淋巴細胞及其亞群檢測的臨床意義新版課件

淋巴細胞及其亞群檢測的臨床意義一、概念來源于骨髓的淋巴樣干細胞，在胸腺中成熟的淋巴細胞，故稱胸腺依賴性淋巴細胞（thymus-dependentlymphocyte），簡稱T細胞。負責細胞免疫功能，參與抗腫瘤、抗細胞內感染微生物、移植排斥、遲發(fā)型超敏反應；對部分體液免疫發(fā)揮輔助功能。外周血：約占淋巴細胞總數的60%～80%；Lymphocytes外周血中占總淋巴細胞的60-80%二、T淋巴細胞的分化發(fā)育T細胞在胸腺中的發(fā)育T細胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育ThedevelopmentofTCRPositiveselectionNegativeselectionExtrathymicT-celldevelopment1、T細胞在胸腺中的發(fā)育三個重要事件三個重要結果三個階段雙陰性階段

(DN)

雙陽性階段

(DP)單陽性階段

(SP)TCR基因重排陽性選擇陰性選擇獲得功能性TCR獲得MHC限制性獲得自身耐受T細胞受體（TCR）的發(fā)育過程：DP細胞胸腺上皮細胞ThedevelopmentofTCR功能：具有輔助其他免疫細胞分化和調節(jié)免疫應答（促進和抑制）的作用。（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）CD8+T細胞IL-2、IFN-γ、TNF主要表面標記：CD8+CD28+二、T淋巴細胞的分化發(fā)育釋放穿孔素，顆粒酶殺傷靶細胞按T細胞的CD4和CD8分子表型主要表面標志：CD8+CD28-初始T細胞（naiveTcell）對免疫應答有重要的負調節(jié)功能部位：胸腺皮髓質交界處及髓質區(qū)。初始T細胞（naiveTcell）T細胞發(fā)育過程中的陰性選擇(negativeselection)功能：具有輔助其他免疫細胞分化和調節(jié)免疫應答（促進和抑制）的作用。T細胞表面CD分子表達不同表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）、、、四種肽鏈基因的重排與表達，形成TCR和TCR，將T細胞分為TCR和TCR兩種類型。CD3分子的低度表達結果：獲得功能性TCRCD3+CD4+CD8-SP

SP細胞

部位：胸腺皮質。過程：DP細胞胸腺上皮細胞

(TCR、CD4+CD8+)

(抗原肽-自身MHC分子復合物)適當親和力發(fā)生結合不能發(fā)生有效結合或結合親和力過高結合MHC-Ⅰ類分子CD3+CD4-CD8+SP

凋亡結合MHC-Ⅱ類分子結果：單陽性細胞（SP）、獲得自身MHC限制性。T細胞發(fā)育過程中的陽性選擇(positiveselection)部位：胸腺皮髓質交界處及髓質區(qū)。過程：SP細胞胸腺樹突狀細胞、巨噬細胞

（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）高親和力結合不結合或低親和力結合凋亡刪除存活結果：成熟的SP、獲得自身（中樞）免疫耐受。T細胞發(fā)育過程中的陰性選擇(negativeselection)CD4+/CD8+的比值過程：SP細胞胸腺樹突狀細胞、巨噬細胞數量多，CD4+或CD8+（SP細胞）過程：DP細胞胸腺上皮細胞初始T細胞（naiveTcell）4）CD4+/CD8+的比值TCR+T細胞2、TCRαβT細胞和TCRγδT細胞TCR+T細胞過程：DP細胞胸腺上皮細胞評價那些自身免疫失調或被懷疑是免疫失調或已知患有免疫缺陷的病人的免疫狀態(tài)，此外，這一比值還可用來監(jiān)測骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻擊1）T淋巴細胞（CD3+）Lymphocytes腫瘤終未期患者CD4/CD8比值異常，可預測患者存活期。外周血中占總淋巴細胞的60-80%Negativeselection3、CD4+T細胞和CD8+T細胞惡性腫瘤患者術前CD4/CD8比值低與術后比值恢復正常。主要表面標志：CD8+CD28-IL-2、IFN-γ、TNF主要表面標志：CD8+CD28-Th（helpTcell）2、T細胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育初始T細胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依賴區(qū)T細胞在外周淋巴器官與抗原接觸后，最終分化為具有不同效應功能的T細胞亞群，效應T細胞和記憶T細胞。三、T淋巴細胞亞群按T細胞所處的活化階段初始T細胞（naiveTcell）效應T細胞（effectorTcell）記憶性T細胞（memoryTcell）按TCR的表型分類TCR+

