藥劑學(xué)課件-01-滅菌法和無(wú)菌操作法

第十章滅菌制劑與無(wú)菌制劑1第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法第二節(jié)注射劑第三節(jié)輸液第四節(jié)注射用無(wú)菌粉末第五節(jié)眼用液體制劑第十章滅菌制劑與無(wú)菌制劑2提高藥物制劑的安全性保護(hù)制劑的穩(wěn)定性保證制劑的臨床療效目的：第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法3概念滅菌與滅菌法:滅菌（sterilization）是指用物理或化學(xué)等方法殺滅或除去所有致病和非致病微生物繁殖體和芽胞的手段。滅菌法（thetechniqueofsterilization）是指殺滅或除去所有致病和非致病微生物繁殖體和芽胞的方法或技術(shù)。第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法4無(wú)菌與無(wú)菌操作法無(wú)菌（sterrility）指任一指定物體、介質(zhì)或環(huán)境中，不得存在任何活的微生物。無(wú)菌操作法（aseptictechnique）在整個(gè)操作過(guò)程中利用或控制一定條件，使產(chǎn)品避免被微生物污染的一種操作方法或技術(shù)。

第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法5防腐與消毒：防腐(antisepsis)

指用物理或化學(xué)方法抑制微生物的生長(zhǎng)與繁殖的手段，亦稱(chēng)抑菌。對(duì)微生物的生長(zhǎng)與繁殖具有抑制作用的物質(zhì)稱(chēng)抑菌劑/防腐劑。消毒（disinfection）指用物理或化學(xué)方法殺滅或除去病原微生物的手段。對(duì)病原微生物具有殺滅或除去作用的物質(zhì)稱(chēng)消毒劑。第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法6滅菌制劑和無(wú)菌制劑滅菌制劑：系指采用某一物理、化學(xué)方法殺滅或除去所有活的微生物繁殖體和芽孢的一類(lèi)藥物制劑。無(wú)菌制劑：系指在無(wú)菌環(huán)境中采用無(wú)菌操作法或無(wú)菌技術(shù)制備的不含任何活的微生物繁殖體和芽孢的一類(lèi)藥物制劑。第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法7藥物制劑規(guī)定無(wú)菌制劑：

不得檢出活菌。非規(guī)定無(wú)菌制劑（限菌制劑）：

限定染菌的種類(lèi)與數(shù)量。8無(wú)菌制劑注射用制劑眼用制劑植入型制劑創(chuàng)傷用制劑手術(shù)用制劑注射劑、輸液、注射粉針植入片潰瘍、燒傷及外傷用溶劑止血海棉、骨蠟滴眼劑、眼用膜劑、軟膏劑、凝膠劑9物理滅菌法化學(xué)滅菌法潔凈技術(shù)與無(wú)菌操作法滅菌的驗(yàn)證第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法10物理滅菌法化學(xué)滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線照射輻射滅菌法過(guò)濾滅菌法氣體滅菌法藥液消毒法第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法高溫滅菌法11物理滅菌法原理：利用蛋白質(zhì)與核酸具有遇熱、射線不穩(wěn)定的特性，采用加熱、射線和過(guò)濾方法，殺滅或除去微生物。12物理滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線照射輻射滅菌法過(guò)濾滅菌法熱力滅菌法13高溫可破壞蛋白質(zhì)和核酸中的氫鍵，導(dǎo)致核酸破壞，蛋白質(zhì)變性或凝固，酶失去活性，致使微生物死亡。物理滅菌法熱力滅菌原理：思考：在同一溫度下，濕熱滅菌與干熱滅菌的效力對(duì)比？14細(xì)菌在濕熱下，菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，由于凝固蛋白質(zhì)所需要的溫度與蛋白質(zhì)含水量有關(guān)，蛋白質(zhì)含水量增加，凝固的溫度降低。濕熱的穿透力比干熱大。濕熱滅菌時(shí)，水蒸氣與物品接觸而凝結(jié)成水，因而放出潛熱（汽化熱），加速細(xì)菌的死亡。物理滅菌法濕熱滅菌的效力大于干熱滅菌的原因：15物理滅菌法16火焰滅菌法干熱空氣滅菌法物理滅菌法干熱滅菌法17特點(diǎn)：最迅速、可靠、簡(jiǎn)便、應(yīng)急的滅菌法。適用：火焰不易損壞的物品，如藥刀、鑷子、鉑絲、玻棒、玻片等。方法：滅菌物品在火焰中加熱20秒鐘以上、迅速通過(guò)火焰3-4次?；鹧鏈缇?8干熱空氣滅菌法滅菌條件：135-145℃滅菌3-5h；160-170℃滅菌2-4h；180-200℃滅菌0.5-1h。適應(yīng)物品：耐高溫的玻璃、金屬或陶瓷制品、不允許濕氣穿透的油脂類(lèi)、耐高溫的藥物，如磺胺類(lèi)藥物、白陶土、滑石粉。優(yōu)點(diǎn)：可破壞細(xì)菌內(nèi)毒素（熱原）；設(shè)備簡(jiǎn)單。缺點(diǎn)：熱空氣穿透力弱，不均勻、時(shí)間長(zhǎng)、溫度高，不適于橡膠、塑料及大部分藥品。注意事項(xiàng)：計(jì)時(shí)須由滅菌物品全部達(dá)到該溫度算起。19物理滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線照射輻射滅菌法過(guò)濾滅菌法20熱壓滅菌流通蒸汽滅菌煮沸滅菌低溫間歇滅菌物理滅菌法濕熱滅菌法特點(diǎn)：蒸氣潛熱大，穿透力強(qiáng)，易使蛋白質(zhì)變性，作用可靠，操作簡(jiǎn)便。缺點(diǎn)：不適于對(duì)濕熱敏感的藥物。21方法：在密閉的熱壓滅菌器內(nèi)，利用高壓的飽和水蒸氣進(jìn)行滅菌。特點(diǎn)：水蒸氣比熱大、穿透力強(qiáng)，易使蛋白質(zhì)變性，滅菌效果好，簡(jiǎn)單、易推廣。適應(yīng)物品：耐熱藥物及其水溶液，玻璃、金屬、瓷器、橡膠塞、濾膜過(guò)濾器等。

