胺類藥物的分析

胺類藥物的分析第一頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一常見的芳胺類藥物對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物都含有對氨基苯甲酸酯的結(jié)構(gòu)母體

第二頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一苯佐卡因第三頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一鹽酸丁卡因鹽酸普魯卡因胺，抗心率失常藥。第四頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一酰胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)是苯胺的?；苌铮涔残允蔷哂蟹减０坊?，基本結(jié)構(gòu)為：第五頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一非那西丁（對乙酰氨基苯乙醚）對乙酰氨基酚（撲熱息痛）第六頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

醋氨苯砜（治療麻風(fēng)病，抑制麻風(fēng)桿菌）。第七頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一鹽酸利多卡因第八頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一鹽酸布比卡因第九頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一性質(zhì)

（一）具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基，可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別或亞硝酸鈉滴定法測定含量，可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)，易氧化變色。（二）酯鍵或酰胺鍵易水解

第十頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

（三）具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進行鑒別或非水堿量法測定含量。（四）游離堿易溶于有機溶劑，其鹽可溶于水。第十一頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（五）某些特征取代基（如酚羥基）的反應(yīng)（六）UV（七）IR第十二頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一三、鑒別試驗（一）重氮化—偶合反應(yīng)芳香第一胺類鑒別反應(yīng)第十三頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

直接：鹽酸普魯卡因、對氨基水楊酸鈉、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺等在鹽酸溶液中可直接與亞硝酸鈉進行重氮化反應(yīng)。與堿性β-萘酚成偶氮染料。第十四頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一苯佐卡因和鹽酸普魯卡因ChP（2000）[鑒別]（1）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

第十五頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

間接：對乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、貝諾酯。間接的意思就是需要水解酰胺基。第十六頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一2對乙酰氨基酚ChP（2000）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性β-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色。第十七頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

鹽酸丁卡因中不具有芳伯氨基，無此反應(yīng)，但在酸性液中與亞硝酸鈉生成N-亞硝基化合物的白色沉淀?？膳c芳伯氨基同類區(qū)別。第十八頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第十九頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（二）三氯化鐵反應(yīng)對乙酰氨基酚的酚羥基可直接與三氯化鐵試劑反應(yīng)成藍紫。第二十頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（三）與重金屬離子反應(yīng)

1.與銅和鈷離子反應(yīng)

具有N-芳環(huán)取代的鹽酸利多卡因，在碳酸鈉溶液中與硫酸銅反應(yīng)生成藍紫色，容易轉(zhuǎn)入氯仿中顯黃色。鹽酸普魯卡因，鹽酸丁卡因，苯左卡因等都不發(fā)生此反應(yīng)。第二十一頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第二十二頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一2．羥肟酸鐵鹽反應(yīng)

見下圖第二十三頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一羥肟酸鐵第二十四頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一3．與汞離子的反應(yīng)

與對氨基苯甲酸酯類可區(qū)別。第二十五頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（四）水解產(chǎn)物的反應(yīng)1.鹽酸普魯卡因ChP（2000）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀。加熱，變?yōu)橛蜖钗铮ㄋ猓?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣（氨基醇類揮發(fā)），能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于過量的鹽酸。第二十六頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第二十七頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一2.苯佐卡因ChP（2000）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。第二十八頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第二十九頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

（五）制備衍生物測熔點1．三硝基苯酚衍生物

鹽酸利多卡因ChP（2000）[鑒別]取本品0.2g，加水20ml溶解。取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過，沉淀用水洗滌后，干燥，依法測定（附錄ⅥC），熔點為228～232℃，熔融時同時分解。鹽酸布比卡因ChP（2000）熔點為194℃第三十頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第三十一頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一2.硫氰酸鹽衍生物鹽酸丁卡因ChP（2000）[鑒別]取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過，結(jié)晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測定（附錄ⅥC），熔點約為131℃。第三十二頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第三十三頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

鹽酸布比卡因ChP（2000）[鑒別]取本品，精密稱定，按干燥品計算，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在263nm與271nm的波長處有最大吸收；其吸收度分別為0.53～0.58與0.43～0.48。（六）UV

第三十四頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（七）IR

鹽酸布比卡因ChP（2000）[鑒別]本品的紅外光吸收圖譜與對照的圖譜（光譜集324圖）一致。第三十五頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一四、特殊雜質(zhì)檢查

（一）對乙酰氨基酚

一般以硝基氯苯為原料，水解后制得對硝基酚,還原成對氨基酚，再?；?。按藥典規(guī)定，除檢查酸度，氯化物，硫酸鹽，重金屬，水分和熾灼殘渣外，還需進行下列檢查：

第三十六頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一乙醇溶液的澄清度與顏色生產(chǎn)工藝中使用鐵粉作還原劑可能帶入成品中。對氨基酚的有色氧化物在乙醇中顯橙紅或棕色。第三十七頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一檢查方法:

取本品1.0g,加乙醇10ml溶解,溶液應(yīng)澄清,無色。第三十八頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一2有關(guān)物質(zhì)

合成路線多，雜質(zhì)來源主要是中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物，如對氨基酚，對氯乙酰苯胺，0-乙?；鶎σ阴０被?，偶氮苯，氧化偶氮苯，苯醌和醌亞胺等，以對氯乙酰苯胺為雜質(zhì)對照品；檢查方法TLC。

其他雜質(zhì)采用參比雜質(zhì)對照品法。第三十九頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

3對氨基酚乙?；煌耆蛸A藏不當發(fā)生水解均可引入。因毒性大又使苯品產(chǎn)生色澤，要嚴格控制限量。反應(yīng)原理第四十頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一檢查方法對照法

