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血栓與止血實(shí)驗(yàn)檢查幻燈課件第一頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三第一節(jié)血栓與止血的篩選檢驗(yàn)一、一期止血缺陷的篩選檢驗(yàn)二、二期止血缺陷的篩選檢驗(yàn)三、纖溶活性增強(qiáng)的的篩選檢驗(yàn)四、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)第二頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三一期止血的篩查檢驗(yàn)
出血時(shí)間測(cè)定血小板計(jì)數(shù)束臂試驗(yàn)血塊收縮試驗(yàn)毛細(xì)血管抵抗力試驗(yàn)
第三頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三
血小板計(jì)數(shù)(plateletcount,PC或plt)
正常值:(100~300)×109/L危險(xiǎn)PC<20×109/L可引起自發(fā)性出血第四頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三出血時(shí)間測(cè)定
bleedingtime,BT一、原理:測(cè)定在皮膚受特定條件外傷后,出血自然停止所需的時(shí)間即為出血時(shí)間。此過(guò)程反映了毛細(xì)血管與血小板的相互作用,包括內(nèi)皮下組織與血小板粘附(通過(guò)vWF的作用)、血小板的聚集和釋放等反應(yīng),以及PGI2與TXA2的動(dòng)態(tài)平衡。第五頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三二、方法
Ivy法、出血時(shí)間測(cè)定器法(衛(wèi)生部推薦方法)三、試劑與器材:
1、血壓計(jì),秒表,干凈濾紙2、出血時(shí)間測(cè)定器
第六頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三四、操作:
1、
血壓計(jì)袖帶縛于測(cè)定上肢的上臂,加壓并維持在40mmHg,兒童減半。2、在肘前窩下5cm處的尺側(cè)做局部消毒后,將測(cè)定器垂直貼于皮膚表面,按下按鈕,同時(shí)啟動(dòng)秒表,移開(kāi)測(cè)定器。3、每隔30s,用干凈濾紙吸去流出的血液,直至流血自然停止,并記錄秒表讀數(shù)。第七頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三五、參考值:2.5-9.5min六、臨床意義:
延長(zhǎng):
1、出血時(shí)間延長(zhǎng)見(jiàn)于血小板減少癥2、血小板功能異常3、血管性血友病4、血管壁異常5、某些嚴(yán)重的凝血因子缺乏縮短:高凝狀態(tài)和血栓性疾病第八頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三血小板檢測(cè)一、血小板生存時(shí)間檢測(cè)二、血小板相關(guān)抗體檢測(cè)三、血小板粘附試驗(yàn)四、血小板聚集試驗(yàn)五、血小板第3因子有效性檢測(cè)六、血小板膜糖蛋白檢測(cè)七、血小板活化指標(biāo)檢測(cè)(血漿β-TG、PF4、血小板P選擇素檢測(cè))第九頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三誘聚劑PPPPRP血小板聚集試驗(yàn)
plateletaggregationtset,PAgT第十頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三第十一頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三臨床意義:血小板無(wú)力癥、巨大血小板綜合癥、血小板貯存池病、低(無(wú))纖維蛋白原血癥、肝硬化、使用血小板抑制劑等。高凝狀態(tài)、血栓形成性疾病、糖尿病、口服避孕藥、人工瓣膜移植術(shù)、吸煙等。聚集率減低聚集率增高第十二頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三質(zhì)量控制:
1.采血要順利,避免組織液混入,抗凝劑使用合理(不用EDTA抗凝)2.采集后3h內(nèi)室溫下完成3.試驗(yàn)前十天停用一切抑制血小板聚集的藥物;試驗(yàn)前禁食高脂類(lèi)食物4.注意PRP:800~1000r/min離心10minPLT(200~400)X109/LPPP:3000r/min離心20minPLT<20X109/L第十三頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三
血小板粘附試驗(yàn)
plateletadhensiontest,PAdT原理:受檢者血液一定速度通過(guò)一定量玻璃珠的塑料管,測(cè)定通過(guò)玻璃珠前后血液中血小板數(shù)的差值,即為粘附于玻珠和塑料管的血小板數(shù),由此可計(jì)算出其占血小板總數(shù)的百分比,即為血小板粘附率。方法:玻球法、玻璃濾器法、玻珠法第十四頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三臨床意義:
血管性血友病、巨大血小板綜合癥、血小板無(wú)力癥、肝硬化、MDS、急性白血病、服用抗血小板藥物等見(jiàn)于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病、妊高癥、口服避孕藥等粘附率減低粘附率增高第十五頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三二期止血缺陷的篩選檢驗(yàn)全血凝固時(shí)間測(cè)定活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定第十六頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定
activatedpartialthromboplastintime,APTT一、原理第十七頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三APTT
Ca2+腦磷脂白陶土
Ca2+腦磷脂部分凝血活酶第十八頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三
二、操作(一)APTT手工法(試管法)血漿0.1ml+APTT試劑各0.1ml+CaCl20.1ml(混勻計(jì)時(shí))結(jié)果觀察:緩慢傾斜試管,觀察液體流動(dòng)狀態(tài),流動(dòng)停止停止計(jì)時(shí)
參考值25~45s(二)儀器法
37℃水浴5min37℃溫浴第十九頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三APTT延長(zhǎng)縮短因子VIII、IX、XI活性減低高凝狀態(tài)三、臨床意義
肝素抗凝監(jiān)測(cè)第二十頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三APTT糾正試驗(yàn)
于患者血漿中分別加入1/4的正常新鮮血漿、硫酸鋇吸附血漿、正常血清,再作APTT試驗(yàn)。硫酸鋇吸附血漿VIII、XI、XII正常血清IX、XI、XII新鮮血漿VIII、IX、XI、XII第二十一頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三血友病甲血友病乙FⅪ缺乏正常血漿硫酸鋇吸附血漿(缺Ⅸ)正常血清(缺Ⅷ)APTT糾正試驗(yàn)----血友病糾正不糾正糾正糾正糾正糾正不糾正患者血漿糾正糾正第二十二頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三凝血酶原時(shí)間測(cè)定Prothrombintime,PT一、原理
