食品微生物檢驗方法

食品微生物檢驗方法（FDA與ISO對比）內容提要：菌落總數檢測大腸菌群及大腸桿菌檢測金黃色葡萄球菌檢測沙門氏菌檢測單核細胞增生李斯特氏菌檢測菌落總數測定——菌落總數的概念菌落總數是指在被檢樣品的單位重量（g）、容積（ml）或表面積（cm2）內，所含能于某種固體培養(yǎng)基上，在一定條件下培養(yǎng)后所生成的菌落的總數。菌落總數測定——衛(wèi)生學意義判定食品被細菌污染的程度及衛(wèi)生質量。及時反映食品加工過程是否符合衛(wèi)生要求，為被檢食品衛(wèi)生學評價提供依據。通常認為，食品中細菌數量越多，則可考慮致病菌污染的可能性越大，菌落總數的多少在一定程度上標志著食品衛(wèi)生質量的優(yōu)劣。FDABAM菌落總數測定流程檢樣xg/mL+9xml稀釋液（磷酸鹽緩沖液）杏適當新十倍列稀釋關樣品輝選擇槍2~萍3間個連昂續(xù)適睡宜稀幣釋度其各取槍1m足L蛙分別符加入敏滅菌望平皿條內況（每志個稀祖釋度助做兩棟個平咐行）訪每皿緊內加隨入適彼量平寸板計楊數瓊超脂（嗽PC示A狡）構35捷湯℃前4催8流±端2啄h凡菌落賓計數亂FD拳A灑BA加M勾菌落昨計數康方法貝選擇竊25擾~2辭50群CF斯U雜之間喘的菌革落進破行計賴數，億計算閣公式邁如下獎：治N茅=柱∑彎C/幫（鋒1*潔n題1懇+0礎.1察*n域2片）并*d殼所有跑平板赤的菌核落數督都不庫足爹25晶CF復U沸，報柱告啄EA內PC辟/m雷l命（銷g為）為袍＜匯25總*1柜/d孝。緊E披AP嗓C行：慘es償ti昌ma雪te身d對ae崗ro榜bi第c異pl梁at速e兩co短un丸t即所有鏟平板仿的菌打落數撫都超每過奴25誕0C命FU剪，但乞不足催1擴0蜻0/獻cm懷2鋪，報泡告攻EA久PC登/m篩l譜（活g載）為眼最接咬近襲25垃0C稱FU賀的平支板菌鈴落數詳的估田計值斥，乘腹以相晃應的醬稀釋龜度。決所有秤平板柜的菌翼落數恐都超剛過邪10罵0/給cm肝2彩，計觀算平濫板的戰(zhàn)面積磨（直犯徑為劇90劉mm羽的平缺板面巧積為歡65稻cm兵2弄），銅估計鬧最高餅稀釋蘆度每佳cm待2重的菌卻落數索，乘群以相村應平答板面飛積作售為該識稀釋延度的杠菌落暈計數噴結果炭，報斗告拒EA橫PC單/m旅l板（累g嗽）為紐＞量65叨*1謙00豈*個1/譯d按。歐無法憲計數令的平晝板報向告凈LA渡（芽La隙bo俗ra屋to催ry怪A膛cc約id姑en四t形）。鵲最終夫結果轉保留嗽前兩貢位有夸效數聽字。佩按照梁4毯舍楊6提入，元5探是奇珍進偶財不進敏。紹IS儉O4果83育3-酷20白03掉啦菌落醒總數揉測定施流程悔檢樣示xg疤/m渠L+固9x倒ml瓶稀釋中液（認磷酸栗鹽緩表沖液仰）狠適當被十倍喬稀釋燕樣品忍選擇依2~鋼3阻個連貍續(xù)適敗宜稀尾釋度泛各取度1m份L日分別效加入捕滅菌押平皿區(qū)內逼（每組個稀料釋度蛙做兩鄰個平調行）圣每皿柏內加構入適畝量（辮12陸~1趕5m饑L諷）盤平板岡計數傾瓊脂蓮（己PC晝A工），陽30橋±上1?！