2020年藥物行業(yè)市場(chǎng)分析報(bào)告

2020年藥物行業(yè)市場(chǎng)分析報(bào)告2020年9月31、自古雄才多磨難,小核酸藥物守得云開(kāi)見(jiàn)月明1.1 二十載崢嶸歲月，守得云開(kāi)終見(jiàn)月明1998年，AndrewFire和CraigMello發(fā)表了一篇開(kāi)創(chuàng)性的論文，確定雙鏈RNA（dsRNA）是秀麗隱桿線蟲(chóng)的轉(zhuǎn)錄后基因沉默（PTGS）的病原體，這種現(xiàn)象被稱(chēng)為RNA干擾（RNAi）。RNAi的發(fā)現(xiàn)解釋了令人費(fèi)解的植物和真菌基因沉默現(xiàn)象，并掀起了一場(chǎng)生物學(xué)革命，該革命最終表明非編碼RNA是多細(xì)胞生物中基因表達(dá)的主要調(diào)節(jié)因子。隨著認(rèn)識(shí)的不斷深入，Elbashir等人發(fā)現(xiàn)21和22個(gè)核苷酸（nt）dsRNA可以在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中誘導(dǎo)RNAi沉默，而不會(huì)引起非特異性干擾素反應(yīng)，使得siRNA很快就成為生物學(xué)研究中的普遍工具。表1：小核酸藥物的多重優(yōu)勢(shì)優(yōu)勢(shì)說(shuō)明特異性強(qiáng)由于小核酸藥物根據(jù)目標(biāo)RNA人工設(shè)計(jì)，所以目標(biāo)明確，靶點(diǎn)特異性強(qiáng)。設(shè)計(jì)簡(jiǎn)小核酸藥物臨床前研發(fā)首先通過(guò)測(cè)定基因序列，針對(duì)疾病基因進(jìn)行便、研發(fā)合理設(shè)計(jì)，使基因靶向沉默，所以能避免盲目開(kāi)發(fā)，極大節(jié)省研發(fā)周期短時(shí)間。靶點(diǎn)豐富小核酸藥物從轉(zhuǎn)錄后水平進(jìn)行治療，能針對(duì)一些蛋白靶點(diǎn)難有療效的特殊靶點(diǎn)進(jìn)行突破，有望攻克尚無(wú)藥物的遺傳疾病。轉(zhuǎn)化基礎(chǔ)RNA干擾技術(shù)發(fā)展至今已經(jīng)成熟，從實(shí)驗(yàn)室到臨床轉(zhuǎn)化相對(duì)容易。深厚數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部到2003年，已有多家公司致力于RNAi的治療領(lǐng)域。不幸的是，使用未修飾的siRNA的第一批臨床試驗(yàn)導(dǎo)致了免疫相關(guān)毒性和可疑的RNAi效應(yīng)。隨后為了減少核酸酶對(duì)于未修飾RNA的降解作用，頭部企業(yè)脂質(zhì)體等納米制劑對(duì)siRNA進(jìn)行遞送。雖然使用了新的遞送系統(tǒng)的siRNA在臨床試驗(yàn)取得了重要進(jìn)展，例如首次確認(rèn)全身施用的納米顆粒對(duì)人類(lèi)的RNAi效應(yīng)，但受制于當(dāng)時(shí)載體系統(tǒng)技術(shù)仍不成熟，siRNA納米顆粒顯示出了明顯的劑量限制性毒性和不足的治療效果。結(jié)果，大型制藥公司在2010年初退出了RNAi領(lǐng)域，給該行業(yè)帶來(lái)了資金危機(jī)。經(jīng)過(guò)多年沉寂，RNAi領(lǐng)域進(jìn)入新紀(jì)元。盡管存在這些挑戰(zhàn)，規(guī)模較小的RNAi公司和學(xué)術(shù)研究人員仍吸取了先前臨床試驗(yàn)失敗的慘痛教訓(xùn)，并堅(jiān)持不斷改進(jìn)序列選擇、核苷酸化學(xué)修飾和遞送機(jī)制。這些實(shí)質(zhì)性進(jìn)展，加上對(duì)疾病適理解的深入，更成熟的臨床開(kāi)發(fā)過(guò)程和更強(qiáng)的制造能力，開(kāi)拓了一條更安全、有效的RNAi治療途徑。2016年以來(lái)，多款A(yù)SO（反義寡核酸）藥物陸續(xù)上市給了行業(yè)一定信心，但由于Ionis藥品很多機(jī)理尚不明確，產(chǎn)業(yè)界仍有質(zhì)疑。而2018年8月10日，美國(guó)FDA批準(zhǔn)了作用于肝臟的siRNA藥物patisiran（Onpattro），以治療遺傳性疾病轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性?。╤ATTR）。Patisiran的批準(zhǔn)為醫(yī)療需求未得到滿足的4hATTR患者帶來(lái)了新希望，真正預(yù)示著RNAi治療領(lǐng)域新紀(jì)元的到來(lái)。圖1：RNAi發(fā)展歷程數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部表2：1998年-至今已上市的小核酸藥物時(shí)間藥物公司簡(jiǎn)介1998FomivirsenIonis/NovartisFDA批準(zhǔn)上市的第一個(gè)反義寡核苷酸類(lèi)藥物，是CMV視網(wǎng)膜炎的二線治療藥物2004MacugenEyetech/Pfizer化學(xué)合成的寡核苷酸序列，治療新生血管性黃斑病變（核酸適配體）2013Kynamro賽諾菲硫代磷酸寡核苷酸藥物，用于治療純合子型家族性高膽固醇血癥（HOFH）罕見(jiàn)病2016Exondys51Sarepta磷酰二胺嗎琳代寡核苷酸，用于治療杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良癥Therapeutics（DMD）罕見(jiàn)病2016DefitelioGentium用于治療肝靜脈閉塞癥伴隨造血干細(xì)胞抑制后腎或肺功能障礙2018Spinraza百健/Ionis用于治療脊髓型肌萎縮癥（SMA）（反義寡核苷酸）罕見(jiàn)病2018TegsediIonis唯一靶向RNA的haTTA治療藥物（反義寡核苷酸）罕見(jiàn)病2018Onpattro(Patisiran)Alnylam/Genzyme首款（siRNA）藥物，用于治療由hATTR（遺傳性轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性）引起的多發(fā)性神經(jīng)疾病2019Waylivra(EMA,有條Ionis/Akcea/Therape首個(gè)用于治療家族性乳糜微粒血癥綜合征（FCS）（反義件批準(zhǔn))utics寡核苷酸）罕見(jiàn)病2019Vyondys53SareptaFDA批準(zhǔn)的第二種針對(duì)DMD的RNA外顯子跳躍療法（反Therapeutics義寡核苷酸）2019GivlaariAlnylam全球第二款（siRNA）藥物，用于治療成人急性肝卟啉癥（AHP）罕見(jiàn)病數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部5目前，從治療領(lǐng)域來(lái)看，小核酸藥物研發(fā)的重點(diǎn)治療領(lǐng)域包括杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良、腫瘤、囊性纖維化等各類(lèi)疾病。由于小核酸藥物兼具基因修飾和傳統(tǒng)藥物的雙重特點(diǎn)，故未來(lái)將在多個(gè)領(lǐng)域大展身手，預(yù)計(jì)在基因遺傳性疾病和病毒感染性疾病領(lǐng)域中將有不俗表現(xiàn)。圖2：RNAi主要治療領(lǐng)域數(shù)據(jù)來(lái)源：cortellis，市場(chǎng)研究部小核酸藥物治療的靶器官主要受遞送系統(tǒng)影響，肝腎等器官是載體天然易被動(dòng)集聚的器官，針對(duì)肝臟，腎臟和眼部適應(yīng)癥的多種候選藥物目前正在I，II和III期臨床試驗(yàn)中，并且針對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）和其他非肝臟組織的研究性新藥（IND）應(yīng)用有望實(shí)現(xiàn)。6圖3：小核酸藥物主要靶向器官數(shù)據(jù)來(lái)源：Nature，市場(chǎng)研究部1.2 對(duì)標(biāo)單抗發(fā)展史，小核酸藥物將打造黃金盛世小核酸藥物與單抗藥物類(lèi)似，都為突破性、技術(shù)驅(qū)動(dòng)型行業(yè)。單抗藥物的雜交瘤技術(shù)與小核酸藥物的RNA干擾技術(shù)都是獲得諾貝爾獎(jiǎng)的劃時(shí)代技術(shù)，具有突破性特點(diǎn)。單抗類(lèi)大分子生物藥相比原有小分子靶向藥物相比具有更高的特異性，特異性地檢測(cè)一個(gè)靶表位，不易與其它蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)。同樣的，RNAi藥物相比目前蛋白水平發(fā)揮作用的藥物，具有更為獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)：RNA藥物的特點(diǎn)在于它們可以直接與mRNA結(jié)合并造成其降解，從而防止致病蛋白質(zhì)被轉(zhuǎn)錄。