自身免疫性疾病及其檢驗(yàn)7

當(dāng)前第1頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)第十七章

自身免疫性疾病及檢驗(yàn)第一節(jié)概述第二節(jié)自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制第三節(jié)常見自身免疫性疾病第四節(jié)自身免疫性疾病的檢驗(yàn)當(dāng)前第2頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)第一節(jié)概述（一）相關(guān)概念

（二）自身免疫病的特征

（三）自身免疫病的分類當(dāng)前第3頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)(一).相關(guān)概念自身耐受(self-tolerance)：

正常情況下，免疫系統(tǒng)對(duì)宿主自身的組織和細(xì)胞不產(chǎn)生免疫應(yīng)答的現(xiàn)象。自身免疫(autoimmunity)：

當(dāng)某種原因使自身耐受破壞時(shí)，免疫系統(tǒng)對(duì)自身組織成分發(fā)生免疫應(yīng)答的現(xiàn)象。產(chǎn)生低水平的自身抗體或自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞。當(dāng)前第4頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)胚胎期單一祖先細(xì)胞分化后形成可識(shí)別各種抗原的淋巴細(xì)胞克隆。胚胎期與抗原接觸的淋巴細(xì)胞自身可被破壞或抑制，成為禁忌克隆。當(dāng)前第5頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)自身免疫病:（autoimmunediseases，AID）是指機(jī)體對(duì)自身成分發(fā)生免疫反應(yīng)而導(dǎo)致的疾病。是由自身抗體或(和)自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫應(yīng)答。

自身抗體：是指抗自身組織，器官、細(xì)胞及細(xì)胞成分的抗體。在自身免疫性疾病患者的血中可檢測(cè)出。當(dāng)前第6頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)1.可有誘因，也可無誘因，但多數(shù)病因不清；2.患者以女性居多，并隨年齡增加發(fā)病率增加；3.有遺傳趨向；4.血清中有自身抗體或自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞。自身抗體在不同的自身免疫病中有交叉和重疊現(xiàn)象。(二).共同特征：當(dāng)前第7頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)6.病程較長(zhǎng)，多反復(fù)發(fā)作和慢性遷延。7.在體外可復(fù)制出相關(guān)動(dòng)物病理模型。8.免疫抑制劑如激素類藥物治療，可取得較好的療效。(二).共同特征：5.疾病的重疊現(xiàn)象，即一個(gè)病人可同時(shí)患一種以上的自身免疫病。當(dāng)前第8頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)(三).分類病名自身抗原器官特異性橋本甲狀腺炎甲狀腺蛋白、甲狀腺微粒體甲狀腺功能亢進(jìn)TSH受體重癥肌無力乙酰膽堿受體自身免疫性溶血性貧血紅細(xì)胞非器官特異性系統(tǒng)性紅斑狼瘡細(xì)胞核類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎變性IgG當(dāng)前第9頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)一、自身抗原的出現(xiàn)二、免疫調(diào)節(jié)異常三、Fas/FasL表達(dá)異常四、遺傳因素第二節(jié)

自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制當(dāng)前第10頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)

一、自身抗原出現(xiàn)

一系列因生物、物理、化學(xué)因素引起的自身組織結(jié)構(gòu)與成分發(fā)生改變，并能引起機(jī)體免疫系統(tǒng)針對(duì)這些成分產(chǎn)生免疫應(yīng)答的抗原物質(zhì)。

（1）.隱蔽抗原釋放甲狀腺球蛋白抗原→橋本甲狀腺炎精子抗原→男性不育眼晶體蛋白→過敏性眼炎

當(dāng)前第11頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)一、自身抗原出現(xiàn)

（2）.自身抗原性質(zhì)改變藥物刺激→藥改變血細(xì)胞抗原性→自身免疫性貧血/血小板減少性紫癜變性IgG→抗變性IgG抗體（類風(fēng)濕因子）→變性IgG-RF復(fù)合物→沉積于關(guān)節(jié)滑膜→類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎當(dāng)前第12頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)一、自身抗原出現(xiàn)

（3）.共同抗原引發(fā)的交叉反應(yīng)

A型溶血性鏈球菌與人腎小球基底膜有共同抗原決定簇→腎小球腎炎柯薩奇病毒感染→產(chǎn)生免疫應(yīng)答可攻擊胰島的β細(xì)胞→糖尿病當(dāng)前第13頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)

