血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的生物化學(xué)檢驗(yàn)

1第一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)第二節(jié)氨基酸代謝紊亂第三節(jié)核苷酸代謝紊亂2第二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)定義：血漿和組織液中蛋白質(zhì)，是血漿固體成份中含量最多、組成復(fù)雜、功能廣泛的一類化合物。3第三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一一、血漿蛋白質(zhì)的功能及分類（一）血漿蛋白質(zhì)的功能維持血漿膠體滲透壓----清蛋白的主要功能作為激素、維生素、脂類、代謝產(chǎn)物、離子、藥物等的載體作為pH緩沖系統(tǒng)的一部分營(yíng)養(yǎng)、修補(bǔ)組織蛋白作用抑制組織蛋白酶在血漿中起催化作用參與凝血與纖維蛋白溶解作為免疫球蛋白與補(bǔ)體等免疫分子，組成體液免疫防御系統(tǒng)。4第四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（二）血漿蛋白質(zhì)的分類1．電泳分類法

醋酸纖維素薄膜電泳一般可將血清蛋白質(zhì)分為清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白5條主要區(qū)帶。2．功能分類法—復(fù)雜

運(yùn)輸載體類免疫球蛋白補(bǔ)體蛋白類凝血因子類蛋白酶抑制物血清酶類蛋白類激素5第五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一二、血清總蛋白及主要組分正常與異常電泳

人血漿總蛋白(totalprotein，TP)濃度為60～80g/L臨床實(shí)驗(yàn)室采用的標(biāo)本多為血清測(cè)定血清TP的首選方法：雙縮脲法樣品采集時(shí)，患者應(yīng)置仰臥位，直立時(shí)升高。靜脈采血時(shí)止血帶壓迫靜脈時(shí)間超過3min，TP也可上升10%。劇烈運(yùn)動(dòng)后立即采血TP最多可升高12%。6第六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一正常血清蛋白電泳圖譜增示意圖及其掃描曲線

（一）血清蛋白電泳的正常組分7第七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（二）異常電泳圖譜的臨床意義1.異常血清蛋白電泳圖譜分型2.典型異常血清蛋白電泳圖譜3．漿細(xì)胞病與M蛋白8第八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一異常血清蛋白質(zhì)電泳圖譜的分型及其特征圖譜類型TPAlbα1α2βγ低蛋白血癥型↓↓↓↓N↑N↓N↑腎病型↓↓↓↓N↑↑↑↑↓N↑肝硬化型N↓↑↓↓N↓N↓β-γ↑（融合）彌漫性肝損害型N↓↓↓↑↓↑慢性炎癥型↓↑↑↑急性時(shí)相反應(yīng)型N↓N↑↑NM蛋白血癥型在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)M蛋白區(qū)帶高α2(β)-球蛋白血癥型↓↑↑↑妊娠型↓N↓↑↑

N

蛋白質(zhì)缺陷型個(gè)別區(qū)帶出現(xiàn)特征性缺乏第九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2．典型異常血清蛋白電泳圖譜

A正常人

B腎病綜合征C肝硬化(β-γ橋)

D肝硬化(不典型β-γ橋)

E多發(fā)性骨髓瘤IgA型F多發(fā)性骨髓瘤IgG型10第十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3．漿細(xì)胞病與M蛋白正常血清蛋白電泳上顯示的寬γ區(qū)帶主要成分:免疫球蛋白(Ig)。漿細(xì)胞病（plasmacelldyscrasia）異常漿細(xì)胞增殖，產(chǎn)生大量單克隆Ig或其輕鏈或重鏈片段，病人血清或尿液中可出現(xiàn)結(jié)構(gòu)單一的M蛋白（monoclonalprotein）在蛋白電泳時(shí)呈現(xiàn)一個(gè)色澤深染的窄區(qū)帶，此區(qū)帶較多出現(xiàn)在γ或β區(qū)，偶見于α區(qū)。11第十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一血漿蛋白質(zhì)的性質(zhì)功能及其與電泳區(qū)帶的關(guān)系電泳區(qū)帶蛋白質(zhì)種類成人參考值（g/L）半壽期（d）分子量（kD）等電點(diǎn)含糖量(%)功能前清蛋白前清蛋白0.2~0.41.9554.70.5營(yíng)養(yǎng)、運(yùn)載清蛋白清蛋白35~5215~1966.24~5.80維持膠壓、運(yùn)載和營(yíng)養(yǎng)等α1-球蛋白α1-抗胰蛋白酶0.9~2.04524.812蛋白酶抑制劑α1-酸性糖蛋白0.5~1.25402.7~445免疫應(yīng)答修飾劑甲胎蛋白3×10－569胎兒期蛋白高密度脂蛋白1.7~3.25200膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)α2-球蛋白結(jié)合珠蛋白0.3~2.0285~4004.112結(jié)合血紅蛋白α2-巨球蛋白1.3~3.057205.48蛋白酶抑制劑銅藍(lán)蛋白0.1~0.44.51324.4鐵氧化酶β-球蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白2.0~3.6779.65.76運(yùn)鐵到胞內(nèi)低密度脂蛋白0.6~1.55300運(yùn)膽固醇到組織C30.9~1.81852補(bǔ)體成分C40.1~0.42067補(bǔ)體成分β2-微球蛋白0.001~0.00211.8纖維蛋白原2.0~4.02.53405.53凝血因子γ-球蛋白IgG7.0~1624144~1506~7.33免疫球蛋白IgA0.7~4.06~1608免疫球蛋白IgM0.4~2.3597012免疫球蛋白C-反應(yīng)蛋白＜5~1156.20炎癥介質(zhì)第十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一三、血漿蛋白主要組分的生物化學(xué)檢驗(yàn)

