大三上細胞生物學粗面內質網(wǎng)功能

RER白蛋白，所以必須有極好的機制進行分選定位，這就是信號肽假說。（membrane-boundedribosome）為了研究內質網(wǎng)上合成的蛋白質是否進入了內質網(wǎng)的腔，ColvinRedman和DavidGünterBlobel內質網(wǎng)結合，并將合成的蛋白質插入內質網(wǎng)？對此，大學的GünterBlobel、DavidSabatiniBernhardDobberstein1971N-端含有一段特別的信號序列（signalsequence），可將多肽和核糖ERERER1972，CésarMilstein（IgG）輕鏈合成時獲得了信號序列存在的直接，證明Blobel等的建議是正確的。他們用分離純化的mRNA泌到細胞外的成免疫球蛋白在N端有一段多出的肽鏈，它有20個氨基酸，他們推IgGG.Blobel、B.Dobberstein、P.Walter加與不加RER小泡，產(chǎn)物不同當將分泌蛋白的mRNA在無細胞體系中進行翻譯時，如果不加粗面內質網(wǎng)（微粒體），獲得的翻譯產(chǎn)物比從細胞中分泌出來的蛋白要長，若添加RER小泡，翻譯的產(chǎn)物長度與從活細胞分泌的蛋白相同。因此推測信號序列在引導蛋白進 蛋白的N-端沒有信號序列（圖9-16）。圖9-16信號序列在分泌蛋白質中的作RERN-端有信號序列，故比從細胞中分泌出來的相同蛋白質肽鏈長；（b）RERRER（RER）加入鏈是邊合成邊的，因為去垢劑能夠破壞內質網(wǎng)的膜，使合成的蛋白質于蛋白水解系（不含RER小泡）中進行翻譯，發(fā)現(xiàn)：短時間溫育，即可得到成分泌蛋白（無信號序列），而長時間的溫育，得到的產(chǎn)物N-端有信號序列，這一結果證明了信號序列的功G.Blobel、B.Dobberstein、P.Walter6～12質網(wǎng)后通常被切除（9-17）。9-17ER1975G.BlobelB.Dobberstein假說（signalhypothesis），要點是：信號假說證明：重組實科學家在編碼該蛋白的上接上一段編碼E.coli分泌蛋白β-半乳糖透性酶（β-lactamase）的信號序列DNA，然后將該加入到無細胞的轉錄和翻譯體系中，并加入ERER的貢獻，使他獲得了1999年醫(yī)學獎。信號識別顆粒（signalrecognitionpartical1981（signalrecognitionpartical，SRP），是一種核9kDa67S（300）scRNA（9-18）9-18（SRP）（dockingprotein，SRPSRP補充修改后的信號假說比早期的信號假說更為合理，這一假說的內容是：核糖體同內質網(wǎng)的結合受制于mRNA中特定的序列（可以翻譯成信號肽），具有這種序SRP9-19GTP-GDP（translocon）號序列與之結合（9-20）。GTP水解作為信號序列轉運的能量來源。起始轉移信號（start-transferSRP識別外，還具有起始穿膜轉移的作通道。［醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整理］內含信號序列（internalsignalsequence）內含信號序列又稱內含信號肽（internalsignalpeptides），N-末端，但具信號序列的作用，故稱為內含信號序列SRP單次跨膜蛋白（9-21）。9-21SRP白。（a）因停止轉移信號的作用而形成單次跨膜的蛋白，那么該蛋結構上只有一個停止轉移信號序列，沒有內含轉移信號，但在N-端有一個信號序列作為轉移起始信號（9-9-22該蛋N-末端信號序列的作用下進行共翻譯轉運，當停止轉移信號進入通道后，與通道內的結合位點相互作用，使通道轉運蛋白失活，從而停止蛋白質的轉運。