不適物品：不耐熱壓的藥品，密度高的固體，半固體（脂肪、植物油等）熱壓滅菌22手提式熱壓滅菌器臥式熱壓滅菌柜水封式熱壓滅菌塔熱壓滅菌熱壓滅菌器種類(lèi):共同點(diǎn)：排氣口、安全閥、壓力表和溫度計(jì)。不同點(diǎn)：加熱方式——煤氣、電熱、木炭。23熱壓滅菌2425熱壓滅菌26方法：于流通的水蒸氣中，加熱30-60分鐘。適應(yīng)物品：能耐受100℃而不能耐受更高溫度的藥物制劑的滅菌。缺點(diǎn)：不能保證殺滅所有的耐熱芽孢，如破傷風(fēng)桿菌。所用抑菌劑：甲酚、氯甲酚、苯酚。流通蒸汽滅菌煮沸滅菌27方法：于60-80℃加熱60-90min，間隔24h后，再用同法滅菌60-90min，間隔24h再滅菌一次或以上。缺點(diǎn)：費(fèi)時(shí)、工效低、效果差，加入適量抑菌劑可提高滅菌效率。適用藥品：必須用熱法滅菌但又不耐高溫的物料或藥品。低溫間隙滅菌法28微生物的種類(lèi)和數(shù)量：種類(lèi)不同，耐熱性不同；繁殖期比衰老期的強(qiáng)；數(shù)量越少滅菌時(shí)間越短。注射液的性質(zhì)：營(yíng)養(yǎng)成分糖、蛋白質(zhì)，可保護(hù)微生物；pH中性時(shí)細(xì)菌耐受力最大，堿性次之、酸性最弱。蒸氣的性質(zhì)：飽和蒸氣>濕飽和蒸氣>過(guò)熱水蒸氣。滅菌溫度和時(shí)間：選擇最佳條件，保證藥液穩(wěn)定。藥物穩(wěn)定性：穩(wěn)定性高時(shí)可升高溫度或延長(zhǎng)時(shí)間，穩(wěn)定性低時(shí)，可向藥液中加入穩(wěn)定劑或抑菌劑。影響濕熱滅菌的因素：29物理滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線照射輻射滅菌法過(guò)濾滅菌法30滅菌用波長(zhǎng)：200-300nm，滅菌力最強(qiáng)的波長(zhǎng)254nm。特點(diǎn)：直線傳播，強(qiáng)度與距離平方正反比，易被反射；穿透力弱；對(duì)人體有害。適應(yīng)物品：空氣滅菌，表面滅菌。3、紫外線滅菌法31物理滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線照射輻射滅菌法過(guò)濾滅菌法32方法：r或β射線，由同位素如Co60產(chǎn)生。適應(yīng)物品：熱敏藥物；較厚樣品。特點(diǎn)：不升高產(chǎn)品的溫度；穿透力強(qiáng)；缺點(diǎn)：設(shè)備費(fèi)用高。滅菌機(jī)制：電離輻射直接作用于生命體中的大分子，如蛋白質(zhì)、核酸、酶等，產(chǎn)生電離、激發(fā)或化學(xué)鍵斷裂，引起分子發(fā)生變化。4、輻射滅菌法334、輻射滅菌法34方法：微波（頻率300MHz~300kMHz)照射產(chǎn)生的熱能殺滅微生物和芽孢。適合物料：液體和固體物料的滅菌。特點(diǎn)：穿透力強(qiáng)，物料表里熱均勻；升溫迅速，滅菌時(shí)間短。缺點(diǎn)：破損率高；藥液品種不同，滅菌效果不同。微波滅菌法35物理滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線照射輻射滅菌法過(guò)濾滅菌法365、過(guò)濾除菌法方法：用微孔濾器除去微生物。常用器材及舉例：微孔濾膜過(guò)濾器，孔徑0.22μm以下，如CoA，胰島素溶液。垂熔玻璃漏斗G6，石棉板濾器，白陶土濾柱，適應(yīng)藥品：很不耐熱的藥物。37方法：風(fēng)速為30-80m/s，190℃。特點(diǎn)：對(duì)小劑量安瓶效果好滅菌時(shí)間短，藥物降解程度低。其他滅菌法高速熱風(fēng)滅菌法38物理滅菌法化學(xué)滅菌法潔凈技術(shù)與無(wú)菌操作法滅菌的驗(yàn)證第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法39方法：用化學(xué)藥品直接作用于微生物而將其殺滅。目的：減少微生物的數(shù)目，控制一定的無(wú)菌狀態(tài)。