另一個(gè)優(yōu)勢(shì)是RNA藥物可以輕易地將其與現(xiàn)有療法合并使用。單抗和小核酸藥物都屬于典型的技術(shù)驅(qū)動(dòng)型行業(yè)，隨著高壁壘技術(shù)的逐個(gè)攻破，行業(yè)發(fā)展的障礙被掃清，將呈現(xiàn)快速增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)。單抗行業(yè)的發(fā)展有賴(lài)于技術(shù)的發(fā)展，行業(yè)發(fā)展之初受限于抗體篩選技術(shù)限制、生產(chǎn)工藝不完善、抗體穩(wěn)定性不佳等問(wèn)題，抗體生產(chǎn)成本一直居高不下，遠(yuǎn)遠(yuǎn)無(wú)法達(dá)到小分子藥物的經(jīng)濟(jì)性，行業(yè)發(fā)展前期舉步維艱。但隨著人源化嵌合技術(shù)、噬菌體展示文庫(kù)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因小鼠技術(shù)、兔抗、Fed-batch、高效連續(xù)流培養(yǎng)、培養(yǎng)基優(yōu)化等關(guān)鍵技術(shù)的突破，限制行業(yè)發(fā)展的因素被逐步解決，行業(yè)呈現(xiàn)出快速增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)。相同的，經(jīng)過(guò)了近二十年的發(fā)展，原先小核酸藥物面臨的主要問(wèn)題諸如免疫原性、穩(wěn)定性及遞送系統(tǒng)問(wèn)題都取得了極大的突破，多年來(lái)已有多款A(yù)SO藥物獲批，同時(shí)2018年siRNA首個(gè)藥物獲批，也正是標(biāo)志著行業(yè)逐步走向成熟，可推測(cè)RNAi藥物在未來(lái)10年將迎來(lái)快速發(fā)展，有望像單抗市場(chǎng)一樣，在未來(lái)30年成為新經(jīng)濟(jì)的核心引擎之一。7圖4：?jiǎn)慰拱l(fā)展歷程數(shù)據(jù)來(lái)源：BMC，市場(chǎng)研究部小核酸藥物具有顯著的優(yōu)勢(shì)，尤其是在研發(fā)成功率上達(dá)到了突破性的變革，且生產(chǎn)放大工藝相對(duì)容易。除了前文所述的優(yōu)勢(shì)，小核酸藥物在生產(chǎn)上也相對(duì)單獨(dú)較低，小核酸的合成相對(duì)簡(jiǎn)單，遞送系統(tǒng)如脂質(zhì)體LNP工藝相對(duì)成熟，容易在工業(yè)化級(jí)別放大。值得注意的是，小核酸藥物在研發(fā)成功率上具有劃時(shí)代的優(yōu)勢(shì)。以siRNA領(lǐng)域領(lǐng)先公司Alnylam為例，Alnylam公司的研發(fā)項(xiàng)目從1期臨床進(jìn)展到3期臨床試驗(yàn)結(jié)果積極的成功率達(dá)到54.6%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于新藥開(kāi)發(fā)的行業(yè)平均值。這是因?yàn)樗械难邪l(fā)項(xiàng)目都基于人類(lèi)遺傳學(xué)驗(yàn)證過(guò)的靶點(diǎn)，而且生物標(biāo)志物的使用是所有研究項(xiàng)目的一部分。一旦克服毒副作用和遞送手段方面的挑戰(zhàn)，成功開(kāi)發(fā)RNAi療法反而變得相對(duì)簡(jiǎn)單。屆時(shí)，限制RNAi療法開(kāi)發(fā)的因素將變?yōu)槿绾握业胶线m的靶點(diǎn)。8圖5：Alnylam研發(fā)成功率高數(shù)據(jù)來(lái)源：Alnylam官網(wǎng)，市場(chǎng)研究部小核酸藥物有望在2025年前創(chuàng)造100億美金市場(chǎng)，并在未來(lái)二十年內(nèi)保持持續(xù)高速發(fā)展。目前已經(jīng)小核酸藥物已有多款藥物獲批，并且在商業(yè)上取得了一定的成功。成功的代表藥物是ASO藥物Nusinersen，用于治療脊髓性肌萎縮癥(SMA)，截至2019年底，其累計(jì)銷(xiāo)售額為47億美元；另外，目前批準(zhǔn)的兩種siRNA藥物Patisiran和Givosiran也都取得了極好的銷(xiāo)售額，Patisiran在2019年上市的第一年銷(xiāo)售額已超過(guò)1.5億美元。圖6：ASO藥物銷(xiāo)售額（單位：百萬(wàn)美金）圖7：Patisiran各季度銷(xiāo)售額ExondysSpinrazaTegsedi銷(xiāo)售額（單位：百萬(wàn)美金）增長(zhǎng)率8050%25007045%20006040%35%50150030%10004025%3020%5002015%10%1005%201620172018201900%2018Q42019Q12019Q22019Q32019Q42020Q1數(shù)據(jù)來(lái)源：cortellis，市場(chǎng)研究部數(shù)據(jù)來(lái)源：Alnylam財(cái)報(bào)，市場(chǎng)研究部在接下來(lái)的5年中，隨著對(duì)RNAi機(jī)制更加深刻的理解，具有增強(qiáng)的特異性和效力的先進(jìn)RNAi載體系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)，可能會(huì)帶來(lái)RNAi領(lǐng)域新的突破性療法，多項(xiàng)小核酸藥物有望穩(wěn)定持續(xù)獲批。我們預(yù)測(cè)小核酸的黃金時(shí)代已至，保守估計(jì)20259年全球市場(chǎng)規(guī)模將遠(yuǎn)超100億美元，并在未來(lái)二十年內(nèi)保持持續(xù)高速發(fā)展。2、RNAi目前認(rèn)知的作用機(jī)理RNAi由長(zhǎng)度為20-30nt的sncRNA觸發(fā)，根據(jù)sncRNA生物合成和作用機(jī)制的不同，可將其分為siRNA（smallinterferingRNA）、miRNA（microRNA）和piRNA（PIWI-interactingRNA）3種。圖8：RNAi作用機(jī)制數(shù)據(jù)來(lái)源：RNAi作用機(jī)制及應(yīng)用研究進(jìn)展，市場(chǎng)研究部2.1 siRNA的作用機(jī)制由于RNA病毒入侵、基因組中反向重復(fù)序列轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)錄、自退火轉(zhuǎn)錄或?qū)嶒?yàn)轉(zhuǎn)染等原因，使得細(xì)胞中出現(xiàn)內(nèi)源性或外源性的dsRNA，核酸內(nèi)切酶Dicer識(shí)別dsRNA，并將其剪切成長(zhǎng)度為21-25nt、5′端含有一個(gè)磷酸基團(tuán)、3′端含有一個(gè)羥基并且突出2nt的siRNA。siRNA的這一結(jié)構(gòu)對(duì)于RNAi是必要的，缺乏5′端磷酸化的siRNA或平端siRNA無(wú)論在細(xì)胞內(nèi)外都無(wú)法啟動(dòng)RNAi。具有一定結(jié)構(gòu)的siRNA隨后在Dicer的幫助下與AGO2等結(jié)合，構(gòu)成siRNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（siRNA-inducedsilencingcomplex，siRISC），siRISC中的siRNA經(jīng)AGO2作用分解成兩條單鏈，正義鏈被釋放出去，反義鏈則留在siRISC中。僅含反義鏈的siRISC被激活，在反義鏈的引導(dǎo)下通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與靶基因結(jié)合，進(jìn)而誘導(dǎo)靶基因10的沉默。沉默發(fā)生后，靶基因被釋放，使得siRISC能與另一個(gè)靶基因結(jié)合，開(kāi)始誘導(dǎo)新一輪的基因沉默。表3：siRISC誘導(dǎo)基因沉默的具體方式作用方式原理反義siRNA與靶mRNA完全互補(bǔ)配對(duì)反義siRNA與靶mRNA不完全配對(duì)