嫔蹋?2個惑±趟3迅h杏菌落芽計數虧IS勸O4皂83訓3欲-2束00脈3創(chuàng)菌落昏計數店方法燥選擇什連續(xù)據2揮個稀訪釋度賓不超揪過獅30塌0C朝FU仆的平曾板，彩且一玉個平寧板至烏少含悲15償CF艷U漿進行藥計數劫，計錄算公蓄式如搏下：龍N撒=別∑源C/框（刃n付1蠶+0紅.1載*n潮2處）促*d金所有危平板淺的菌錯落數悶都不咽足脅15象CF否U公，計庸算虹2食平板樓菌落乏的算晚術平忘均值倆m脂，液涉體樣侮品：策N煩E攏=m責固體革樣品糕：招N透E班=m榜×滿d測-1披無菌零生長仿：液訂體樣咳品：沖le離ss粒t嘉ha血n師1;鵲具摩飾固體饒樣品泥：秧le圾ss鴿t冰ha年n烤1盜×嗽d束-1畏最終截結果經保留似前兩俗位有漆效數舅字。登菌落解總數獵測定身幾點織說明辱由于珍檢樣攏中采撫用棒30表/3串5朽℃?zhèn)冇醒趸顥l件榴下培蚊養(yǎng)，默因而按并不徒是樣逼品中憂實際猴的總葡活菌捉數，碎一些慘特殊級營養(yǎng)澆要求諸的細額菌、式厭氧枕菌、剃微需侄氧菌免、以浮及非坊嗜中扒溫細痰菌，粘均難擁以反爛映出權來。派鑒于須食品基檢樣擦中的叔細菌欄細胞猜是以掌單個言、成縣雙、術鏈狀與、葡蘇萄狀拔或成昨堆的頂形式煎存在當，因拐而在棋平板劈上出貴現的呀菌落貌可以近來源恥于細妨胞塊顛，也具可以獨來源鬧于單厘個細彼胞，散因而揭平板艷上所腦得菌蜂落的價數字超不應走報告榮活菌興數，幅而應代以單卷位重忘量、族容積望或表倡面積儀內的掙菌落臺數或濟菌落連形成陳單位節(jié)（抽co槐lo狠ny芬f凳or郵mi耐ng兇u傷ni淚ts怨，計CF扯U蜜）報穗告。荷菌落介總數海測定偉幾點厘要求瞇每個歐樣品傻從開傭始稀棒釋到榜傾注由最后定一個彼平皿才所用茄的時夕間不識得超縱過班15控mi碧n碗，主類要為舅防止唱細菌認增殖表和產鳥生片袍狀菌般落。盆樣液翠與瓊粒脂應連充分冷混合蒼，避疏免將助混合繪物濺楊到平乒皿壁狗和皿憑蓋上神。皿繭內瓊付脂凝納固后澡，不也要長揮時間織放置咬，然崖后倒盈置培傷養(yǎng)，列可避晨免菌組落蔓搭延生徹長。絹檢樣襯過程敬中應島用稀煎釋劑跡做空見白對芒照，槍用以學判定蘇稀釋缸液、林培養(yǎng)景基、齡平皿繁或吸凡管可風能存張在的江污染虎。同劈時，技檢樣淺過程謠中應唇在工蓬作臺垃上打蓄開一狀塊空新白平灣板計趟數瓊吩脂，調其暴覽露時響間應食與檢鄉(xiāng)樣時艷間相彼當，崗以了扇解檢遭樣在葵檢驗鍋操作默過程趨中有箏無受裳到來塘自空畏氣的橋污染聞。險檢樣造稀釋煤液有災時帶賞有食航品顆振粒，械為避刺免與溝細菌癢菌落慢發(fā)生螞混淆唉，可相作一蔑檢樣督稀釋曬液與秋平板段計數額瓊脂你混合諷的平滔皿，梢不經晚培養(yǎng)貨，于篇4貧℃疊放置怎，以允便在恭計數晉檢樣慚時用換作對胡照。彼大腸鼻菌群組的定戰(zhàn)義疲大腸立菌群吐系指式一群恢能發(fā)鋤酵乳儲糖、弟產酸葡產氣籮、需利氧和謝兼性劫厭氧競的革躍蘭氏擺陰性類無芽蕉孢桿遙菌。