重瓣玫瑰雜交育種技術(shù)規(guī)程

重瓣玫瑰雜交育種技術(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食用玫瑰（Roserugosacv.plena）選育目標(biāo)和育種計(jì)劃的制定，雜交育種親本的選擇與栽培，雜交技術(shù)，種子采集，建立雜交種繁育圃，雜交種評(píng)價(jià)，品種比較試驗(yàn)，區(qū)域性試驗(yàn)，生產(chǎn)性試驗(yàn)等內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)適用于XX省重瓣玫瑰的雜交育種。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本〈包括所有的修改單〉適用于本文件。GB/T1.1-2009，《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)》GB4285農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)GB/T8321.（1～9）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則（所有部分）LY/T2289林木種苗生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)檔案DB/T3338-2019食用玫瑰花栽培技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)與定義3.1初花期重瓣玫瑰5%花朵開(kāi)放日期。3.2盛花期重瓣玫瑰50%花朵開(kāi)放日期。3.3花粉發(fā)芽率花粉在適宜的條件下培養(yǎng)一定時(shí)間，長(zhǎng)出花粉管（亦稱(chēng)花粉發(fā)芽）的花粉粒數(shù)占培養(yǎng)花粉粒數(shù)的比值，以百分率表示。4選育計(jì)劃的制定根據(jù)選育區(qū)域的氣候、土壤及市場(chǎng)需求制訂選育計(jì)劃，包含：選育目標(biāo)、調(diào)查內(nèi)容、優(yōu)株選擇、區(qū)域性測(cè)定、生產(chǎn)性試驗(yàn)等程序方法。表1重瓣玫瑰品種選育目標(biāo)表選育目標(biāo)指標(biāo)開(kāi)花特性花期早，花期長(zhǎng)，鮮花蕾大品質(zhì)黃酮、多酚以及揮發(fā)油的含量較高抗性耐干旱、耐澇經(jīng)濟(jì)性質(zhì)產(chǎn)量高5親本選擇及培育5.1親本的選擇根據(jù)育種目標(biāo)選擇生長(zhǎng)良好的品種的親本品種，雙親性狀應(yīng)能優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，親本選用配合力好，生態(tài)類(lèi)型差異較大，親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的材料，有一親本能適應(yīng)當(dāng)?shù)亓⒌貤l件。5.2隔離不同的父母本要進(jìn)行物理隔離，防止花粉混雜和混交。5.3親本栽培栽培及管理事項(xiàng)參照DB/T3338-2019執(zhí)行。6花粉的采集6.1采集時(shí)期初花期開(kāi)始采集花朵，直至盛花期。宜在晴天或陰天上午10時(shí)前，輕拍有少量花粉散出時(shí)為最佳。6.2采集方法6.2.1花朵的選擇選用春季的第一批花，以主莖和一級(jí)側(cè)枝上的為佳，去除已經(jīng)開(kāi)放或多余的幼小花蕾。同時(shí)要求樹(shù)體生長(zhǎng)勢(shì)好，健康無(wú)病蟲(chóng)害。6.2.2方法采摘整朵大蕾期雄花，采下的花蕾用桶、布袋、筐等工具盛裝。要求分品種隔離，1-5℃干燥保存。6.2.3花藥脫離及除雜剛采下的花蕾不能堆放，要及時(shí)取出花藥，在室內(nèi)將花蕾倒入細(xì)鐵絲篩中，用手輕輕揉搓，取出花藥，也可用花藥電動(dòng)輥剝機(jī)剝?nèi)』ㄋ??；ㄋ幨占髴?yīng)去除花絲、花瓣等雜質(zhì)。6.2.4花朵臨時(shí)存放收集的花如不能及時(shí)脫離花藥，應(yīng)臨時(shí)存放在陰涼處，并每隔1h翻動(dòng)一次。6.2.5花粉萌發(fā)率測(cè)定6.2.5.1萌發(fā)培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基配方：X脂10g/L，蔗糖100g/L，硼酸100mg/L，硝酸鈣5mg/L。按配方稱(chēng)取需要的培養(yǎng)基量，加熱溶解，將培養(yǎng)基涂于載玻片上。6.2.5.2花粉的培養(yǎng)待培養(yǎng)基冷卻后，用小刷子或毛筆刷取花粉，輕彈刷頭，使花粉均勻落在培養(yǎng)基上。將載玻片放在墊入濕潤(rùn)濾紙或紙巾的培養(yǎng)皿中，置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，溫度25℃～28℃，培養(yǎng)時(shí)間為4h～6h。6.2.5.3萌發(fā)率鏡檢用顯微鏡的高倍鏡觀察計(jì)數(shù)，最少要有6個(gè)視野以上計(jì)數(shù)，每個(gè)視野中花粉總量100粒左右，取平均值來(lái)代表花粉萌發(fā)率。