修改要求你標(biāo)注

三黃雞NLRP3基因組織表達(dá)和分布研究導(dǎo)師：寧章勇教授研究生：葉錦輝Ppt模板的背景色有點(diǎn)深，是夠可以淺一些！下面是不是要有時(shí)間！實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c意義實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線(xiàn)結(jié)果討論總結(jié)致謝匯報(bào)提綱目的與意義NLRP3炎性復(fù)合體作用1.天然免疫應(yīng)答

天然免疫應(yīng)答是機(jī)體抵御病原生物入侵的第一道防線(xiàn)。宿主天然免疫細(xì)胞胞漿內(nèi)存在的NLRP3炎性復(fù)合體可識(shí)別胞內(nèi)感染的病原微生物及其產(chǎn)物并激活NLRP3炎性復(fù)合體，啟動(dòng)機(jī)體免疫防御反應(yīng)。2.參與炎癥反應(yīng)

NLRP3炎性復(fù)合體參與多種細(xì)菌、病毒、內(nèi)源性危險(xiǎn)信號(hào)的炎癥反應(yīng)。目的與意義不能完全照抄你師兄的，尤其是后面那張圖片，你自己再找一張機(jī)制圖吧！目的與意義NLRP3炎性復(fù)合體的激活機(jī)制這張圖一定要更換，這是你志強(qiáng)師兄用過(guò)的圖片！目的與意義實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩喾N細(xì)菌、病毒可激活NLRP3炎性復(fù)合體，引起炎癥反應(yīng)三黃雞是華南地區(qū)最重要的優(yōu)質(zhì)肉雞品種

通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR和免疫組化，確定了NLRP3炎性復(fù)合體在三黃雞各個(gè)組織中NLRP3的mRNA相對(duì)表達(dá)水平及NLRP3蛋白的組織分布，這有助于闡明不同組織中的NLRP3在雞炎癥性疾病中的作用，也為NLRP3在不同物種的功能和進(jìn)化研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線(xiàn)1.三黃雞NLRP3基因的克隆三黃雞的肝臟液氮研磨提取RNART-PCR獲得cDNAPCR獲得三黃雞NLRP3基因完整CDS區(qū)與克隆載體連接轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)質(zhì)粒提取PCR或酶切鑒定

測(cè)序，軟件分析實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線(xiàn)2.Real-timePCR檢測(cè)三黃雞NLRP3基因mRNA水平三黃雞8個(gè)組織液氮研磨提取RNART-PCR獲得cDNA利用相對(duì)定量的方法，采用Real-timePCR檢測(cè)三黃雞NLRP3基因mRNA水平實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線(xiàn)3.三黃雞NLRP3基因的克隆PCR擴(kuò)增含酶切位點(diǎn)的片段PET32α（+）-NLRP3質(zhì)粒構(gòu)建PET32α（+）-NLRP3質(zhì)粒PCR鑒定質(zhì)粒PET32α（+）-NLRP3的雙酶切鑒定重組質(zhì)粒測(cè)序及分析NLRP3蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)SDSWesternBlotting免疫印跡檢測(cè)NLRP3重組蛋白的純化NLRP3蛋白多克隆抗體的制備WeSTernblotting檢測(cè)抗體特異性實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線(xiàn)4.三黃雞NLRP3蛋白免疫組織化學(xué)檢測(cè)組織固定切片制作滅活內(nèi)源性酶

高壓修復(fù)孵育一抗、二抗DAB顯色蘇木素復(fù)染脫水封片鏡檢拍照結(jié)果1.1三黃雞NLRP3基因的克隆和質(zhì)粒鑒定結(jié)果1.2

三黃雞NLRP3基因序列分析NLRP3基因的同源性比較NLRP3基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)結(jié)果NLRP3蛋白的疏水性分析NLRP3蛋白信號(hào)肽的預(yù)測(cè)分析結(jié)果NLRP3蛋白的保守結(jié)構(gòu)域分析NLRP3蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)分析結(jié)果2.1NLRP3片段和β-actin片段的鑒定熒光定量三黃雞NLRP3基因和β-actin基因PCR結(jié)果結(jié)果2.2NLRP3和β-actin基因熒光定量PCR的溶解曲線(xiàn)NLRP3溶解曲線(xiàn)β-actin溶解曲線(xiàn)結(jié)果2.3

NLRP3和β-actin基因熒光定量PCR的擴(kuò)增曲線(xiàn)NLRP3擴(kuò)增曲線(xiàn)β-actin擴(kuò)增曲線(xiàn)結(jié)果NLRP3基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程為：y=-2.758973x+29.080881(R2=0.999497)2.4NLRP3基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)結(jié)果2.5β-actin基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)β-actin基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程為：y=-2.758807x+22.635201(R2=0.999815)結(jié)果2.6NLRP3基因在各個(gè)組織的相對(duì)表達(dá)水平結(jié)果3.1原核表達(dá)載體構(gòu)建建議下面這個(gè)圖用文本框，不要直接粘貼過(guò)來(lái)。結(jié)果3.2三黃雞NLRP3蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)及純化對(duì)各個(gè)數(shù)字代表的條帶進(jìn)行說(shuō)明?？贵w是如何制備的？如何檢測(cè)的？免疫兔子的程序和Elisa檢測(cè)結(jié)果結(jié)果3.3His標(biāo)簽單克隆抗體檢測(cè)NLRP3的表達(dá)3.4純化蛋白SDS蛋白凝膠電泳檢測(cè)文字太小。結(jié)果3.5純化蛋白WB檢測(cè)3.6抗血清特異性檢測(cè)文字太小。結(jié)果

4.三黃雞NLRP3蛋白的免疫組織化學(xué)檢測(cè)

A氣管B肺臟建議把組織學(xué)的圖片弄的大一些，一張ppt上面只有一張圖片就可以了。

C心臟D大腦F法氏囊E脾臟

H腎臟G肝臟討論1.

