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維生素C含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告維生素C含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆沼?,6-二氯酚靛酚測(cè)定維生素C的原理和方法。實(shí)驗(yàn)原理維生素C有強(qiáng)的還原性,在中性和微酸中,呈藍(lán)色的染料2,6-二氯酚靛酚還原成無(wú)色的還原型2,6-二氯酚靛酚,同時(shí)自身被氧化脫氫抗壞血酸。在維生素C全部氧化后,再滴下的2,6-二氯酚靛酚將立即使溶液呈粉紅色。本實(shí)驗(yàn)采用2,6-二氯酚靛酚滴定分析,由于提取液中的其他還原性物質(zhì)還原2,6-二氯酚靛酚速度較慢,故可將滴定過(guò)程控制在2min之內(nèi),并判斷終點(diǎn)以紅色15~30S內(nèi)消失為準(zhǔn)。儀器與試劑維生素C標(biāo)準(zhǔn)液,維生素C樣液,0.1mg/ml2,6-二氯酚靛酚溶液,1/1000mol/l碘酸鉀,甲醛醋酸緩沖液,2%草酸溶液,1%淀粉,6%KI溶液實(shí)驗(yàn)步驟標(biāo)準(zhǔn)維生素C的標(biāo)定:吸取標(biāo)準(zhǔn)維生素C溶液5ml放入三角瓶,加入6%KI溶液0.05mlt和1%淀粉5滴。用微量管以碘酸鉀液進(jìn)行滴定,每滴下1滴既充分搖勻,滴至出現(xiàn)微青藍(lán)色為止,記下計(jì)數(shù)Vc1,求出標(biāo)準(zhǔn)維生素C的含量。維生素C含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告全文共3頁(yè),當(dāng)前為第1頁(yè)。維生素C樣液的滴定:取三個(gè)三角瓶標(biāo)記為A,B和C。維生素C含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告全文共3頁(yè),當(dāng)前為第1頁(yè)。編號(hào)ABC樣品維生素C樣液1010-維生素C標(biāo)準(zhǔn)液--1甲醛醋酸緩沖液-1-2%草酸溶液--9以標(biāo)定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定,并記錄下所消耗的體積V1、V2、V3V1——表示維生素C和非維生素C的其他還原性性質(zhì)總共消耗V2——表示非維生素C的還原性物質(zhì)的消耗實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論每100g樣品還原型維生素C的量(mg)=((V1-V2)*C*V*100)/A測(cè)得:V1=0.200mlV2=0.140mlVc1=0.440mlVc2=2.30ml標(biāo)準(zhǔn)維生素C含量C1=(0.440*0.88)/5=0.0078mg/ml分析:標(biāo)準(zhǔn)維生素C液中有部分氧化。樣品維生素C含量=(0.200-0.140)*5*100*C/3=0.078mg1ml2,6-二氯酚靛酚溶液所能氧化維生素C的毫克數(shù)C=C1/Vc2=0.0339mg分析:一般豬肉中,100g所含的維生素C約在0.1mg,本實(shí)驗(yàn)所求得的維生素C含量為0.0339,比正常水平明顯要低,造成的原因可能是:1、吸取樣品液前未對(duì)樣液進(jìn)行搖勻,造成吸取的樣液局部濃度偏低,測(cè)出來(lái)的含量也就偏低;2、用2,6-二氯酚靛酚滴定標(biāo)準(zhǔn)維生素C溶液時(shí),由于產(chǎn)生的粉紅色難以判斷出來(lái),另外滴定過(guò)程中,儀器難以控制,造成2,6-二氯酚靛酚消耗量偏少,則計(jì)算C(1ml2,6-二氯酚靛酚溶液所能氧化維生素C的毫克數(shù))偏低,造成所測(cè)量得的樣液維生素C含量偏低。因此,為了能取得更好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,本實(shí)驗(yàn)應(yīng)進(jìn)行重復(fù)多次的平行實(shí)驗(yàn)。思考題維生素C含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告全文共3頁(yè),當(dāng)前為第2頁(yè)。1.2,6-二氯酚靛酚溶液滴定法測(cè)定維生素C含量有何優(yōu)缺點(diǎn)?測(cè)定誤差是否大?維生素C含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告全文共3頁(yè),當(dāng)前為第2頁(yè)。答:2,6-二氯酚靛酚溶液滴定法是測(cè)定維生素C的經(jīng)典方法,此法優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便,快速,準(zhǔn)確地測(cè)量出維生素C的含量,但同樣其存在很多缺點(diǎn):1、生物組織中的脫氫抗壞血酸及結(jié)合抗壞血酸同樣有維生素C的生理作用,用此法測(cè)不出來(lái);2、生物材料提取液中含有其他還原性物質(zhì),也可使2,6-二氯酚靛酚溶液還原脫色而而引起誤差;3、提取液中常存在的色素類(lèi)物質(zhì)干擾滴定終點(diǎn)觀察,所以在選材時(shí)應(yīng)選用無(wú)色,綠色或淺黃色等,當(dāng)取材為紫色等時(shí),可用活性炭,白陶土脫色處理。維生素C含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告全文共3頁(yè),當(dāng)前為第3頁(yè)。實(shí)驗(yàn)應(yīng)迅速滴定,防止維生素C被氧化。若不迅速,操作不當(dāng),都會(huì)使
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