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光激化學(xué)發(fā)光ightnitiatedhemiluminescencessayLiCA4G工作原理性能參數(shù)技術(shù)特點(diǎn)系統(tǒng)平臺(tái)LiCA放免酶聯(lián)免疫化學(xué)發(fā)光熒光免疫60年代70年代80年代90年代免疫標(biāo)記技術(shù)發(fā)展國(guó)產(chǎn)進(jìn)口酶促化學(xué)發(fā)光直接化學(xué)發(fā)光電化學(xué)發(fā)光LiCA(LOCI)是以納米級(jí)高分子微粒為基礎(chǔ),由光激發(fā)的一種均相免洗的化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)。具有快速、均相(免洗)、高靈敏度和操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)的新一代技術(shù)。是化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的又一個(gè)新的里程碑光激化學(xué)發(fā)光LiCALightInitiatedChemiluminescentAssay
兩種高分子微粒:感光微粒和發(fā)光微粒兩種微粒近距離接近。是感光微粒接受激發(fā)光照射釋放出單線(xiàn)態(tài)氧構(gòu)成“氧橋”傳遞能量,使發(fā)光微粒發(fā)出光信號(hào)LiCA技術(shù)基礎(chǔ)
直徑:200nm
包被親和素紅色激光680nm照射釋放單線(xiàn)態(tài)氧
直徑:200nm
用于包被抗體/抗原接受單線(xiàn)態(tài)氧產(chǎn)生610nm光感光微粒發(fā)光微粒LiCA原理—兩種微粒半衰期:4μS作用距離:200nmLiCA原理——單線(xiàn)態(tài)氧(能量載體)三線(xiàn)態(tài)氧(基態(tài))單線(xiàn)態(tài)氧(激發(fā)態(tài))感光微粒—親和素發(fā)光微粒-Anti-HBsHBsAg生物素-Anti-HBs發(fā)射光610nm<200nm激發(fā)光680nm1O2LiCA原理—舉例(雙抗體夾心法)不含待測(cè)抗原激發(fā)光680nm1O2>200nm能量的近距離轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移的介質(zhì)是單線(xiàn)態(tài)氧兩種微粒相互接近——200nmLiCA發(fā)光原理光激化學(xué)發(fā)光=光能→化學(xué)能→光能工作原理性能參數(shù)技術(shù)特點(diǎn)系統(tǒng)平臺(tái)LiCA均相反應(yīng)反應(yīng)充分速度更快LiCA技術(shù)特點(diǎn)——均相反應(yīng)酶標(biāo)板,板式磁微粒,微米級(jí),非均相LiCA微粒,納米級(jí),類(lèi)均相**********YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY*YYYYYYYY微粒包被等質(zhì)量比表面積A:B=5ABdA=200nmdB=1μm等質(zhì)量微粒(比表面積)LiCA磁微粒YYYYYYYYYLiCAAb磁微粒AbLiCA抗體載量?jī)?yōu)勢(shì)準(zhǔn)確成本快速LiCA的技術(shù)特點(diǎn)
加樣
孵育15%
洗滌
孵育80%
檢測(cè)5%隨機(jī)誤差/交叉污染
CV
<5%自動(dòng)化平臺(tái)免洗/免分離類(lèi)均相反應(yīng)技術(shù)納米級(jí)別微粒包被500Tests/Hour清洗廢液處理大量純化水清洗管路
管路定期更換(一般半年一換)進(jìn)口原裝管昂貴需達(dá)到無(wú)害環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)繁瑣水質(zhì)要求達(dá)標(biāo)高額隱性成本免洗提升經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益品牌平臺(tái)測(cè)試速度羅氏2010(e411)80e170(e601)170雅培i1000100i2000200貝克曼Access2100Dxi800400
采用680nm弱能量紅光激發(fā)
單線(xiàn)態(tài)氧不易受外界環(huán)境因素干擾
