浮游植物的采集計(jì)數(shù)與定量方法

浮游植物的采集計(jì)數(shù)與定量方法第一頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一浮游植物（Phytoplankon）又稱浮游藻類，是水中懸浮生活的若干種藻類的總稱。浮游植物及其生產(chǎn)力是水生態(tài)系統(tǒng)的重要成員與重要功能之一，是魚類天然餌料的重要組成部分。由于浮游植物對(duì)環(huán)境的變化十分敏感，故在環(huán)境監(jiān)測(cè)中，也有重要作用。我國淡水養(yǎng)殖的主要對(duì)象是鰱、鳙魚類，它們的天然餌料常以浮游植物為主。我們知道，不同類型的水體或同一水體的不同季節(jié)，藻類的組成是不相同的，各種藻類的相對(duì)量在不斷地變化。這種變化是有一定的趨勢(shì)的，這以后要專題介紹。就鰱鳙而言，藻類又有易消化種類和不易消化種類之分，一般說來，硅藻門、金藻門、甲藻門中種類易于消化，而藍(lán)藻門、綠藻門、裸藻門中的多數(shù)種類難于消化。因此，在魚類生長(zhǎng)季節(jié)，研究水中藻類組成和現(xiàn)存量（Standingcrop），可為養(yǎng)殖魚類的合理投放提供重要的科學(xué)依據(jù)。同時(shí)為水生態(tài)研究及利用提供了有用的資料。浮游植物的現(xiàn)存量，指的是某一瞬間單位水體中所存在的浮游植物的量。這個(gè)量有兩種表示方法，用數(shù)目單位表示成為密度，一般用萬個(gè)／升為單位，五、六十年代用之；用重量單位（mg/L）表示的現(xiàn)存量稱為生物量（Biomass）。70年代以來被廣泛使用。第二頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一在以往的調(diào)查中，人們往往只注重浮游植物的種類或數(shù)量，對(duì)其生物量則重視不夠。其原因在于：1、浮游植物生物量測(cè)算繁瑣；2、對(duì)生物量與數(shù)量之間的本質(zhì)差別認(rèn)識(shí)不足。由于不同水體，不同種類的藻類在個(gè)體上有很大差異，僅僅用數(shù)量就很難評(píng)價(jià)不同水體餌料生物的豐欠。這就要求，浮游植物的定量工作，必須以測(cè)算生物量為目標(biāo)。

不同的調(diào)查方法，有時(shí)會(huì)得出不同的結(jié)果。關(guān)于浮游生物的采集、計(jì)數(shù)與定量方法采用下列方法。

第三頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一一、采樣：1．

采水器：各種采水器均可，一般淺水（<10m）湖泊可用玻璃瓶采水器，深水湖泊或水庫必須用顛倒采水器、北原式采水器或有機(jī)玻璃采水器。2．采樣點(diǎn)的選擇及采樣層次的確定選擇采樣點(diǎn)的原則是，采樣點(diǎn)在平面上的分布要有代表性。一般要求湖心、庫心、江心必須采樣，有條件時(shí)采樣點(diǎn)可適當(dāng)多設(shè)一些，如大的湖灣、庫灣、河流的上、中、下游水體的沿岸帶、淺水區(qū)等也要設(shè)點(diǎn)采集。凡水深不超過2米者，可于采樣點(diǎn)水下0.5m處采水，水深2～10米以內(nèi)，應(yīng)距底0.5米處另采一個(gè)樣，水深超過10米時(shí)。應(yīng)于中層增采一個(gè)水樣。一般來說池塘、水庫、湖泊、河流的樣點(diǎn)及采水層次可總結(jié)如下：

第四頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一⑴池塘：樣點(diǎn)可設(shè)在距岸邊1m處。水深小于2m時(shí)采一中層水樣。若水深大于2m時(shí)，最好采上、中、下層水樣。亞表層：水下20cm左右。中層：水體中間部分。下層：離底20cm左右。⑵水庫及河流：樣點(diǎn)可設(shè)在上、中、下游。上游：設(shè)十個(gè)點(diǎn)（亞表層或中層）中游：水在2－3米深時(shí)設(shè)一個(gè)點(diǎn)，采2個(gè)樣（上中層和中下層）下游：設(shè)2－3個(gè)樣點(diǎn)。中心點(diǎn)3個(gè)樣（上、中、下層），兩測(cè)點(diǎn)各一個(gè)樣（中層）⑶湖泊：中心區(qū)設(shè)一點(diǎn)。進(jìn)水口和出水口也應(yīng)設(shè)點(diǎn)。

