醫(yī)學(xué)寄生蟲(chóng)學(xué)課件 實(shí)驗(yàn)一吸蟲(chóng)

1

請(qǐng)同學(xué)們按編號(hào)入座（編號(hào)見(jiàn)門(mén)旁名單）

編號(hào)＝座位號(hào)＝標(biāo)本盒號(hào)＝顯微鏡號(hào)2人體寄生蟲(chóng)學(xué)實(shí)驗(yàn)3實(shí)驗(yàn)課注意事項(xiàng)

一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則1.進(jìn)實(shí)驗(yàn)室上課時(shí)必須穿白大衣，按編號(hào)入座

（編號(hào)=座位號(hào)=標(biāo)本盒號(hào)=顯微鏡號(hào)）；2.實(shí)驗(yàn)前做好預(yù)習(xí)，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?.嚴(yán)格遵守操作程序，愛(ài)護(hù)教學(xué)標(biāo)本、儀器、試劑、動(dòng)物。44.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)要耐心細(xì)致，自己動(dòng)手，獨(dú)立思考。5.上課要準(zhǔn)時(shí)，不得無(wú)故缺席、遲到或早退。遵守課堂紀(jì)律。6.嚴(yán)格遵守生物安全規(guī)定。動(dòng)物尸體、玻片、器皿、垃圾應(yīng)按要求放到指定地點(diǎn)。7.值日生應(yīng)負(fù)責(zé)搞好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生，離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)關(guān)好水、電、門(mén)窗及簽名。

51.每位同學(xué)：①離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室之前按順序放好玻片標(biāo)本；放好顯微鏡；整理好自己的臺(tái)面和清潔實(shí)驗(yàn)用具。②動(dòng)物尸體、玻片、器皿、垃圾應(yīng)按要求放到指定地點(diǎn)。2.值日生:①抹實(shí)驗(yàn)臺(tái)、黑板、整理桌面等；②拖地、倒垃圾；③值日組長(zhǎng)簽名；④關(guān)好水、電、門(mén)窗。

清潔與值日

6二、賠償制度

1.損壞公物要賠償

2.重點(diǎn)為玻片標(biāo)本，損壞要登記賠償（蠕蟲(chóng)標(biāo)本每人一盒，每盒18張玻片標(biāo)本）。

3.要求課前課后檢查標(biāo)本課前：上課前檢查或老師課前講話(huà)后5min

內(nèi)檢查課后：離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室之前4.標(biāo)本損壞賠償：（206室登記，）7三、顯微鏡的使用

1.搬動(dòng)顯微鏡時(shí)要輕，對(duì)號(hào)使用，對(duì)號(hào)放回。2.插、拔電源前要檢查顯微鏡燈泡的亮度是否已撥至最低處，開(kāi)關(guān)是否關(guān)了。3.看玻片標(biāo)本要注意的問(wèn)題

(1)成蟲(chóng)玻片標(biāo)本：用肉眼、解剖鏡、低倍鏡

(2)蟲(chóng)卵玻片標(biāo)本：用低倍鏡、高倍鏡

蟲(chóng)卵玻片標(biāo)本的特點(diǎn)及對(duì)焦方法低倍→對(duì)焦→對(duì)靶→高倍

(3)原蟲(chóng)玻片標(biāo)本：高倍鏡→油鏡8蟲(chóng)卵玻片標(biāo)本的對(duì)焦方法低倍→對(duì)焦→對(duì)靶→高倍顯微鏡故障處理1.放在邊臺(tái)桌面，無(wú)需放入柜內(nèi)2.寫(xiě)張小紙條注明故障情況夾于玻片夾處

3.可取無(wú)人使用的后備顯微鏡使用，用完后放回原處。10四、實(shí)驗(yàn)安排

操作：自己用顯微鏡看小組操作：一般4人一組

小班示教：在小班實(shí)驗(yàn)室看示教：分兩組，到208示教室和大廳看。每組12分鐘，帶上實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

示教時(shí)間：15:00-15:25組別

12345678910座位號(hào)1-45-88-1213-1617-2021-2425-2829-3233-3536-3811五、作業(yè)要求

在每次作業(yè)首頁(yè)的左上角寫(xiě)上“報(bào)告日期：2012年×月×日”標(biāo)注圖：用平行線(xiàn)標(biāo)注各部位的名稱(chēng)繪圖：用鉛筆描繪，點(diǎn)、線(xiàn)圖

繪蟲(chóng)卵圖要求：

1.外形特征,內(nèi)含物結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

2.卵殼用雙線(xiàn)表示厚薄、是否均勻等特征

3.標(biāo)注主要結(jié)構(gòu)