取樣量?jī)H25μl,試劑中有表面活性劑LiCA的抗干擾性O(shè)2-O2-O2-O2-O2-O2-2000-2009年光激化學(xué)發(fā)光相關(guān)文獻(xiàn)間接相關(guān)直接相關(guān)SCI10/核心期刊/4生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究新藥的篩選目標(biāo)小分子的多樣性蛋白核酸糖LiCA的應(yīng)用拓展17技術(shù)特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)均相免疫反應(yīng)充分免清洗/分離結(jié)果精密度高高通量500測(cè)試/小時(shí)易使用免疫=生化高靈敏度10-15mol納米微粒技術(shù)提高反應(yīng)面積和抗體載量離子氧傳遞能量不易受反應(yīng)環(huán)境影響目標(biāo)分子多樣性蛋白質(zhì)、核酸等LiCA的技術(shù)特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)18工作原理性能參數(shù)技術(shù)特點(diǎn)系統(tǒng)平臺(tái)LiCALiCASP移液工作站LiCAHT均相發(fā)光免疫分析儀LiCA產(chǎn)品平臺(tái)樣品臂試劑臂試管架試劑倉(cāng)槍頭架微孔板廢物盒LiCASP移液工作站
未包被任何抗原/抗體96個(gè)反應(yīng)空杯LiCA微孔板托盤(pán)上蓋板LiCAHT均相免疫發(fā)光分析儀
甲狀腺T3T4FT3FT4TSHTSH-3ATPOATG性激素BhCGPTFSHLHE2E3Prolactin腫瘤標(biāo)志物AFPCEACA12-5CA19-9CA153CA50CA24-2CY21-1fPSAPSANSESCCpro-GRPPG-Ⅰ/Ⅱ心肌標(biāo)志物cTnIMyOmCKMBBNPNT-proBNPhsCRP新陳代謝C-peptideInsuliniPTHDPD傳染性疾病HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBcAnti-HAVIgMAnti-HBcIgMAnti-HCVAnti-HIVAnti-TPLiCA項(xiàng)目菜單24工作原理性能參數(shù)技術(shù)特點(diǎn)系統(tǒng)平臺(tái)LiCALiCA系統(tǒng)的多中心臨床評(píng)估項(xiàng)目臨床評(píng)估單位參比系統(tǒng)乙型肝炎上海市第一人民醫(yī)院雅培I2000乙型肝炎北京協(xié)和醫(yī)院強(qiáng)生Vitros乙型肝炎上海市瑞金醫(yī)院國(guó)產(chǎn)試劑腫瘤上海市中山醫(yī)院羅氏E170腫瘤上海市瑞金醫(yī)院雅培I2000腫瘤上海市新華醫(yī)院羅氏e601甲狀腺上海市第六人民醫(yī)院西門(mén)子CentaurN=453,上海第一人民醫(yī)院;
參比試劑:雅培I2000乙肝靈敏度特異性符合率HBsAg97.92%100%99.78%Anti-HBs95.98%97.38%96.69%HBeAg95.24%100%99.59%Anti-HBe90.77%97.21%95.36%Anti-HBc91.54%98.9%94.48%LiCA性能多中心臨床評(píng)估(乙型肝炎)相關(guān)性相關(guān)系數(shù)線(xiàn)性系數(shù)AFP顯著相關(guān)0.990.74CEA顯著相關(guān)0.930.89LiCA性能多中心臨床評(píng)估(腫瘤標(biāo)志物)N=200,上海市中山醫(yī)院參比試劑:羅氏E170LiCA性能多中心臨床評(píng)估(腫瘤標(biāo)志物)相關(guān)性相關(guān)系數(shù)線(xiàn)性系數(shù)AFP顯著相關(guān)0.970.88CEA顯著相關(guān)0.960.79N=500,上海市瑞金醫(yī)院參比試劑:雅培I2000LiCA性能多中心臨床評(píng)估(甲狀腺)
甲狀腺相關(guān)性相關(guān)系數(shù)線(xiàn)性TSH顯著相關(guān)0.990.84FT3顯著相關(guān)0.931.25FT4顯著相關(guān)0.90.84TT3顯著相關(guān)0.940.99TT4顯著相關(guān)0.930.73N=300,上海市第六人民醫(yī)院參比試劑:西門(mén)子AdviacentuarAFPHBsAg4.50%1.79%4.91%2.14%AFP12345……MeanSDCV批內(nèi)86.1186.3688.4087.9086.43……86.271.551.79%批間74.5973.6369.6471.9071.96……71.013.204.50%HBsAg12345……MeanSDCV批內(nèi)72.5971.2576.5075.0578.03……76.611.642.14%批間0.220.220.230.220.23……0.230.014.91%批內(nèi)批間LiCA的精
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