二、免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)異常

（1）.多克隆刺激劑的旁路活化EB病毒和超抗原→激活Hh→B細(xì)胞→抗體（2）.T細(xì)胞旁路活化（3）.輔助分子表達(dá)異常→自身反應(yīng)性T細(xì)胞（4）.Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞功能失衡

1型糖尿病SLE當(dāng)前第14頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)5）、Fas/FasL表達(dá)異常Fas普遍表達(dá)于多種細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞表面。FasL通常出現(xiàn)于活化的T細(xì)胞（如CTL）和NK細(xì)胞膜上，也可以游離形式存在。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明：如果Fas基因和FasL基因發(fā)生突變,引起自身免疫病。當(dāng)前第15頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)三、生理因素年齡因素：年齡發(fā)病率性別因素：某些疾病女性更易患病。當(dāng)前第16頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)四、遺傳因素1、自身免疫性疾病中發(fā)現(xiàn)疾病特異的基因。

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎－編碼促皮質(zhì)激素基因

1型糖尿病－染色體6q27的IDDM82、研究發(fā)現(xiàn)多種自身免疫性疾病的發(fā)生率與HLA的某些基因型的檢出率呈正相關(guān)。當(dāng)前第17頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)HLA與自身免疫病的關(guān)系病名抗原相對(duì)危險(xiǎn)值SLEDR35.8類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎DR44.2橋本甲狀腺炎DR53.2惡性貧血DR55.4當(dāng)前第18頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)第三節(jié)常見自身免疫病AID是由自身抗體和/或自身反應(yīng)性T細(xì)胞攻擊破壞自身細(xì)胞和組織所致。一、Ⅱ型超敏反應(yīng)：自身抗體+細(xì)胞性抗原二、Ⅲ型超敏反應(yīng)：自身抗原-抗體復(fù)合物介導(dǎo)三、Ⅳ型超敏反應(yīng)：自身反應(yīng)性T細(xì)胞介導(dǎo)當(dāng)前第19頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)（一）II型超敏反應(yīng)細(xì)胞損傷機(jī)制當(dāng)前第20頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)產(chǎn)生抗血細(xì)胞表面抗原抗體：自身免疫性溶血性貧血自身免疫性血小板減少性紫癜產(chǎn)生抗細(xì)胞表面受體抗體：

Graves?。谞钕倏哼M(jìn)?。?/p>

重癥肌無力（MG）產(chǎn)生抗細(xì)胞外抗原的自身抗體

肺出血腎炎綜合征（Goodpasture‘snephritis

）[抗基底膜Ⅳ型膠原]相關(guān)疾病當(dāng)前第21頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)Grave’sdisease抗ＴＳＨ受體抗體當(dāng)前第22頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)重癥肌無力（MG）抗乙酰膽堿受體抗體當(dāng)前第23頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)（二）Ⅲ型超敏反應(yīng)發(fā)生的機(jī)制當(dāng)前第24頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）相關(guān)疾病當(dāng)前第25頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)Systemiclupuserythematosus

SLEImmunofluorescentdetectionofantinuclearantibodyintheserumofanSLEpatient當(dāng)前第26頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)Rheumatoidarthritis

RACharacterizedbythepresenceofrheumatoidfactor(antibodiesagainstIgG)當(dāng)前第27頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)（三）Ⅳ型超敏反應(yīng)發(fā)生機(jī)制當(dāng)前第28頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)相關(guān)疾病胰島素依賴性糖尿病多發(fā)性硬化癥當(dāng)前第29頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)第四節(jié)自身免疫病的檢測(cè)自身抗體的檢測(cè)免疫球蛋白檢測(cè)補(bǔ)體檢測(cè)淋巴細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞因子檢測(cè)當(dāng)前第30頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)一、自身抗體抗自身組織，器官、細(xì)胞及細(xì)胞成分的抗體。高效價(jià)自身抗體是自身免疫性疾病的特點(diǎn)之一，也是臨床確診自身免疫性疾病的重要標(biāo)志。每種自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗體譜。當(dāng)前第31頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)常見自身抗體及檢測(cè)與RA相關(guān)自身抗體：

