性病實驗室診斷標準及應用

性病實驗室診斷標準及應用第一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六常見性傳播疾病的實驗室診斷“金標準”

淋病淋球菌培養(yǎng)梅毒暗視野檢查+TPPA(FTA-ABS,WB)

沙眼衣原體衣原體培養(yǎng)+核酸擴增技術(shù)支原體感染支原體培養(yǎng)生殖器皰疹病毒培養(yǎng)+核酸擴增技術(shù)尖銳濕疣核酸雜交和核酸擴增技術(shù)

HIV/艾滋病蛋白印跡試驗+HIV抗原檢測滴蟲性陰道炎濕片法+毛滴蟲培養(yǎng)細菌性陰道病G染色查線索細胞軟下疳細菌培養(yǎng)+核酸擴增技術(shù)性病性淋巴肉芽腫衣原體培養(yǎng)+核酸擴增技術(shù)

第二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六一、梅毒的診斷標準梅毒診斷要點：梅毒診斷標準根據(jù)衛(wèi)生部衛(wèi)生行業(yè)標準《梅毒診斷標準》(WS273－2007)。梅毒診斷分為一期、二期、三期、隱性和胎傳梅毒。梅毒診斷原則應根據(jù)流行病學史、臨床表現(xiàn)及實驗室檢查等進行綜合分析。分期/類

病例分類

病史

臨床表現(xiàn)

實驗室檢查

一期梅毒

疑似病例性接觸史，或性伴感染史硬下疳非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性確診病例(實驗室診斷病例)同上同上暗視野檢查陽性；或梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性，非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性；第三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六分期/類病例分類病史臨床表現(xiàn)實驗室檢查二期梅毒疑似病例性接觸史，或性伴感染史二期梅毒皮疹非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性確診病例(實驗室診斷病例)同上同上暗視野檢查陽性；或梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性，非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性三期梅毒疑似病例性接觸史，或性伴感染史三期梅毒表現(xiàn)，病期在2年以上非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性確診病例(實驗室診斷病例)同上同上梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性，非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性；或三期梅毒組織病理改變第四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六分期/類病例分類病史臨床表現(xiàn)實驗室檢查隱性梅毒疑似病例性接觸史，或性伴感染史；既往無梅毒診斷與治療史無任何臨床癥狀與體征非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性確診病例(實驗室診斷病例)同上同上梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性，非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性胎傳梅毒疑似病例生母為梅毒患者或隱性梅毒者胎傳梅毒的臨床表現(xiàn)；或無任何臨床癥狀。非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性，其抗體滴度高于生母4倍及以上，但低于該值并不排除胎傳梅毒；或出生后3個月隨訪滴度升高。應取嬰兒靜脈血進行檢測，而不是臍帶血確診病例(實驗室診斷病例)同上同上暗視野檢查陽性；梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性，非梅毒螺旋體抗原血清試驗陽性，其抗體滴度高于生母4倍及以上，但低于該值并不排除胎傳梅毒，或出生后3個月隨訪滴度升高。應取嬰兒靜脈血進行檢測，而不是臍帶血第五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六

