HPV核酸檢測(cè)及基因分型在宮頸癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值

HPV核酸檢測(cè)及基因分型在宮頸癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值

【Summary】目的：對(duì)500名住院女性中HPV即人乳頭瘤病毒的感染率、感染亞型、年齡的分布進(jìn)行回顧性調(diào)查，并對(duì)其感染特點(diǎn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。方法：回顧性分析了2021年9月～2021年12月在晉江市某三甲醫(yī)院進(jìn)行人乳頭瘤病毒核酸檢測(cè)的500名女子對(duì)HPV25種基因在宮頸脫落細(xì)胞中的基因分型檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果及結(jié)論：HPV感染的基因類型多少與子宮頸疾病的嚴(yán)重程度無關(guān)，但與HPV類型的致癌力有關(guān)，多重感染不會(huì)使宮頸癌的發(fā)病率升高。Keys：HPV檢測(cè)宮頸癌人乳頭瘤病毒基因型1.引言1.1

研究背景HPV是一種球形DNA病毒，它可以引起表皮細(xì)胞黏膜的鱗狀上皮增生，它的基因組編碼E6、E7等調(diào)控蛋白[1-2]而宮頸癌是僅次于乳腺癌一種最常見的婦科惡性腫瘤[3]。屬于乳多空病毒科乳頭瘤空泡病毒A屬的這種病毒只侵襲人體，比如容易經(jīng)過性傳播的為尋常疣、尖銳濕疣等。1.2

研究意義一方面，宮頸疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)；另一方面，預(yù)防控制，HPV分型可用于分析感染的流行情況，為當(dāng)?shù)豀PV感染的防治提供依據(jù)。

2.一般資料和方法2.1

研究對(duì)象選取2021年9月～2021年12月在晉江市某三甲醫(yī)院婦產(chǎn)科門診進(jìn)行人乳頭瘤病毒核酸檢測(cè)的500名女性作為研究對(duì)象。年齡范圍為19～69歲。2.1.1

樣本類型宮頸脫落細(xì)胞2.1.2

納入標(biāo)準(zhǔn)（1）來例假后10～18日是最佳的檢測(cè)時(shí)機(jī)；（2）進(jìn)行檢查的三天內(nèi)禁止服用陰道內(nèi)的任何藥物或清洗陰道；（3）在發(fā)生性關(guān)系24小時(shí)內(nèi)不得進(jìn)行檢查；（4）如果在測(cè)試之前使用過碘液以及醋酸涂抹，那么測(cè)試將被禁止。2.2

檢驗(yàn)方法使用3500DX基因分析儀，針對(duì)HPV基因組早期表達(dá)基因E6、E7、E1基因的特異性引物應(yīng)用多重PCR技術(shù)與毛細(xì)電泳技術(shù)設(shè)計(jì)且由于HPV的分型不同基因進(jìn)行分離應(yīng)該采用特異擴(kuò)增和毛細(xì)電泳的方法。在同一時(shí)間內(nèi)，按特定的擴(kuò)增片段長(zhǎng)度的不同在一次檢測(cè)中對(duì)25種HPV類型進(jìn)行分型。利用內(nèi)置反應(yīng)內(nèi)參pcDNA和人類基因組內(nèi)參β-globin，分別對(duì)PCR的反應(yīng)過程和樣本的加工處理進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。2.3

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS25.0對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，采用Χ2檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，結(jié)果顯示：P＜0.05的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.研究結(jié)果3.1

不同年齡段HPV核酸檢測(cè)的陽性率表3-1

不同年齡段HPV核酸檢測(cè)陽性率(%)概況年齡段（歲）受檢人數(shù)（n）陽性人數(shù)（n）檢出率（%）19～29862427.9130～391982713.6440～491533220.9250～5948816.6760～6915426.67總計(jì)5009519.00注：Χ2值為4.1313，每個(gè)年齡組間比較P值均＜0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.2

HPV核酸檢測(cè)亞型分布情況表3-2

HPV核酸檢測(cè)亞型分布情況類別基因型n構(gòu)成比（%）陽性率（%）高危型1685.671.601853.551.00260003110.710.203342.840.803500039128.512.404532.130.60511510.643.00522618.445.205385.671.605600058117.802.205996.381.806610.710.206874.961.407321.420.408221.420.40低危型610.710.201153.551.004242.840.804321.420.404485.671.608164.261.208310.710.20注：Χ2＝18.4251，P＜0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.3