類風(fēng)濕因子（RF）、抗角蛋白抗體（AKA）抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗ＣＣＰ）抗核抗體（ANA）抗DNA抗體抗ENA抗體與小血管炎相關(guān)的自身抗體：

抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體、抗磷脂抗體當(dāng)前第32頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)一）.類風(fēng)濕因子（RF）是一種抗人或動(dòng)物

IgG分子Fc片段抗原決定簇的抗體，是以變性IgG為靶抗原的自身抗體。類型：以IgM型為主。它與天然IgG結(jié)合能力較差，易與變性IgG或免疫復(fù)合物中的IgG結(jié)合。當(dāng)前第33頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)檢測(cè)方法膠乳顆粒凝集試驗(yàn)：速率散射比濁法：ELISA：定性或半定量、靈敏度和特異性不高、只能檢測(cè)IgM型快速可定量、準(zhǔn)確度和敏感性高于前者、只能檢測(cè)IgM型特異性、敏感性、重復(fù)性均好可檢測(cè)不同類型當(dāng)前第34頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)臨床意義RF者中陽(yáng)性檢出率達(dá)到79.6%，其滴度與癥狀相關(guān)，但不能作診斷RA的唯一標(biāo)準(zhǔn)；但在其它自身免疫性疾?。⊿LE、硬皮病等）及部分老年人RF陽(yáng)性；但RF陰性不能排除RA的診斷。當(dāng)前第35頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)IgM型：血清中RF效價(jià)＞80IU/ml并伴有嚴(yán)重關(guān)節(jié)功能障礙，提示預(yù)后不良。IgG型：滑膜液中檢出IgG型RF比血清中IgM型RF更有意義；IgA型：血清或滑膜液中檢出是RF活動(dòng)的指標(biāo)之一。當(dāng)前第36頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)幾種疾病時(shí)RF的檢出率疾病陽(yáng)性率（%）類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎79系統(tǒng)性紅斑狼瘡30干燥綜合征95硬皮病80皮肌炎80混合性結(jié)締組織病25當(dāng)前第37頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)又稱抗絲集蛋白抗體（AFA）或抗角質(zhì)層抗體（ASCA）。主要見于RA患者，其陽(yáng)性率低為36-59%，特異性高可達(dá)95-99%。在非類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的自免病AKA陽(yáng)性檢出率極低。二）.抗角蛋白抗體（AKA）當(dāng)前第38頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)檢測(cè)方法間接免疫熒光法以大鼠食管中段粘膜組織切片作為反應(yīng)基質(zhì)。當(dāng)前第39頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)臨床意義AKA先于疾病的臨床表現(xiàn)，可用于RA的早期診斷。AKA是判斷RA愈后的一個(gè)標(biāo)志性抗體，高效價(jià)AKA的RA患者，常提示疾病較為嚴(yán)重。敏感性較低，陰性不能排除ＲＡ的診斷?？膳cＲＦ聯(lián)合檢測(cè)，提高對(duì)ＲＡ的診斷．但二者很少平行出現(xiàn)．當(dāng)前第40頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)1998年Schellekens和GirbalNeuhause等證實(shí)瓜氨酸是RA患者血清中特異的抗中間絲相關(guān)蛋白（filaggrin）抗體識(shí)別的主要組成性抗原決定簇成分。合成環(huán)瓜氨酸肽（cycliccitrullinatedpeptide,CCP），以此為抗原基質(zhì)用ELISA法檢測(cè)RA患者血清中的抗環(huán)瓜氨酸肽抗體。三）.抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗ＣＣＰ）當(dāng)前第41頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的一種高度敏感和特異的新指標(biāo)。自2002年3月歐洲診斷試劑公司（EURO-DIAGNOSTICA）推出世界上第一個(gè)抗CCP診斷試劑盒以來，越來越多的專家認(rèn)為抗CCP抗體將成為RA早期診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。三）.抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗ＣＣＰ）當(dāng)前第42頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)檢測(cè)方法ＥＬＩＳＡ法技術(shù)指標(biāo)價(jià)格人抗環(huán)胍氨酸肽抗體（CCP）試劑盒；Humananti-cycliccitrullinatedpeptide，CCPElisaKit；規(guī)格：96T3680.00當(dāng)前第43頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)臨床意義該抗體比RF具有更高的特異性（抗CCP抗體：97%，RF：62%），而敏感性相當(dāng)（抗CCP抗體：80%，RF：79%）?？笴CP在疾病早期可出現(xiàn)陽(yáng)性，并有很高的陽(yáng)性預(yù)期值（91%）。抗CCP抗體在RA早期患者中的陽(yáng)性率為79%，因而RA的早期診斷并及時(shí)開始恰當(dāng)?shù)闹委煂?duì)控制病情非常重要。當(dāng)前第44頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)四）.抗核抗體

