直接計(jì)數(shù)法及酵母菌的測定食品微生物

直接計(jì)數(shù)法及酵母菌的測定食品微生物第一頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三Ppt出自江蘇食品學(xué)院

食品與營養(yǎng)工程學(xué)院

-----食檢112班楊雙茹(11)吳海珍(12)王婷(09)第二頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)方向分為1.目的要求2.實(shí)驗(yàn)原理3.實(shí)驗(yàn)器材4.操作方法及報(bào)告5.思考題第三頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三1.實(shí)驗(yàn)的目的要求:了解血球計(jì)數(shù)板測定微生物數(shù)量的原理.了解血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)，學(xué)習(xí)并掌握利用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行酵母菌記數(shù)的方法，包括樣品的點(diǎn)樣、菌數(shù)計(jì)數(shù)的方法與計(jì)算。第四頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三2.實(shí)驗(yàn)原理微生物常用的計(jì)數(shù)方法有兩種，即直接計(jì)數(shù)法和間接計(jì)數(shù)法。前者利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)，能立即得到數(shù)值。后者是在平板上長成菌落后再計(jì)數(shù)，反應(yīng)較真實(shí)，但費(fèi)時(shí)太長。第五頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三3.實(shí)驗(yàn)器材菌種：酵母菌液儀器：顯微鏡，血球計(jì)數(shù)板、蓋玻片（22mm*22mm）、吸水紙、計(jì)數(shù)器、滴管、擦鏡紙等。第六頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三4.酵母細(xì)胞數(shù)測定具體的操作方法血球計(jì)數(shù)板的構(gòu)造圖示第七頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三酵母菌數(shù)量的測定取潔凈的血球計(jì)數(shù)板一塊，在技術(shù)室上蓋一塊蓋玻片。搖勻酵母菌液，用滴管滴在計(jì)數(shù)板中間兩側(cè)的溝槽內(nèi)滴一滴，使?jié)B入計(jì)數(shù)室，勿產(chǎn)生氣泡，保證計(jì)數(shù)板干凈后，然后蓋上蓋玻片（勿產(chǎn)生氣泡）靜置五分鐘，先用低倍鏡找到計(jì)數(shù)室再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)時(shí)用16中格的計(jì)數(shù)板，要按對(duì)角線方位，取左上、左下、右上、右下的4個(gè)中格（即100小格）的酵母菌數(shù)。如果是25中格計(jì)數(shù)板。除數(shù)上述四格外，還需數(shù)中央1中格的酵母菌數(shù)（即80小格）。由于菌體在計(jì)數(shù)室中處于不同的空間位置，要在不同的焦距下才能看到，因而觀察時(shí)必須不斷調(diào)節(jié)微調(diào)螺旋，方能數(shù)到全部菌體，防止遺漏。如菌體位于中格的雙線上，計(jì)數(shù)時(shí)則數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右，以減少誤差凡酵母菌的芽體達(dá)到細(xì)胞大小一半時(shí)，可作為兩個(gè)菌體計(jì)算。血球計(jì)數(shù)板用后，應(yīng)用水洗干凈切勿洗刷，一面損壞網(wǎng)格刻度，洗凈后晾干即可。第八頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三第九頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)報(bào)告填入下列表格計(jì)數(shù)次數(shù)每個(gè)大方格均數(shù)稀釋倍數(shù)總菌數(shù)平均值12345第一次第二次第十頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三5.思考題根據(jù)你的體會(huì)，說明用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的誤差主要來自哪些方面？應(yīng)如