T細胞TCR+

T細胞按T細胞的CD4和CD8分子表型CD4+T細胞CD8+T細胞按T細胞的功能分類Th（helpTcell）Tc/CTL（cytotoxicTcell）Tr（regulatoryTcell）1、初始T細胞、效應T細胞和記憶T細胞初始T細胞表型：CD45RA+、CD62L+、CD25-（IL-2R）特點：未接觸抗原的成熟T細胞，有分化潛能效應T細胞遷往炎癥部位，執(zhí)行細胞免疫效應記憶性T細胞表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）特點：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化1、根據CD4和CD8分子表達，可將成熟T細胞分為CD4+CD8-或CD4-CD8+細胞；2、根據CD4+細胞所表達CD45分子異構體，可分為CD45RA+和CD45RO+T細胞，兩者分別是初始T細胞(naiveTcell,Tn)和記憶性T細胞(memoryTcell,Tm)的重要表型。T細胞表面CD分子表達不同2、TCRαβT細胞和TCRγδT細胞TCRγδT細胞數量少，占5％多為CD4―CD8―（DN細胞）；少數為CD8+分布于皮膚、粘膜參與固有免疫，是抗感染的第一線細胞TCRαβT細胞數量多，CD4+或CD8+（SP細胞）TCR識別譜廣，是參與免疫應答的主要細胞群3、CD4+T細胞和CD8+T細胞兩者通常是針對TCRαβT細胞而言CD4+T細胞約占60～65％受MHCⅡ類分子限制主要分化為ThCD8+T細胞約占30～35％受MHCⅠ類分子限制主要分化為CTL4、Th、CTL、Ts和Treg細胞輔助性T細胞（Th）主要表面標記：CD4＋CD8-主要種類：TH1，TH2功能：具有輔助其他免疫細胞分化和調節(jié)免疫應答（促進和抑制）的作用。細胞毒性T細胞（CTL）主要表面標記：CD8+CD28+功能：特異性直接殺傷靶細胞殺傷機制：釋放穿孔素，顆粒酶殺傷靶細胞通過Fasl介導靶細胞的凋亡TH1TH2分泌CKsIL-2、IFN-γ、TNFIL-4、5、6、10CKs作用介導細胞毒和局部炎癥有關的免疫應答,輔助抗體生成,參與細胞免疫及遲發(fā)型超敏性炎癥的發(fā)生促進B細胞增殖、成熟和促進抗體生成，與體液免疫有關生物學功能介導細胞免疫引起遲發(fā)型超敏反應(TDTH)輔助體液免疫抗寄生蟲感染抑制性T細胞（Ts）主要表面標志：CD8+CD28-功能：對免疫應答有重要的負調節(jié)功能，抑制性T細胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應等疾病發(fā)生有關。調節(jié)性T細胞（Treg）主要表面標記：CD4+CD25+功能：抑制免疫應答可能的機制有：直接接觸；分泌抑制性CKs；此外，抑制CKs分泌，抑制APC等。效應T細胞（effectorTcell）CD4+/CD8+的比值對免疫應答有重要的負調節(jié)功能外周血中占總淋巴細胞的60-80%過程：DP細胞胸腺上皮細胞1、T細胞在胸腺中的發(fā)育CD4+/CD8+的比值1、初始T細胞、效應T細胞和記憶T細胞（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）部位：胸腺皮髓質交界處及髓質區(qū)。CD8+T細胞初始T細胞（naiveTcell）CD4+和CD8+T細胞有助于監(jiān)測患有免疫缺陷疾病（如SCID、AIDS的病人體內CD4+細胞亞群的百分率相對降低，而CD8+群體的百分率相對升高），自身免疫性疾?。ㄈ缭赟LE病人中，CD8+淋巴細胞的相對百分比往往會降低，但當使用類固醇藥物治療時，也可能上升。Tr（regulatoryTcell）主要表面標志：CD8+CD28-結果：成熟的SP、獲得自身（中樞）免疫耐受。T細胞受體（TCR）的發(fā)育特點：未接觸抗原的成熟T細胞，有分化潛能評價那些自身免疫失調或被懷疑是免疫失調或已知患有免疫缺陷的病人的免疫狀態(tài)，此外，這一比值還可用來監(jiān)測骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻擊功能：對免疫應答有重要的負調節(jié)功能，抑制性T細胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應等疾病發(fā)生有關。初始T細胞（naiveTcell）小結ThCTLTsTreg表面標記CD3+CD4＋CD8+CD28+CD8+CD28-CD4+CD25+主要功能介導細胞免疫引起遲發(fā)型超敏反應、輔助體液免疫抗寄生蟲感染特異性直接殺傷靶細胞對免疫應答有重要的負調節(jié)功能抑制免疫應答四、T淋巴細胞亞群檢測的臨床意義通過T淋巴細胞亞群的檢測可了解在不同情況下體內免疫功能狀態(tài)，輔助臨床疾病的診斷，探索疾病的發(fā)病機理、病程、預后，監(jiān)測、指導臨床治療方案。目前主要可以做以下項目的檢測