（一）前清蛋白（prealbumin，PA）1.性質(zhì)分子量55kD由肝臟細(xì)胞合成的糖蛋白電泳時(shí)遷移在Alb之前半壽期1.9d生理功能：作為組織修補(bǔ)材料和運(yùn)載蛋白13第十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2.檢測(cè)

目前多采用免疫透射比濁法

3.臨床意義（一）前清蛋白（prealbumin，PA）作為營(yíng)養(yǎng)不良的指標(biāo)作為肝功能不全的指標(biāo)負(fù)性急性時(shí)相反應(yīng)蛋白PA:200～400mg/L正常PA:100～150mg/L輕度缺乏PA:50～100mg/L中度缺乏PA＜50mg/L嚴(yán)重缺乏14第十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（二）清蛋白

（albumin，Alb）1．性質(zhì)585個(gè)氨基酸殘基組成分子量66.2kD含17個(gè)二硫鍵，是唯一不含糖的血漿蛋白質(zhì)肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成半壽期19d血漿中含量最多的蛋白質(zhì)15第十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一維持血漿膠體滲透壓：血漿滲透壓的75%～80%由Alb維持血漿中主要的載體蛋白，具有結(jié)合各種配體分子的能力緩沖酸堿維持酸堿平衡作用營(yíng)養(yǎng)作用2．生理功能3．Alb的檢測(cè)染料結(jié)合法----國(guó)內(nèi)最常用方法是溴甲酚綠法電泳法免疫法(免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法和RIA)電化學(xué)測(cè)定法16第十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一4．臨床意義（1）低清蛋白血癥1）Alb合成降低：2）Alb的分布異常3）Alb丟失4）Alb分解代謝增加5）無清蛋白血癥(analbuminaemia)

（2）血漿Alb增高（3）由Alb含量估計(jì)其配體的存在形式和作用（4）作為個(gè)體營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的評(píng)價(jià)指標(biāo)（5）Alb的遺傳性變異17第十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一4．臨床意義血漿Alb作為營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)＞35g/L正常28～34g/L輕度缺乏21～27g/L中度缺乏＜21g/L嚴(yán)重缺乏18第十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）基因定位于14q31-32.3394個(gè)氨基酸殘基組成分子量52kDpI為4.8含糖10%～12%在醋纖膜電泳中位于α1區(qū)帶主要由肝細(xì)胞合成，單核細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞也能合成人血漿中主要的絲氨酸蛋白酶的抑制劑

1．性質(zhì)

19第十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一

2．ATT基因的遺傳表型

常染色體共顯性遺傳，有多種遺傳表型現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)至少有75種基因變體主要根據(jù)電泳遷移率分類移動(dòng)快的AAT變體用字母表前面的字母表示移動(dòng)最慢的基因以PiZ表示。F型--fast,M型--middle,S型—slow根據(jù)等位基因出現(xiàn)頻率的不同，缺陷變體可進(jìn)一步分為常見和少見兩部分最常見的缺陷變體為Z和S型表現(xiàn)為以下基因型：ZZ、SS、SZ、MZ、MS。20第二十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3．臨床意義PiZZ型、PiSS型甚至PiMS型常伴有早年（20～30歲）出現(xiàn)的肺氣腫低血漿AAT可發(fā)現(xiàn)于胎兒呼吸窘迫綜合征ZZ蛋白聚集在肝細(xì)胞，導(dǎo)致肝硬化PiZZ表型的新生兒中10%～20%在出生數(shù)周后易患肝炎，最后因活動(dòng)性肝硬化致死PiZZ表型的某些成人會(huì)發(fā)生肝損害AAT缺乏：AAT屬急性時(shí)相蛋白，在炎癥、感染、腫瘤、肝病時(shí)均顯著增加。AAT增加：21第二十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一4．AAT的檢測(cè)血清蛋白電泳單向擴(kuò)散試驗(yàn)免疫散濁比濁免疫透射比濁法。對(duì)于AAT降低者可進(jìn)一步采用等電聚焦電泳或分子生物學(xué)方法進(jìn)行AAT表型分析。22第二十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（四）α1-酸性糖蛋白（AAG）181個(gè)氨基酸殘基組成分子量約40kD屬血漿中含糖量最高（達(dá)45%）、酸性最強(qiáng)的糖蛋白pI為2.7～4.0典型的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