Ca2+腦磷脂PT組織因子Ca2+
磷脂第二十三頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三
1、直接報(bào)告患者及正常對(duì)照的PT秒數(shù)2、報(bào)告凝血酶原時(shí)間比值(PTR)PTR=受檢者PT(秒)/正常對(duì)照PT(秒)3、報(bào)告國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)INR=PTRISI二、報(bào)告方式第二十四頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三PT延長(zhǎng)縮短因子II、V、VII、X、Fg活性減低高凝狀態(tài)三、臨床意義
口服雙香豆素類(lèi)抗凝藥物監(jiān)測(cè)第二十五頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三要保證止凝血檢驗(yàn)的質(zhì)量
必須做好以下十點(diǎn):1.采血須順利,盡量用大號(hào)針頭,動(dòng)作要輕柔;2.標(biāo)本用加蓋有刻度標(biāo)記的塑料試管或硅化管收集;3.抗凝劑用109mmol/L的枸櫞酸鈉,抗凝劑與血液的比例為1:9;第二十六頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三當(dāng)Hct增高>55%或<25%時(shí),務(wù)必對(duì)抗凝劑用量或濃度進(jìn)行調(diào)整:抗凝劑用量(ml)=0.00185x全血量(ml)x[1-Hct(%)]紅細(xì)胞壓積(%)枸櫞酸鈉溶液(%)<105.6310-205.3220-553.1355-602.6960-702.19>701.57第二十七頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三4.標(biāo)本采集至檢驗(yàn)時(shí)間PT<4小時(shí),APTT<2小時(shí),一些因子活性檢測(cè)要求即刻試驗(yàn);5.使用儀器推薦或配套的試劑,使用時(shí)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū),注意有效期和穩(wěn)定性;6.反應(yīng)溫度控制在(37±1)℃;7.手工操作必須做正常對(duì)照,復(fù)管檢測(cè);8.正確使用正常對(duì)照血漿及參比血漿;9.每天堅(jiān)持室內(nèi)質(zhì)控,積極參加室間質(zhì)評(píng);10.建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。第二十八頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三凝血因子檢驗(yàn)一、凝血酶原消耗試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)二、簡(jiǎn)易凝血活酶生成試驗(yàn)及糾正試驗(yàn)三、血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性檢測(cè)四、血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性檢測(cè)五、凝血因子ⅩIII定性試驗(yàn)和亞基抗原檢測(cè)第二十九頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三纖溶活性篩選檢驗(yàn)優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間血清纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物檢測(cè)血漿D-二聚體檢測(cè)血漿硫酸魚(yú)精蛋白副凝固試驗(yàn)第三十頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三血清纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物測(cè)定
fibrin/fibrinogenproduct,F(xiàn)DP一、原理:膠乳凝集法:在受檢血清中加入特異性抗纖維蛋白(原)D、E片段抗體標(biāo)記的膠乳顆粒懸液,如果血清中含有纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDP),特別是D、E片段,即可發(fā)生抗原抗體反應(yīng),導(dǎo)致膠乳顆粒凝集。第三十一頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三二、臨床意義:
1、血清FDP輕度增高10-40mg/L,見(jiàn)于急性靜脈血栓、急性心梗、嚴(yán)重肺炎大手術(shù)后、惡性腫瘤、休克等。2、血清FDP明顯增高>40mg/L,見(jiàn)于原發(fā)性纖溶癥、DIC、M3、應(yīng)用鏈激酶等溶栓治療時(shí)。第三十二頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三血漿D-二聚體測(cè)定
D-Dimer一、原理:
1、膠乳凝集法2、ELISA法二、臨床意義:
1、DIC時(shí)呈陽(yáng)性或明顯增高,另見(jiàn)深靜脈血栓、心梗、肺栓塞、重癥肝炎等2、可作為原發(fā)纖溶和繼發(fā)纖溶鑒別的重要依據(jù)。第三十三頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三第三十四頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三生理性抗凝蛋白檢驗(yàn)一、抗凝血酶檢測(cè)1、血漿抗凝血酶活性檢測(cè)2、血漿抗凝血酶抗原檢測(cè)二、蛋白C檢測(cè)1、血漿蛋白C活性檢測(cè)2、血漿蛋白C抗原檢測(cè)三、血漿蛋白S抗原檢測(cè)四、組織因子途徑抑制物檢測(cè)第三十五頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三病理性抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)一、復(fù)鈣交叉試驗(yàn)二、凝血酶時(shí)間檢測(cè)及甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn)三、普通肝素和低相對(duì)分子質(zhì)量肝素檢測(cè)四、凝血因子Ⅷ抑制物檢測(cè)五、狼瘡抗凝物質(zhì)的篩選試驗(yàn)和確診試驗(yàn)第三十六頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三凝血酶時(shí)間測(cè)定及甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn)
thrombintime,TT
一、原理:
凝血酶TT第三十七頁(yè),共四十頁(yè),編輯于2023年,星期三二、結(jié)果判斷:
正常人凝血酶時(shí)間一般在16-18s,超過(guò)正常對(duì)照3s或在20s以上視為延長(zhǎng);如正常對(duì)照在20s以上,則超過(guò)5s為
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