生活史線(xiàn)條圖：

簡(jiǎn)答題：簡(jiǎn)明扼要，或用表格列出

報(bào)告：寫(xiě)目的／原理、方法（步驟）、結(jié)果、分析12實(shí)驗(yàn)課的總目的和要求1.掌握常見(jiàn)人體寄生蟲(chóng)的辨認(rèn)，掌握具有診斷價(jià)值的寄生蟲(chóng)形態(tài)特征和常見(jiàn)寄生蟲(chóng)的病原學(xué)檢查方法，了解免疫學(xué)診斷技術(shù)及高新技術(shù)診斷方法。2.培養(yǎng)動(dòng)手能力、分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力及創(chuàng)新能力。3.驗(yàn)證理論課中所學(xué)的基本理論，對(duì)重要理論內(nèi)容加深理解。13實(shí)驗(yàn)一華支睪吸蟲(chóng)（Clonorchissinensis）布氏姜片蟲(chóng)（Fasciolopsisbuski）14實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?/p>

1.以華支睪吸蟲(chóng)為代表，掌握吸蟲(chóng)基本形態(tài)和生活史的基本特點(diǎn)。

2.掌握兩種吸蟲(chóng)的蟲(chóng)卵形態(tài)特征和病原學(xué)診斷方法。

3.熟悉兩種吸蟲(chóng)的感染途徑、感染方式、寄生部位與致病作用及防治要點(diǎn)。15

實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

一、操作

1.華支睪吸蟲(chóng)(成蟲(chóng)、蟲(chóng)卵)

2.布氏姜片蟲(chóng)(成蟲(chóng)、蟲(chóng)卵)二、小組操作

1.檢查貓肝（找華支睪吸蟲(chóng)成蟲(chóng),注意病理變化）

2.ELISA法檢測(cè)待測(cè)血清中的抗華支睪吸蟲(chóng)抗體三、示教：成蟲(chóng)液浸標(biāo)本、中間宿主（淡水螺、淡水魚(yú)）、植物媒介、生活史各期、病理標(biāo)本四、錄像：華支睪吸蟲(chóng)五、作業(yè)六、小結(jié)16華支睪吸蟲(chóng)成蟲(chóng)注意觀察：外形口、腹吸盤(pán)（位置和大小比例）生殖系統(tǒng)消化系統(tǒng)17

華支睪吸蟲(chóng)卵

大?。?9×17μm形狀：芝麻狀（或燈泡狀）顏色：黃褐色內(nèi)含物：毛蚴其它：卵蓋疣狀突起（小瘤）小瘤18布氏姜片蟲(chóng)成蟲(chóng)腹吸盤(pán)口吸盤(pán)睪丸卵巢注意觀察：外形口、腹吸盤(pán)生殖系統(tǒng)消化系統(tǒng)19布氏姜片蟲(chóng)卵

大?。喝梭w吸蟲(chóng)中最大者

形態(tài)：長(zhǎng)橢圓形

顏色：淡黃色

內(nèi)含物：一個(gè)卵細(xì)胞

許多卵黃細(xì)胞

其它：卵殼薄

卵蓋不明顯卵蓋卵細(xì)胞卵黃細(xì)胞ELISA法檢測(cè)待測(cè)血清中抗華支睪吸蟲(chóng)抗體（小組操作）

實(shí)驗(yàn)原理：特異性抗原與特異性抗體反應(yīng)包埋已知抗原（GST2，基因工程重組抗原）抗原抗體復(fù)合物底物的顯色反應(yīng)加待測(cè)血清酶標(biāo)記的二抗實(shí)驗(yàn)?zāi)康模菏煜っ庖邔W(xué)診斷方法和意義終止反應(yīng)ELISA法檢測(cè)待測(cè)血清中抗華支睪吸蟲(chóng)抗體（小組操作）操作步驟100ul＋－100ul100ul1.加樣待測(cè)樣品1或22.溫育封板，37℃25分鐘3.洗滌洗滌液3次，200ul，拍干4.加酶標(biāo)記二抗100ul，封板，37℃20分鐘5.洗滌洗滌液4次，拍干6.顯色、加終止液&結(jié)果判定顯色液A、B各加一滴,37℃10分鐘；加終止液一滴操作注意事項(xiàng):1.每一步的反應(yīng)液要垂直滴入反應(yīng)孔,加樣后輕輕搖勻；2.每一步反應(yīng)完后都要拋盡，并注意拋盡的方向

以防交叉反應(yīng)；3.每次沖洗、拋盡后要在吸水紙上拍干。實(shí)驗(yàn)報(bào)告:實(shí)驗(yàn)?zāi)康?原理

實(shí)驗(yàn)方法（步驟）

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析232425272829在魚(yú)肉中的囊蚴(0.138-0.15mm)301.繪蟲(chóng)卵圖（華支睪吸蟲(chóng)、布氏姜片蟲(chóng)）2.標(biāo)注成蟲(chóng)形態(tài)圖（華支睪吸蟲(chóng)、布氏姜片蟲(chóng)）3.繪華支睪吸蟲(chóng)生活史線(xiàn)條圖4.寫(xiě)出ELISA法檢測(cè)待測(cè)血清中抗華支睪吸蟲(chóng)抗體的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)?zāi)康?原理、實(shí)驗(yàn)方法/步驟、實(shí)驗(yàn)結(jié)果/實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析）作業(yè)31小結(jié)