主要在肝臟產(chǎn)生,某些腫瘤組織也可產(chǎn)生1．性質(zhì)23第二十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2．臨床意義目前主要作為急性時(shí)相反應(yīng)指標(biāo)：在風(fēng)濕病、惡性腫瘤及心肌梗死等炎癥或組織壞死時(shí)一般增加3～4倍。AAG增高是活動(dòng)性潰瘍性結(jié)腸炎最可靠的指標(biāo)之一。AAG增高：糖皮質(zhì)激素增加，包括內(nèi)源性的庫欣綜合征和外源性強(qiáng)的松、地塞米松等藥物治療時(shí)，可引起AAG升高。AAG降低：營(yíng)養(yǎng)不良、嚴(yán)重肝損害、腎病綜合征以及胃腸道疾病致蛋白嚴(yán)重丟失等情況下AAG降低。此外雌激素可使AAG降低。24第二十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3．α1-酸性糖蛋白的檢測(cè)

過氯酸和磷鎢酸分級(jí)沉淀AAG后，測(cè)定蛋白質(zhì)或含糖量再計(jì)算之。免疫擴(kuò)散免疫比濁法25第二十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（五）結(jié)合珠蛋白（haptoglobin，Hp）一種急性時(shí)相蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在電泳中位于α2區(qū)帶由α與β鏈形成α2β2四聚體，α鏈有α1及α2兩種，而α1又有α1F及α1S兩種遺傳變異體，兩種變異體僅為一個(gè)氨基酸殘基差異1．性質(zhì)與遺傳表型26第二十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一結(jié)合珠蛋白的遺傳表型表型亞單位的結(jié)構(gòu)組成組成Hp1-1

(α1F)2β2α1Fα1Sβ2(α1S)2β2分子量約為90kD，α鏈含83個(gè)氨基酸殘基，β鏈含245個(gè)氨基酸殘基Hp2-1

(α1Sα2β2)n(α1Fα2β2)n分子量為120~200kD的聚合體，由于n不同，可在電泳中出現(xiàn)多條帶Hp2-2

(α2β)nn=3~8分子量為160~400kD，由于n不同，可在電泳中出現(xiàn)多條帶27第二十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2．功能運(yùn)輸血管內(nèi)游離的血紅蛋白(Hb)到網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞降解，防止Hb從腎臟丟失而為機(jī)體有效地保留鐵，并能避免Hb對(duì)腎臟的損傷。28第二十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3．臨床意義

Hp濃度下降見于：①溶血性疾病如溶血性貧血、輸血反應(yīng)、瘧疾。Hp參考值范圍較寬，須連續(xù)觀察以監(jiān)測(cè)溶血是否處于進(jìn)行狀態(tài)。對(duì)于溶血性疾病合適的組合檢測(cè)項(xiàng)目包括血漿Hp、LD和游離Hb。血管外溶血不會(huì)使Hp發(fā)生變化。②嚴(yán)重肝病患者，其Hp合成減少。Hp濃度升高見于：

屬急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，當(dāng)燒傷和腎病綜合征情況下，血Hp常明顯升高。29第二十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一4．Hp的檢測(cè)

放射免疫擴(kuò)散法免疫比濁法定量檢測(cè)Hp亞型聚丙烯酰胺凝膠電泳等電聚焦電泳30第三十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（六）α2-巨球蛋白

（α2-macroglobulin，α2-MG或AMG）血漿中分子量最大的糖蛋白，約為720kD，含糖量約8%由肝細(xì)胞、單核細(xì)胞和星形細(xì)胞合成半壽期約5d包括補(bǔ)體C3和C4在內(nèi)的一組血漿蛋白的主要成員，為硫酯鍵血漿蛋白家族。主要特性是能與多種離子和分子結(jié)合，特別是能與蛋白水解酶結(jié)合而抑制酶的活性可選擇地保護(hù)某些蛋白酶活性1．性質(zhì)31第三十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2．臨床意義不屬于急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。低清蛋白血癥，尤其是腎病綜合征時(shí)，α2-MG含量可顯著增高α2-MG水平降低見于：嚴(yán)重的急性胰腺炎和進(jìn)展型前列腺癌治療前免疫比濁法3．α2-MG的檢測(cè)方法32第三十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（七）銅藍(lán)蛋白（ceruloplasmin，Cp）含銅的α2球蛋白由1046個(gè)氨基酸殘基組成含糖約8%~9.5%每分子結(jié)合6～8個(gè)銅原子，由于含銅而呈藍(lán)色95%的血清銅存在于Cp中，其余5%呈可擴(kuò)散狀態(tài)血循環(huán)中的Cp可認(rèn)為是銅的無毒性代謝庫1．性質(zhì)33第三十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（七）銅藍(lán)蛋白（ceruloplasmin，Cp）血漿銅的轉(zhuǎn)運(yùn)具有鐵氧化酶作用，將Fe2+氧化為Fe3+，調(diào)節(jié)鐵的運(yùn)輸、利用和氧化還原反應(yīng)抗氧化作用，抑制膜脂質(zhì)被金屬離子的過氧化作用2．功能34第三十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（七）銅藍(lán)蛋白（ceruloplasmin，Cp）Cp濃度減少有關(guān)的疾?。喊╓ilson病、營(yíng)養(yǎng)性銅缺乏和Menkes?。ㄟz傳性銅吸收不良）。屬于急性時(shí)相反應(yīng)蛋白：在妊娠、感染、創(chuàng)傷和腫瘤時(shí)血漿濃度增加。但在營(yíng)養(yǎng)不良、嚴(yán)重肝病及腎病綜合征時(shí)往往下降。3．臨床意義