（antinuclearantibody,ANA)是一組將自身真核細(xì)胞的各種細(xì)胞核成分作為靶抗原的自身抗體的總稱;主要是

IgG、也有IgM、IgA和IgD；它無器官特異性和種屬特異性，故該類抗體可與所有動(dòng)物的細(xì)胞核發(fā)生反應(yīng)。當(dāng)前第45頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)在大部分自身免疫病呈陽(yáng)性，但正常老年人有低效價(jià)的ANA。細(xì)胞核成分復(fù)雜，因此產(chǎn)生許多ANA，不同的自身免疫病可形成不同的特征性抗體譜。ANA分類：抗DNA抗體抗組蛋白抗體抗非組蛋白抗體抗核仁抗體當(dāng)前第46頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)間接免疫熒光法

（indirectimmunofluorescence,IIF）作為總ANA

篩選的經(jīng)典試驗(yàn)；可以小鼠肝細(xì)胞印片作為抗原底物片，目前最常用Hep-2細(xì)胞（核質(zhì)豐富）作為抗原。不同的熒光核型，提示不同的自身免疫性疾病。當(dāng)前第47頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)培養(yǎng)Hep-2細(xì)胞作為底物固定于載玻片上；加受檢血清：血清中ANA與核抗原結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物；加FITC標(biāo)記的抗人IgG：形成標(biāo)記抗體-抗原-抗體復(fù)合物；熒光顯微鏡下觀察結(jié)果：在底物片上ANA熒光著染強(qiáng)度和免疫熒光圖形。操作過程：當(dāng)前第48頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)均質(zhì)型包括：抗ＤＮＰ抗體抗組蛋白抗體抗dsDNA抗體高效價(jià)：SLE低效價(jià)：RA當(dāng)前第49頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)斑點(diǎn)型高滴度見于MCTD也見于SLE、硬皮病、SS等當(dāng)前第50頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)核膜型抗dsDNA抗體高效價(jià)：幾乎僅見于SLE，且提示病情活動(dòng)抗核抗體核膜型當(dāng)前第51頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)抗核仁型抗RNA抗體高效價(jià)對(duì)硬皮病診斷有一定特異性，但也見于雷諾病。當(dāng)前第52頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)五）.抗DNA抗體抗雙鏈DNA（dsDNA)抗體：抗單鏈DNA（ssDNA)抗體：特異性達(dá)95-100%，診斷SLE標(biāo)準(zhǔn)之一；其效價(jià)高低反映疾病的活動(dòng)性；但敏感性僅為30%-50%。特異性較差，可見于SLE、其他結(jié)締組織病。當(dāng)前第53頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)檢測(cè)方法間接熒光免疫法：ELISA法RIA法當(dāng)前第54頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)間接熒光免疫法

檢測(cè)抗dsDNA抗體請(qǐng)問能否用HEP-2細(xì)胞作為抗原基質(zhì)。可以，但靈敏度較低。那可以用什么可替代HEP-2細(xì)胞作為抗原基質(zhì)，為什么？馬疫錐蟲或綠蠅短膜蟲作為抗原基質(zhì)。特異性強(qiáng)－其動(dòng)基體由純凈的環(huán)狀dsDNA構(gòu)成靈敏度高－標(biāo)本稀釋10倍染色陽(yáng)性即有診斷意義當(dāng)前第55頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)六).抗ENA抗體ENA(extractablenuclearantigen)可提取核抗原的總稱，可用鹽水或磷酸鹽緩沖液從細(xì)胞核中被提取。主要包括Sm、U1－RNP、Rib、SSA、SSB、Jo-1、Scl-70等抗原。

