人類染色體技術(shù)

人類染色體技術(shù)第一頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六遺傳病基因病(genicdisease）染色體?。╟hromosomaldisease）單基因病（monogenicdisease）多基因?。╬olygenicdisease）常染色體病性染色體病體細胞遺傳病線粒體遺傳病第二頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六前言

染色體（chromosome）

是遺傳物質(zhì)(基因)的載體。它由DNA和蛋白質(zhì)等構(gòu)成，具有儲存和傳遞遺傳信息的作用。

染色質(zhì)和染色體實質(zhì)上是同一物質(zhì)在不同細胞周期、執(zhí)行不同生理功能時不同的存在形式。第三頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六染色質(zhì)（chromatin）定義：間期細胞核中伸展開的DNA蛋白質(zhì)纖維。分類：常染色質(zhì)（euchromatin）異染色質(zhì)（heterochromatin）

第四頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六常染色質(zhì)與異染色質(zhì)的特性比較

特征常染色質(zhì)異染色質(zhì)數(shù)量和分布一般占染色體的極大部分一般占染色體的少部分,位于著絲粒區(qū)、端粒、核仁形成區(qū)，染色體的中間、末端及整個染色體臂染色反應正常染色反應特有染色反應DNA復制正常復制晚復制凝縮程度折疊疏松折疊緊密固縮行為間期解螺旋，分裂時形成螺旋，分裂中期達到高峰異固縮（正、負異固縮）組成特性含單一和重復序列，能進行轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)含重復和非重復DNA，不能轉(zhuǎn)錄；功能異染色質(zhì)含有活動基因，有轉(zhuǎn)錄活性化學性質(zhì)無差別無差別第五頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六第六頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六第七頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六人類染色體的數(shù)目和形態(tài)結(jié)構(gòu)相對恒定。通過核型分析可以鑒定細胞中的染色體數(shù)，染色質(zhì)檢查可以確定性染色體情況，顯帶技術(shù)可以鑒別每條染色體的結(jié)構(gòu)。如果因為某種原因造成染色體的數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常，則會引起個體一系列性狀的改變，形成染色體病。染色體異常的種類不同，導致幾種不同類型的染色體病。第八頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六第一節(jié)人類染色體

一、染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu)染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu)在細胞增殖周期中不斷發(fā)生著變化，一般在有絲分裂中期，染色體的形態(tài)最典型、最清晰。第九頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六第十頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六著絲粒位于異染色質(zhì)區(qū)內(nèi)，這里富集了衛(wèi)星DNA，也就是短的DNA串聯(lián)重復序列。此外，在縊痕區(qū)內(nèi)有一個直徑或長度為400nm左右的很致密的顆粒狀結(jié)構(gòu)，這稱為動粒(kinetochore)的結(jié)構(gòu)直接與牽動染色體向兩極移動的纖絲蛋白相連結(jié)。若著絲粒丟失了，那么染色體就失去了附著到紡錘絲上的能力，細胞分裂時染色體就會隨機地進入子細胞。然而有著絲粒的染色體也會出現(xiàn)這種異常分配，那就是復制后的兩個染色體拷貝并不總是正確地分離進入子細胞。在此過程中發(fā)生錯誤的概率通常是很低的。若發(fā)生錯誤會引起染色體數(shù)目的改變。如在酵母中分配發(fā)生錯誤的概率低于十萬分之一。第十一頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六動原粒第十二頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六端粒（Telomere）：是染色體的末端部分，有重要的生物學功能,可穩(wěn)定染色體的功能,防止染色體DNA降解、末端融合,保護染色體結(jié)構(gòu)基因,調(diào)節(jié)正常細胞生長。人端粒是由6個堿基重復序列(TTAGGG)和結(jié)合蛋白組成。1984年，分子生物學家發(fā)現(xiàn)了一種能維持端粒長度的端粒酶，并揭示了它在人體內(nèi)的奇特作用：除了人類生殖細胞和部分體細胞外，端粒酶幾乎對其他所有細胞不起作用，但它卻能維持癌細胞端粒的長度，使其無限制擴增。第十三頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六染色體的四種類型：1/2~5/8中央著絲粒染色體5/8~7/8亞中著絲粒染色體7/8近端著絲粒染色體中部亞中部近端部端部

——末端處第十四頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六第十五頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六

細

胞

培

養(yǎng)

與

染

色

體

制

備

正常人外周血或細胞

RPMI1640培養(yǎng)基+15%小牛血清=5ml370C，培養(yǎng)68hr加秋水仙素，培養(yǎng)2~4hr（抑制細胞分裂）收集細胞離心，去上清液（1000rpm/10min）低滲處理，0.075MKCI，370C，25min

預固定，甲醇：冰醋酸=3：1

離心，去上清液（1000rpm/10min）重復固定三次制片，染色，觀察，染色體分析第十六頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六第十七頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六chr.groups:A:1~3B:4,5C:6~12,XD:13~15E:16~18F:19,20G:21,22,Y第十八頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六正常人類染色體核型核型：一個體細胞（somaticcell）中的全部染色體稱為核型（Karyotype）。確切的說核型是指是一個體細胞內(nèi)的全部染色體按其大小和形態(tài)特征排列所構(gòu)成的圖像。對這種圖像進行分析稱為核型分析。

第十九頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六第二十頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期六核型的描述

染色體總數(shù)，性染色體

正常男性46

，XY

正常女性4