機能學實驗離體蛙心灌流

機能學實驗離體蛙心灌流第一頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六一、實驗?zāi)康?.本實驗的目的是學習離體蛙心的灌流方法。2.觀察各種理化因素對對離體心臟活動的影響。第二頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六

正常的蛙心能按靜脈竇的節(jié)律性自動產(chǎn)生興奮，心臟的自動節(jié)律性活動，需要有一個合適的理化環(huán)境。

蟾蜍心臟離體后，用任氏液灌流，在一定時間內(nèi)仍能保持節(jié)律性興奮和收縮活動。由于心臟的正?；顒舆€有賴于內(nèi)環(huán)境因素的相對穩(wěn)定，改變灌流液的成分可引起心臟活動的改變。二、實驗原理

第三頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六

心肌細胞的生理特性表現(xiàn)為：自動節(jié)律性、興奮性、傳導性和收縮性。心肌細胞外離子濃度的變化和因體內(nèi)生物活性物質(zhì)（如激素）引起的細胞膜離子通透性的改變，對心肌細胞的生物電活動和生理特性必然會產(chǎn)生明顯的影響。第四頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六三、實驗對象

蟾蜍第五頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六四、實驗步驟一、離體蟾蜍心臟標本制備

1.破壞腦和脊髓

2.仰臥位固定蟾蜍，暴露心臟第六頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六第七頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六（腹面）

（背面）3.蛙心插管第八頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六第九頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六AB蛙心插管在心室收縮時插入心室第十頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六4.連接儀器記錄蛙心搏動曲線第十一頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六五、觀察項目

（一）描記正常心搏曲線

曲線幅度——收縮的程度曲線疏密——心率曲線基線——舒張的程度第十二頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六1.換成無鈣任氏液灌注，沖洗（下同）

2.加入3%氯化鈣溶液1～2滴

3.加入1%氯化鉀溶液1～2滴

4.加入1:10000腎上腺素溶液1～2滴

5.加入1:10000乙酰膽堿溶液1～2滴

6.加入2.5%碳酸氫鈉溶液1～2滴

7.加入3%乳酸溶液1～2滴（二）觀察離子、藥物和酸堿的影響第十三頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六五、注意事項1.蛙心插管內(nèi)液面勿過高或過低，每次換液時，必須用任氏液沖洗3次。2.每次加藥，心搏曲線出現(xiàn)變化后立即將插管內(nèi)液體吸出。3.隨時滴加任氏液于心臟表面使之保持濕潤。4.換能器頭端應(yīng)向下傾斜以免液體進入換能器。第十四頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六六、實驗結(jié)果觀察項目心率收縮程度1．無鈣任氏液2．2%CaCl23．1%KCl4．Adr5．Ach6．2.5%NaHCO37．3%乳酸第十五頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六觀察項目心率收縮幅度（收縮力）無鈣任氏液3%CaCl2

1%KClAdrAch2.5%NaHCO33%乳酸↓↓↑↑（“鈣僵”）(甚至停于舒張期)↓↓↓↓↓↓↑↑↑↑第十六頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六七、結(jié)果分析與討論第十七頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六1.無鈣任氏液無鈣任氏液灌流細胞外液Ca2+↓↓心肌細胞動作電位期間Ca2+

內(nèi)流↓↓心肌細胞胞漿Ca2+↓↓心肌收縮力收縮↓↓第十八頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六細胞外液Ca2＋濃度升高工作細胞動作電位期間Ca2＋內(nèi)流增加肌漿Ca2＋濃度增加興奮收縮耦聯(lián)增強心肌收縮力增強2.3%CaCl2慢反應(yīng)細胞4期自動除極化速度增加自律性增加心率增快第十九頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六細胞外液K＋濃度升高K＋抑制Ca2＋內(nèi)流收縮力↓Ca2＋內(nèi)流↓興奮收縮耦聯(lián)削弱3.1%KClIK1通道通透性↑，K＋易于外流，對抗了If內(nèi)流去極自律性↓第二十頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六如果任氏液中鉀離子濃度明顯增高，蛙心會處于什么狀態(tài)？當細胞外顯著高鉀時，細胞膜內(nèi)外鉀濃度梯度減小，使得靜息電位絕對值減小至－55mv，使得鈉通道失活，從而使心肌細胞興奮性喪失，心臟可停搏在舒張狀態(tài)（當細胞外輕度高鉀時，膜內(nèi)外K＋濃度梯度↓，靜息電位↓，RP與TP的差↓，興奮性↑）第二十一頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六心肌細胞膜β1受體結(jié)合Adr肌漿網(wǎng)對Ca2＋通透性↑動作電位期間Ca2＋內(nèi)流性↑收縮力↑細胞膜對Ca2＋通透性↑4期自動除極化速度↑自律性↑心率↑4.腎上腺素（Adr）Ca2＋與肌鈣蛋白親和力↓，肌漿網(wǎng)攝鈣速度↑舒張速度↑復極期肌漿Ca2＋濃度降低速度↑第二十二頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期六心肌細胞膜M受體結(jié)合細胞膜對K＋通透性增加自律性降低心率減慢細胞膜對Ca