第五頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一3．采樣量及采樣次數(shù)每一個(gè)采樣點(diǎn)應(yīng)采水1000ml。若系一般性調(diào)查，可將各層采的水等量混合，取1000ml混合水樣固定；或者分層采水，分別計(jì)數(shù)后取平均值。分層采水可以了解每一采樣點(diǎn)各層水中浮游植物的數(shù)量和種類。采得水樣后立即加入10－15ml魯哥氏液（Lugol’ssolution）固定，魯哥氏液即將6克碘化鉀溶于20ml水中，待其完全溶解后，加入4克碘充分搖動(dòng)，待碘全部溶解后定容到100ml即配成魯哥氏液。泥沙多時(shí)沉淀后再取水樣。采樣次數(shù)可多可少。有條件時(shí)還可逐月采樣一次，一般情況可下每季采樣一次，最低限度應(yīng)在春季、夏季末、秋初各采樣一次。

第六頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一二、沉淀濃縮：上述水樣，搖勻后倒入1000ml圓柱形沉淀器中沉淀24小時(shí)，沉淀器可用1000ml的瓶子代替。用虹吸管小心抽出上面不含藻類的“清液”。剩下30－50ml沉淀物轉(zhuǎn)入50ml的定量瓶中；再用上述虹吸出來的“清液”少許沖洗三次沉淀器，沖洗液轉(zhuǎn)入定量瓶中。凡以碘液固定的水樣固定的水樣，瓶塞要擰緊。還要加入2－4％的甲醛固定液（福爾馬林），即每100ml樣品需另加4ml福爾馬林，以利于長(zhǎng)期保存。濃縮時(shí)切不可攪動(dòng)底部，萬一動(dòng)了應(yīng)重新靜止沉淀，為不是漂浮水面的某些微小生物等進(jìn)入虹吸管內(nèi)，管口應(yīng)始終低于水面，虹吸時(shí)流速流量不可過大，吸至澄清液1／3時(shí)，應(yīng)控制流速，使其成滴緩慢留下為宜。采水時(shí)，每瓶樣品必須貼上標(biāo)簽，標(biāo)簽上藥劑在采集的時(shí)間、地點(diǎn)、采水體積等，其他詳細(xì)內(nèi)容應(yīng)另行做好記錄，以備查對(duì)，避免錯(cuò)誤。濃縮的體積視浮游植物的多少而定。也可根據(jù)水的肥瘦確定濃縮體積。如下面的濃縮體積與水透明度（體現(xiàn)水的肥瘦）之間關(guān)系大致如下，僅供參考。 瘦中肥 透明度>1m >50cm >30cm

