秦病毒感染的檢測方法與防治原則優(yōu)質課件

秦病毒感染的檢測方法與防治原則（優(yōu)選）秦病毒感染的檢測方法與防治原則直接病毒診斷細胞病理學方法:光鏡下檢查病變組織或脫落細胞中的特異性病毒包涵體，DNA病毒在核內裝配產生核內包涵體，RNA病毒在胞漿裝配產生胞漿包涵體電子顯微鏡法:負染法（重金屬染液，電子光束通過低電子密度的病毒顆粒但不能通過金屬背景，病毒顆粒明亮清晰，負反差）、超薄切片法、immuneelectronmicroscope（抗體處理病毒顆粒形成病毒抗體復合物凝聚成團，高速離心負染后觀察）

病毒抗原檢測:胞內病毒抗原的檢測免疫熒光技術、免疫酶技術胞外（游離）病毒抗原的檢測ELISA病毒核酸檢測核酸雜交技術斑點分子雜交法、Southern印跡法、原位分子雜交法、Northern印跡法聚合酶鏈反應技術（PCR）（1）標本處理

組織、細胞粗提將沉渣、細菌、真菌等去除，釋

放病毒，有的還需要提純濃縮

體液腦脊液、胸腔液、水泡液、尿液等直接接種培

養(yǎng)管

拭子咽、眼、鼻拭子直接放入含有抗生素的培養(yǎng)管病毒的分離培養(yǎng)與鑒定1動物接種2雞胚接種雞胚對多種病毒敏感，羊膜腔、尿囊腔、卵黃囊、絨毛尿囊膜3組織培養(yǎng)原代細胞培養(yǎng)傳1～10代二倍體細胞培養(yǎng)傳50～100代傳代細胞培養(yǎng)三大培養(yǎng)方法（2）分離培養(yǎng)方法器官培養(yǎng)組織培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)

常用的細胞培養(yǎng)1CPE2hemadsorption病毒在細胞內增殖的指標正常細胞病變細胞（3）病毒的鑒定流感病毒和某些副粘病毒感染細胞后24～48小時，在細胞膜上出現病毒的血凝素，能吸附動物及人的紅細胞2、50%感染量ID50

或50%組織細胞感染量TCID50（

tissuecultureinfectivedose50）估計病毒感染性的強弱及含量，不能準確地測定感染性病毒顆粒的數量

病毒感染雞胚、動物或細胞后，引起50%發(fā)生死亡或病變的最小病毒量病毒樣本作10倍連續(xù)稀釋

病毒感染單層細胞后，產生的局限性病灶（瓊脂限制病毒的擴散），稱蝕斑。一個蝕斑是由一個感染性病毒體復制增殖后形成的，稱蝕斑形成單位（plaqueformingunit，PFU），病毒懸液中的感染性病毒量以每毫升的蝕斑形成單位來表示（4）病毒數量與感染性的測定1、蝕斑測定比較準確地測定感染性病毒顆粒的多少胞外（游離）病毒抗原的檢測ELISA（1）天然被動免疫：通過胎盤的IgG和初乳中的IgA；載體病毒常用的有痘苗病毒、腺病毒、HSV1原代細胞培養(yǎng)傳1～10代原代細胞培養(yǎng)傳1～10代減毒活疫苗（attenuatedlivevaccine）利用DNA重組技術，將編碼病毒抗原的基因插入到另一無毒力的載體病毒，使之高效表達消除腫瘤病毒的潛在的致癌作用部分肽只激發(fā)B細胞表位，缺乏激發(fā)TH細胞的表位包涵體，DNA病毒在核內裝配產生核內包涵體，抗獨特型抗體疫苗（antiidiotypevaccine）

病毒的血清學診斷

最有特異性中和試驗補體結合試驗血凝抑制試驗免疫擴散等免疫標記技術流感病毒與患者血清中抗HA抗體（中和抗體）結合后，紅細胞表面的糖蛋白受體就不能與HA結合，血凝現象被抑制。雙份血清同時做血凝抑制試驗，恢復期抗體效價比急性期高4倍或以上可確診DiagnosisStrategyforViralInfection不同肽免疫活性有差異?；钜呙纾╨ivevaccine）秦病毒感染的檢測方法與防治原則利用DNA重組技術，定向缺失病毒基因組的某一區(qū)段，使病毒喪失毒力而保留增殖能力和免疫原性亞單位疫苗（subunitvaccine）物理或化學方法滅活病毒。DiagnosisStrategyforViralInfection成功的范例1961年我國應用脊灰疫苗，脊灰發(fā)病率大幅度下降。物理或化學方法滅活病毒。病毒感染單層細胞后，產生的局限性病灶（瓊脂限制病毒的擴散），稱蝕斑。變異株可能回復到有毒力的野生株不含病毒核酸，僅有能誘導中和抗體的衣殼蛋白或包膜表面抗原。ELISAforHIVantibody

