藥物常見定量分析方法 樣品前處理和分析方法的驗證 （藥物分析課件）

樣品前處理樣品前處理是指在樣品分析前要采用一定的方法，使待測藥物純化或待測元素轉(zhuǎn)化為適宜的狀態(tài)后再進行分析測定。樣品前處理1.目的樣品前處理消除干擾，保護儀器。提高方法的準確度、精密度、選擇性和靈敏度。分析檢測的關鍵環(huán)節(jié)。前處理對象前處理方法樣品前處理含金屬（Ca、Fe、Zn、Hg）鹵素（F、Cl、Br、I）、N元素、P、S不經(jīng)有機破壞經(jīng)有機破壞樣品前處理1.不經(jīng)有機破壞的分析方法對藥物分子的有機結(jié)構(gòu)部分不進行完全破壞，通過選用適當溶劑溶解或經(jīng)簡單回流處理，使待測元素電離、離解，轉(zhuǎn)化為無機離子進行測定，適用于含金屬有機藥物或結(jié)合不牢固的含鹵素藥物的分析。方法包括直接溶解法、提取分離法中的加熱回流、超聲處理、索氏提取、水蒸氣蒸餾法、冷浸或滲漏法、萃取濃集法化學分解法……樣品前處理2.經(jīng)有機破壞的分析方法某些藥品中含有機氮、硫、磷及有機金屬離子與碳原子結(jié)合牢固，用上述方法難以成為無機的化合物，此時必須采用有機破壞的方法，使之轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機化合物，方可進行測定。樣品前處理方法包括濕法破壞法和干法破壞法。破壞法2.經(jīng)有機破壞的分析方法

（1）濕法破壞法1、硝酸—高氯酸方法2、硫酸—硫酸鹽方法3、硝酸—硫酸法方法4、其他濕法主要采用強酸進行有機破壞，將有機結(jié)合的待測元素轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓽y定無機化合物。本法可用于生物制品中氮、磷或金屬元素的測定。以硫酸-硫酸鹽法為基礎的含氮有機藥物定量分析方法。適用于含氮有機藥物前處理。例：凱氏定氮法用濃硫酸進行消解消解液加氫氧化鈉蒸餾，用2%硼酸溶液吸收生成硼胺再用稀硫酸滴定2.經(jīng)有機破壞的分析方法

樣品前處理高溫熾灼法氧瓶燃燒法2.經(jīng)有機破壞的分析方法

（2）干法破壞法適用于含鹵素、硫、磷等有機物的前處理，亦可用于含硒、砷鹽藥物的測定。樣品前處理主要用于含鹵素藥物的鑒別。本法將有機藥物經(jīng)高溫灼燒灰化，使有機結(jié)構(gòu)分解而待測元素轉(zhuǎn)化為無機元素或可溶性的無機鹽。樣品前處理（1）高溫熾灼法將有機藥物放入充滿氧氣的密閉燒瓶中進行燃燒，將燃燒所產(chǎn)生的待測物質(zhì)吸收在適當吸收液中，采用適當分析方法進行鑒別、檢查或含量測定。適用于含鹵素及硫、磷、硒等藥物的鑒別、檢查和含量測定。（2）氧瓶燃燒法樣品前處理2.經(jīng)有機破壞的分析方法

分析方法的驗證藥品質(zhì)量標準分析方法驗證的目的是證明采用的方法適合于相應檢測要求。分析方法的驗證對原分析方法進行修訂

建立藥品質(zhì)量標準AC制劑的組分變更BD

藥品生產(chǎn)工藝變更需要進行方法驗證的情況方法驗證的理由、過程和結(jié)果均應記載在藥品質(zhì)量標準起草說明或修訂說明中。分析方法的驗證質(zhì)量標準中需要驗證的項目鑒別試驗、限量或定量檢查、原料藥或制劑中有效成分含量測定、制劑中其他成分藥品溶出度、釋放度等檢查中溶出量等的測定方法。準確度、精密度、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性。在分析方法驗證中，須采用標準物質(zhì)進行試驗。分析方法的驗證指標分析方法的驗證一、準確度準確度系指采用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。準確度應在規(guī)定的范圍內(nèi)測定。

加樣回收率測定——向已知被測成分含量的供試品中精密加入一定量的被測成分對照品，用實測值與供試品中含有量之差，除以加入對照品量計算回收率。

數(shù)據(jù)要求：9個測定結(jié)果，3個不同濃度，每個濃度各3份(80，100，120％)分析方法的驗證在規(guī)定的條件下，同一份均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標準偏差或相對標準偏差表示。在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結(jié)果在同一個實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設備測定結(jié)果在不同實驗室由不同分析人員測定所得結(jié)果二、精密度重現(xiàn)性中間精密度重復性分析方法的驗證三、專屬性在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）存在下，采用的分析方法能正確測定被測物的能力。鑒別反應、雜質(zhì)檢查和含量測定方法，均應考察其專屬性。對照品溶液供試品溶液空白溶液分析方法的驗證檢測限檢測限系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。檢測限僅作為限度試驗指標和定性鑒別的依據(jù)，沒有定量意義。四、檢測限分析方法的驗證定量限試樣中被測物能被定量測定的最低量，應符合準確度和精密度要求。適用于微量或痕量藥物分析、定量測定藥物雜質(zhì)和降解產(chǎn)物。五、定量限分析方法的驗證指在設計的范圍內(nèi)，測定響應值與試樣中被測物濃度呈比例關系的程度。應在規(guī)定的范圍內(nèi)測定線性關系。以測得的響應信號對應被測物的濃度作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進行線性回歸?？捎猛粚φ掌焚A備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱取對照品，制備一系列對照品溶液的方法進行測定，至少制備5份不同濃度的對照品溶液。六、線性分析方法的驗證必要時，響應信號可經(jīng)數(shù)學轉(zhuǎn)換，再進行線性回歸計算；可采用描述濃度-響應關系的非線性模型。六、線性數(shù)據(jù)要求：列出回歸方程、相關系數(shù)和線性圖。分析方法的驗證范圍能達到一定精密度、準確度和線性要求時的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應根據(jù)分析方法的具體應用及其線性、準確度、精密度結(jié)果和要求確定。分析方法的驗證七、范圍八、耐用性在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，為所建立的方法用于日常檢驗提供依據(jù)，開始研究分析方法時，就應考慮其耐用性。如果測試條件要求苛刻，應在方法中寫明并注明可以接受變動的范圍，可先采用均勻設計確定主要影響因素，再通過單因素分析等確定變動范圍。分析方法的驗證九、驗證內(nèi)容的選擇

010203定量分析方法如原料藥或制劑的含量測定及含量