一般發(fā)生在mRNA的編碼區(qū)或開(kāi)放閱讀框中，siRISC中具有核酸內(nèi)切酶活性的AGO2剪切靶mRNA，啟動(dòng)靶mRNA的降解，一旦最初降解形成，細(xì)胞中的核酸外切酶就會(huì)攻擊剩余片段以完成整個(gè)降解過(guò)程，從而導(dǎo)致靶基因沉默，這是siRISC的主要作用方式。一般發(fā)生在mRNA的3′非編碼區(qū)，此時(shí)的siRISC將抑制靶mRNA的翻譯或引發(fā)靶mRNA的降解。siRISC通過(guò)與翻譯起始復(fù)合物競(jìng)爭(zhēng)mRNA的5′帽子結(jié)構(gòu)、影響核糖體大小亞基的聚合等作用在翻譯的起始階段抑制翻譯，或者通過(guò)減緩核糖體在翻譯中的移動(dòng)速度、促進(jìn)核糖體的提早解離等作用在翻譯的其他階段抑制翻譯。siRISC還可以促進(jìn)脫帽酶切除mRNA的5′帽子結(jié)構(gòu)，脫腺苷酶切除mRNA的3′端poly（A）尾巴，使mRNA失去5′和3′端的保護(hù)而被核酸外切酶攻擊，最終導(dǎo)致mRNA的降解。作用于DNAsiRISC通過(guò)激活甲基化酶或抑制去甲基化酶的作用，引發(fā)DNA的甲基化，DNA的甲基化在轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)一步導(dǎo)致染色質(zhì)蛋白的甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等，從而促進(jìn)異染色質(zhì)的形調(diào)控基因的成，引發(fā)基因沉默。表達(dá)數(shù)據(jù)來(lái)源：生物技術(shù)通報(bào)，市場(chǎng)研究部雙鏈siRNA進(jìn)入siRISC后，經(jīng)AGO2作用解開(kāi)成兩條單鏈，反義鏈留在siRISC中引導(dǎo)siRISC沉默靶基因，正義鏈被釋放出去。被釋放的正義鏈可能很快被降解，也可能作為引物，在RNA依賴(lài)的RNA聚合酶（RNA-dependentRNApolymerase，RdRP）的催化下以靶mRNA為模板擴(kuò)增得到dsRNA，dsRNA又被Dicer降解成siRNA進(jìn)入RNAi循環(huán)，從而使得RNAi的效果級(jí)聯(lián)放大。2.2 miRNA的作用機(jī)制與siRNA主要來(lái)自外源性dsRNA不同，miRNA主要源于生物自身的基因組。細(xì)胞核內(nèi)編碼miRNA的基因在RNA聚合酶Ⅱ或聚合酶Ⅲ的作用下轉(zhuǎn)錄得到pri-miRNA，pre-miRNA被轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Exportin5轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中，在細(xì)胞質(zhì)中被Dicer剪切成長(zhǎng)度約為22nt的miRNA：miRNA雙鏈。雙鏈很快與AGO（AGO1-4，主要是AGO1）等結(jié)合形成miRNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（miRISC），隨后miRNA：miRNA雙鏈中5′端堿基配對(duì)穩(wěn)定性較強(qiáng)的正義鏈miRNA*迅速被降解，5′端堿基配對(duì)穩(wěn)定性較弱的反義鏈miRNA則保留在miRISC中。僅含反義鏈的miRISC被激活，在反義鏈miRNA的引導(dǎo)下通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則識(shí)別靶基因，誘導(dǎo)靶基因沉默。siRNA主要通過(guò)完全互補(bǔ)配對(duì)的方式與靶基因結(jié)合，并通過(guò)直接剪切作用誘發(fā)靶基因的降解，從而保護(hù)體內(nèi)基因組不受轉(zhuǎn)座子活動(dòng)或病毒感染等外源性因素的影響。與之不同，miRNA主要通過(guò)不完全配對(duì)的方式與靶mRNA結(jié)合，抑制靶mRNA的翻譯或引發(fā)靶mRNA的降解，從而內(nèi)源性的調(diào)控體內(nèi)基因的表達(dá)。112.3 piRNA的作用機(jī)制RNAi過(guò)程中，3種sncRNA均與Argonaute蛋白家族結(jié)合，Argonaute蛋白家族包括AGO和PIWI兩類(lèi)亞家族，siRNA和miRNA與AGO亞家族結(jié)合，而piRNA則與PIWI亞家族結(jié)合。piRNA途徑是動(dòng)物特有的，主要存在于動(dòng)物的生殖細(xì)胞中，目前對(duì)piRNA的認(rèn)識(shí)尚處于初級(jí)階段。2.4 反義核酸ASO反義寡核苷酸（ASO）是一種合成的單鏈寡核苷酸，具有不同的化學(xué)成分，包含與靶RNA轉(zhuǎn)錄物互補(bǔ)的序列。ASos具有廣泛的應(yīng)用，包括阻斷mRNA的翻譯、競(jìng)爭(zhēng)性抑制miRNA、沉默靶miRNA、外顯子跳躍、外顯子包合和核酸酶H介導(dǎo)的靶降解。在這些應(yīng)用中，靶向核酸酶H介導(dǎo)的降解是最有效的。圖9：ASO作用機(jī)制數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部目前，ASO已有多款藥物獲批，領(lǐng)先公司Ionis已證明ASO藥物成藥性上的可行性。表4：ASO已有多款藥物獲批時(shí)間產(chǎn)品名公司適用癥FDA批準(zhǔn)上市的第一個(gè)反義寡1998FomivirsenIonis/Novartis核苷酸類(lèi)藥物，是CMV視網(wǎng)膜炎的二線治療藥物硫代磷酸寡核苷酸藥物，用于治2013Kynamro賽諾菲療純合子型家族性高膽固醇血癥（HOFH）罕見(jiàn)病磷酰二胺嗎琳代寡核苷酸，用于2016Exondys51SareptaTherapeutics治療杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良癥（DMD）罕見(jiàn)病122018Spinraza百健/Ionis2018TegsediIonis2019Waylivra(EMA,有Ionis/Akcea/Therapeutics條件批準(zhǔn))2019Vyondys53SareptaTherapeutics數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部

用于治療脊髓型肌萎縮癥（SMA）（反義寡核苷酸）罕見(jiàn)病唯一靶向RNA的haTTA治療藥物（反義寡核苷酸）罕見(jiàn)病首個(gè)用于治療家族性乳糜微粒血癥綜合征（FCS）（反義寡核苷酸）罕見(jiàn)病FDA批準(zhǔn)的第二種針對(duì)DMD的RNA外顯子跳躍療法（反義寡核苷酸）2.5 其他小RNA研發(fā)熱點(diǎn)目前，環(huán)狀RNA(circularRNA,circRNA)、longnoncodingRNA(IncRNA)等亦是學(xué)界關(guān)注的熱點(diǎn)，如目前學(xué)界認(rèn)識(shí)到circRNA可以作為天然小RNA(miRNA)海綿體吸附并調(diào)控miRNA的活性，與轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件結(jié)合或與蛋白互作調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄等。相信未來(lái)隨著轉(zhuǎn)錄組學(xué)、表觀遺傳學(xué)等學(xué)科的發(fā)展，將會(huì)有更多的非編碼RNA、RNAi機(jī)制被發(fā)現(xiàn)與認(rèn)識(shí)。圖10：circRNA數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部為了更好地發(fā)揮RNAi的作用，小核酸藥物必須克服藥理學(xué)方面的挑戰(zhàn)，靶向特異性，脫靶RNAi活性，免疫原性以及與藥代動(dòng)力學(xué)相關(guān)的全身循環(huán)等問(wèn)題。這些挑戰(zhàn)使得序列選擇與結(jié)構(gòu)、化學(xué)修飾以及遞送系統(tǒng)的選擇都在RNAi藥物的成13藥性上起到了至關(guān)重要的作用。表5：RNAi藥物的毒副反應(yīng)副作用原因主要解決方案dsRNA盡管對(duì)于第一代小干擾RNA（siRNA）藥物來(lái)說(shuō)是一的免疫免疫原性反應(yīng)源于PKR，Toll樣受體3個(gè)主要問(wèn)題，但是最近的具有大量2′-O-甲基堿基修原性反（TlR3）和TlR7對(duì)dsRNA的感應(yīng)飾作用的RNAi引發(fā)劑在很大程度上避免了這一問(wèn)題應(yīng)可能直接來(lái)自賦形劑成分或賦形劑的開(kāi)發(fā)有效且無(wú)毒的納米顆粒，將賦形劑限制為少量經(jīng)遞送系代謝分解。復(fù)雜的多功能納米顆粒制劑過(guò)單獨(dú)驗(yàn)證具有低毒性的化學(xué)成分。組裝的納米顆粒統(tǒng)毒性在儲(chǔ)存過(guò)程中也可能發(fā)生降解，從而隨需要盡可能均勻。著時(shí)間的推移改變其毒性。通過(guò)使用諸如BlAST之類(lèi)的工具針對(duì)人類(lèi)基因組序列RNAi脫RNAi引導(dǎo)鏈與非靶向mRNA之間的意外篩選目標(biāo)位點(diǎn)并消除與關(guān)注基因有明顯重疊的目標(biāo)靶毒性種子區(qū)域匹配位點(diǎn)，可以緩解此問(wèn)題。但即使經(jīng)過(guò)大量測(cè)試，某些脫靶RNAi效應(yīng)也是不可避免的。非靶器官 的 系統(tǒng)遞送至人體的siRNA可能在許多組RNAi 織中積累，而這些組織不是藥物活性的 提高載體的靶向性在靶毒性 預(yù)期部位數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部3、序列選擇-小核酸藥物研發(fā)的重要因素反義鏈的序列便是RNAi發(fā)揮作用的重要因素。RNAi中的反義鏈?zhǔn)荝ISC與mRNA靶標(biāo)結(jié)合的推定引導(dǎo)鏈，因此，一旦RNAi觸發(fā)信號(hào)進(jìn)入細(xì)胞，反義鏈的序列便是RNAi發(fā)揮作用的重要因素。圖11：序列選擇對(duì)RNAi作用十分關(guān)鍵數(shù)據(jù)來(lái)源：computationalbiology，市場(chǎng)研究部14一般序列的設(shè)計(jì)主要包括如下步驟：表6：序列的設(shè)計(jì)主要步驟順序1