35第三十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一一種常染色體隱性遺傳病因血漿Cp減少，血漿游離銅增加，銅沉積在肝可引起肝硬化，沉積在腦基底節(jié)的豆?fàn)詈藢?dǎo)致豆?fàn)詈俗冃?，該病又稱為肝豆?fàn)詈俗冃栽摬〉脑虿蝗荂p減少大部分患者可有肝功損害并伴神經(jīng)系統(tǒng)癥狀不及時(shí)治療，此病是進(jìn)行性和致命的，宜及時(shí)診斷可用銅螯合劑-青霉胺治療Wilson病診斷標(biāo)準(zhǔn)：Cp下降，血清總銅濃度降低、游離銅增加和尿銅排泄增加，肝中銅的含量升高Wilson病36第三十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一放射免疫擴(kuò)散法散射免疫比濁法透射免疫比濁法4.Cp的檢測(cè)

37第三十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一

（八）轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TRF）分子量約79.6kD為單鏈糖蛋白，含糖量約6%電泳位置在β區(qū)帶等電點(diǎn)5.5～5.9主要由肝細(xì)胞合成半壽期為7d能可逆地結(jié)合多價(jià)陽離子，每分子TRF可結(jié)合2個(gè)Fe3+血漿中TRF的濃度受食物鐵供應(yīng)的影響1．性質(zhì)38第三十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一多采用免疫比濁測(cè)定法2．臨床意義用于貧血的鑒別診斷負(fù)性急時(shí)相反應(yīng)蛋白：在炎癥、腫瘤時(shí)常隨著Alb、前清蛋白同時(shí)下降作為營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的一項(xiàng)指標(biāo)3．檢測(cè)39第三十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一

由肝細(xì)胞合成的典型急性時(shí)相反應(yīng)蛋白由5個(gè)相同亞基非共價(jià)結(jié)合成盤形多聚體分子量為115～140kD電泳分布在慢γ區(qū)帶在鈣離子存在下，結(jié)合多種細(xì)菌、真菌及原蟲等體內(nèi)的多糖物質(zhì)以及磷酸膽堿，卵磷脂和核酸在鈣離子缺乏情況下，結(jié)合多聚陽離子與抗體相似，可引發(fā)對(duì)入侵微生物對(duì)細(xì)胞的免疫調(diào)理作用和吞噬作用可識(shí)別、結(jié)合從損傷組織中釋放的毒性物質(zhì)，然后解毒或從血中清除本身在發(fā)生調(diào)理作用后被分解（九）C-反應(yīng)蛋白(C-reactiveprotein，CRP)1．性質(zhì)40第四十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一第一個(gè)被認(rèn)識(shí)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，是急性時(shí)相反應(yīng)的一個(gè)極靈敏指標(biāo)血漿中CRP濃度在急性心肌梗死、創(chuàng)傷、感染、炎癥、外科手術(shù)、腫癌浸潤(rùn)時(shí)迅速顯著地增高CRP是非特異性指標(biāo)，主要臨床用途：①篩選器質(zhì)性疾?、谠u(píng)估炎癥性疾病的活動(dòng)度和療效監(jiān)控③識(shí)別系統(tǒng)性紅斑狼瘡、白血病和外科手術(shù)后等并發(fā)的感染④監(jiān)測(cè)腎移植后的排斥反應(yīng)等2．臨床意義41第四十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一散射免疫比濁法透射免疫比濁法酶免疫分析法熒光免疫分析法3．檢測(cè)42第四十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一四、急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

AATAAGCpCRPHpα1-抗糜蛋白酶血紅素結(jié)合蛋白C3C4纖維蛋白原顯著升高或升高降低

PAAlbTRF急性負(fù)相時(shí)相反應(yīng)蛋白43第四十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一食物蛋白消化吸收體內(nèi)合成（非必需氨基酸）蛋白質(zhì)（主）合成酮體氧化供能糖脫羧胺類轉(zhuǎn)變其它含氮化合物經(jīng)腎排出(1g/d)氨基酸代謝庫氨基酸代謝概況分解脫氨-酮酸（生成尿素）組織蛋白質(zhì)分解第二節(jié)氨基酸代謝紊亂一、體內(nèi)氨基酸代謝44第四十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一二、氨基酸代謝紊亂的種類原發(fā)性氨基酸代謝紊亂：由于參與氨基酸代謝的酶或其他蛋白因子缺乏而引起的遺傳性疾病繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂：與氨基酸代謝有關(guān)的器官如肝、腎出現(xiàn)嚴(yán)重病變而導(dǎo)致的。氨基酸血癥（aminoacidemia）：當(dāng)酶缺乏出現(xiàn)在代謝途徑的起點(diǎn)時(shí)，其作用的氨基酸將在血循環(huán)中增加。氨基酸尿癥（aminoaciduria）：升高的氨基酸從尿中排出。45第四十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一氨基酸代謝紊亂可發(fā)生于：①膜轉(zhuǎn)移機(jī)制障礙，包括氨基酸從小腸吸收和腎小管重吸收；②氨基酸分解代謝途徑障礙；