1、暗視野檢查/鍍銀染色法2、非梅毒螺旋體抗原血清試驗3、梅毒螺旋體抗原血清試驗（一）實驗室診斷方法的臨床意義第六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六暗視野顯微鏡法直接鏡檢圖像（×1000）第七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六1、暗視野檢查臨床意義當標本陽性時，可確診梅毒。適宜于早期梅毒(一、二期)，特別是早期一期梅毒、早期先天梅毒。暗視野顯微鏡檢查法被WHO確定為性病實驗室的必備方法當標本陰性時，不能排除梅毒診斷不適用于來至口腔的標本暗視野顯微鏡檢查法是能夠立即在獲得性或先天性梅毒的早期進行直接診斷的唯一標準第八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六2、RPR類臨床意義RPR等試驗一般認為是梅毒初篩試驗?陽性者，均需作確證試驗。VDRL用于神經(jīng)梅毒診斷。有些疾病可導致生物學假陽性。復發(fā)或再感染可陽轉(zhuǎn)或滴度升高。為療效觀察、判愈方法。早期梅毒治療后血清滴度應下降4倍認為治療有效。第九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六3、TPPA（TPHA）臨床意義1、為梅毒確證試驗，其敏感性：一期梅毒76％（69％－90％）二期梅毒為100％潛伏梅毒為97％（97％－100％）晚期梅毒為94％其特異性：100％2、治療后可終生陽性，不能作為療效指標。3、IgM抗體可作為梅毒早期診斷或胎傳梅毒診斷。4、可有1％生物學假陽性存在，如，SLE。第十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六兩類血清學方法臨床意義的比較RPR類：RPR等試驗可用于大標本量的篩查？RPR定量可排除生物學假陽性？RPR是療效判定的指標RPR是療后隨訪的指標RPR用于判定是否血清復發(fā)TPPA類：是金標準TPPA等試驗是確診指標在HIV感染者中，血清學試驗可發(fā)生難于解釋的現(xiàn)象，若懷疑梅毒感染應作HIV檢查第十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六（二）實驗室診斷方法臨床應用1、適用對象2、方法學的靈敏度3、不同病期方法學選擇4、血清學結(jié)果解釋5、RPR滴度與治療效果6、療后血清學隨訪7、生物學假陽性8、胎傳梅毒實驗室診斷標準9、神經(jīng)梅毒實驗室診標準第十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六1、適用對象皮膚、性病門診輸血前檢查手術(shù)前檢查入院檢查產(chǎn)前檢查檢驗檢疫第十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六2、方法學的靈敏度病原學檢查：PCR鍍銀染色暗視野血清學方法：FTA-ABSTPPARPR抗體：IgMIgG第十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六3、不同病期方法學選擇一期二期三期暗視野、鍍銀染色、PCR、IgMFTA-ABS、TPPA、ELISA、CLIA、RT、WB、RPR、暗視野、鍍銀染色、PCR等FTA-ABS、TPPA、ELISA、CLIA、RT、WB、RPR、VDRL、病理等第十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六4、血清學結(jié)果解釋請在此輸入您的文本。請在此輸入您的文本。請在此輸入您的文本。請在此輸入您的文本。請在此輸入您的文本。第十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六TPPA為什么做滴度？經(jīng)常有人提問第十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第十八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六夫、妻、子結(jié)果不一致情況？第十九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六5、RPR滴度與治療效果1、治療成功：早期梅毒患者在治療后6個月內(nèi)癥狀消失，且RPR滴度有至少4倍的下降。晚期梅毒或隱性梅毒患者在治療后12~24個月內(nèi)RPR滴度有至少4倍的下降。2、治療失敗：治療后癥狀持續(xù)或重新出現(xiàn)；治療后RPR滴度反而上升了4倍或以上；RPR滴度較高（1:32或以上）但在六個月內(nèi)沒有達到4倍的下降?？姑范局委熓〉牟∪藨紤]合并HIV感染及神經(jīng)梅毒的可能性。3、血清固定：經(jīng)正規(guī)治療后，梅毒患者RPR一般都會轉(zhuǎn)為陰性，但有1~3%的病人即使經(jīng)足量抗梅治療，RPR滴度仍持續(xù)呈低滴度陽性，這種現(xiàn)象稱為血清固定，其原因尚不明了。血清固定患者的滴度重又上升則提示再次感染梅毒。第二十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六6、療后血清學隨訪方法:RPR時間：第1年，每3個月檢查1次第2年，每6個月檢查1次第3年，最后1個月檢查第二十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六7、生物學假陽性常見原因RPR類試驗TPPA類試驗感染因素細菌性心內(nèi)膜炎、軟下疳病毒性肝炎、傳單增多癥結(jié)核、麻風、麻疹、瘧疾、水痘支原體或雙球菌引起的肺炎其它螺旋體感染，如品他、雅司病傳單增多癥麻風瘧疾萊姆病非感染因素生理，如年老、妊娠毒品惡性腫瘤SLE類多發(fā)性骨髓瘤慢性肝病損害SLE甲狀腺炎大家忘掉只有梅毒才能達到1:8？第二十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第二十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六RPR在妊娠患者中，有28%的假陽性發(fā)生第二十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第二十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六XX梅毒事件（華西都市報）2012年8月，李冬梅（化名）懷孕。2012年12月26日，初檢胎檢篩查疑患梅毒。2013年1月4日(另一家機構(gòu)），夫妻再檢均呈陰性。2013年5月14日，待產(chǎn)，第2天產(chǎn)檢結(jié)果被告之有梅毒。2013年5月16日，剖腹產(chǎn)。2013年5月21日（另一家機構(gòu)），李冬梅RPR（-）TPPA（+），雙女與母一致。2013年9月，前往重慶，RPR（-）TPPA（+）。第二十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六8、胎傳梅毒實驗室診斷標準暗視野檢查陽性。非梅毒螺旋體抗原血清試驗持續(xù)陽性。非梅毒螺旋體抗原血清抗體滴度是母親的4倍以上。患兒19S－IgM陽性。隨訪18個月觀察。第二十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六9、神經(jīng)梅毒的實驗室診斷梅毒血清學試驗（RPR、TPPA）陽性。腦脊液異常（WBC計數(shù)≥10*10/L