步驟簡(jiǎn)介主要內(nèi)容從AUG起始密碼子開(kāi)始，掃描AA二核苷酸序列。記錄每個(gè)AA和3'相鄰的19個(gè)核苷酸作為潛在的siRNA靶位點(diǎn)。在靶選擇siRNA靶位點(diǎn)的這種策略是基于Elbashir等人的觀察。具mRNA中有3'突出的UU二核苷酸的siRNA最有效。這也與使用RNApol找到以AAIII轉(zhuǎn)錄發(fā)夾siRNA兼容，因?yàn)镽NApolIII在4-6個(gè)核苷酸的poly二核苷酸（T）區(qū)域終止轉(zhuǎn)錄，從而產(chǎn)生帶有短poly（U）尾巴的RNA開(kāi)始的分子。21nt序列在Elbashir和隨后的出版物中，具有其他3'末端二核苷酸突出端的siRNA已顯示可有效誘導(dǎo)RNAi，但是建議避免突出端具有G殘基，因?yàn)閟iRNA可能在單鏈G殘基處被RNase裂解。通常隨機(jī)設(shè)計(jì)的siRNA的一半以上會(huì)降低目標(biāo)mRNA水平至少50％，約1/4會(huì)降低目標(biāo)mRNA水平75-95％。一般而言，GC含量為30-50％的siRNA比G/C含量更高的siRNA具有更選擇 2-42個(gè)靶序列設(shè)計(jì)適當(dāng)3 的對(duì)照組數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部

高的活性。由于4-6個(gè)核苷酸的poly（T）束充當(dāng)RNApolIII的終止信號(hào)，因此在設(shè)計(jì)要從RNApolIII啟動(dòng)子表達(dá)的序列時(shí)，請(qǐng)避免在靶序列中延伸>4T或A。由于mRNA的某些區(qū)域可能是高度結(jié)構(gòu)化的或被調(diào)控蛋白結(jié)合的，因此通常會(huì)在基因序列長(zhǎng)度的不同位置選擇siRNA靶位點(diǎn)。完整的siRNA實(shí)驗(yàn)應(yīng)包括許多對(duì)照，以確保數(shù)據(jù)的有效性。為了獲得最佳的安全性和效力，RNAi藥物需要確保反義鏈的排他性選擇，這可以通過(guò)調(diào)節(jié)dsRNA的熱力學(xué)穩(wěn)定性來(lái)實(shí)現(xiàn)。通常，將優(yōu)先選擇在其5′末端具有較弱堿基配對(duì)的鏈。理想的dsRNA觸發(fā)子在反義鏈的5′端比正義鏈的5′端具有更多的AU富集。一旦加載到RISC中，引導(dǎo)鏈需要與其在靶mRNA上的結(jié)合位點(diǎn)堿基配對(duì)以啟動(dòng)RNAi活性。但是，局部二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)，mRNA結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)核糖體仍會(huì)大大阻礙RNAi的進(jìn)入。因此，現(xiàn)代的RNA熱力學(xué)預(yù)測(cè)軟件無(wú)法可靠地預(yù)測(cè)mRNA上同源結(jié)合位點(diǎn)的可及性。序列選擇的另一個(gè)復(fù)雜之處是需要避免脫靶與其他mRNA的匹配。RISC可以潛在地下調(diào)任何與引導(dǎo)鏈種子區(qū)（從5'端開(kāi)始的2-8個(gè)堿基）具有完美堿基配對(duì)互補(bǔ)性的mRNA。因?yàn)檫@僅由七個(gè)堿基組成，所以對(duì)于任何指導(dǎo)序列，脫靶匹配的潛在數(shù)量都很大。幸運(yùn)的是，目標(biāo)mRNA的有效催化降解需要更廣泛的堿基配對(duì)以參與人類(lèi)Ago2的切片機(jī)活性。目前根據(jù)NatureBiology的推薦，用于篩選基因組序列匹配的工具是NCBIBLAST，并且，隨著基于卷積神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)和深度強(qiáng)化學(xué)習(xí)的新設(shè)計(jì)算法的發(fā)展，加上開(kāi)發(fā)人員經(jīng)驗(yàn)的積累，RNAi序列效力和靶向特異性的15難度將一步步被降低。4、化學(xué)修飾-小核酸藥物的基礎(chǔ)對(duì)siRNA的化學(xué)修飾可以一定程度的提高其效率、特異性和穩(wěn)定性，并降低其毒性和免疫原性。根據(jù)核苷酸的天然結(jié)構(gòu)，化學(xué)修飾可置于磷酸骨架，核糖部分或堿基上，通常，這些修飾會(huì)同時(shí)引入siRNA。例如，2'-OMe和硫代磷酸酯（PS）修飾的組合促進(jìn)了與膽固醇結(jié)合的siRNA的全身給藥，并在體內(nèi)實(shí)現(xiàn)了有效的基因沉默，例如2'-OMe和2'-F的組合已用于ONPATTRO；采用硫代磷酸酯（PS），2'-OMe，2'-F和2'-deoxy修飾的inclisiran（ALN-PCSsc）亦被用于治療高膽固醇血癥。目前，Alnylam，Arrowhead，Silence，Dicerna等頭部企業(yè)在自身siRNA管線成藥性設(shè)計(jì)時(shí)都采用了多種化學(xué)修飾并用的方法以增加其藥物的成藥性。4.1 磷酸骨架修飾磷酸骨架的修飾是增加siRNA成藥性的常用手段。硫代磷酸酯（PS）、二硫代磷酸酯（PS2）、甲基膦酸酯（MP）等手段已被開(kāi)發(fā)并廣泛應(yīng)用。圖12：磷酸骨架的常見(jiàn)修飾數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部硫代磷酸酯（PS）是反義寡核苷酸（ASO）與siRNA常用的修飾。這種修飾是通過(guò)利用硫原子代替磷酸二酯的一種非橋連氧來(lái)實(shí)現(xiàn)的，PS修飾的位置和數(shù)量對(duì)于它們發(fā)揮應(yīng)用至關(guān)重要。此外，與沒(méi)有修飾的親本siRNA相比，含PS鍵的siRNA在體內(nèi)的生物分布特性幾乎沒(méi)有變化，因?yàn)樗饕e累在如肝臟，腎臟和腸等代謝器官中，腺體組織、骨髓、脂肪細(xì)胞和淋巴結(jié)也有一定積累。表7：PS修飾的應(yīng)用與優(yōu)劣勢(shì)優(yōu)勢(shì) PS鏈賦予修飾的寡核苷酸以耐核酸酶的能力16表8：磷酸骨架的修飾策略修飾開(kāi)發(fā)的修飾策略，可增強(qiáng)siRNA的活性。缺點(diǎn)工業(yè)使用示例

更易于與血漿蛋白（尤其是白蛋白）結(jié)合，可顯著增長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間且蛋白質(zhì)結(jié)合通常有利于寡核苷酸進(jìn)入細(xì)胞蛋白質(zhì)結(jié)合通常與體內(nèi)毒性呈正相關(guān)Patisiran中Alnylam在正義鏈的5'末端的前兩個(gè)核苷酸處引入了兩個(gè)PS鍵，在反義鏈的5'末端和3'端的前兩個(gè)核苷酸處引入了兩個(gè)PS鍵數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部二硫代磷酸酯（PS2），甲基膦酸酯（MP），甲氧基丙基膦酸酯（MOP）和肽核酸PNA）等都被成功地研發(fā)出來(lái)用于取代寡核苷酸中的磷酸二酯基。另外，在siRNA或單鏈siRNA（ss-siRNA）的5'末端用各種類(lèi)似物進(jìn)行膦酸酯修飾是一種新PS2MP、MOPPNA、phosphotriesters5 ′-methylphosphonate、(S)-5′-C-methyl5′-(E)VPstructure數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部4.2 核糖部分修飾

作用提高RISC和siRNA之間的親和力可減少ASO與蛋白的結(jié)合，減輕ASO的肝毒性提高RISC和siRNA之間的親和力取代的疏水基團(tuán)增加完整寡核苷酸的穩(wěn)定性，并有利于RISC裝載。增加完整寡核苷酸的穩(wěn)定性，通過(guò)提高與Argonaute-2結(jié)合來(lái)改善siRNA在組織中的積累和停留時(shí)間，并提高體內(nèi)siRNA的效力核糖部分修飾也是學(xué)界多年來(lái)研發(fā)的方向之一。圖13：常用的核糖部分修飾數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部17由于核糖核酸酶需要2'端羥基才能水解RNA，2'端的核糖修飾已被廣泛用于保護(hù)siRNA免受核糖核酸酶的攻擊。2'-OMe是天然存在的核糖，是迄今為止藥物開(kāi)發(fā)中最常用的修飾方法，類(lèi)似的，2'-O-MOE是2'-OMe最廣泛使用的類(lèi)似物之一。2′-F、2′-Ara-F也可被用于ASO和siRNA核糖的修飾。表9：核糖部分修飾修飾2′-OMe2′-O-methoxyethyl(2′-O-MOE)2′-deoxy-2′-fluoro(2′-F)