景大腸啄菌群漲不是幣細菌膛學上猶的分存類命改名，代而是旅根據暮衛(wèi)生漫學方泡面的哭要求蜘，提品出的婚與糞街便污棗染有苦關的店細菌興，即捉作為饞食品眠、水償體等梨是否孤受過神人畜低糞便志污染堅的指最示菌寧，這有些細體菌在拘生化沖及血鴨清學紫方面知并非油完全選一致固。根貼據進蹄一步臥的生雅化試趁驗，另可將拴這群盆細菌詞再分搜為大悼腸艾疑希氏熟菌（糖俗稱均大腸素桿菌末）、皇弗氏唱檸檬真酸桿才菌、券肺炎摘克雷悼伯氏飼菌和蘿陰溝素腸桿買菌等坡。悶大腸認桿菌贊的定閱義枝大腸裙桿菌誠（也朝稱大薦腸埃午希氏么菌）阿，分惑類于寬腸桿僑菌科健，歸北屬于刺埃希惱氏菌閉屬。聰大腸坐桿菌使指革筑蘭氏艦陰性燈無芽番孢桿句菌、懷乳糖惠發(fā)酵蒜產酸亂產氣統(tǒng)、廚IM類Vi真C賽試驗恐（靛洋基質弟、賢MR懼、兔V-酬P眾、檸勇檬酸窯鹽試赴驗）牢為呆++雜--蓮或拉-+搞--檢的細爛菌。涌與人治類有太關的鄙大腸歉桿菌替統(tǒng)稱漁為致釀瀉性騰大腸澆桿菌拳，包頑括五曾種：姥腸毒村素性喂大腸鞏桿菌秒（國ET豪EC撈）、俱致病盡性大暴腸桿肺菌（假EP古EC窮）、纏出血下性大寄腸桿濱菌（富EH呆EC血）、掀侵襲低性大摘腸桿弊菌（看EI集EC碌）、槳黏附欠性大評腸桿勺菌（睜EA餡EC寺）。撇衛(wèi)生棵學意寨義造大腸草菌群樹和大雄腸桿姐菌是而評價籌衛(wèi)生層質量弓的重鼓要指或標，徒作為懶食品宴中的就糞便仁污染伴指標俱。六食品丙中檢澤出大民腸菌陽群，昌表明這該食風品有豈糞便盲污染浴，既獅可能首有腸兇道致稿病菌頑存在田，因勝而也膠就有蓄可能倘通過跪污染絹的食妨品引翠起腸緞道傳觸染病沫的流騎行。幕大腸鄙菌群墊數的吸高低愛，表箱明了森糞便僚污染怨的程棚度，附也反誤映了糟對人奶體健墳康危秀害性條的大怖小。抖大腸甲桿菌慈在外鳥界存捏活時死間與吹一些鳳主要描腸道愿致病掉菌接烈近，理它的暮出現搖預示晨著某衣些腸僻道病擇原菌暮的存雷在，肉因此震該菌嫩是國鞏際上撐公認臘的衛(wèi)賊生監(jiān)痰測指焰示菌酒。近濟年來掃，有嶄些國略家在冒執(zhí)行輩HA癥CC包P暮管理艇中，鳴將大艱腸桿凍菌檢陷測作控為微季生物豆污染穿狀況橫的監(jiān)若測指耕標和袋HA今CC戚P鮮實施姻效果職的評竟估指劇標。保大腸截桿菌閉的生顆物學蹈特性澤基本熄形態(tài)認：情此菌匠為兩滾端鈍皇圓的斯短小完桿菌爽，一挎般約欺0.央5-撓0.誓8造μ頃m*草1.接0-惱3.月0腳μ惡m走，多妻單獨產存在其或成兔雙，影但不姓呈長磚鏈排鵝列。站約春50費%奔的菌結株有炒周生致鞭毛櫻，但匹多數禿只有追1-釀4益根，掩一般鳳不超曲過警10錫根，鮮故菌睬體動介力弱云。多憑數菌掠株有味菌毛遍，有剛的有館莢膜填或微潔莢膜屯，不賞形成傾芽孢生，對相普通奪堿性根染料殿著色選良好況，革拘蘭氏館染色統(tǒng)陰性刷。匠培養(yǎng)凡特性忘：納大腸掠桿菌強合成仆代謝繭能力乒強，記在含礎無機起鹽、敲銨鹽緊、葡父萄糖妹的普愈通培產養(yǎng)基成上生綠長良和好。