蛋白量>500mg/L）3.

腦脊液VDRL試驗陽性（可FTA-ABS陽性）。6第二十八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六梅毒血清學檢測---策略一非梅毒螺旋體抗原血清試驗（RPR)陽性陰性報告：RPR陰性梅毒螺旋體抗原血清試驗（TPPA)RPR定量試驗報告：RPR陰性滴度TPPA陽性陽性陰性報告：RPR陽性TPPA陰性？前帶、早期第2次收費？1：8習慣？第二十九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六孕產(chǎn)婦梅毒檢測及服務流程接受初次產(chǎn)前保健的孕產(chǎn)婦采用RPR或TRUST等篩查采用TPPA等證實陽性陰性診斷梅毒感染陽性排除梅毒感染陰性繼續(xù)常規(guī)產(chǎn)前保健2個療程治療，RPR定量檢測和隨放？方法、前帶、早期？真陽？真能排除？真梅毒第三十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六梅毒血清學檢測---策略二梅毒螺旋體血清試驗（ELISA)陽性陰性報告：ELISA陰性推薦TPPA復檢RPR定性、定量試驗報告：ELISA陽性RPR陽性及滴度陽性陰性報告：ELISA陽性,TPPA陰性,RPR陰性報告：ELISA陽性RPR陰性陽性陰性報告：ELISA陽性,TPPA陽性,RPR陰性？敏感性第2次收費？？收費不？以誰為準第三十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六我室推薦的梅毒血清學試驗---策略三

梅毒螺旋體抗原血清試驗（TPPA等）TPPA-TPPA+陰性報告RPR-RPR+現(xiàn)癥梅毒抗梅治療療后觀察既往感染隨訪或抗梅治療第2次收費？第三十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六我室推薦的梅毒血清學試驗---策略四