作用增加其靶mRNA的親和力并降低體內(nèi)免疫原性。2′-OMe類(lèi)似物，與2'-OMe相比，RNA的親和力更高，每個(gè)修飾核苷酸的Tm變化為0.9–1.7°C，這進(jìn)一步提高了修飾的siRNA抵抗核酸酶攻擊的能力高度帶負(fù)電的氟使修飾的siRNA可提高結(jié)合親和力，每個(gè)修飾的核苷酸的Tm約為2.5°C。2′-arabino-fluoro (2′-Ara-F)2′-O-benzyl2′-O-methyl-4-pyridine(2′-O-CH2Py(4))、2′-Obenzyl、2′-O-CH2Py數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部

2′-F的類(lèi)似物在實(shí)驗(yàn)室中展現(xiàn)出良好潛力此外，2'-C，4'-C甚至整個(gè)糖環(huán)也可能發(fā)生修飾，從而產(chǎn)生分子包括UNAs，LNA，GNA，（S）-cEt-BNA，三環(huán)DNA（tcDNA）和二氨基磷酸酯嗎啉代低聚物（PMO）。表10：核糖部分修飾修作用飾UNAGNALNAPMO

由于未連接的2'和3'碳，比未修飾的產(chǎn)品具有更高的靈活性和熱穩(wěn)定性，可通過(guò)將化學(xué)不對(duì)稱(chēng)性引入雙鏈siRNA中來(lái)阻止過(guò)客鏈的進(jìn)入并促進(jìn)引導(dǎo)鏈的RISC裝載熱不穩(wěn)定核苷酸，可通過(guò)將其包含在siRNA導(dǎo)鏈的種子區(qū)域中來(lái)消除脫靶效應(yīng)誘導(dǎo)的肝毒性雙環(huán)結(jié)構(gòu)，包含2'氧和4'碳之間的橋。它將核糖“鎖定”在其首選的C3'-endo構(gòu)象中，并顯著提高了堿基配對(duì)的親和力在生理pH下不帶電荷，不是RNaseH的底物，主要用于阻斷RNA剪接或翻譯。數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部4.3 堿基修飾堿基替換對(duì)基于核酸的藥物開(kāi)發(fā)非常有益。 例如，假尿苷，2-硫尿苷，N6-甲基18腺苷，5-甲基胞苷或尿苷和胞苷殘基的其他堿基類(lèi)似物替換可以減少先天免疫識(shí)別，同時(shí)使ASO對(duì)核酸酶更具抗性。但是，處于對(duì)人工堿基可能會(huì)摻入基因組的考慮，制藥公司仍然對(duì)這些分子持審慎態(tài)度。取而代之的是，這些公司更喜歡使用天然存在的堿基結(jié)構(gòu)（例如5mC和6mA）來(lái)修飾某些堿基。圖14：常用的堿基修飾數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部5、載體系統(tǒng)——RNAi給藥的重中之重RNAi要想發(fā)揮基因沉默效果，需要先克服諸如核酸酶降解、較短的半衰期、血液循環(huán)中的免疫識(shí)別、靶組織中的積累、跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)以及從內(nèi)體和溶酶體逃逸等一系列挑戰(zhàn)。雖然通過(guò)結(jié)合化學(xué)修飾，可大大降低了核酸酶穩(wěn)定性和避免免疫識(shí)別，但是，其他問(wèn)題仍有待解決，而載藥系統(tǒng)可以極大程度地解決化學(xué)修飾所不能解決的問(wèn)題，提升RNAi治療的有效性和安全性，因此載體系統(tǒng)可謂是RNAi給藥的重中之重。5.1 RNAi給藥的挑戰(zhàn)相對(duì)較高的分子量（?13–16kD）和凈負(fù)電荷也往往會(huì)阻礙人工siRNA穿過(guò)細(xì)胞膜，同時(shí)在血液循環(huán)中，非特異性結(jié)合和腎小球?yàn)V過(guò)都會(huì)阻礙siRNA在所需組織中的積累。siRNA的長(zhǎng)度約為7-8nm，直徑約為2-3nm。該分子太大，無(wú)法穿過(guò)細(xì)胞膜，但又小到足以被腎小球自由清除，因?yàn)榇笮⌒∮?nm的分子很容易過(guò)濾到尿液中。因此，一旦siRNA離開(kāi)血流，它們將在膀胱中積聚并在幾分鐘至半小時(shí)內(nèi)迅速?gòu)捏w內(nèi)排出，這阻止了它們?cè)诎薪M織或細(xì)胞中積聚。將siRNA封裝到囊泡中或使其與某些配體綴合可以有效避免腎臟清除，更重要的是，可以將siRNA輸送至所需的組織或細(xì)胞。19脂質(zhì)納米顆粒（LNP），動(dòng)態(tài)多結(jié)合物（DPC）和GalNAc等各類(lèi)給藥系統(tǒng)被開(kāi)發(fā)出來(lái)，從而實(shí)現(xiàn)有效的siRNA遞送。陽(yáng)離子細(xì)胞穿透肽（CPPs）是RNAi遞送早期的一種選擇。CPPs通常尾部富含精氨酸，可通過(guò)胍基與細(xì)胞表面的負(fù)磷酸鹽，硫酸鹽和羧酸鹽之間的相互作用形成二齒鍵。這種相互作用導(dǎo)致膜孔的形成，導(dǎo)致細(xì)胞對(duì)siRNA的吸收。作為另一種策略，可通過(guò)帶正電荷的脂質(zhì)或聚合物中和siRNA的負(fù)電荷，從而賦予siRNA更易于與膜結(jié)合并通過(guò)吸附性胞飲作用輕易內(nèi)化的能力。該策略已為目前siRNA遞送的主要策略。提高內(nèi)體和溶酶體逃逸效率是RNAi治療需要解決的另一大挑戰(zhàn)。siRNA必須有效地從內(nèi)體和溶酶體逃逸到細(xì)胞質(zhì)，在那里需要將siRNA的反義鏈裝載到RISC中。目前大多數(shù)輸送系統(tǒng)采用pH敏感單元，運(yùn)用“質(zhì)子海綿效應(yīng)”或“膠體滲透壓效應(yīng)”來(lái)導(dǎo)致膜不穩(wěn)定或膜溶脹。然而，目前整體載體endosomeescape的效率普遍不高，主流的載體往往只有0.1-2％的siRNA被釋放到細(xì)胞質(zhì)中，并且僅在內(nèi)化后的有限時(shí)間內(nèi)發(fā)生。因此，進(jìn)一步了解逃逸機(jī)制以及如何提高逃逸效率對(duì)siRNA藥物開(kāi)發(fā)至關(guān)重要。圖15：目前基因給藥的主要瓶頸數(shù)據(jù)來(lái)源：生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展，市場(chǎng)研究部目前針對(duì)RNAi給藥，好的遞送系統(tǒng)是解決挑戰(zhàn)的重中之重，全球各大核算領(lǐng)域公司的研發(fā)重點(diǎn)都聚焦于規(guī)避開(kāi)現(xiàn)有專(zhuān)利，開(kāi)發(fā)出更有效、更安全的載體系統(tǒng)，各類(lèi)平臺(tái)如陽(yáng)離子脂質(zhì)體（LNP）、Galnac、exsome、DPC等都孕育而生，目前領(lǐng)先公司Alnylam獲批的藥物一款采用脂質(zhì)體LNP、一款采用Galnac遞送系統(tǒng)。20圖16：各類(lèi)遞送系統(tǒng)數(shù)據(jù)來(lái)源：Nature，市場(chǎng)研究部5.2 脂質(zhì)體和類(lèi)脂質(zhì)納米顆粒陽(yáng)離子脂質(zhì)體是最經(jīng)典的陽(yáng)離子納米載體，已有大量研究致力于以陽(yáng)離子脂質(zhì)體輔助并優(yōu)化基因藥物的傳遞，其也是人類(lèi)基因治療中最有希望實(shí)現(xiàn)臨床應(yīng)用的非病毒基因載體。脂質(zhì)體是磷脂依靠疏水締合作用在水中自發(fā)形成的一種分子有序組合體，為多層囊泡結(jié)構(gòu)，每層均為類(lèi)脂雙分子膜，構(gòu)成雙分子層的類(lèi)脂其親水性的頭部形成膜的內(nèi)外表面，而親脂性的尾部處于膜的中間。脂質(zhì)體分為中性脂質(zhì)體、陰離子脂質(zhì)體和陽(yáng)離子脂質(zhì)體．在基因治療應(yīng)用中，中性脂質(zhì)體和陰離子脂質(zhì)體與基因治療藥物作用較為簡(jiǎn)單，主要是通過(guò)親水包覆作用．然而，中性脂質(zhì)體間缺乏排斥作用，極易聚集。陰離子脂質(zhì)體由于表面帶有負(fù)電荷，導(dǎo)致其基因治療藥物包埋率低，脂膜融合效率差，以上缺點(diǎn)使得二者應(yīng)用受到很大限制。目前，在基因治療領(lǐng)域里應(yīng)用較為廣泛的是陽(yáng)離子脂質(zhì)體。經(jīng)典的siRNA-LNP包含類(lèi)似的成分，例如陽(yáng)離子或可電離的脂質(zhì)，DSPC（1,2-二硬脂?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿）以及膽固醇和聚乙二醇（PEG）脂質(zhì)。21圖17：脂質(zhì)體LNP載藥系統(tǒng)數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部陽(yáng)離子脂質(zhì)體是一種自身帶有正電荷的脂質(zhì)囊泡，主要由陽(yáng)離子脂質(zhì)和中性輔助脂組成．