利用DNA重組技術，將編碼病毒抗原的基因插入到另一無毒力的載體病毒，使之高效表達秦病毒感染的檢測方法與防治原則不含病毒核酸，僅有能誘導中和抗體的衣殼蛋白或包膜表面抗原。病毒感染單層細胞后，產生的局限性病灶（瓊脂限制病毒的擴散），稱蝕斑。將野毒株表面抗原基因與弱毒株其他基因組合而獲得減毒活病毒原位分子雜交法、Northern印跡法減毒活疫苗（attenuatedlivevaccine）包涵體，DNA病毒在核內裝配產生核內包涵體，

免疫預防1、人工被動免疫（1）天然被動免疫：通過胎盤的IgG和初乳中的IgA；（2）人工被動免疫：

1）人胎盤或人血中提取出的免疫球蛋（IgG）；

2）康復期病人的血清或高效價免疫血清（SARS

病人恢復期血清）病毒感染的防治人工主動免疫滅活疫苗：乙腦疫苗狂犬病疫苗流感滅活疫苗HAV，HBV疫苗等減毒活疫苗：脊髓灰質炎疫苗麻疹疫苗腮腺炎疫苗風疹疫苗HAV疫苗亞單位疫苗：流感疫苗、乙肝疫苗人工主動免疫－病毒疫苗減毒活疫苗（attenuatedlivevaccine）滅活疫苗（inactivatedvaccine）亞單位疫苗（subunitvaccine）基因工程疫苗（geneengineeredvaccine）基因工程亞單位疫苗（geneengineeredsubunitvaccine）基因工程載體疫苗（geneengineeredvectoredvaccine）基因缺失活疫苗（genedeletedlivevaccine）核酸疫苗（nucleicacidvaccine）。合成肽疫苗（syntheticpeptidevaccine）抗獨特型抗體疫苗（antiidiotypevaccine）活疫苗（livevaccine）減毒活疫苗基于基因工程技術的新型活疫苗遺傳重組活疫苗基因缺失活疫苗載體活疫苗減毒活疫苗(attenuatedlivevaccine)自然或人工選擇法（如Ts株）所篩選的對人低毒或無毒的變異株，如脊灰、流感、麻疹的減毒株優(yōu)點模擬自然感染，免疫效果好，局部IgA。理論上的缺點，實際工作中少見變異株可能回復到有毒力的野生株如果機體免疫缺陷，減毒株仍可能引起感染或并發(fā)癥可能激活機體內其它病毒的感染減毒活苗可能引起持續(xù)感染成功的范例1961年我國應用脊灰疫苗，脊灰發(fā)病率大幅度下降。1980年天花病毒滅絕遺傳重組活疫苗將野毒株表面抗原基因與弱毒株其他基因組合而獲得減毒活病毒適用于基因組分節(jié)段雙鏈RNA病毒，如流感病毒、輪狀病毒等基因缺失活疫苗利用DNA重組技術，定向缺失病毒基因組的某一區(qū)段，使病毒喪失毒力而保留增殖能力和免疫原性優(yōu)點疫苗株的遺傳背景清楚，不易突變回到野毒株載體活疫苗利用DNA重組技術，將編碼病毒抗原的基因插入到另一無毒力的載體病毒，使之高效表達易建立多價疫苗載體病毒常用的有痘苗病毒、腺病毒、HSV1滅活疫菌（inactivatedvaccine）滅活全病毒疫苗亞單位疫苗合成肽病毒疫苗基因工程疫苗獨特型病毒疫苗核酸疫苗滅活全病毒疫苗物理或化學方法滅活病毒。適用烈性或易變異病毒如乙腦病毒、狂犬病病毒、流感病毒，常用甲醛液作為滅活劑優(yōu)點生產簡單、易保存運輸缺點需要大量培養(yǎng)病毒，成本高無局部抗體，不激活CTL，可激活TDTH甲醛滅活的麻疹病毒和RSV疫苗可加重疾病，機制不詳亞單位疫苗（subunitvaccine）種類化學方法制備如HBsAg和流感HA基因工程亞單位疫苗優(yōu)點不含病毒核酸，僅有能誘導中和抗體的衣殼蛋白或包膜表面抗原。免除了回復突變和交叉復活的可能消除腫瘤病毒的潛在的致癌作用合成肽病毒疫