③尿素合成途徑障礙。46第四十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一①中性氨基酸載體：轉(zhuǎn)運(yùn)中性氨基酸；

②酸性氨基酸載體：轉(zhuǎn)運(yùn)酸性氨基酸；

③堿性氨基酸載體：轉(zhuǎn)運(yùn)堿性氨基酸和

半胱氨酸；

④亞氨基酸和甘氨酸載體：轉(zhuǎn)運(yùn)脯氨酸

和甘氨酸。腎小管細(xì)胞膜上與氨基酸吸收有關(guān)的載體：47第四十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一遺傳性氨基酸代謝紊亂及血、尿的檢測(cè)結(jié)果遺傳性氨基酸代謝紊亂名稱缺乏的酶血中升高的成分尿中升高的成分苯丙酮酸尿癥苯丙氨酸羥化酶苯丙氨酸、苯丙酮酸苯丙氨酸、苯丙酮酸Ⅰ型酪氨酸血癥延胡索酰乙酰乙酸水解酶？酪氨酸、甲硫氨酸酪氨酸、對(duì)-羥苯丙酮酸等尿黑酸尿癥尿黑酸氧化酶尿黑酸（輕度）尿黑酸同型胱氨酸尿癥胱硫醚--合酶同型胱氨酸、甲硫氨酸胱硫醚尿癥-胱硫醚酶胱硫醚胱硫醚及其代謝產(chǎn)物組氨酸血癥組氨酸酶組氨酸、丙氨酸咪唑、丙酮酸和組氨酸代謝產(chǎn)物甘氨酸血癥甘氨酸裂解酶系統(tǒng)受阻甘氨酸槭糖漿尿癥(支鏈酮酸尿癥)支鏈酮酸脫羧酶亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸和相應(yīng)的酮酸丙酸尿癥丙酰CoA羧化酶甘氨酸甘氨酸、丙酸、羥化丙酸、甲基檸檬酸第四十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一遺傳性氨基酸代謝紊亂及血、尿的檢測(cè)結(jié)果遺傳性氨基酸代謝紊亂名稱缺乏的酶血中升高的成分尿中升高的成分甲基丙二酸尿癥甲基丙二酸單酰CoA變位酶甘氨酸、甲基丙二酸甘氨酸、甲基丙二酸、酮尿肌肽血癥肌肽酶肌肽Ⅰ型高脯氨酸血癥脯氨酸氧化酶脯氨酸脯氨酸、羥脯氨酸、甘氨酸瓜氨酸血癥精氨酸代琥珀酸合酶瓜氨酸、氨、丙氨酸瓜氨酸、谷氨酰胺精氨酸代琥珀酸尿癥精氨酸代琥珀酸裂解酶精氨酸代琥珀酸、瓜氨酸精氨酸代琥珀酸及其酐、瓜氨酸精氨酸血癥精氨酸酶精氨酸精氨酸、胱氨酸、鳥氨酸高鳥氨酸血癥鳥氨酸脫羧酸鳥氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸鳥氨酸、同型瓜氨酸鳥氨酸氨甲酰轉(zhuǎn)移酶缺乏癥鳥氨酸氨甲酰轉(zhuǎn)移酶氨、谷氨酰胺乳清酸、尿苷、尿嘧啶二羧基氨基酸尿癥（腎小管酸性氨基酸載體）谷氨酸、天冬氨酸49第四十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一三、主要氨基酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn)（一）苯丙酮酸尿癥(phenylketonuria，PKU)苯丙氨酸羥化酶先天性缺乏所致，屬常染色體隱性遺傳，因患兒尿液中排出大量苯丙酮酸等代謝產(chǎn)物而得名。