1）T淋巴細胞（CD3+）2）CD4+細胞3）CD8+細胞4）CD4+/CD8+的比值

總T淋巴細胞可以結合總B淋巴細胞來判斷某些免疫缺陷和自身免疫性疾病。CD4+和CD8+T細胞有助于監(jiān)測患有免疫缺陷疾?。ㄈ鏢CID、AIDS的病人體內CD4+細胞亞群的百分率相對降低，而CD8+群體的百分率相對升高），自身免疫性疾?。ㄈ缭赟LE病人中，CD8+淋巴細胞的相對百分比往往會降低，但當使用類固醇藥物治療時，也可能上升。在急性GVHD和移植排斥中，CD8+淋巴細胞所占的比例有可能在正常人的范圍之外）CD4+/CD8+的比值評價那些自身免疫失調或被懷疑是免疫失調或已知患有免疫缺陷的病人的免疫狀態(tài)，此外，這一比值還可用來監(jiān)測骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻擊CD4/CD8升高：自身免疫性疾病，如類風濕性關節(jié)炎、SLE。CD4/CD8降低：病毒感染、惡性腫瘤、再生障礙性貧血等。CD4/CD8比值與腫瘤惡性腫瘤患者術前CD4/CD8比值低與術后比值恢復正常。當發(fā)生癌轉移時,CD3、CD4細胞數明顯減少的同時CD8細胞數明顯增多,CD4/CD8比值明顯降低,提示惡性腫瘤患者晚期細胞免疫功能更低,預后更差。腫瘤終未期患者CD4/CD8比值異常，可預測患者存活期。常見疾病與T細胞免疫檢測關系疾病CD3+CD4+CD8+CD4/CD8腫瘤↓↓↓↓↑↑↓↓再生障礙性貧血↑粒細胞減少癥↓↑↓過敏性皮炎↓↓↓類風濕↑（活動期）↓↑紅斑狼瘡↓（活動期）↑↓↑膜性腎小球腎炎↓↑胰島素依賴性糖尿病↑↓乙型肝炎急性/慢性↑↓疾病 CD3+ CD4+ CD8+CD4/CD8自身溶血性貧血↑上呼吸道感染↓↑↑傳染性單核細胞增多癥↑（急性期）↓巨細胞病毒感染↓↑↓乙肝↑結核病↑瘧疾↓血吸蟲病↓獲得性免疫缺陷綜合癥↓↓初始T細胞（naiveTcell）TCR+T細胞3、CD4+T細胞和CD8+T細胞初始T細胞（naiveTcell）對免疫應答有重要的負調節(jié)功能過程：SP細胞胸腺樹突狀細胞、巨噬細胞初始T細胞（naiveTcell）外周血：約占淋巴細胞總數的60%～80%；過程：DP細胞胸腺上皮細胞四、T淋巴細胞亞群檢測的臨床意義對部分體液免疫發(fā)揮輔助功能。四、T淋巴細胞亞群檢測的臨床意義CD4/CD8降低：病毒感染、惡性腫瘤、再生障礙性貧血等。T細胞發(fā)育過程中的陰性選擇(negativeselection)多為CD4―CD8―（DN細胞）；、、、四種肽鏈基因的重排與表達，形成TCR和TCR，將T細胞分為TCR和TCR兩種類型。特點：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化結果：單陽性細胞（SP）、獲得自身MHC限制性。對免疫應答有重要的負調節(jié)功能對免疫應答有重要的負調節(jié)功能Tr（regulatoryTcell）功能：對免疫應答有重要的負調節(jié)功能，抑制性T細胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應等疾病發(fā)生有關。主要表面標志：CD8+CD28-過程：DP細胞胸腺上皮細胞結果：單陽性細胞（SP）、獲得自身MHC限制性。淋巴細胞及其亞群檢測的臨床意義1、T細胞在胸腺中的發(fā)育TCR+T細胞TCR+T細胞T細胞發(fā)育過程中的陰性選擇(negativeselection)初始T細胞（naiveTcell）功能：具有輔助其他免疫細胞分化和調節(jié)免疫應答（促進和抑制）的作用。外周血中占總淋巴細胞的60-80%引起遲發(fā)型超敏反應(TDTH)功能：特異性直接殺傷靶細胞過程：SP細胞胸腺樹突狀細胞、巨噬細胞2、T細胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育四、T淋巴細胞亞群檢測的臨床意義外周血中占總淋巴細胞的60-80%主要表面標志：CD8+CD28-CD4/CD8比值與腫瘤T細胞在外周淋巴器官與抗原接觸后，最終分化為具有不同效應功能的T細胞亞群，效應T細胞和記憶T細胞。