陽(yáng)離子脂質(zhì)為整個(gè)脂質(zhì)體提供正電荷，主要包括單電荷的陽(yáng)離子脂質(zhì)，如DOTAP、DOTMA、DDAB、DC-Chol等，以及多電荷的陽(yáng)離子脂質(zhì)，如DOGS、DOSPA等，可離子化的陽(yáng)離子脂質(zhì)如DLinDMA或DLinDMA的衍生物、DSPC、膽固醇(cholesterol)及PEG脂質(zhì)。陽(yáng)離子脂質(zhì)利用靜電相互作用，與帶有負(fù)電荷的基因治療藥物相互作用，有效壓縮基因治療藥物由伸展結(jié)構(gòu)成為體積較小的粒子，形成負(fù)載基因治療藥物的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染復(fù)合物。圖18：常用的陽(yáng)離子脂質(zhì)材料數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部22圖19：常用的可離子化脂質(zhì)數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部陽(yáng)離子脂質(zhì)體可以有效提高基因治療藥物的治療效果。陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染復(fù)合物表面帶有正電荷，可離子化的陽(yáng)離子脂質(zhì)在低pH條件下（叔胺基團(tuán)質(zhì)子化）帶有正電荷（在生理pH條件下，該陽(yáng)離子脂質(zhì)顯示電中性或低的正電荷），通過(guò)靜電相互作用吸附到帶有負(fù)電荷的細(xì)胞表面，利用細(xì)胞內(nèi)吞作用，形成內(nèi)涵體進(jìn)入細(xì)胞．在內(nèi)涵體中，陽(yáng)離子脂質(zhì)與內(nèi)涵體中帶有負(fù)電荷的膜脂質(zhì)發(fā)生靜電相互作用，帶有負(fù)電荷的膜脂質(zhì)由內(nèi)涵體的腔外翻轉(zhuǎn)到腔內(nèi)，與正電荷脂質(zhì)形成中性離子對(duì)，基因治療藥物脫離陽(yáng)離子脂質(zhì)體后進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、翻譯、表達(dá)相應(yīng)蛋白質(zhì)。從治療領(lǐng)域上看，靶向肝腎等器官的疾病以及腫瘤治療是LNP主要應(yīng)用場(chǎng)景，且在腫瘤尤其是肝癌中，LNP相較于其他載體如Galnac也有一定的優(yōu)勢(shì)。脂質(zhì)體具有天然被動(dòng)靶向肝腎等代謝器官的特性，且增強(qiáng)的滲透和保留（EPR）效應(yīng)有助于LNP富集于腫瘤組織中，主要原因是快速生長(zhǎng)的惡性腫瘤中的不連續(xù)和有孔的內(nèi)皮細(xì)胞和不良的淋巴系統(tǒng)使LNP和內(nèi)在化的siRNA在實(shí)體瘤中具有更大的積累和更慢的清除率。LNP作為載體也在神經(jīng)退行性疾病方面有廣闊的前景。ApoE介導(dǎo)的脂蛋白顆粒的攝取也可發(fā)生在腦等其它組織中。大腦可以合成自己的膽固醇，并利用載脂蛋白(ApoE)將膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)到神經(jīng)元，通過(guò)ApoE介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)行攝取。已經(jīng)證明，在肝細(xì)胞中具有基因沉默有效性的LNPsiRNA系統(tǒng)，經(jīng)大腦皮層內(nèi)給藥后在神經(jīng)元中具有相同的基因沉默有效性；腦室內(nèi)及腦鞘內(nèi)給予LNPsiRNA系統(tǒng)，全腦內(nèi)顯現(xiàn)基因沉默功效，具有治療嚴(yán)重神經(jīng)退行性疾病的應(yīng)用前景。并且，為了進(jìn)一步提升LNP遞送siRNA的靶向性，先進(jìn)的設(shè)計(jì)在LNPs的表面可以添加靶向材料，如抗體或蛋白質(zhì)、肽或小分子等，這些配體在一定程度上促進(jìn)23了腫瘤組織中裝載siRNA的LNP的積累。表11：增加脂質(zhì)體LNP靶向性可選的靶標(biāo)序號(hào)靶標(biāo)1腫瘤細(xì)胞表面2腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)3腫瘤血管的內(nèi)皮細(xì)胞表面受體數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部目前，LNP載運(yùn)小分子藥物的制劑技術(shù)已經(jīng)相對(duì)成熟，它具有適宜的粒徑（100nm直徑或更小），高封裝效率，制備工藝穩(wěn)定、表面電荷低的特點(diǎn)（低表面電荷可以減少與血清蛋白的相互作用）。通過(guò)不同的載藥策略和制備技術(shù)，LNP載藥系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)核酸聚合物的有效聚集（>80％）和遞送。值得注意的是，隨著陽(yáng)離子脂質(zhì)體在體內(nèi)外的應(yīng)用增加，人們逐漸關(guān)注到其所帶電荷和細(xì)胞毒性間的關(guān)系。陽(yáng)離子脂質(zhì)體-基因復(fù)合物的毒性很大程度上取決于陽(yáng)離子脂質(zhì)材料和核酸的正負(fù)電荷比，并且其細(xì)胞毒性呈劑量依賴(lài)性。陽(yáng)離子脂質(zhì)由帶有正電荷的極性頭部（通常為氨基）、非極性疏水尾部（包含烷基鏈或膽固醇）和連接頭尾部的連接鍵構(gòu)成，而極性頭部和非極性疏水尾部的結(jié)構(gòu)通常決定了其轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞毒性，一般脂質(zhì)體-基因復(fù)合物的細(xì)胞毒性隨著其每摩爾所帶電荷數(shù)增加而增加。因此，大多數(shù)制藥公司和研究所都在努力開(kāi)發(fā)新型可電離脂質(zhì)，在提高遞送效率的同時(shí)，增加產(chǎn)品安全性。表12：目前工業(yè)界認(rèn)為較好的脂質(zhì)篩選標(biāo)準(zhǔn)序號(hào)標(biāo)準(zhǔn)1叔胺的脂質(zhì)頭部2O13尾巴3多于2個(gè)疏水尾巴4pKa≥5.5數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部5.3 典型脂質(zhì)體RNAi藥物介紹LNP遞送siRNA最經(jīng)典的藥物非Alnylam的ONPATTRO莫屬。ONPATTRO是在脂質(zhì)體中配制的經(jīng)過(guò)化學(xué)修飾的抗運(yùn)甲狀腺素蛋白（TTR）siRNA。在克服基因傳遞障礙中Alnylam的給出的脂質(zhì)納米粒(LNP)方案中一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)就是在LNP-siRNA系統(tǒng)中摻入了一種經(jīng)過(guò)優(yōu)化的可電離陽(yáng)離子脂質(zhì)（DLIN-MC3-DMA或MC3）。在LNP-siRNA系統(tǒng)中摻入MC3可帶來(lái)高效的基因沉默效果，在小鼠模型中，在低劑24量水平（5ugsiRNA/小鼠kg）下可有效地沉默小鼠肝臟中的基因。ONPATTRO的脂質(zhì)成分包括DLin-MC3-DMA，DSPC，膽固醇和PEG-DMG，摩爾比為50/10/38.5/1.5。圖20：Patisiran處方數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部Onpattro的獲批是基于III期臨床研究APOLLO的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，這是一項(xiàng)隨機(jī)、雙盲、安慰劑對(duì)照、全球性研究。研究結(jié)果顯示，Onpattro取得了極佳的治療效果，達(dá)到了研究的主要終點(diǎn)和所有次要終點(diǎn)：與安慰劑相比，Onpattro改善了多神經(jīng)病、生活質(zhì)量、日常生活活動(dòng)能力、步行能力、營(yíng)養(yǎng)狀況、自主神經(jīng)癥狀。此外，在心肌受累的患者（占研究患者總數(shù)的56%）中開(kāi)展的一項(xiàng)心臟亞組分析結(jié)果顯示，與安慰劑相比，Onpattro在心臟結(jié)構(gòu)和功能探索性終點(diǎn)方面也表現(xiàn)出顯著改善。安全性方面，Onpattro治療組和安慰劑組不良事件發(fā)生率和嚴(yán)重程度均相似，Onpattro治療組周?chē)[和輸液相關(guān)反應(yīng)發(fā)生率較高，但通常是輕至中度。總體而言，盡管需要用抗組胺藥，非甾體類(lèi)抗組胺藥或糖皮質(zhì)激素進(jìn)行預(yù)處理以減少與輸注相關(guān)的反應(yīng)的發(fā)生率，但該藥物對(duì)受試者的耐受性良好。