NLRP3作為最重要的病原感受器之一，對(duì)于調(diào)控炎性復(fù)合體的激活，避免其由于過(guò)度活化而造成不良結(jié)果，具有非常顯著的作用。NLRP3蛋白組織學(xué)特異性的表達(dá)和分布與各個(gè)組織器官在相應(yīng)炎癥中發(fā)揮的作用密切相關(guān)。2.哺乳類(lèi)動(dòng)物和禽類(lèi)之間的同源性非常低，說(shuō)明哺乳動(dòng)物和禽類(lèi)宿主炎癥反應(yīng)機(jī)制可能相異。關(guān)于雞NLRP3基因與其他物種同源性的分析結(jié)果，將會(huì)為哺乳類(lèi)和禽類(lèi)之間的物種進(jìn)化研究提供新的數(shù)據(jù)信息。文字適當(dāng)放大一些。討論3.所制備的雞NLRP3多克隆抗體有助于對(duì)NLRP3炎性復(fù)合體相關(guān)信號(hào)通路的深入研究，從而進(jìn)一步探究哺乳類(lèi)和禽類(lèi)炎癥反應(yīng)機(jī)制的差異。4..三黃雞的NLRP3mRNA在肺臟和氣管中的表達(dá)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他器官，氣管和肺臟是雞呼吸道系統(tǒng)疾病發(fā)生的靶器官，對(duì)宿主有著重要的影響作用。有研究證實(shí)禽流感病毒的感染可激活NLRP3炎性復(fù)合體，改變下游因子IL-1β的表達(dá)量。文字適當(dāng)放大一些。討論5.本研究NLRP3蛋白免疫組織化學(xué)分析結(jié)果顯示，氣管和肺臟上皮細(xì)胞均呈現(xiàn)出強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)。這個(gè)結(jié)果與Mansson等關(guān)于NALP3mRNA和蛋白存在于鼻息肉和正常的上呼吸道鼻粘膜的研究結(jié)果一致。6.本研究NLRP3蛋白免疫組織化學(xué)分析結(jié)果顯示，法氏囊中的皮質(zhì)和髓質(zhì)淋巴細(xì)胞則呈現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性，法氏囊是禽類(lèi)相比于哺乳類(lèi)動(dòng)物所特有的免疫器官，在雞對(duì)抗病原體感染中扮演著重要的角色，從該試驗(yàn)結(jié)果可推測(cè)，NLRP3可能是該免疫器官發(fā)生炎癥反應(yīng)的重要分子。文字適當(dāng)放大一些。討論7.BALB/c小鼠NLRP3蛋白表達(dá)的免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，只有極少量的肝細(xì)胞呈現(xiàn)中至強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，但是本試驗(yàn)中三黃雞大部分肝細(xì)胞呈現(xiàn)中至強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)。三黃雞大腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞呈現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，但在膠質(zhì)細(xì)胞中卻沒(méi)有出現(xiàn)，這與之前報(bào)道人類(lèi)的膠質(zhì)細(xì)胞分泌IL-1β結(jié)果相異。這些結(jié)果說(shuō)明，NLRP3組織分布在不同的物種間有顯著的差異。文字適當(dāng)放大一些。總結(jié)1.本實(shí)驗(yàn)成功克隆出三黃雞NLRP3基因2.重組原核表達(dá)純化蛋白制備出多克隆抗體3.獲得了三黃雞NLRP3基因在多個(gè)器官的基因表達(dá)數(shù)據(jù)4.從蛋白水平驗(yàn)證了三黃雞NLRP3蛋白在各組織的分布獲獎(jiǎng)與發(fā)表的論文1.獲獎(jiǎng)情況

2014年6月被評(píng)為華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院模范共產(chǎn)黨員

連續(xù)兩年獲得華南農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)秀碩士研究生一等獎(jiǎng)

華南農(nóng)業(yè)大學(xué)2015年優(yōu)秀畢業(yè)研究生2.發(fā)表論文情況（1）JinhuiYe,MengYu,KaizhaoZhang,JianxinLiu,QingnanWang,PanTao,KunJia,MingLiao,ZhangyongNing.Tissue-specificexpressionpatternanddistributionofNLRP3inChineseYellowChicken.Gene,2015.（underreview）（2）葉錦輝，張凱照，于夢(mèng)，王晴楠，劉健新，陶攀，寧章勇.波爾山羊線(xiàn)粒體融合蛋白2基因的克隆及序列分析.中國(guó)畜牧獸醫(yī),2015（已經(jīng)錄用，待刊出）.（3）張凱照,葉錦輝，于夢(mèng)，王晴楠，劉健新，陶攀，亓文寶，寧章勇.