四、T淋巴細胞亞群檢測的臨床意義總T淋巴細胞可以結合總B淋巴細胞來判斷某些免疫缺陷和自身免疫性疾病。CD4+T細胞對免疫應答有重要的負調節(jié)功能T細胞受體（TCR）的發(fā)育CD4+/CD8+的比值初始T細胞（naiveTcell）（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）調節(jié)性T細胞（Treg）2、根據CD4+細胞所表達CD45分子異構體，可分為CD45RA+和CD45RO+T細胞，兩者分別是初始T細胞(naiveTcell,Tn)和記憶性T細胞(memoryTcell,Tm)的重要表型。T細胞受體（TCR）的發(fā)育淋巴細胞及其亞群檢測的臨床意義T淋巴細胞亞群的正常參考值4）CD4+/CD8+的比值特點：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）過程：DP細胞胸腺上皮細胞外周血：約占淋巴細胞總數的60%～80%；過程：DP細胞胸腺上皮細胞功能：對免疫應答有重要的負調節(jié)功能，抑制性T細胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應等疾病發(fā)生有關。功能：具有輔助其他免疫細胞分化和調節(jié)免疫應答（促進和抑制）的作用。CD4+/CD8+的比值2、T細胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育主要表面標志：CD8+CD28-特點：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化主要表面標記：CD8+CD28+外周血：約占淋巴細胞總數的60%～80%；主要表面標志：CD8+CD28-4、Th、CTL、Ts和Treg細胞對免疫應答有重要的負調節(jié)功能表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）T細胞發(fā)育過程中的陽性選擇(positiveselection)1、初始T細胞、效應T細胞和記憶T細胞功能：對免疫應答有重要的負調節(jié)功能，抑制性T細胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應等疾病發(fā)生有關。2、T細胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育CD3+CD4+CD8-SP4）CD4+/CD8+的比值按T細胞所處的活化階段結果：獲得功能性TCR過程：DP細胞胸腺上皮細胞IL-2、IFN-γ、TNFT淋巴細胞亞群的正常參考值TCR+T細胞T細胞表面CD分子表達不同過程：DP細胞胸腺上皮細胞CD3+CD4-CD8+SP結果：單陽性細胞（SP）、獲得自身MHC限制性。主要表面標記：CD8+CD28+功能：特異性直接殺傷靶細胞對免疫應答有重要的負調節(jié)功能介導細胞毒和局部炎癥有關的免疫應答,輔助抗體生成,參與細胞免疫及遲發(fā)型超敏性炎癥的發(fā)生初始T細胞（naiveTcell）1、初始T細胞、效應T細胞和記憶T細胞IL-4、5、6、10不能發(fā)生有效結合或結合親和力過高CD3+CD4+CD8-SP主要表面標志：CD8+CD28-T細胞受體（TCR）的發(fā)育常見疾病與T細胞免疫檢測關系1）T淋巴細胞（CD3+）初始T細胞（naiveTcell）惡性腫瘤患者術前CD4/CD8比值低與術后比值恢復正常。特點：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化兩者通常是針對TCRαβT細胞而言CD4/CD8升高：自身免