根據(jù)有關(guān)改良的神經(jīng)病障礙評(píng)分+7（mNIS+7）和諾?？松钯|(zhì)量糖尿病性神經(jīng)病（QoL-DN）評(píng)分的結(jié)果，第2和第3期研究達(dá)到了研究的主要終點(diǎn)和第二終點(diǎn)?；谶@些成就，F(xiàn)DA和EC于2018年8月批準(zhǔn)了ONPATTRO的商業(yè)用途。25圖21：Patisiran治療機(jī)制與構(gòu)成數(shù)據(jù)來(lái)源：Nature，市場(chǎng)研究部圖22：Patisiran臨床療效展示數(shù)據(jù)來(lái)源：clinicaltrial，市場(chǎng)研究部良好的療效使得Patisiran獲得了商業(yè)上的成功。盡管Patisiran定價(jià)高昂，年化的費(fèi)用達(dá)到了450,000美金，但其成熟LNP工藝及序列選擇、修飾技術(shù)帶來(lái)了確切的療效，極大的滿足了患者為滿足的需求，使得該產(chǎn)品在2018年Q4上市后就取得了巨大的成功，在每季度保持了銷(xiāo)售額的高速增長(zhǎng)。26圖23：Onpattro銷(xiāo)售額保持高速增長(zhǎng)銷(xiāo)售額（單位：百萬(wàn)美金）增長(zhǎng)率8050%7045%6040%35%5030%4025%3020%2015%10%105%00%2018Q42019Q12019Q22019Q32019Q42020Q1ONPATTRO季度銷(xiāo)售額數(shù)據(jù)來(lái)源：Alnylam財(cái)報(bào)，市場(chǎng)研究部除了Onpattro，TKM-080301（TKM-PLK1）是另一種基于DLin-DMA的LNP制劑。TKM-080301由TekmiraPharmaceuticals開(kāi)發(fā)，并包含抗PLK1（polo樣激酶1）siRNA，用于治療實(shí)體癌。臨床前研究表明，在異種移植腫瘤模型中具有理想的抗腫瘤活性，并且在接受單劑TKM-080301后7-10天，PLK1表達(dá)的抑制作用得以維持。沒(méi)有顯示明顯的免疫激活或骨髓抑制作用，并且在肝臟和脾臟中觀察到有限的毒性。在1/2期臨床試驗(yàn)（NCT02191878）中，患者通過(guò)30分鐘的靜脈內(nèi)注射，將TKM-080301的劑量從0.15毫克/千克遞增至0.9毫克/千克，接受了28天的治療。每周輸注一次。兩名患者以0.9mg/kg/周的劑量觀察到劑量限制毒性（DLT）和3級(jí)不良反應(yīng)，最大耐受劑量（MTD）為0.75mg/kg/week。36,150在另一項(xiàng)臨床試驗(yàn)中（NCT01262235），TKM-080301的劑量為0.6或0.75mg/kg/周，治療持續(xù)18個(gè)周期（每個(gè)周期4周），臨床結(jié)果觀察到腫瘤的減少?？梢灶A(yù)見(jiàn)，隨著FDA可能在2018年的批準(zhǔn)上市的Patisiran，LNP這類(lèi)載體系統(tǒng)將繼續(xù)收到很高臨床期望。另外，含有可離子化的陽(yáng)離子脂質(zhì)的LNP也在促進(jìn)mRNA和CRISPR/Cas等其他基因治療的快速發(fā)展。如本次新冠疫情中，領(lǐng)先的mRNA疫苗公司Moderna和Biontech都采用了脂質(zhì)體作為遞送系統(tǒng)。LNP優(yōu)勢(shì)在于其極大的基因載量，成熟的監(jiān)管體系以及極強(qiáng)的工藝可放大性，能夠極好的控制成本，且載遺傳藥物L(fēng)NP現(xiàn)在已被證明可以實(shí)現(xiàn)肝細(xì)胞中幾乎所有基因的敲除，表達(dá)或編輯，未來(lái)還有有望延伸至其他組織的應(yīng)用。27圖24：LNP作為mRNA疫苗的主要遞送系統(tǒng)數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部5.4 GalNAc遞送系統(tǒng)-肝細(xì)胞靶向極佳的遞送系統(tǒng)盡管基于脂質(zhì)體LNP的RNAi藥物patisiran進(jìn)入了商業(yè)應(yīng)用，但GalNAc-siRNA偶聯(lián)物的遞送平臺(tái)因其針對(duì)肝靶向性肝素遞送的效力和安全性受到了各大藥企的追捧。GalNAc是去唾液酸糖蛋白受體（ASGPR）的配體，去唾液酸糖蛋白受體（ASGPR）是一種內(nèi)吞性受體，在肝細(xì)胞的膜表面上高度特異性地表達(dá)（?500,000/細(xì)胞），而在其他細(xì)胞中幾乎不表達(dá)。ASGPR和網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用可以有效地將半乳糖衍生的配體從細(xì)胞表面轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)。在此過(guò)程中，ASPGR在15分鐘內(nèi)出現(xiàn)在細(xì)胞表面。四價(jià)和三價(jià)配體比單價(jià)和二價(jià)ASGPR表現(xiàn)出更高的親和力。因此，三價(jià)或四價(jià)GalNAc部分與具有專(zhuān)有接頭結(jié)構(gòu)的siRNA共價(jià)綴合。28圖25：GalNAc肝靶向遞送的作用機(jī)理數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部雖然僅限于肝臟靶點(diǎn)，但GalNAc技術(shù)的優(yōu)勢(shì)顯露無(wú)遺。諾華97億美元收購(gòu)的降脂藥物Inclisiran就是使用的GalNAc技術(shù)，安全性和便利性甚至超越了口服小分子?？梢云は麻L(zhǎng)循環(huán)給藥是GalNAc的一個(gè)巨大優(yōu)勢(shì)。皮下注射的GalNAc-siRNA比靜脈注射的GalNAc-siRNA具有更好的性能。主要原因是皮下施用的siRNA需要穿過(guò)結(jié)締組織以及毛細(xì)血管和淋巴內(nèi)皮細(xì)胞才能在循環(huán)中積累。這個(gè)過(guò)程改變了GalNAc-siRNA的藥代動(dòng)力學(xué)特性。靜脈內(nèi)注射的siRNA會(huì)從循環(huán)系統(tǒng)迅速排至腎臟，而與靜脈注射可實(shí)現(xiàn)更高的肝內(nèi)聚集。更重要的是，通過(guò)增強(qiáng)的穩(wěn)定修飾化學(xué)（例如ESC或ESCplus）時(shí)，GalNAc-siRNA結(jié)合物顯示出非常長(zhǎng)的作用時(shí)間，支持這些RNAi藥物甚至可以做到僅需半年給一次藥。表13：GalNAc的優(yōu)劣勢(shì)序號(hào)優(yōu)勢(shì)1只需2-5mg/kg劑量2可做成皮下給藥3一次給藥持續(xù)6個(gè)月以上4制劑簡(jiǎn)單穩(wěn)定性好劣勢(shì)1僅靶向肝臟，限定了應(yīng)用器官292肝癌中，ASGR在肝臟的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中不表達(dá)，高度去分化的HCC腫瘤細(xì)胞中ASGR的水平往往會(huì)降低數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部但是GalNac也存在著諸多不足。唾液酸糖蛋白受體（ASGPR）的配體在賦予GalNac高肝靶向性的同時(shí)，也限制了其應(yīng)用的領(lǐng)域，并且在肝癌中GalNAc往往并非最佳選擇。去唾液酸糖蛋白受體（ASGR）是凝集素家族成員，在肝細(xì)胞中高表達(dá)，但在肝臟的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中不表達(dá)，相對(duì)于正常肝細(xì)胞，高度去分化的HCC腫瘤細(xì)胞中ASGR的水平往往很低，低分化的HCC細(xì)胞系中ASGR1/2的表達(dá)水平要低得多，這極大地限制了GalNAc在肝癌這一巨大適應(yīng)癥領(lǐng)域中的發(fā)展。圖26：ASGR在原發(fā)性肝癌HCC中低表達(dá)數(shù)據(jù)來(lái)源：moleculartherapy，市場(chǎng)研究部目前，GalNAc受到了各大藥企的追捧。2019年11月，在Alnylam接受NDA僅四個(gè)月后，F(xiàn)DA批準(zhǔn)了用于AHP治療的GIVLAARI。GIVLAARI是一種靶向RNAi治療劑的氨基乙酰丙酸合酶1（ALAS1），是全球首個(gè)結(jié)合GalNAc的RNAi治療劑。根據(jù)Alnylam公布的1期臨床數(shù)據(jù)，9每月一次以2.5mg/kg劑量服用的GIVLAARI顯著降低了ALAS1mRNA，δ氨基乙酰丙酸（ALA）和膽色素原（PBG）的水平，抑制率超過(guò)80％，與安慰劑相比，平均年發(fā)作率降低了79％。在ENVISION3期研究中，接受GIVLAARI的患者與接受安慰劑的患者相比，復(fù)合卟啉癥發(fā)作的年平均減少74％，具有可接受的總體安全性和耐受性。