按式（1）計(jì)算萌發(fā)率?；ǚ勖劝l(fā)率%N1/N2............................（1）式中：N1—發(fā)芽花粉數(shù)量，單位為個(gè)；N2—花粉總數(shù)，單位為個(gè)。7雜交7.1雌花選擇7.2去雄套袋7.2.1時(shí)間在開(kāi)花前1～2d，晴天6:00～8:00和16:00～18:00進(jìn)行。7.2.2方法用鑷子輕輕挑開(kāi)花萼和花冠，把全部雄蕊除凈，操作時(shí)不要損壞柱頭，盡量減少破壞花冠。操作完畢后，要套以紙袋。7.3授粉7.3.1時(shí)間去雄1～2d后，大部分雌花柱頭膨大，粘濕或呈“倒八字”形張開(kāi)時(shí)為授粉適期。選晴天的8:00～11:00和15:00～17:00進(jìn)行。7.3.2方法去除母本紙袋，待柱頭上剛剛分泌出亮晶的粘液時(shí)應(yīng)立即授粉，用毛筆尖沾上花粉粒細(xì)心地在柱頭上涂抹，2天內(nèi)共涂抹3～4次即可受孕。一般每朵雄花可授2～3朵雌花。冷藏花粉在使用前需避光，適應(yīng)外界環(huán)境2h～4h后，并在24h內(nèi)完成授粉。7.3.3標(biāo)記操作完畢后，掛上紙牌，注明：父母本名稱(chēng)、株號(hào)、去雄日期、授粉日期、授粉次數(shù)、授粉（去雄）人等字樣，套上紙袋。7.4授粉后的管理雜交后的最初幾天要檢查紙袋，如脫落、破碎則可能發(fā)生了以外的雜交，應(yīng)重新補(bǔ)做雜交。一周左右，花瓣開(kāi)始凋謝，幼果漸漸長(zhǎng)大時(shí)，除去紙袋。同時(shí)要防止風(fēng)、鳥(niǎo)以及病蟲(chóng)的危害。果實(shí)達(dá)到生理成熟后及時(shí)采收，檢查結(jié)實(shí)率。8種子的采集和貯藏8.1種子采集12月中旬，果實(shí)開(kāi)始變紅成熟，應(yīng)及時(shí)采收脫粒，曬干后貯藏。8.2種子貯藏脫粒后的雜交種子應(yīng)以每個(gè)果實(shí)內(nèi)的種子為一個(gè)單位，先縫入小布袋內(nèi)，再用濕沙將小布袋埋入花盆內(nèi)沙藏一冬，保持-5℃～0℃的低溫，來(lái)年3月中下旬分別插入小花盆內(nèi)，切勿使雜交組合之間紊亂。9建立雜交種苗圃將雜交得到的種子進(jìn)行播種，得到F1代。按組合編號(hào)順序點(diǎn)播稀植，每個(gè)組合的雜交種子栽植10～20株為一個(gè)小區(qū)。第一代雜種實(shí)生苗先不要選擇和淘汰，在花蕾開(kāi)放前進(jìn)行套袋，讓它們自花授粉。取第二代雜交種子繼續(xù)播種。等第二代雜交種子成株后，進(jìn)行雜交種評(píng)價(jià)。首先淘汰那些沒(méi)有觀賞價(jià)值的個(gè)體，再認(rèn)真鑒別和比較，從中選出既有母本優(yōu)良性狀又具有父本優(yōu)良性狀的個(gè)體，待它們的性狀穩(wěn)定不變后，再用扦插或嫁接方法進(jìn)行無(wú)性繁殖，如果營(yíng)養(yǎng)苗保持性狀穩(wěn)定即可命名和推廣。10雜交種評(píng)價(jià)F1代進(jìn)行播種后，調(diào)查生長(zhǎng)狀況、產(chǎn)量大小，并進(jìn)行品質(zhì)測(cè)定，按表1指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。11區(qū)域性試驗(yàn)經(jīng)雜交種評(píng)價(jià)后有優(yōu)良性狀的雜交種，通過(guò)嫁接方式進(jìn)入?yún)^(qū)域性試驗(yàn)，經(jīng)過(guò)測(cè)定，表現(xiàn)優(yōu)良的無(wú)性系，經(jīng)過(guò)不同地理氣候或土壤類(lèi)型的三個(gè)點(diǎn)以上的區(qū)域試驗(yàn)，并完成連續(xù)4年盛花期的性狀評(píng)價(jià)，確定其適應(yīng)區(qū)。11生產(chǎn)性試驗(yàn)11.1試驗(yàn)要求11.1.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)以隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)為主，每個(gè)品種的面積≥2hm2。11.1.2進(jìn)入盛產(chǎn)期后，對(duì)主要經(jīng)濟(jì)性狀進(jìn)行評(píng)價(jià)。11.1.3結(jié)合試驗(yàn)品種的生長(zhǎng)特性，開(kāi)展配套栽培技術(shù)試驗(yàn)。11.2試驗(yàn)觀測(cè)10.2.1觀測(cè)并詳細(xì)記錄物候期、生長(zhǎng)量、產(chǎn)量等指標(biāo)，觀測(cè)記錄表參見(jiàn)附錄B。品質(zhì)測(cè)定11.2.2.1經(jīng)濟(jì)性狀每個(gè)參試品種采集50株，測(cè)定株高、葉片質(zhì)地、花色、花香、花瓣數(shù)、花期。11.2.2.2品質(zhì)特征多酚含量測(cè)定參照T/AHFIA005-2018；黃酮含量測(cè)定參照NY/T3112-2017；揮發(fā)油含量參照G