50第五十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一苯丙氨酸羥化酶（PAH）+H2O酪氨酸+O2四氫生物蝶呤二氫生物蝶呤NADPH+H+NADP+苯丙氨酸1．苯丙氨酸的代謝紊亂正常代謝51第五十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一苯丙氨酸先天性缺少PAH(多數(shù))苯丙氨酸的代謝紊亂四氫生物蝶呤生成不足(少數(shù))苯乙酸轉(zhuǎn)氨酶苯乙酰谷氨酰胺GlnH2O苯丙酮酸(血中積累，尿中排出)酪氨酸苯丙酮酸尿癥NAD+NADH+H+CO2苯乳酸NADH+H+NAD+52第五十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一有智力缺陷，其嚴(yán)重程度與血苯丙氨酸升高的水平和持續(xù)時(shí)間有關(guān)。毛發(fā)和皮膚色素較正常人略淺。身體有霉臭味，尿有鼠尿樣氣味，易流口水及出汗。有反復(fù)發(fā)作的驚厥、肌張力高，軀體前后搖擺，行動(dòng)困難。2．苯丙酮酸尿癥臨床表現(xiàn)及治療臨床表現(xiàn)53第五十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一患兒在出生后3月內(nèi)就需用低苯丙氨酸膳食（如低苯丙氨酸的奶粉）治療，可改善癥狀，防止癡呆發(fā)生。治療最少要堅(jiān)持到10歲，甚至終生。在停止飲食治療前需作負(fù)荷試驗(yàn)。若是，則可停止飲食治療。飲食治療中，給予低苯丙氨酸及高酪氨酸膳食最為合理。女性在幼時(shí)若治療恰當(dāng)，可正常生長(zhǎng)發(fā)育。妊娠時(shí)，則應(yīng)使用治療本病的膳食，以免因再發(fā)高苯丙氨酸血癥而影響胎兒正常發(fā)育。2．苯丙酮酸尿癥臨床表現(xiàn)及治療治療54第五十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3．新生兒中苯丙酮酸尿癥的診斷PKU的早期診斷十分必要。目前國(guó)際上新生兒PKU篩查的常用方法：Guthrie試驗(yàn)、熒光光度法、苯丙氨酸脫氫酶法。新生兒的篩查在歐美國(guó)家廣泛地進(jìn)行。評(píng)估應(yīng)包括尿中生物蝶呤和新蝶呤的測(cè)定和有時(shí)可能還要測(cè)定其血清含量。新生兒PKU的診斷試驗(yàn)：色譜法、熒光分光光度法、FeCl3法檢測(cè)尿中苯丙酮酸。用PCR-ASO探針法和PCR-RFLP連鎖分析法可鑒定出導(dǎo)致PKU的點(diǎn)突變。55第五十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3．新生兒中苯丙酮酸尿癥的診斷Guthrie建立的一種細(xì)菌抑制法。在PKU的篩查試驗(yàn)中用來測(cè)定人血清、尿液中苯丙氨酸。原理Guthrie試驗(yàn)瓊脂糖培養(yǎng)基中的噻吩丙氨酸可抑制枯草桿菌的生長(zhǎng)，而苯丙氨酸及其代謝產(chǎn)物苯丙酮酸等可抑制噻吩丙氨酸的此種作用。將浸有血液或尿液的濾紙片置于培養(yǎng)基表面上培養(yǎng)，通過抑菌圈的大小來半定量樣本中的苯丙氨酸濃度。56第五十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（二）酪氨酸的代謝紊亂

1．酪氨酸的正常分解代謝和轉(zhuǎn)變（1）酪氨酸的正常分解代謝57第五十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一酪氨酸羥化酶CO2（2）轉(zhuǎn)變成兒茶酚胺與黑色素酪氨酸多巴多巴胺58第五十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一多巴胺去甲腎上腺素SAM腺苷同型半胱氨酸兒茶酚胺CH3腎上腺素59第五十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一

原因：酪氨酸分解途徑中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性降低。該癥可出現(xiàn)：血和尿中酪氨酸水平增加；血中甲硫氨酸濃度升高；尿中排出大量多巴和其他酪氨酸代謝物。2．酪氨酸血癥

（1）Ⅰ型酪氨酸血癥（tyrosinemiaⅠ）

60第六十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一Ⅰ型酪氨酸血癥（肝腎型酪氨酸血癥）病人有嚴(yán)重的肝功能損害和腎小管功能不全。急性酪氨酸血癥患者肝延胡索酰乙酰乙酸水解酶只有正?；钚缘?%，臨床表現(xiàn)有腹瀉、嘔吐。如未治療，常在1歲前死于肝功能衰竭。慢性酪氨酸血癥病人的延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性只有正?；钚缘?0%，癥狀較輕，常在10歲前死亡。Ⅰ型酪氨酸血癥發(fā)病率約為1/10萬。用低酪氨酸、苯丙氨酸和甲硫氨酸膳食可減輕癥狀。61第六十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一

（2）Ⅱ型酪氨酸血癥（tyrosinemiaⅡ）原因：肝細(xì)胞液酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶缺乏血中和尿中酪氨酸水平升高，尿中酚酸和酪胺濃度增加。

Ⅱ型病罕見。

與Ⅰ型不同的是：血中甲硫氨酸不升高。62第六十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一

（3）酪氨酸血癥的生物化學(xué)檢驗(yàn)參考方法：離子交換層析其他方法：色譜法分光光度法酶學(xué)方法63第六十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3.白化?。╝lbinism）在皮膚黑色素細(xì)胞中酪氨酸酶催化下，酪氨酸羥化生成多巴，后者經(jīng)氧化、脫羧等反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)檫胚?5，6-醌，黑色素就是吲哚-醌的聚合物。如酪氨酸酶缺乏，酪氨酸不能轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏?，將?dǎo)致白化病。白化病發(fā)病率約為1/13000，表現(xiàn)為白色頭發(fā)、淺色皮膚和灰藍(lán)色眼睛等。多數(shù)白化病同時(shí)累及皮膚和眼部、少數(shù)單獨(dú)累及眼部，但無單獨(dú)累及皮膚者?；颊咭M可能避免日光照射。