一、蟲(chóng)卵的鑒別及病原學(xué)診斷方法

大小、形狀、顏色、內(nèi)含物、卵殼、其他（卵蓋）

32

兩種蟲(chóng)卵的鑒別要點(diǎn)華支睪吸蟲(chóng)卵布氏姜片蟲(chóng)卵

卵蓋有卵蓋（大）肩峰明顯有卵蓋（?。o(wú)肩峰

大小較小27~35μm×12～20μm（小）較大130~140μm×80~85μm，（大）

形態(tài)低倍鏡下看似芝麻高倍鏡下看似燈泡（上窄下寬），底端有一小疣橢圓形

顏色黃褐色淡黃色

內(nèi)含物毛蚴卵內(nèi)含一個(gè)卵細(xì)胞和20-40個(gè)卵黃細(xì)胞

卵殼較薄薄離開(kāi)人體的載體（診斷材料）糞便（膽汁）糞便33二、成蟲(chóng)的鑒別外形口、腹吸盤(pán)生殖系統(tǒng)消化系統(tǒng)寄生部位3435兩種成蟲(chóng)鑒別要點(diǎn)華支睪吸蟲(chóng)成蟲(chóng)布氏姜片蟲(chóng)成蟲(chóng)吸盤(pán)（附著、運(yùn)動(dòng)器官）口吸盤(pán)比腹吸盤(pán)略大，腹吸盤(pán)在蟲(chóng)體前1/5處腹吸盤(pán)比口吸盤(pán)大4-5倍，兩吸盤(pán)距離很近。腹吸盤(pán)漏斗狀，肌肉發(fā)達(dá)。生殖系統(tǒng)睪丸一對(duì)在體后1/3處前后排列，樹(shù)枝狀。卵巢在體中部分葉，有受精囊、勞氏管，無(wú)陰莖、陰莖袋。與左相似，但睪丸分支細(xì)而多，卵巢也分支，無(wú)受精囊，有勞氏管、陰莖袋。卵黃腺發(fā)達(dá)。消化系統(tǒng)腸管較直腸管彎曲體表無(wú)體棘有體棘體形狹長(zhǎng)，葵花子形長(zhǎng)橢圓形，為人體最大的吸蟲(chóng)寄生部位終宿主肝膽管終宿主小腸36

三、生活史

寄生蟲(chóng)完成一代的生長(zhǎng)、發(fā)育及繁殖的整個(gè)過(guò)程。終宿主保蟲(chóng)宿主宿主第一中間宿主第二中間宿主／植物媒介感染期感染途徑、感染方式定居部位致病離開(kāi)人體的時(shí)期診斷37華支睪吸蟲(chóng)生活史：蟲(chóng)卵毛蚴胞蚴雷蚴尾蚴囊蚴成蟲(chóng)蟲(chóng)卵糞便水淡水螺（紋沼螺等）淡水魚(yú)蝦人糞便哺乳動(dòng)物肝膽管第一中間宿主第二中間宿主終宿主（1M）布氏姜片吸蟲(chóng)生活史：

蟲(chóng)卵毛蚴胞蚴母雷蚴子雷蚴尾蚴囊蚴成蟲(chóng)蟲(chóng)卵糞便水淡水螺（扁卷螺）水生植物人糞便豬、野豬小腸中間宿主植物媒介終宿主(1-3M)（感染期）（感染期）38兩種吸蟲(chóng)生活史鑒別要點(diǎn)

華支睪吸蟲(chóng)布氏姜片蟲(chóng)終宿主／保蟲(chóng)宿主人／豬、狗、貓、豹、虎等哺乳動(dòng)物人／豬、野豬第一中間宿主紋沼螺、長(zhǎng)角涵螺、赤豆螺扁卷螺第二中間宿主／植物媒介淡水魚(yú)（鯉科魚(yú)）、淡水蝦水生植物，菱角、荸薺（馬蹄）感染期囊蚴囊蚴感染途徑經(jīng)口（被動(dòng)）經(jīng)口（被動(dòng)）定居部位人或哺乳動(dòng)物的膽管（肝膽管）內(nèi)人、家豬、野豬等小腸內(nèi)離開(kāi)人體的時(shí)期（診斷取材）蟲(chóng)卵（糞便）蟲(chóng)卵（糞便）致病肝，膽管炎、肝腫大、肝硬變、膽結(jié)石、膽管癌…消化道癥狀，機(jī)械損傷，壞死脫落，炎癥、出血、水腫、潰瘍…

39四、ELISA法檢測(cè)華支睪吸蟲(chóng)感染的結(jié)果分析

應(yīng)結(jié)合病史，臨床癥狀等綜合判斷。①血清中無(wú)特異性抗體②未感染華支睪吸蟲(chóng)③感染早期，特異性抗體未出現(xiàn)④病人已治愈，無(wú)抗體存在⑤假陰性①血清中有特異性抗體②已感染華支睪吸蟲(chóng)③曾感染經(jīng)治療未治愈④經(jīng)治療病人已治愈，抗體仍存在⑤假陽(yáng)性陽(yáng)性陰性40

五、復(fù)習(xí)名詞慨念

1.寄生蟲(chóng)（parasite）

2.宿主（host）