老水特老水 <30cm<20cm濃縮的標(biāo)準(zhǔn)是以每個(gè)視野里有十幾個(gè)藻類為宜。

1000ml30ml50ml100ml 不濃縮 稀釋第七頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一三、計(jì)數(shù)方法將濃縮沉淀后水樣充分搖勻后，立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml樣品，注入0.1ml計(jì)數(shù)框內(nèi)（計(jì)數(shù)框的表面積最好是20×20㎜2），小心蓋上蓋玻片（22×22㎜2），在蓋蓋玻片時(shí)，要求計(jì)數(shù)框內(nèi)沒有氣泡，樣品不溢出計(jì)數(shù)框。然后在14×40或16×40倍顯微鏡下計(jì)數(shù)。即在400－600倍顯微鏡下計(jì)數(shù)。每瓶標(biāo)本計(jì)數(shù)兩片取其平均值，每片大約計(jì)算50～100個(gè)視野，但視野數(shù)可按浮游植物的多少而酌情增減，如平均每個(gè)視野不超過1～2個(gè)時(shí)，要數(shù)200個(gè)視野以上，如果平均每個(gè)視野有5～6個(gè)時(shí)要數(shù)100個(gè)視野，如果平均每個(gè)視野有十幾個(gè)時(shí)數(shù)50個(gè)視野就可以了。同一樣品的兩片計(jì)算結(jié)果和平均數(shù)之差如不大于其均數(shù)的±15％，其均數(shù)視為有效結(jié)果，否則還必須測(cè)第三篇，直至三片平均數(shù)與相近兩數(shù)之差不超過均數(shù)的15％為止，這兩個(gè)相近值的平均數(shù)，即可視為計(jì)算結(jié)果。在計(jì)數(shù)過程中，常碰到某些個(gè)體一部分在視野中，另一部分在視野外，這時(shí)可規(guī)定出在視野上半圈者計(jì)數(shù)，出現(xiàn)在下半圈者不計(jì)數(shù)。數(shù)量最好用細(xì)胞表示，對(duì)不宜用細(xì)胞數(shù)表示的群體或絲狀體，可求出其平均細(xì)胞數(shù)。計(jì)算時(shí)優(yōu)勢(shì)種類盡可能鑒別到屬，注意不要把浮游植物當(dāng)作雜質(zhì)而漏計(jì)。計(jì)數(shù)時(shí)可按下列格式記錄，然后再進(jìn)行整理計(jì)算。視野數(shù)種類第一片第二片正小球藻正正正正正衣藻正正正正小環(huán)藻正正第八頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一四、數(shù)量與生物量的計(jì)算：1．一升水中的浮游植物的數(shù)量（N）可用下列公式計(jì)算：式中：Cs—計(jì)數(shù)框面積（㎜2），一般為400㎜2。Fs—每個(gè)視野的面積（㎜2），лR2，視野半徑r可用臺(tái)微尺測(cè)出（一定倍數(shù)下）。Fn—

計(jì)數(shù)過的視野數(shù)。V—

一升水樣經(jīng)沉淀濃縮后的體積（ml）U—

計(jì)數(shù)框的體積（ml）為0.1ml。Pn—

計(jì)數(shù)出的浮游植物個(gè)數(shù)。如果計(jì)數(shù)框、顯微鏡固定不變，F(xiàn)n、V、U也固定不變，公式中的（）可視為常數(shù)，此常數(shù)用K表示，則上述公式可簡(jiǎn)化為：N=K×Pn。Pn代表某種藻類的個(gè)數(shù)，計(jì)算結(jié)果N只表示一升水中這種藻類的數(shù)量；Pn若代表各種藻類的總數(shù)，計(jì)算結(jié)果N則表示一升水中浮游植物的總數(shù)。前者若求浮游植物數(shù)量將各計(jì)算結(jié)果相加即可。

第九頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一2．生物量一般按體積來換算。這是因?yàn)楦∮沃参飩€(gè)體極小，直接稱重較困難，且其細(xì)胞比重多接近于1?？捎眯螒B(tài)相近似的幾何體積公式計(jì)算細(xì)胞體積。細(xì)胞體積的毫升數(shù)相當(dāng)于細(xì)胞重量的克數(shù)。這樣體積值（μm-3）可直接換算為重量值（109μm-3）可直接換算為重量值（109μm-3≈1毫克鮮藻重）。下列體積公式，可供計(jì)算生物量時(shí)參考：圓錐體：V=1/3лR2h圓柱體：V=лR2h球體：V=4/3лR3橢圓體：V＝4/3ab2л（a為長(zhǎng)軸半徑，b為短軸半徑）圓臺(tái)體：V＝1/3лH（+）長(zhǎng)方體與正方體ab×h或a3硅藻細(xì)胞的計(jì)算通式：V＝殼面面積×帶面平均高度不規(guī)則性藻類可分可為幾個(gè)部分計(jì)算。

第十頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一每種藻類至少隨機(jī)測(cè)量20個(gè)以上，求出這種藻類個(gè)體重的平均值，一般都制成附表供查找。此平均值乘上一升稅種該種藻類的數(shù)量，即得到一升水中這種藻類的生物量（mg/L）。由于同一種類的細(xì)胞大