由于N-末端9-23Bip（heavy-chainbindingprotein）聚合（9-24）。9-24BipERBipER疊。結合有蛋白質的BipATP的，BipBipBipDNA技術，將酵母中編碼Bip蛋白的突變成溫度敏感型后，當提高細胞培養(yǎng)溫度時，BipERBipER中的，抑制了新生肽向ER的轉移。ERN-連接糖基化（N-linked糖基化的第一步是將一個14糖的寡聚糖添加到新形成多肽鏈的天冬氨酸上，其氨Asn-X-Ser/Thr（X），由于糖是同天冬酰胺的自NH2N-連接的糖基化（9-25）。9-25ERN形成脂錨定蛋白［新合成的蛋白質除了成為跨膜蛋白或ER腔中的游離蛋白外，還會通過酰基化同ER膜上的糖脂結合，將自己錨定在ER膜上。圖9-26是新合成的ER蛋白被信號肽酶從ER上切割之后，立即通過羧基端與已存在于ER膜上的糖基磷脂酰肌醇共價結合，形成脂錨定蛋白 ER構成線粒體的蛋白主要是核編碼的，少量是線粒體編碼的，無論是核還是線粒體編碼的蛋白質都要轉運定位。線粒體有四個組成部分，其中有兩層膜，所以由細胞質核糖體合成的蛋白質轉運到線粒體基質必須穿過兩層膜（圖7-13）。7-13線粒體基質蛋白（mitochondrialmatrixprotein）轉運過程十分復雜（7-14）。7-14cN質導向序列（matrix-targetingsequence），其后還有第二個導向序列，即膜間隙導向序列（intermembrane-space-targetingsequence），功能是將蛋白質定位于內膜或膜間隙，這類蛋白有兩種轉運定位方式。［醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整理］保守性尋靶（conservativetargeting）前體蛋N-端的基質導向序列引導下N轉肽酶將膜間隙導向序列切除（7-15）。7-15非保守性尋靶（nonconservativesequence）錨定在內膜上，從而了蛋白質的C-末端穿過內膜進入線粒體基質；然后構型（7-16）。7-167-17P70P70的N-端有一個短的基質導向序列，緊隨其后是一段較長的、強疏水性氨基酸序列。實驗中，如果將疏水性氨基酸序列缺失，P70運信號，既防止了外膜蛋白進入線粒體基質，又作為錨定序列將外膜蛋白錨定在外膜7-17一部分也要通過體向細胞質膜等部位。因此，體是細胞內物質的交爾基體的順面，小泡與順面體網(wǎng)絡融合之后，轉運的蛋白質進入體腔，這到內質網(wǎng)（9-29）。圖9-29體和ER間的雙向的模從ER出芽形成的小泡到體順面稱為正向，從體形成的小泡都可獨立ER。內質網(wǎng)滯留信號（ERretention芽時被錯誤地包進分泌泡而離開了ER，復合體膜上的這種信號受體蛋白就會與逃ERERER（9-30）。9-30KDELERKDELERKDEL基體的順面膜囊和ER到體順面小泡上。主要作用是識別KDEL信號并與之結ERER.小泡與體膜囊的融合和出芽都是發(fā)生在兩側（圖9-31），該過程伴隨有蛋白質的各圖9-31穿梭小泡從順面體網(wǎng)絡向體網(wǎng)絡移測。后來由JamesRothman和LelioOrci通過無細白質合成體系獲得了實驗證明JamesRothman和LelioOrci怎樣通過實驗證爾基體的中間膜囊具有蛋白質轉運蛋白質的N-連接糖基化是在內質網(wǎng)中進行的，而對糖基的修飾則是在體中完對于進入到體的糖蛋白來說，形成高甘露糖基寡聚糖側鏈所需的修飾比較簡3分子的葡萄糖即可（9-32）RER9-3252N-乙酰葡萄糖胺、22（9-33），有時還要加上巖藻糖。圖9-33哺乳動物體中進行的N-連接糖基化修飾過O-連接的糖基化（O-linked體中進行的另一種蛋白質的糖基化是O-連接的糖基化，將糖鏈轉移到多肽鏈