30圖27：GIVLAARI臨床主要終點(diǎn)結(jié)果數(shù)據(jù)來(lái)源：ENVISIONstudy，市場(chǎng)研究部除了已獲批的GIVLAARI，Alnylam的另一款GalNAc遞送的RNAi藥物lumasiran和Novartis的inclisiran都已向FDA遞交了NDA，而tustusan（ALN-AT3）和vutrisiran（ALN-TTRsc02）正在進(jìn)行3期臨床試驗(yàn)，預(yù)計(jì)未來(lái)幾年內(nèi)會(huì)有多款產(chǎn)品陸續(xù)上市。5.5 胞外囊泡遞送系統(tǒng)胞外囊泡遞送系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與LNP類(lèi)似，也是近年來(lái)RNAi領(lǐng)域遞送系統(tǒng)研究的方向之一。胞外囊泡（Extracellularvesicle，EV）是細(xì)胞分泌的，用于細(xì)胞間通信。幾乎所有細(xì)胞都能分泌EV。EV最早在1980年代初期被發(fā)現(xiàn)，但直到2007年發(fā)現(xiàn)EV中有RNA時(shí)，才被廣泛關(guān)注。根據(jù)形成方式的不同，EV目前主要被分成四類(lèi)：外泌體（exosomes，EXO）（直徑30-120nm）、微囊泡（microvesicles，MV）（直徑50nm-幾微米）、凋亡小體（apoptoticbodies）（直徑1-5微米）和largeoncosomes（直徑1-10微米）。目前在載體領(lǐng)域研究較多的是前兩種。M目前exosomes是該領(lǐng)域研究較多的類(lèi)型。圖28：Exosome結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)來(lái)源：Nature，市場(chǎng)研究部31EV具有較好的靶向性與良好的免疫原性。一般本身就具有組織靶向性。其靶向性由其膜蛋白的組成決定。比如，表達(dá)Tspan8-alpha4的EV靶向CD54陽(yáng)性?xún)?nèi)皮細(xì)胞或者胰腺癌細(xì)胞；表達(dá)整合素αVβ5的EV靶向肝臟中的Kupffer細(xì)胞；整合素α6β4和整合素α6β1則分別靶向肺部成纖維細(xì)胞和表皮細(xì)胞。同時(shí)，EV的組織靶向性可以通過(guò)在EV膜蛋白上插入靶向多肽或者蛋白（如駱駝抗體、ScFv），進(jìn)行改造。同時(shí)，EV由細(xì)胞分泌，有較高的生物相容性和較低的免疫原性，且本身就含有豐富的生物活性物質(zhì)，本身就有一定的治療潛力。目前EV給藥最大的問(wèn)題在于成藥性上。由于外泌體的生成、分泌機(jī)制尚不明晰，其亞群體的區(qū)分和功能研究較少且外泌體內(nèi)容物豐富且復(fù)雜，找到其發(fā)揮功能作用的信號(hào)分子也存在難度，這些都影響了EV作為給藥系統(tǒng)的成藥性以及批間穩(wěn)定性，對(duì)下游工藝也造成了極大的挑戰(zhàn)，這也是為何到目前為止下游工藝尚未有成熟方案。5.6 各類(lèi)遞送系統(tǒng)比較目前，在全球范圍內(nèi)，對(duì)于肝臟疾病的靶向遞送研究熱點(diǎn)主要是GalNAc技術(shù)，但其在肝癌領(lǐng)域相對(duì)研發(fā)較少，對(duì)于癌癥和非肝臟靶向的疾病，LNP是主要的研發(fā)重心，其他遞送系統(tǒng)如Exsome，多肽聚合物等也有一定的發(fā)展。在成熟度上，LNP與GalNAc相對(duì)在工藝成熟度、成藥性驗(yàn)證上遙遙領(lǐng)先。表14：各類(lèi)RNAi遞送系統(tǒng)Deliverymethod 靶器官肝臟，腎臟，CNS，Lipidnanoparticles 造血器官，實(shí)體瘤，其他組織GalNAc 肝臟Exosomes 實(shí)體瘤，其他組織金納米粒子 膠質(zhì)瘤polymericmatrix 胰腺癌Bowen病，皮膚鱗狀多肽聚合物細(xì)胞原位癌數(shù)據(jù)來(lái)源：市場(chǎng)研究部

例子最快階段Patisiran305,TKM-Ebola獲批GIVLAARI，Lumasiran，獲批Vutrisiran，F(xiàn)itusiranMesenchymalstromalcell-derivedexosomeswithphase1KRAS-G12DtargetingsiRNANU-0129phase1siG12D-LODERphase1STP70phase1/26、他山之石——黑石20億美元投資RNAi，行業(yè)黃金歲月即將到來(lái)Alnylam——行業(yè)堅(jiān)守者，磨劍20年終迎曙光。2020年4月13日，納斯達(dá)克上市32公司Alnylam(Nasdaq:ALNY)發(fā)布公告，與黑石Blackstone達(dá)成戰(zhàn)略投資合作協(xié)議，黑石投資20億美元支持Alnylam的RNAi項(xiàng)目，成為biotech行業(yè)領(lǐng)域最大的單筆私有投資案例。Alnylam成立于2002年，公司公司主要專(zhuān)注于遺傳性疾病、肝臟傳染疾病、心臟代謝疾病和中樞神經(jīng)/眼科疾病4個(gè)治療領(lǐng)域，目前公司有2個(gè)已上市產(chǎn)品（Onpattro、Givlaari）、2個(gè)已提交NDA（Lumasiran、Inclisiran）、11個(gè)在臨床階段的產(chǎn)品。圖29：Alnylam研發(fā)方向與管線情況數(shù)據(jù)來(lái)源：Alnylam官網(wǎng)，市場(chǎng)研究部研發(fā)上的高效與高成功率證明了RNAi療法的優(yōu)越性。在研發(fā)上，Alnylam預(yù)計(jì)，從現(xiàn)在到2025年，該公司的研發(fā)管線中每年將有2-4個(gè)研發(fā)項(xiàng)目可以遞交IND申請(qǐng)。Alnylam公司的研發(fā)項(xiàng)目從1期臨床進(jìn)展到3期臨床試驗(yàn)結(jié)果積極的成功率達(dá)到54.6%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于新藥開(kāi)發(fā)的行業(yè)平均值。這是因?yàn)樗械难邪l(fā)項(xiàng)目都基于人類(lèi)遺傳學(xué)驗(yàn)證過(guò)的靶點(diǎn)，而且生物標(biāo)志物的使用是所有研究項(xiàng)目的一部分。一旦克服毒副作用和遞送手段方面的挑戰(zhàn)，成功開(kāi)發(fā)RNAi療法反而變得相對(duì)簡(jiǎn)單。這時(shí)，限制RNAi療法開(kāi)發(fā)的因素將變?yōu)槿绾握业胶线m的靶點(diǎn)。33圖30：Alnylam計(jì)劃每年遞交2-4個(gè)IND數(shù)據(jù)來(lái)源：Alnylam官網(wǎng)，市場(chǎng)研究部圖31：Alnylam研發(fā)成功率高數(shù)據(jù)來(lái)源：Alnylam官網(wǎng)，市場(chǎng)研究部從Alnylam的成功上，我們可以發(fā)現(xiàn)，小核酸技術(shù)已成為生物制藥公司的兵家必爭(zhēng)之地，目前基本形成兩類(lèi)具有代表性的企業(yè)。一類(lèi)是專(zhuān)注于小核酸技術(shù)與品種研發(fā)的縱向一體式公司，如Ionis、Alnylam、Arrowhead、Quark等，其中Ionis、Alnylam進(jìn)度比較靠前。另一類(lèi)是國(guó)際生物醫(yī)藥巨頭如羅氏、賽諾菲、阿斯利康等通過(guò)自身雄厚的資金實(shí)力，通過(guò)兼并或者合作開(kāi)發(fā)模式來(lái)布局小核酸藥物領(lǐng)域。7、投資建議34RNA治療的新領(lǐng)域正穩(wěn)健發(fā)展，盡管目前為止僅批準(zhǔn)了少數(shù)幾種RNA藥物，但仍鼓舞了其余尚在臨床試驗(yàn)階段的藥物?？梢钥隙ǖ氖?，未來(lái)幾年RNA治療將在藥物研究中占據(jù)舉足輕重的地位，降低尚無(wú)相對(duì)應(yīng)藥物治療的蛋白質(zhì)標(biāo)的并治愈疾病。誠(chéng)然要開(kāi)發(fā)一款成功的RNAi療法并不容易，需要克服毒副作用、遞送手段等多方面的挑戰(zhàn)，但隨著行業(yè)近20年的積累，以Alnylam為首的頭部公司已經(jīng)慢慢展露出RNAi獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，其接近60%的從臨床1期到3期的成功率表明，一旦克服毒副作用和遞送手段方面的挑戰(zhàn)，成功開(kāi)發(fā)RNAi療法反而變得相對(duì)簡(jiǎn)單，屆時(shí)，限制RNAi療法開(kāi)發(fā)的因素將變?yōu)槿绾握业胶线m的靶點(diǎn)。我們預(yù)計(jì)RNAi領(lǐng)域?qū)⒃谖磥?lái)5年內(nèi)創(chuàng)造100億美金以上的市場(chǎng)，并且在未來(lái)二十年內(nèi)如生物藥一樣，創(chuàng)造千億美金級(jí)別的市場(chǎng)，給予行業(yè)“增持”評(píng)級(jí)，建議重點(diǎn)關(guān)注國(guó)內(nèi)企業(yè)：白橡樹(shù)海昶生物、