當(dāng)前第56頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)六).抗ENA抗體不同的自身免疫性疾病可產(chǎn)生不同的抗ENA抗體。不同特性的抗ENA抗體在各種自身免疫性疾病中的陽(yáng)性率有明顯差異，有些有很高的特異性。用westerblot進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)前第57頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)從小?；蛲眯厍惶崛〉腅NA抗原，經(jīng)（SDS）電泳，按分子量大小分離成區(qū)帶；將各抗原區(qū)帶轉(zhuǎn)印至硝酸纖維膜；加待檢血清加在硝酸纖維膜上：加入酶標(biāo)記抗人IgG抗體：形成抗原-抗體-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物；再加入酶的底物：顯色反應(yīng)，參照此時(shí)抗原區(qū)帶的分子量及各區(qū)帶的相對(duì)位置，可辯讀出各特異性抗ENA抗體1、操作過程：當(dāng)前第58頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)抗Sm抗u1RNP抗SSA抗SSB抗Scl-70抗Jo-1抗rRNP抗DE抗RA-5413.5kD70kD52kD13.4kD11.5kD38kD55kD54kD29kD28kD32kD29kD28kD86kD22kD67kD16.5kD28.5kD20kD18.5kD18kD47kD45kD當(dāng)前第59頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)2、結(jié)果分析：（抗Sm抗體為例）Sm抗原電泳后，位于29kD、28kD、13.5kD三個(gè)位置；抗Sm13.5kD29kD28kD結(jié)果報(bào)告問題:1）出現(xiàn)三條帶同時(shí)出現(xiàn)即為抗Sm抗體陽(yáng)性,但能否確定為SLE?2）出現(xiàn)三條帶中的一條帶或兩條帶能否報(bào)告為抗Sm抗體陽(yáng)性?是SLE的標(biāo)志抗體，陽(yáng)性率為30-50%。當(dāng)前第60頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)病例：患者王某，病初發(fā)熱，因給予氨芐青霉素而過敏出現(xiàn)皮疹、關(guān)節(jié)痛，被疑為“SLE”，當(dāng)時(shí)檢測(cè)總ANA陰性，而多肽抗體中抗13500陽(yáng)性，被視為抗Sm陽(yáng)性，即用大量激素進(jìn)行“正規(guī)”治療，導(dǎo)致激素的嚴(yán)重不良反應(yīng)?；颊咻氜D(zhuǎn)南北，不僅造成了極大的經(jīng)濟(jì)損失，而且嚴(yán)重影響了病人的身心健康?？筍m13.5kD當(dāng)前第61頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)結(jié)論：只出現(xiàn)一條帶或兩條帶不能判斷為抗Sm抗體陽(yáng)性。抗29000、28000和13500三條帶均陽(yáng)性的可判斷為抗Sm抗體陽(yáng)性，但要作出SLE的診斷一定要結(jié)合臨床。SLE的診斷必須密切結(jié)合臨床，不能完全依靠自身抗體的檢測(cè)結(jié)果。當(dāng)前第62頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)3、臨床意義：

1）抗Sm抗體：是SLE的血清標(biāo)志抗體，已列入SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)。陽(yáng)性檢出率30－50%，其水平不反映SLE疾病的活動(dòng)性。對(duì)早期、不典型的SLE診斷有很大幫助。但陰性不能排除SLE的診斷。當(dāng)前第63頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)2）抗核RNP抗體（抗nRNP）：是診斷混合性結(jié)締組織?。∕CTD）的重要血清學(xué)依據(jù)，列入MCTD的診斷標(biāo)準(zhǔn)。在MCTD患者陽(yáng)性率高達(dá)95%。但其無疾病特異性，在其他自身免疫病有一定的檢出率，如SLE約30%，SS約20%。由于Sm和RNP是同一分子復(fù)合物中的不同抗原位點(diǎn)，因此二者有相關(guān)性，常同時(shí)陽(yáng)性。當(dāng)前第64頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)3）抗SSA和抗SSB抗體：在干燥綜合征中陽(yáng)性率40-95%和40-95%，同時(shí)檢測(cè)可提高對(duì)干燥綜合征的診斷率。另外在SLE中的陽(yáng)性率為20-60%和10-20%。