梅毒螺旋體抗原血清試驗（TPPA等）RPR滴度（1:32直到出現(xiàn)陰性）TPPA-RPR-陰性報告TPPA-RPR+生物學假陽性TPPA+RPR-既往感染或隨訪TPPA+RPR+現(xiàn)癥病人抗梅治療療效隨訪面對當前梅毒血清學檢測存在的問題，即將有策略五…第三十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六梅毒孕產(chǎn)婦所生兒童隨訪與先天梅毒感染狀態(tài)監(jiān)測流程梅毒產(chǎn)婦所生新生兒不能開展暗視野、IgM采靜脈血、RPR定量能開展暗視野、IgM陰性診斷先天梅毒感染陽性滴度≧母親4倍，無論有無癥狀滴度﹤母親4倍，有癥狀滴度﹤母親4倍，無癥狀治療、隨訪18月TPPA陽性預治療每3個月RPR定量，觀察癥狀陽性陰性RPR滴度不下降或上升，結(jié)合癥狀6月后RPR未陰，滴度低水平連續(xù)2次陰性每3個月TPPA18月TPPA+連續(xù)2次陰性排除先天梅毒感染陰性無此線？第三十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六歐盟梅毒指南（2008年版）初篩試驗：選用EIA、TPPA/TPHA如果懷疑早期梅毒最好用TP特異性IgM檢測，如果陰性，1～2周后重復檢測RPR/VDRL不推薦作為初篩試驗，但可作為有癥狀早期梅毒的快速檢測方法，需要同時檢測滴度。第三十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六確證試驗初篩陽性，應用另外一種TP特異性試驗確證?EIA用TPPA/TPHA確證?TPPA/TPHA用EIA確證然后再做滴度如果初篩和確證結(jié)果不一致，則做重組抗原免疫印跡試驗初篩和確證試驗陽性，而RPR/TRUST陰性，推薦做IgM檢測。陽性結(jié)果需要對第二份血樣進行重復檢測以確證。第三十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六判斷梅毒活動性成功治療后，滴度≥32罕見。IgM檢測，可以說明疾病的活動性，但是晚期梅毒IgM可能為陰性。如果治療前RPR/TRUST為陰性，IgM檢測有助于判斷病情。第三十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六血清學試驗選擇篩選試驗:1.EIA；2.TPPA;3.TPPA/TPHA加VDRL/RPR。疑似早期梅毒：EIA-IgM初篩陽性，另一實驗證實TPPA,EIA,RPR/VDRLEIA+:confirmwithTPPAorTPHA。2個試驗不一致:免疫印跡。VDRL/RPR滴度1:16、IgM陽性為梅毒活動的標志之一。治療當天滴度為判斷療效的最佳依據(jù)。梅毒早期VDRL/RPR滴度可能較低。第三十八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第三十九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第四十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第四十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第四十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第四十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第四十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第四十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六二、淋病的實驗室診斷標準淋病診斷要點：淋病診斷標準根據(jù)衛(wèi)生部衛(wèi)生行業(yè)標準《淋病診斷標準》(WS268－2007)。淋病診斷原則應根據(jù)流行病學史、臨床表現(xiàn)及實驗室檢查等進行綜合分析。

分期/類

病例分類

病史

臨床表現(xiàn)

實驗室檢查

淋病

疑似病例不安全性行為，或性伴感染史，或新生兒的母親有淋病史

男性尿道膿性分泌物；女性宮頸粘液膿性分泌物或膿性分泌物；肛交者直腸粘液膿性分泌物或膿性分泌物；新生兒眼結(jié)膜膿性分泌物無確診病例(實驗室診斷病例)同上同上男性尿道分泌物涂片查到細胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌；或淋球菌培養(yǎng)陽性；或淋球菌核酸檢測陽性第四十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六淋病診斷標準－實驗室方法1、顯微鏡檢查涂片、革蘭染色對男性病人有診斷價值（敏感性90~95%，特異性98~100%）對女性病人敏感性50~70%2、培養(yǎng)敏感性：80~100%特異性：100%3、核酸檢測：熒光PCR、NG∕CT核酸TMA雙檢、NG∕CT∕Uu三檢等敏感性：100%，死菌活菌、尿液分泌物均可特異性：100%第四十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六有診斷意義的報告報告方式，要包含4個因素對男性單純性NG感染，敏感性可達95％對女性NG感染，敏感性只有50％不能作為診斷指標不能作為判愈指標顯微鏡檢查臨床意義第四十八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六淋菌培養(yǎng)臨床意義是臨床診斷的金標準，是WHO推薦的淋病篩查的唯一方法是判愈的指標可以對疑似（或非生殖器部位標本）NG的菌株作進一步的鑒定可進行NG耐藥監(jiān)測，PPNG、TRNG、QRNG科研第四十九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六三、生殖道沙眼衣原體感染的

診斷標準生殖道沙眼衣原體感染診斷要點：生殖道沙眼衣原體感染診斷標準根據(jù)中國疾病預防控制中心印發(fā)的《全國性病監(jiān)測方案(試行)》(2007年)。生殖道沙眼衣原體感染診斷原則應根據(jù)流行病學史、臨床表現(xiàn)及實驗室檢查等進行綜合分析。

分期/類

病例分類

病史

臨床表現(xiàn)