95例HPV陽性中單一感染和多重感染總體比例表3-3

HPV單一感染與多重感染總體比例HPV型別例數(shù)總比例（%）占單一感染或混合感染的比例（%）單一感染7275.79-高危型6366.3287.50低危型99.4712.50混合感染2324.21-二重感染1414.7460.87三重感染66.3226.09四重感染11.054.35五重感染11.054.35六重感染11.054.35注：Χ2＝9.3526，P＜0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.4

HPV型別在13例宮頸癌中的分布9例為單一型感染：52型4例、16型4例、18型1例；4例為多重感染，且均為二重感染：16+33型2例、16+68型1例、52+68型1例，見表5。表3-4

宮頸癌中HPV型別分布HPV基因型別5216183368單一/多重感染4/14/31/00/20/2注：Χ2＝12.5825，P＜0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.討論4.1

HPV基因型在不同年齡段的感染特點(diǎn)有關(guān)研究顯示，女性HPV感染與年齡存在著一定的關(guān)系，而HPV感染的兩個(gè)高峰期分別是青春期和絕經(jīng)過渡期[4]。500例女性標(biāo)本中，HPV陽性率最高的是19～29歲（27.91%），其次是60～69歲（26.67%）。年輕女性如果有更多的性行為，導(dǎo)致HPV感染的可能性更大。60多歲的老年女性，由于其更年期后的卵巢機(jī)能減退，體內(nèi)的雌性荷爾蒙降低，抵抗力降低；身體對(duì)外部的不良因素的抵抗能力降低，從而導(dǎo)致HPV的感染的概率會(huì)加大。4.2

HPV核酸檢測(cè)亞型分布情況目前已有的調(diào)查顯示HPV在人類中的感染比例為1.40%～27.30%，一般為10.00%[5]。本文感染HPV的高?；蛐妥疃嘁姷那叭环謩e是HPV-52占比5.2%、HPV-51占比3.0%、HPV-39占比2.4%，結(jié)果表明，HPV52型與子宮頸癌有較大的相關(guān)性。4.3

HPV的單一感染和多重感染與宮頸癌的關(guān)系在本數(shù)據(jù)整理中，單一感染為72例，占比75.79%，多重感染為23例，占比24.21%。且在單一感染中，高危型感染率87.50%，低危型感染率12.50%。HPV的單一亞型感染率隨著子宮頸病變程度的升高而升高，且HPV在宮頸鱗癌中的感染呈單一性高風(fēng)險(xiǎn)。HPV多重感染可導(dǎo)致不同程度的宮頸病變，但并沒有明顯提高子宮頸癌的發(fā)病率。4.4

HPV型別與宮頸癌的關(guān)系十三例宮頸癌中就有九例為單一型感染，四例為多重感染，四例多重感染均為二重感染，16+33型2例、16+68型1例、52+68型1例，提示HPV16型與宮頸癌關(guān)系密切。本文認(rèn)為，宮頸疾病的嚴(yán)重程度與HPV病毒的感染類型關(guān)系不大，且感染宮頸癌以高危16型感染為主要且與HPV類型的致癌力有關(guān)，多重感染不會(huì)使宮頸癌的發(fā)病率升高。5.結(jié)論女性HPV感染與年齡有關(guān)，其中青春期和絕經(jīng)過渡期是HPV感染的高峰期。HPV感染在宮頸鱗癌中的感染呈單一性高風(fēng)險(xiǎn)。HPV的多種感染均可引起宮頸病變，但其發(fā)病率未見顯著提高。宮頸癌的嚴(yán)重程度與HPV的感染基因型相關(guān)不大，主要與HPV類型的致癌力有關(guān)，多重感染不會(huì)使宮頸癌的發(fā)病率升高。1

Reference[1]林爽，王翠峰.HPVE6/E7mRNA檢測(cè)在宮頸癌中的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2018,45（3）：513-515,519.[2]BrantAC，MenezesAN，F(xiàn)elixSP，etal.CharacterizationofHPVintegration，viralgeneexpressionandE6E7alternativetranscriptsbyRNA-Seq：Adescrptivestudyininvasivecervicalcancer.Genomics.2019Dec；111（6）：1853-1861.[3]蔡江義，崔旭，秦嶺，康媛媛，白煥煥.高危型人乳頭瘤病毒基因分型聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)技術(shù)在宮頸癌篩查中的應(yīng)用分析[J].安徽醫(yī)藥，2021,25（