特種蛋白的免疫測定及臨床意義課件

特定蛋白的免疫測定及臨床意義特定蛋白的免疫測定方法■基本原理:免疫沉淀反應(yīng)免疫透射比濁免疫散射比濁免疫沉淀反應(yīng)的發(fā)展歷史1897年,Kraus發(fā)現(xiàn)細(xì)菌培養(yǎng)液與其相應(yīng)抗血清混合后出現(xiàn)肉眼可見的沉淀反應(yīng)1902年Ascoli建立了環(huán)狀沉淀試驗(yàn)1905年Bechhold將抗體混溶在明膠中,然后再將相應(yīng)特異抗原加于其上,抗原抗體的特異結(jié)合可在明膠中出現(xiàn)沉■1946年Oudin報(bào)道了試管單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)。(1965年Mancini又提出了平板單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)。)Grabar和Williams在1953年報(bào)道了免疫電泳。(對流免疫電泳、火箭免疫電泳和免疫固定電泳)■上述為經(jīng)典免疫沉淀試驗(yàn)發(fā)展階段,測定范圍窄(10100μg/ml)、靈敏度低,繁瑣費(fèi)時(shí),不能自動(dòng)化。免疫沉淀反應(yīng)的發(fā)展歷史■1959年,Schultze等報(bào)道了透射比濁法Transmissionturbidimetry)■1967年,Ritchie等報(bào)道了散射比濁法(nephelometry)■1977年,Sternberg等進(jìn)一步發(fā)展建立了速率散射比濁法(Ratenephelometry)免疫比濁測定方法與免疫沉淀方法相比,靈敏度高,重復(fù)性好,測定范圍寬,已用于臨床體液特定蛋白含量的測定,現(xiàn)已有多種自動(dòng)化檢測儀器應(yīng)用于臨床檢驗(yàn),尤其是免疫散射比濁測定免疫透射比濁溫道:加■基本原理:一定波長光線通過抗原抗體反應(yīng)混合液時(shí),被其中的免疫復(fù)合物(IC)反射或遮擋、吸收而減弱。在一定范圍內(nèi),透射光被吸收的量與免疫復(fù)合物的量呈正比,后者又與相應(yīng)抗原和抗體的量呈函數(shù)關(guān)系?？贵w量一定,即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線獲知抗原的量■由于要求抗原抗體復(fù)合物的數(shù)量足夠,并且顆粒要足夠大(35-100nm),本法的測定靈敏度和準(zhǔn)確度相對較低免疫散射比濁增溫道加20■基本原理:光線通過檢測溶液時(shí),被其中所含的抗原抗體復(fù)合物折射而部分偏轉(zhuǎn),產(chǎn)生散射光根據(jù)雷利散射公式定條件下,透射光與微粒濃度成正比,散射光與微粒濃度成反比散射比濁可分為和散射比濁兩種熒光:高壓汞燈發(fā)射,入射光波長(λ)355nm,散射夾角(0)為90℃激光:氦氖燈,=663nm,0=15~35℃碘鎢光:碘鎢燈,入=400~500nm,0=70℃免疫散射比濁儀器增溫道加20得靈、貝克曼等美國THEB|DINGSITE-M|NIPEPH德國美創(chuàng)-D-dimer武漢艾爾夫深圳國賽特定蛋白測定的臨床意義■D-二聚體(D-dimer):生理學(xué)背景:纖維蛋白溶解系統(tǒng)FDP意義肺栓塞和深V血栓及A血栓的診斷溶栓監(jiān)測胱抑素C特定蛋白測定的臨床意義增溫道加20■血液中含有多種功能蛋白,如載體蛋白、免疫球蛋白(抗體)、酶、凝血因子等,其含量變化通常與多種疾病有密切關(guān)系C反應(yīng)蛋白(CRP)、免疫球蛋白及亞類、補(bǔ)體C3和C4、抗鏈球溶血素O(ASO)、類風(fēng)濕因子(RF)前白蛋白(Prealbumin)、白蛋白(Albumin)、微白蛋白(Microalbumin)β2微球蛋白β2Microglobulin)、α1抗胰蛋白酶(α1AT)、銅藍(lán)蛋白(Caeruloplasm