取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1m1，搖勻，放置30min；如顯色，與對乙酰氨基酚對照品1.0g加對氨基酚50g用同一方法制成的對照液比較，不得更深（0.005％）。

第四十一頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（二）鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查有酯鍵，在注射液的制備過程中受滅菌溫度，時間，溶液pH值，貯藏時間，以及光線和金屬離子等因素的影響，可水解成對氨基苯甲酸和2-二乙氨基醇。前者長期貯藏和高溫加熱脫羧成苯胺，苯胺可進一步轉(zhuǎn)化成有色物使注射液變黃，療效下降，毒性增加。限量為1.2%。

第四十二頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一檢查方法TLC雜質(zhì)對照品法第四十三頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第四十四頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

精密量取本品，加乙醇稀釋使成為每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg的溶液，作為供試品溶液。取對氨基苯甲酸對照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作為對照品溶液。第四十五頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

取上述兩種溶液各10l，分別點于含有羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠H薄層板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1∶1∶4）為展開劑，展開后，取出晾干，用對二甲氨基苯甲醛溶液（2％對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）噴霧顯色。第四十六頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一供試品溶液如顯與對照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點，其顏色與對照品溶液主斑點比較，不得更深。檢出限量0.01ug,苯胺也是。第四十七頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（一）亞硝酸鈉滴定法1.原理在酸性溶液中與亞硝酸鈉成重氮鹽五、含量測定第四十八頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測定。第四十九頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第五十頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一2.主要測定條件（1）因生成物也不夠穩(wěn)定，加入適量KBr加速反應(yīng)KBr為催化劑，芳伯胺的堿性越弱越有利于重氮化反應(yīng)的進行。在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機理為：

NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O第五十一頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第五十二頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（1）K1（2）K2∵K1≈300K2

加入KBr，可增大被測溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速度第五十三頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（2）酸的種類及其濃度在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3第五十四頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一鹽酸應(yīng)過量1:2.5～6；加入鹽酸：①重氮化反應(yīng)速度加快；②重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影響測定結(jié)果第五十五頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一第五十六頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（3）室溫條件下滴定10～30℃（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3處，滴定液一次大部分放下，近終點時方改為慢速滴定。因為屬于分子型反應(yīng)，速度很慢。最后一滴要攪拌震蕩1-5min。第五十七頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一3.指示終點的方法有電位法，永停滴定法，外指示劑法，和內(nèi)指示劑法。（1）永停滴定法

ChP（2000）、BP（1998）第五十八頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一永停滴定法（附錄ⅦA）中國藥典規(guī)定，亞硝酸鈉滴定用永停法指示終點。作重氮化法的終點指示時，調(diào)節(jié)R1使加于電極上的電壓約為50mV。取供試品適量，精密稱定，置燒杯中，除另有規(guī)定外，可加水40ml與鹽酸溶液（1→2）15ml，而后置電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑—鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處。第五十九頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點時，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點。第六十頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一

終點時，溶液中無亞硝酸，線路無電流通過，有微量亞硝酸時與電極起氧化還原反應(yīng)，有電流。電流計指針突然偏轉(zhuǎn)。永不回復(fù)。即為終點。第六十一頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一4.測定方法鹽酸普魯卡因ChP（2000）取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法（附錄ⅦA），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當于27.28mg的C13H20N2O2·HCl第六十二頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（2）外指示劑法—在外面KI—淀粉糊劑或指示液或試紙，到達終點時，稍過量的亞硝酸鈉在酸性溶液中氧化碘化鉀析出碘與淀粉顯藍。

2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O第六十三頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（二）非水溶液滴定法鹽酸利多卡因，鹽酸丁卡因側(cè)鏈脂肪胺具有叔胺氮，鹽酸布比卡因的哌啶環(huán)也是叔胺氮，這些脂烴胺側(cè)鏈都具弱堿性，在非水溶液中用酸滴定。第六十四頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（三）紫外分光光度法對乙酰氨基酚在0.4％氫氧化鈉溶液中，于257nm波長處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測定。第六十五頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一對乙酰氨基酚ChP（2000）取本品約40mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長處測定吸收度，按C8H9NO2的吸收系數(shù)為715計算，即得。第六十六頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一原料藥吸收系數(shù)法USP（24）對照法第六十七頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（四）比色法（P152）中性條件下的重氮化反應(yīng)第六十八頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（五）熒光法——熒光探針技術(shù)使熒光衍生化試劑與本身無熒光或熒光效率低的化合物反應(yīng)，其產(chǎn)物具有強熒光，從而使檢測靈敏度大大提高。λex400nm（激發(fā)波長）、λem485nm（發(fā)射波長）處測定熒光強度，標準曲線法定量。第六十九頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（六）HPLC法

鹽酸普魯卡因注射液ChP（2000）可同時測定鹽酸普魯卡因及其降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸離子抑制色譜法，內(nèi)標法定量，以苯甲酸為內(nèi)標。第七十頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一（七）體內(nèi)藥物分析（P153）對乙酰氨基酚的急性中毒檢測中毒早期癥狀與胃潰瘍相似，肝功正常。常漏診。第七十一頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一血漿樣品制備靜脈血3ml，肝素抗凝，3000轉(zhuǎn)離心分離。尚清血漿加飽和硫酸鋅溶液1ml，沉淀蛋白。加乙醚5ml，斡旋混合。離心取乙醚液氮氣吹干。蒸餾水溶解，進樣。第七十二頁，共八十頁，編輯于2023年，星期一對照品溶液制備對乙酰氨基酚甲醇液10mg/ml，甲醇逐級稀釋成0.01-5mg/ml。