實驗室檢查

生殖道沙眼衣原體感染確診病例(實驗室診斷病例)有多性伴，不安全性行為，或性伴感染史

男性尿道炎、附睪炎；女性宮頸炎、盆腔炎；男性和女性直腸炎、眼結(jié)膜炎；新生兒眼結(jié)膜炎、肺炎等。

沙眼衣原體抗原檢測陽性；或沙眼衣原體核酸檢測陽性；或沙眼衣原體細胞培養(yǎng)陽性無癥狀感染(病原攜帶者)

同上無臨床癥狀

同上第五十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六沙眼衣原體診斷標準－

實驗室檢查方法1、培養(yǎng)法：McCoy細胞特異性高：100%敏感性低價昂、費時、費力設備2、抗原檢測①、直接免疫熒光試驗（DFA）：用種特異的沙眼衣原體主要外膜蛋白單克隆抗體用熒光素標記染色。需熒光顯微鏡，檢查者要有經(jīng)驗，區(qū)別非特異性熒光。②、酶免疫吸附試驗（ELISA）：敏感性71~97，特異性97~99%，可成批檢測。③、快速免疫層析法：明窗試驗等。第五十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六明窗試驗（clearviewchlamydia）臨床意義此法診斷女性宮頸沙眼衣原體感染的敏感性為87％，特異性為98.8％簡便、快速，醫(yī)生和病人都容易接受不是金標準注意事項標本的量一定要夠、拭子要大一點、轉(zhuǎn)動一圈、停留時間要長一點男性若分泌物少，可用首段尿液沉淀注意Na離子或其它原因造成的假陽性第五十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六3、核酸擴增試驗（NAAT）聚合酶鏈反應與連接酶鏈反應(PCR，LCR)、熒光定量PCR、NG∕CT核酸TMA雙檢、NG∕CT∕Uu三檢等。優(yōu)點：1、敏感性：90~97%，特異性99~100%2、可以用尿液作檢查，非侵襲性方法3、篩查，無癥狀病人缺點：1、價格昂貴需要貴重儀器、設備2、人員需要培訓第五十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六200份標本同時用3種方法檢測Ct結(jié)果

明窗試驗

IDEIAPCE

FQ-PCR

陽性47 62 66

陰性153138134

合計200200200第五十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六四、生殖器皰疹實驗室診斷標準生殖器皰疹診斷要點：衛(wèi)生部衛(wèi)生行業(yè)標準《生殖器皰疹診斷標準及處理原則》(WS236-2003)。

分期/類

病例分類

病史

臨床表現(xiàn)

實驗室檢查

生殖器皰疹

臨床診斷病例

有多性伴，不安全性行為，或性伴病史，或病史不明外生殖器或肛門周圍部位的疼痛性水皰、糜爛、潰瘍、結(jié)痂無

確診病例(實驗室診斷病例)同上同上

生殖器肛門部位皮損取材單純皰疹病毒細胞培養(yǎng)陽性；或生殖器肛門部位皮損取材單純皰疹病毒抗原檢測陽性，或核酸檢測陽性；或單純皰疹病毒-2型(HSV-2)特異性抗體檢測陽性第五十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六生殖器皰疹診斷標準－

實驗室檢查方法1、病毒抗原檢測：單克隆抗體免疫熒光試驗（IFA）或酶免疫吸附試驗（ELISA）來檢測抗原。2、培養(yǎng)：看特征性細胞病變，特異性100%，但敏感性不高。需設備條件、技術(shù)。

3、核酸檢測:熒光PCR、雙檢、三聯(lián)檢4、抗體檢測：IgM第五十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六其它方法介紹－復合PCR請在此輸入您的文本。請在此輸入您的文本。請在此輸入您的文本。請在此輸入您的文本。請在此輸入您的文本。第五十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六HSV快速檢查方法HSV-IDEIA（酶免疫放大）與金標準相比，其敏感性達93.6%,特異性達97.8％可同時檢測HSV-1和HSV-2型文獻報道，HSV-1致GH的比例在上升DAKO專利技術(shù)可成批，可單人份做2小時出結(jié)果可目測，可上機第五十八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六M-PCR與IDEIA檢測HSV比較

HSV-IDEIAM-PCRIDEIA（＋）IDEIA（—）Total

＋1665171—