4）抗Jo-1抗體：對(duì)多發(fā)性皮肌炎（PM）具有特異性，陽(yáng)性檢出率達(dá)25－35%。

5）抗Scl-70抗體：是進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮?。≒SS）的特征抗體，陽(yáng)性檢出率40－60%。當(dāng)前第65頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)可同時(shí)對(duì)多項(xiàng)抗體進(jìn)行分析，靈敏度高、特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便；目前應(yīng)用最為廣泛。4、評(píng)價(jià)：當(dāng)前第66頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)七）、抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體

（antineutrophilcytoplasmicantibody,ANCA)是一組以人中性粒細(xì)胞胞質(zhì)成分靶抗原的自身抗體的總稱;與臨床多種小血管炎性疾病密切相關(guān)。主要是IgG、也有IgM、IgA和IgD；當(dāng)前第67頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)分型：胞質(zhì)型（cANCA）：靶抗原是蛋白酶3(PR3)，為嗜天青顆粒主要成分；核周型（pANCA）：靶抗原是髓過氧化物酶(MPO)，為嗜天青顆粒另一主要成分當(dāng)前第68頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)檢測(cè)方法間接免疫熒光法（IIF）：總ANCAELISA法：特異性ANCA當(dāng)前第69頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)間接熒光免疫法檢測(cè)ANCA將中性粒細(xì)胞固定于載玻片上；滴加待測(cè)血清并孵育；加入熒光標(biāo)記的抗人IgG并孵育；熒光顯微鏡下觀察。cANCA陽(yáng)性圖pANC陽(yáng)性圖乙醇固定pANC陽(yáng)性圖乙醛固定當(dāng)前第70頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)臨床意義ANCA被認(rèn)為是原發(fā)性小血管炎的特異性血清標(biāo)志物;是診斷、療效觀察、病情活動(dòng)和復(fù)發(fā)的一項(xiàng)重要指標(biāo)。

韋格納肉芽腫（WG）的cANCA陽(yáng)性率高達(dá)90%，抗PR3陽(yáng)性是診斷WG特異性指標(biāo)。新月形腎小球腎炎其ANCA陽(yáng)性率高達(dá)80%。當(dāng)前第71頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)八）、其他自身抗體相關(guān)疾病抗體類型自身免疫性肝炎抗平滑肌抗體ASMA抗線粒體抗體AMA橋本甲狀腺炎抗甲狀腺球蛋白抗體ATGA抗甲狀腺微粒體抗體TMA神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫病抗乙酰膽堿受體AchR抗骨髓肌抗體StrAb當(dāng)前第72頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)九)自身抗體檢測(cè)的臨床應(yīng)用首先選擇敏感性高、特異性不強(qiáng)的方法進(jìn)行初篩；再選擇特異性高，相關(guān)性強(qiáng)的方法。當(dāng)前第73頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)疑為SLE的患者：發(fā)熱、蝶形紅斑、口腔潰瘍等抗ANA(+)和（或）抗dsDNA抗體(+)總ANA+抗dsDNA抗體當(dāng)前第74頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室診斷為SLE抗ENA抗體譜檢測(cè)抗Sm(+)和（或）抗RNP(+)抗Sm13.5kD29kD28kD38kD15kD抗rRNP16.5kD當(dāng)前第75頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)二、免疫球蛋白檢測(cè)在自身免疫性疾病中，由于產(chǎn)生大量自身抗體，故免疫球蛋白含量高于正常值，以IgG升高較為明顯；動(dòng)態(tài)觀察免疫球蛋白量的變化，可反映疾病的進(jìn)展情況。當(dāng)前第76頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)三、補(bǔ)體檢測(cè)的意義在以Ⅱ、Ⅲ型超敏反應(yīng)機(jī)制發(fā)生的自身免疫性疾病中，補(bǔ)體可參與反應(yīng)。疾病活躍期時(shí)，補(bǔ)體量明顯降低；疾病緩解期時(shí)，補(bǔ)體含量正常。當(dāng)前第77頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)四、淋巴細(xì)胞檢測(cè)淋巴細(xì)胞數(shù)量及功能的改變是介導(dǎo)免疫病理?yè)p傷的重要因素；SLE的活躍期，明顯的CD4/CD8亞群倒置，Tc細(xì)胞高于穩(wěn)定期。當(dāng)前第78頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)第三部分