礙最適些生長永溫度細為增37憶℃嚇，在佛42矩-4形4聯(lián)℃槍條件織下仍林能生鑒長，牌生長恩溫度鍛范圍鬼15瀉-4更6斧℃演。粉大腸賴菌群獎及大索腸桿木菌測耽定莖菠——糠MP脊N久法檢盞驗流蝕程（呢FD山A撓BA拒M徒）越檢樣俘50章g饞+4周50甜ml漸稀釋嶺液等適當茄十倍處稀釋米樣品息選擇卷3巖個適承宜的軌連續(xù)賤稀釋老度的住樣品違稀釋匯液，睜每個腫稀釋楊度接斃種三察管嘩LS享T樣肉湯資（每帝管班9m鞭lL緊ST謹肉湯訂并加雄有導嗓管）積，點每管其接種轎1m盆L西35粘℃呆，追24儀挪±恨2柄h術~4咳8簡±腔2桑h濱沒有焰產氣插管眠有產渴氣管倘報告斯陰性吧接種類BG者LB脫肉湯蛇管芽接種菊EC挽肉湯眾44熟.5羽±當0.證5鍋℃擺（水售浴培寇養(yǎng)）毯24斷回±史2既h石~4支8洽±前2詳h掙查玻MP烘N委表報梳告結沒果鮮產氣慚管接逮種冰EM慮B戴平板觸（唯35街℃峰、睬18筍~2漿4h騎）奪（大筍腸菌替群）獄從霞EM壘B尖平板尖上挑追取套5連個可憑疑菌沸轉接晌到皺PC逢A螺斜奏面，劉進行迫革蘭族氏染罷色、葛IM諸VC蹦生化物鑒定抓、接吧種桐LS螺T聽復檢絮產氣蓮查克MP威N尸表報虧告結機果（番大腸初桿菌甜）繞大腸劇菌群向測定辰——揭MP倒N南法檢窩驗幾昏點說幼明楚MP甚N凈檢索閥表：貨獻M牽PN油檢索叉表只肢給了扣三個透稀釋高度，勒如改蘿用不謙同的啄稀釋德度，場則表擺內數漿字應桌相應液降低鈴或增佛加怪10章倍。項初發(fā)舉酵和韻證實偵試驗摔：啊兵荷1誼）兩純步法純進行雁了兩導次乳認糖發(fā)瑞酵試楊驗?？铣醢l(fā)氣酵和歇證實底實驗化所用往培養(yǎng)達基不持同，心但都炸是為誘了證且實培攪養(yǎng)物婆是否路符合身大腸位菌群縮的定皺義，笨即河“竟在梨37另℃終分解皂乳糖午產酸潤產氣牌”巧。疑朝弟2示）初岡發(fā)酵餓陽性米管，恨不能狀肯定尋就是挨大腸鐮菌群牽細菌盒，經齊過證鉆實試熊驗后循，有設時可占能成栽為陰暴性。啞有數惜據表挽明，樓食品危中大肺腸菌通群檢壇驗步水驟的殼符合悟率，瘡初發(fā)欣酵與川證實墻試驗蹦相差傲較大鴨。因行此，促在實慮際檢觀測工厚作中肢，證懇實試犁驗是遣必需顆的?？赢a氣易量與么倒管裂：老在乳敏糖發(fā)仍酵試深驗工清作中罵，經順?？裳阋钥醇彽皆谟懓l(fā)酵送倒管靈內極迫微少朝的氣嘩泡（京有時削比小尖米粒賽還小促），店有時捎可以藝遇到豈在初倚發(fā)酵岡時產吩酸或診沿管衡壁有下緩緩宋上浮尼的小柿氣泡往。實鏟驗表轟明，盜大腸狀菌群橫的產懶氣量尸，多仁者可芽以使用發(fā)酵氧倒管漿全部耐充滿樓氣體羊，少悔者可閉以產控生比呢小米晝粒還曉小的渡氣泡末。如敬果對扎產酸菠但未砌產氣貿的乳善糖發(fā)恢酵如媽有疑夸問時腐，可裕以用閱手輕讀輕打方動試海管，羨如有忌氣泡勿沿管顫壁上淚浮，仗即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