實驗 土壤中細菌的分離與純化

實驗土壤中細菌的分離與純化第一頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二實驗十微生物的分離與純化第二頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二

一、目的要求掌握土壤微生物的分離純化方法和無菌操作技術(shù)；初步掌握微生物的鑒定技術(shù)。第三頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二

二、實驗原理自然界中各種微生物混雜生活在一起，要研究某種微生物的特性，首先須使該微生物處于純培養(yǎng)狀態(tài)。從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種或一株微生物的過程稱為微生物的分離與純化。土壤是微生物生活的大本營，可以從中分離到很多有價值的菌株。本實驗將采用三種不同的培養(yǎng)基從土壤中分離不同類型的微生物。第四頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二三、實驗器材土樣：采集校園土壤培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基——細菌高氏Ⅰ號培養(yǎng)基——放線菌馬丁氏培養(yǎng)基——真菌其他：無菌的培養(yǎng)皿、盛90mL無菌水并帶玻璃珠的三角瓶、盛9mL無菌水的試管、小鐵鏟、吸頭、移液器、無菌玻璃涂棒、接種環(huán)、顯微鏡、染色液等。第五頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二四、操作步驟（1）制備土壤稀釋液涂布平板培養(yǎng)挑菌落平板劃線分離轉(zhuǎn)入斜面觀察菌落特征、制片鏡檢菌體形態(tài)菌種保藏第六頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二1.

制備土壤稀釋液

四、操作步驟（2）第七頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二2.

涂布四、操作步驟（3）第八頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二四、操作步驟（4）3.

培養(yǎng)：高氏Ⅰ號培養(yǎng)基平板和馬丁氏培養(yǎng)基平板倒置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3~5d，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板倒置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3d。

第九頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二四、操作步驟（5）4.

挑菌落接種和分離工具1.接種針；2.接種環(huán)；3.接種鉤；4.5.玻璃涂棒；6.接種圈；7.接種鋤；8.小解剖刀第十頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二四、操作步驟（6）5.平板劃線分離第十一頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二

平板劃線分離的方法1.斜線法；2.曲線法；3.方格法；4.放射法；5.四格法四、操作步驟（6）平板劃線法第十二頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二四、操作步驟（6）平板劃線分離第十三頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二斜面接種時的無菌操作(1)接種滅菌;(2)開啟棉塞;(3)管口滅菌;(4)挑起菌苔;(5)接種;(6)塞好棉塞四、操作步驟（7）6.轉(zhuǎn)入斜面第十四頁，共十五頁，編輯于2023年，星期二試擬出從土