常見自身免疫病及檢測(cè)當(dāng)前第79頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)一、系統(tǒng)性紅斑狼瘡

（SLE）是一個(gè)累及多系統(tǒng)多器官，臨床表現(xiàn)復(fù)雜，病程遷延反復(fù)的自身免疫性疾病。由于體內(nèi)有大量致病性自身抗體和免疫復(fù)合物，造成組織損傷。當(dāng)前第80頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)據(jù)估算，我國(guó)大約有一百萬SLE患者，并呈逐年增加趨勢(shì)。多發(fā)于生育年齡女性。近20年來，由于臨床免疫學(xué)的飛速發(fā)展，SLE的早期診斷和治療已經(jīng)不再是難題。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前我國(guó)SLE患者的10年存活率達(dá)84％以上，已經(jīng)處于國(guó)際先進(jìn)水平。當(dāng)前第81頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)一)診斷標(biāo)準(zhǔn)：面部蝶形紅斑盤狀紅斑：面部的隆起紅斑光過敏：是曬后皮膚過敏口腔或鼻咽部潰瘍關(guān)節(jié)炎：非侵蝕性，＞2個(gè)外周關(guān)節(jié)漿膜炎當(dāng)前第82頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)7.腎臟病變：蛋白尿或細(xì)胞管型8.神經(jīng)病變：癲癇發(fā)作或精神病9.血液異常：各系細(xì)胞減少免疫學(xué)異常：

狼瘡細(xì)胞陽(yáng)性抗ds－DNA抗體陽(yáng)性抗SM抗體陽(yáng)性梅毒實(shí)驗(yàn)假陽(yáng)性11.抗核抗體陽(yáng)性當(dāng)前第83頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)當(dāng)前第84頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)當(dāng)前第85頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)當(dāng)前第86頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)當(dāng)前第87頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)當(dāng)前第88頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)當(dāng)前第89頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)當(dāng)前第90頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)當(dāng)前第91頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)抗核抗體陽(yáng)性當(dāng)前第92頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)上述11項(xiàng)中，如有4項(xiàng)或4項(xiàng)以上陽(yáng)性，則可診斷為SLE，其特異性為98%，敏感性97%。當(dāng)前第93頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)二)SLE的實(shí)驗(yàn)室檢查血常規(guī)：可有貧血、或白細(xì)胞減少、或血小板減少尿液：蛋白尿或出現(xiàn)細(xì)胞管型血沉：增快C反應(yīng)蛋白：增高補(bǔ)體：降低時(shí)提示處于活動(dòng)期。自身抗體：(抗ANA、抗dsDNA、抗Sm抗體）當(dāng)前第94頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)三)病例分析患者周某，女，31歲，主訴“乏力，發(fā)熱3月余，伴顴部紅斑1月余，檢出蛋白尿2周余”。3個(gè)月前患者無明顯誘因出現(xiàn)低熱，乏力，1月前出現(xiàn)顴部紅斑，2周前檢出蛋白尿(++)。查體：T37.8℃

P90次/分R21次/分BP110/80mmHg

面部蝶形紅斑，口腔潰瘍，右腎區(qū)輕微叩痛，余無特殊。當(dāng)前第95頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室檢查：血常規(guī)：正常尿常規(guī)：尿蛋白(++)，RBC3-8/Hp

腎功能：Cr：230umol/L↑BUN：6.0mmol/LN當(dāng)前第96頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)問：請(qǐng)分析該患者可能患何病？1.病史：女性、發(fā)熱、顴部紅斑。2.查體：低熱、口腔粘膜潰瘍、右腎區(qū)輕微叩痛

3.實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：尿常規(guī)及腎功檢測(cè)異常：提示腎臟病變考慮系統(tǒng)性紅斑狼瘡。當(dāng)前第97頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)自身抗體檢測(cè)：

總ANA(或/和)抗dsDNA↓異常

抗ENA譜問：做什么檢查有助于特異性診斷？免疫球蛋白、血沉(ESR)、C3、C4：?jiǎn)枺鹤龊螜z測(cè)有助于判斷是否在活動(dòng)期？當(dāng)前第98頁(yè)\共有112頁(yè)\編于星期四\10點(diǎn)結(jié)果：