64第六十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一4．尿黑酸尿癥（alkaptonuria）一種罕見的因尿黑酸氧化酶缺陷引起的遺傳病性代謝性疾病。細(xì)胞和體液尿黑酸的積聚。特點(diǎn)是尿放置變黑色，一般不引起注意。常在中年被疑為褐黃病和關(guān)節(jié)炎時(shí)才被診斷。如新生兒未洗尿布變黑引起了注意或被觀察到，在新生兒時(shí)期即可診斷。目前對(duì)本癥沒有滿意的治療方法。如早期發(fā)現(xiàn)，限制酪氨酸或其前體苯丙氨酸飲食可能有所收效。服用維生素C可能會(huì)減少尿黑酸在體液中含量和在組織中沉積。診斷本病的方法:尿黑酸的還原試驗(yàn)。65第六十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（三）含硫氨基酸代謝紊亂甲硫氨酸(Met)半胱氨酸(Cys)同型半胱氨酸(HCY)66第六十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一半胱氨酸與胱氨酸的互變+2H2半胱氨酸–2H—S——S—胱氨酸67第六十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一蛋氨酸循環(huán)N5-CH3-FH4FH4N5-CH3-FH4轉(zhuǎn)甲基酶蛋氨酸ATPPPi+PiH2O腺苷同型半胱氨酸RHS-腺苷同型半胱氨酸R-CH31．含硫氨基酸的正常代謝SAM68第六十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一S-腺苷甲硫氨酸（SAM）中的甲基為活性甲基，可轉(zhuǎn)移至另一種物質(zhì)，生成50多種含甲基的重要生理活性物質(zhì)。HCY+絲氨酸胱硫醚-β-合酶胱硫醚裂解半胱氨酸+α-酮丁酸69第六十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2．同型胱氨酸尿癥（homocystinuria）含硫氨基酸代謝紊亂最常見的是同型胱氨酸尿癥，它是一組體內(nèi)以HCY增高為特征的代謝紊亂。（1）胱硫醚-β-合成酶缺失-----最常見的原因體液HCY及其前體積聚，Cys和胱氨酸下降。生化異常：血漿同型胱氨酸(HCY的氧化形式)達(dá)到可檢測(cè)水平，血漿Met升高。尿中含有同型胱氨酸和其他含硫氨基酸如Met、甲硫氨酸硫氧化物和Cys的二硫化物和HCY。血漿Met不升高.

（2）N5甲基四氫葉酸轉(zhuǎn)甲基酶缺失----較罕見原因70第七十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（3）同型胱氨酸尿癥的診斷

新生兒篩選的Guthrie試驗(yàn)只適用于胱硫醚-β-合酶缺失所致的同型胱氨酸尿癥。陽性結(jié)果解釋應(yīng)慎重，因很有可能是暫時(shí)的，或由于肝損害，酪氨酸代謝病或肝S-腺苷甲硫氨酸合成酶的缺失所致。暫時(shí)性同型胱氨酸尿癥目前發(fā)生率已下降。如未進(jìn)行新生兒篩選，同型胱氨酸尿癥需等到癥狀出現(xiàn)或尿液檢測(cè)才被發(fā)現(xiàn)。硝基氫氰酸試驗(yàn)檢測(cè)同型胱氨酸和胱氨酸。銀硝普鹽改良試驗(yàn)可區(qū)分同型胱氨酸和胱氨酸之間的差別。71第七十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一目前血漿HCY檢測(cè)可作為心腦血管病臨床常規(guī)檢查指標(biāo)。血脂正常，膽固醇不高的人群有嚴(yán)重AS性疾病和家族史人群有早期(＜50歲)冠心病、腦血管或外周血管病癥狀的人群服用氨甲喋呤、氨茶堿、苯妥英等人群中，HCY升高的比例較高，有進(jìn)一步引發(fā)血管疾病的可能，需要聯(lián)合考慮。HCY檢測(cè)適應(yīng)癥72第七十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（3）同型胱氨酸尿癥的診斷

輕度：16～30μmol/L中度：31～100μmol/L重度：＞100mol/LHPLC放射酶免疫分析法熒光偏振免疫分析(FPIA)HCY測(cè)定方法參考值：空腹血漿HCY5～15mol/L≥15mol/L為高HCY血癥。高HCY血癥分型73第七十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一四、繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn)

主要發(fā)生在肝臟和腎臟疾患、蛋白質(zhì)-能量營(yíng)養(yǎng)紊亂以及燒傷等

。（一）肝功能衰竭和氨基酸代謝失衡

（二）腎臟疾病

74第七十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一五、氨基酸的生物化學(xué)檢驗(yàn)篩選試驗(yàn)：薄層層析，尿呈色試驗(yàn)（三氯化鐵、硝基氫氰酸、2，4-二硝基苯肼、硝基萘酚試驗(yàn)），Guthrie試驗(yàn)半定量測(cè)定。定量試驗(yàn)：毛細(xì)管電泳，氣相色譜，HPLC，離子交換液體層析，串聯(lián)質(zhì)譜，分子遺傳學(xué)試驗(yàn)等用于監(jiān)測(cè)治療或證實(shí)最初的診斷。特異性試驗(yàn)：判明未知氨基酸或代謝產(chǎn)物。75第七十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（一）自動(dòng)分析法