化學(xué)滅菌法氣體滅菌法藥液消毒法40氣體滅菌法適合物品：適用于環(huán)境消毒和不耐熱的醫(yī)用器具、設(shè)備和設(shè)施等的消毒，亦用于粉末注射劑的消毒。常用的氣態(tài)殺菌劑：環(huán)氧乙烷、甲醛、過(guò)氧化氫、臭氧?；瘜W(xué)滅菌法41藥液滅菌法適合物品：常作為其他滅菌法的輔助措施，適用于皮膚、無(wú)菌器具和設(shè)備的消毒。常用消毒液：75%乙醇、1%聚維酮碘溶液、0.1~0.2%新潔爾滅溶液、酚或煤酚皂溶液等?；瘜W(xué)滅菌法42物理滅菌法化學(xué)滅菌法潔凈技術(shù)與無(wú)菌操作法滅菌的驗(yàn)證第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法43對(duì)潔凈生產(chǎn)廠房的要求空氣凈化系統(tǒng)無(wú)菌操作法潔凈技術(shù)與無(wú)菌操作法44對(duì)潔凈生產(chǎn)廠房的要求生產(chǎn)區(qū)、控制區(qū)、潔凈區(qū)、無(wú)菌區(qū)潔凈技術(shù)與無(wú)菌操作法藥品品種不同、生產(chǎn)工藝不同，對(duì)環(huán)境的潔凈度有不同要求45潔凈室的凈化度標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別塵粒最大允許數(shù)/m3(動(dòng)態(tài))微生物最大允許數(shù)

