)甲基與卟吩核連接(R—CH3)。蠟狀藍(lán)黑色微小晶體。熔點(diǎn)117,120?。溶于乙醇、乙醚、丙酮、氯仿、二硫化碳和苯,不溶于石油醚。其乙醇溶液是藍(lán)綠色，并有深紅色熒光。(2)葉綠素b有三個(gè)甲基和一個(gè)醛基與卟吩核連接(R=—CHO)。蠟狀藍(lán)黑色微小晶體。熔點(diǎn)120,130?。溶于乙醇和乙醚，難溶于石油醚。乙醚溶液有亮綠色。其它有機(jī)溶劑的溶液通常是綠色至黃綠色，并有紅色熒光?？捎米鞣试?、脂肪、油蠟、食品、化妝品和醫(yī)藥用的無(wú)毒著色劑。由綠葉用乙醇萃取而制得,也可用化學(xué)方法合成。(3)胡蘿卜素胡蘿卜素有多種異構(gòu)體,是四萜類(lèi)化合物。α-胡蘿卜素為紅色結(jié)晶。熔點(diǎn)187?。旋光度+385?(c=0.08,苯)。溶于乙醚、苯、氯仿。β-胡蘿卜素為紅棕色結(jié)晶,熔點(diǎn)181?,溶于乙醚、丙酮、苯、石油醚。γ-胡蘿卜素為紫色棱形結(jié)晶，熔點(diǎn)177.5?，溶于苯、氯仿。α-，β-和γ-胡蘿卜素常共存于許多植物中，β-胡蘿卜素含量最高。β-胡蘿卜素在植物中幾乎總是和葉綠素共存，含量最多的是胡蘿卜、棕櫚油以及多種綠葉植物。用做食物色素、保健食品，以及作防曬化妝品成分，還可用作制造維生素A的原料。(4)葉黃素又稱(chēng)胡蘿卜醇(carotenol)。一類(lèi)羥基類(lèi)胡蘿卜素的衍生物。以乙醚加甲醇精制，得黃色穗狀物。具金屬光澤的結(jié)晶。熔點(diǎn)183?。不溶于水。溶于油性溶劑。光穩(wěn)定性較好。主要與葉綠素、胡蘿卜素共存于綠色植物的葉和花中。在天然黃色素中，它的價(jià)格較貴，可用于食品著色。也有添加于禽飼料中，使禽蛋蛋黃增進(jìn)黃色。三.實(shí)驗(yàn)原理色譜法是一種物理的分離方法，其原理是利用混合物中各成分的物理化學(xué)性質(zhì)的差異，當(dāng)選擇某一條件使混合物中各成分流過(guò)支持劑或吸附劑時(shí)，各成分可因其物理性質(zhì)不同而分離。分離效果的好壞關(guān)鍵在于條件的選擇。薄層色譜是在玻片上涂布固體吸附劑，利用樣品對(duì)固體吸附劑的吸附能力不同，選擇對(duì)樣品溶解(解附)能力不同的溶劑，將混合物各成分按照極性大小不同隨溶劑前進(jìn)速度不同而分開(kāi)的方法。應(yīng)用:薄層色譜可以用來(lái)分離、鑒別化合物，也可以用于跟蹤反應(yīng)進(jìn)程。Rf值與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系Rf=溶質(zhì)移動(dòng)的距離溶劑移動(dòng)的距離Rf值越大，樣品與固體吸附劑吸附越緊，即樣品與固體吸附劑分子間作用力越大，說(shuō)明樣品極性越強(qiáng)或分子量越大。本實(shí)驗(yàn)利用有機(jī)溶劑將菠菜中的色素浸提出來(lái)，利用柱層析和薄層層析法將色素分離開(kāi)來(lái)，根據(jù)各色素的顏色、分子極性與Rf值的關(guān)系、吸收光譜、熒光對(duì)分離出的色素進(jìn)行鑒定歸屬，討論結(jié)構(gòu)對(duì)Rf值、吸收光譜的影響。四.儀器試劑新鮮菠菜、石油醚、乙醇、丁醇、中性氧化鋁(柱層析用)、薄層層析硅膠、丙酮、苯、飽和食鹽水、無(wú)水硫酸鈉、羧甲基纖維素鈉(CMC)、載玻片、研缽、層析缸、點(diǎn)樣毛細(xì)管、層析柱、滴管、分液漏斗、烘箱、紫外分光光度計(jì)、熒光儀。五、實(shí)驗(yàn)方法1薄層板的制備稱(chēng)取適量硅膠