氨基酸自動(dòng)分析儀：色譜系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)加樣系統(tǒng)控制系統(tǒng)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)

76第七十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（二）氨基酸的紙層析和薄層層析（TLC）不需特殊設(shè)備、經(jīng)濟(jì)和操作簡(jiǎn)單采集在濾紙上的標(biāo)本可郵寄。1.紙層析的優(yōu)點(diǎn)靈敏度低分辨力差費(fèi)時(shí)2.紙層析缺點(diǎn)速度快分辨力靈敏度高3.TLC優(yōu)點(diǎn)77第七十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（二）氨基酸的紙層析和薄層層析（TLC）紙層析和TLC又分為單向和雙向兩種。單向?qū)游鲆话氵m用于某個(gè)或某組氨基酸增高時(shí)的篩選檢測(cè)，如獲異常結(jié)果需進(jìn)一步用雙向?qū)游龇蛛x，或其他定量方法證實(shí)。雙向?qū)游龇芊蛛x全部氨基酸，可作為確診的參考。78第七十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（三）氨基酸的化學(xué)法測(cè)定

1．尿液總氨基酸量測(cè)定----磷酸銅試劑法2．色氨酸測(cè)定3．尿羥脯氨酸測(cè)定79第七十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（四）氨基酸的酶法分析1．苯丙氨酸測(cè)定2．酪氨酸測(cè)定3．支鏈氨基酸測(cè)定4．谷氨酰胺測(cè)定

80第八十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（四）氨基酸的酶法分析1．苯丙氨酸測(cè)定----有兩種酶學(xué)方法苯丙氨酸苯丙氨酸氧化酶H2O2+4-氨基安替比林+N，N’-二甲苯胺生成醌亞胺測(cè)定A550NADH+H+苯丙氨酸NAD+苯丙氨酸脫氫酶苯丙酮酸檢測(cè)A340的增加速率，反映苯丙氨酸含量檢測(cè)A340的下降速率，反映苯丙酮酸含量81第八十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2．酪氨酸測(cè)定三氯醋酸濾液在硝酸存在條件下與硝基萘酚和亞硝酸鹽的混合物反應(yīng)。通過測(cè)定其熒光對(duì)酪氨酸進(jìn)行定量。該法不適應(yīng)于尿液酪氨酸測(cè)定。常規(guī)方法氧電極測(cè)定氧的消耗來對(duì)酪氨酸進(jìn)行定量。酪氨酸酶法酪氨酸+O2酪氨酸酶多巴醌82第八十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3．支鏈氨基酸測(cè)定

LeuIleValNADH+H+NAD+亮氨酸脫氫酶相應(yīng)酮酸檢測(cè)A340的增加速率，反映各氨基酸含量4.谷氨酰胺測(cè)定GlnNH3谷氨酰胺酶Glu檢測(cè)A340的增加速率，反映Gln含量NAD+谷氨酸脫氫酶NADH+H+α酮戊二酸83第八十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一第三節(jié)核苷酸代謝紊亂一、嘌呤核苷酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn)（一）嘌呤核苷酸的代謝（二）高尿酸血癥（三）痛風(fēng)的發(fā)生機(jī)制（四）尿酸的生物化學(xué)檢驗(yàn)二、嘧啶核苷酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn)84第八十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（一）嘌呤核苷酸的代謝1.嘌呤核苷酸的從頭合成途徑（主要）用磷酸核糖、氨基酸、一碳單位及CO2等簡(jiǎn)單物質(zhì)為原料，經(jīng)過一系列酶促反應(yīng)合成嘌呤核苷酸的途徑。85第八十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一N1C2N3C4C5C6N97NC8

甲?；?一碳單位)甘氨酸CO2Asp甲酰基(一碳單位)Gln(酰胺基)甘氨當(dāng)中站,谷氮坐兩邊,左上天冬氨,頭頂CO286第八十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一1.嘌呤核苷酸從頭合成途徑合成的原料:CO2,甲?；?氨基酸等合成的場(chǎng)所:肝臟的胞液合成的過程:兩個(gè)階段①次黃嘌呤核苷酸(IMP)的合成②腺苷酸(AMP)和鳥苷酸(GMP)的合成87第八十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一1.從頭合成途徑88第八十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一1.嘌呤核苷酸從頭合成途徑ATPGTPR-5-PATPPRPP合成酶PRPP酰胺轉(zhuǎn)移酶PRAIMPAMPSAMPADPXMPGMPGDP嘌呤核苷酸是在磷酸核糖基礎(chǔ)上逐步合成嘌呤環(huán)的，而不是首先單獨(dú)合成嘌呤堿然后再與磷酸核糖結(jié)合的，這是與嘧啶核苷酸合成過程不同之處