≥0.5μm≥5μm浮游菌/m3沉降菌/皿A1003,5001<1<1B100350,0002,000105C10萬(wàn)3,500,00020,00010050D30萬(wàn)------20010046藥品類(lèi)別100級(jí)10000級(jí)10萬(wàn)級(jí)30萬(wàn)備注無(wú)菌藥品最終滅菌藥品1.大容量注射劑灌封注射劑:稀配,濾過(guò)小容量注劑：灌封內(nèi)包材料：最終處理（精洗等）1.注射劑：濃配、稀配（采用密閉系統(tǒng)的）100級(jí)潔凈區(qū)或10000級(jí)背景下的局部100級(jí)以下均同含放射性藥品和中藥制劑非最終滅菌藥品1.藥液配制(灌裝前不需除菌濾過(guò)的);2.注射劑：灌封、分裝、壓塞；3.內(nèi)包材料最終處理后的暴露環(huán)境1.藥液配制（灌裝前需除菌濾過(guò)的）軋蓋；內(nèi)包最后一次精洗的最低要求含放射性藥品和中藥制劑其他供角膜創(chuàng)傷、手術(shù)用滴眼劑的配制、灌裝含放射性藥品和中藥制劑47藥品類(lèi)別100級(jí)萬(wàn)級(jí)10萬(wàn)級(jí)30萬(wàn)級(jí)備注非無(wú)菌藥品非最終滅菌口服液；深部組織創(chuàng)傷外用藥品眼用藥品腔道用藥(直腸用藥除外)1.最終滅菌口服液2.口服液固體藥品3.表皮外用藥品4,直腸用藥5.放射免疫分析藥盒1.標(biāo)注在100000級(jí)或300000級(jí)的各劑型均為生產(chǎn)中暴露工序的最低要求2.含放射性質(zhì)藥品和中藥制劑原料藥標(biāo)準(zhǔn)中列有無(wú)菌檢查項(xiàng)目的原料藥生產(chǎn)其他原料藥的生產(chǎn)暴露環(huán)境的最低要求含放射性藥品和中藥制劑48藥品100級(jí)10000級(jí)10萬(wàn)級(jí)30萬(wàn)備注生物制品灌裝前不經(jīng)除菌濾過(guò)的制品：配制、合并、灌裝、凍干、加塞、添加穩(wěn)定劑、佐料、滅活劑等1.灌裝前經(jīng)除菌濾過(guò)的制品：配制、合并、精制，添加穩(wěn)定劑、佐劑、滅活劑、除菌過(guò)濾、超濾等；2.體外免疫診斷試劑陽(yáng)性血清分裝，抗原-抗體分裝1．原料血漿的合并，非低溫提取，分裝前的巴氏消毒、軋蓋及制品最終容量的清洗；2.口服制劑；3.發(fā)酵培養(yǎng)密閉系統(tǒng)環(huán)境，暴露部分需無(wú)菌操作；4.酶聯(lián)免疫吸附試劑：包裝、配液、分裝、干燥；5.膠體金試劑、聚合酶鏈反應(yīng)試劑(PCR)、紙片法試劑等體外免疫試制6.深部組織創(chuàng)傷用制品，大面積體表創(chuàng)面用制品，大面積體表創(chuàng)面用制品：配制、灌裝各類(lèi)制品生產(chǎn)過(guò)程中涉及高危致病因子的操作，其空氣凈化系統(tǒng)等設(shè)施還應(yīng)符合特殊規(guī)定49空氣凈化系統(tǒng)潔凈技術(shù)與無(wú)菌操作法目的：創(chuàng)造潔凈空氣。分類(lèi)：工業(yè)凈化和生物凈化。50方法：空氣過(guò)濾法空氣凈化系統(tǒng)過(guò)濾方式與機(jī)制：表面過(guò)濾——攔截作用深層過(guò)濾——吸附作用51空氣過(guò)濾器52中效折疊式空氣過(guò)濾器53凈化空調(diào)系統(tǒng)的基本流程54潔凈室的設(shè)計(jì)要求：人員物料內(nèi)部結(jié)構(gòu)人流、物流和空氣流的流向潔凈度從高→低。55潔凈室的設(shè)計(jì)56水平層流氣流方式示意圖57垂直層流氣流方式示意圖58層流示意圖5960無(wú)菌操作法方法：整個(gè)過(guò)程控制在無(wú)菌條件下進(jìn)行。適用范圍：不耐熱藥物的注射液、眼用制劑、皮試液、海綿劑和創(chuàng)傷制劑的制備。步驟：無(wú)菌操作室的滅菌和無(wú)菌操作。61

無(wú)菌操作室的滅菌常采用紫外線、液體和氣體滅菌法對(duì)無(wú)菌操作室環(huán)境進(jìn)行滅菌。常用甲醛溶液加熱熏蒸法。氣體發(fā)生裝置（蒸氣加熱夾層鍋）液態(tài)甲醛甲醛蒸氣鼓風(fēng)機(jī)無(wú)菌室關(guān)閉熏蒸12~24h濕度﹥60%溫度﹥25℃25%氨水除氣62甲醛溶液加熱熏蒸法的傳統(tǒng)氣體發(fā)生裝置63物理滅菌法化學(xué)滅菌法潔凈技術(shù)與無(wú)菌操作法滅菌的驗(yàn)證第一節(jié)滅菌法和無(wú)菌操作法64D值Z值F值F0值滅菌的驗(yàn)證65D值意義：D值為降低被滅菌物品中微生物數(shù)至原來(lái)1/10或降低一個(gè)對(duì)數(shù)單位（lg100降至lg10）所需的時(shí)間。在一定溫度下，殺滅90%微生物（或殘存率為10%）所需的滅菌時(shí)間。lgN0–lgNt=kt/2.303微生物死亡的速度:D=t=(lg100-lg10)*2.303/k66不同滅菌法不同微生物的D值滅菌方法微生物溫度介質(zhì)或樣品D值（min）蒸氣滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1055％葡萄糖水溶液87.8蒸氣滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1215％葡萄糖水溶液2.4蒸氣滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌121注射用水3.0蒸氣滅菌產(chǎn)芽胞梭狀芽孢桿菌1055％葡萄糖水溶液1.3干熱滅菌枯草芽胞桿菌135紙16.6紅外線滅菌枯草芽胞桿菌160玻璃板18秒67Z值

降低一個(gè)lgD值所需升高的溫度，即滅菌時(shí)間減少到原來(lái)的1/10所需升高的溫度?；蛟谙嗤瑴缇鷷r(shí)間內(nèi)，殺滅90%的微生物所需提